植物檢疫梨火疫病梨火疫病是歐洲梨樹上的毀滅性病害，在日本、朝鮮(韓國)各地發(fā)生亦多。我國尚未發(fā)現(xiàn)此病，屬危險(xiǎn)性病害，為我國重要的檢疫對象。分布美國、加拿大、墨西哥、百慕大、海地、新西蘭、英國、荷蘭、波蘭、丹麥、德國、比利時、法國、盧森堡、瑞典、挪威、愛爾蘭、北愛爾蘭、捷克共和國、瑞士、前南斯拉夫、亞美尼亞、羅馬尼亞、保加利亞、意大利、希臘、埃及、塞浦路斯、以色列、土耳其、黎巴嫩、約旦、津巴布韋。亞洲梨火疫病分布于日本和韓國（朝鮮）。寄主

梨火疫病菌寄主范圍很廣，能為害梨、蘋果、山楂、李等40多個屬220多種植物，大部分屬薔薇科Pomoideae亞科。病原梨火疫病菌:Erwinia

amylovora

亞洲梨火疫病:E.pyrifoliae

病原特點(diǎn)直桿菌，有莢膜，周生鞭毛，能運(yùn)動，多數(shù)單生，有時成雙或短時間內(nèi)3～4個呈鏈狀。革蘭氏染色陰性，兼性厭氧.

生長所需的溫度范圍為6～37℃，生長最適溫度25～27℃，最高溫度33～34℃，致死溫度45～50℃。病菌世代時間在25℃下為74.9分鐘，最適pH為6。菌落白色，粘性，圓頂狀，27℃培養(yǎng)2天，菌落直徑3～7cm，有1稠絨毛狀的中心環(huán)，表面光滑，邊緣整齊。生物學(xué)特性梨火疫病菌以簡單的細(xì)胞分裂繁殖，一個細(xì)胞在條件適宜時，3天內(nèi)在寄主植物組織中能達(dá)到109細(xì)胞，每個細(xì)胞都是一個侵染源，感染寄主而引起病害的發(fā)展。除蛋白酶外，病菌不產(chǎn)任何有助于侵入寄主的酶，主要是在環(huán)境條件適宜時，通過胞間組織侵入薄壁組織的病菌產(chǎn)生胞外多糖。胞外多糖在病害發(fā)展過程中起重要的作用，它是菌膿的重要成份。菌膿的理化性質(zhì)隨濕度變化而變化，干時皺、硬，大時膨脹易被雨水?dāng)U散，中等濕度的菌膿粘易被昆蟲、風(fēng)傳播。

發(fā)生規(guī)律該病為細(xì)菌性病害，病原菌主要在病葉、枝干或某些昆蟲體內(nèi)越冬。翌年借雨水或昆蟲傳播，通過植株氣孔侵入。一般年份于6月下旬至7月上旬開始發(fā)生，開始多在樹體中下部1年生枝中上部成齡葉片上發(fā)生，先從葉緣侵染，以后逐漸蔓延。若7月份雨水較多，不及時防治，可迅速流行。癥狀在雨天觀察葉及幼果等危害部位似沸水燙過，晴天像火燎一樣：邊緣焦枯，成褐色，形狀不規(guī)則。以后順葉脈擴(kuò)展至整個葉片，顏色變身、呈黑色，病葉不脫落。嚴(yán)重時，整株呈火燎狀，只有部分嫩梢上有少量新葉，果實(shí)停長、干縮。翌年病枝上的葉芽、花芽均發(fā)育不良，造成減產(chǎn)。果園地勢低洼而排水不良、土壤黏重易板結(jié)的果園、種植密度過大或管理粗放、樹勢較弱的地塊發(fā)生較重，雨水較多的年份發(fā)病加重，傳播迅速。侵染循環(huán)梨火疫病菌在病株病疤邊緣組織處越冬，掛在樹上的病果也是它的越冬場所，如冬季溫和，病菌還能在病株樹皮上度過，來年早春病菌在上年的潰瘍處迅速繁殖，遇到潮濕、溫和的天氣，從病部滲出大量乳白色粘稠狀的細(xì)菌分泌物，即為當(dāng)年的初侵染源。病菌直接從氣孔、水孔等自然孔口或蕾苞，或由風(fēng)引起的傷口侵入葉片，初葉邊壞死，并向中脈、中柄、莖擴(kuò)展，后變黑，通常有菌膿。癥狀花器被害后呈萎蔫狀，深褐色，并向下蔓延至花柄，使花柄呈水漬狀。葉片發(fā)病，先從葉緣開始變黑色，然后沿葉脈發(fā)展，最終全葉變黑、凋萎。病果初生水漬狀斑，后變暗褐色，并有黃色粘液溢出，最后病果變黑而干縮。枝干被害，初呈水漬狀，有明顯邊緣，后病部凹陷出現(xiàn)潰瘍狀呈褐色至黑色。癥狀梨火疫病最典型的癥狀是花、果實(shí)和葉片受火疫病菌侵害后，很快變黑褐色枯萎，猶如火燒一般，但仍掛在樹上不落，故此得名。

目前國際上將其癥狀據(jù)受侵害的部位，分成5個階段:

花枯萎病原直接侵染開放的花引起花枯萎。一般發(fā)生于早春，病菌直接從花器侵入，初為水漬狀斑，花基部或花柄暗色，不久萎蔫。病菌可擴(kuò)展至花梗及花簇中其它的花；在溫曖潮濕條件下，花梗上有菌膿滲出。隨著枯萎發(fā)展，花梗、花等變褐至黑褐色，在某些情況下僅限于花梗，條件適宜時可繼續(xù)侵染并殺死小枝并形成小潰瘍斑。

潰瘍枯萎潰瘍枯萎是指前一季越冬潰瘍邊緣的病菌重新復(fù)活的結(jié)果。最初的癥狀是在復(fù)活的潰瘍附近的健康樹皮組織上出現(xiàn)窄的水漬狀區(qū)，幾天后，樹皮內(nèi)部組織出現(xiàn)褐色條斑，隨后病菌侵入附近的繁殖枝內(nèi)部并引起萎蔫死亡。這些枝條特別是嫩枝與下面談及的枝枯萎有明顯區(qū)別，即在萎蔫之前枝尖芽褪色（黃至桔黃色）。

枝枯萎花被侵染后，枝和嫩枝是最易感病的植物部位。細(xì)菌直接侵入前1～3葉的枝尖，然后殺死整個枝條及支持枝。最初癥狀是枝尖萎蔫，但萎蔫前不褪色，象拐杖狀。枝枯萎發(fā)展很快，條件適宜時，幾天內(nèi)可移動15～30cm以上，造成整枝死亡，病枝、枝皮、葉通常變黑。潮濕時，枝條上出現(xiàn)菌膿。生長后期，終芽前出現(xiàn)的枝枯萎一般不會萎蔫，且僅在枝的最上部出現(xiàn)壞死。隨著病菌不斷深入，并侵染主干，皮層收縮，下陷，形成潰瘍斑。

損傷枯萎和砧木枯萎這二種比較特殊，前者主要是由于晚霜、冰雹或大風(fēng)損傷引起，如果實(shí)，很容易引起果實(shí)枯萎。后者僅限于高感品種EMAL-26、EMLA-9和MARK-39砧木。通常是由感病的接穗在這些砧木上發(fā)病后引起，最終成潰瘍帶而殺死樹體。傳播途徑通過昆蟲、雨滴、風(fēng)、鳥類以及人的田間操作將病菌傳給健株。據(jù)記載，傳病昆蟲包括蜜蜂在內(nèi)有77個屬的100多種昆蟲，其中密蜂的傳病距離約為200～400m。一般情況下，梨火疫病的自然傳播距離約為每年6km。傳播途徑在傳病的氣候因子中，雨水是果園短距離傳播的主要因子，從越冬或新鮮接種源至花和幼枝，經(jīng)常在潰瘍斑下面枝條上觀察到圓錐形侵染類型。其次風(fēng)亦是中短距離傳播的重要因子，往往在沿著盛行風(fēng)的方向，病原菌以單個菌絲、菌膿或菌絲束被風(fēng)攜帶到較遠(yuǎn)距離。

遠(yuǎn)距離傳播主要是感病寄主繁殖材料，包括種苗、接穗、砧木、水果、被污染的運(yùn)輸工具、候鳥及氣流。但對于如我國、澳大利亞等國，目前最有可能亦最危險(xiǎn)的傳播途徑是通過病接穗、苗木、果實(shí)的傳帶。Psaltidas(1990)認(rèn)為，梨火疫病在地中海地區(qū)擴(kuò)散，并不能排除煙霧。檢驗(yàn)方法由于梨火疫病在世界各國均很重視，研究亦相對較多，其檢驗(yàn)方法亦很多，從經(jīng)典的分離培養(yǎng)、致病性測定、癥狀觀察等到先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)，包括DNA探針、PCR技術(shù)的應(yīng)用及脂肪酸分析、單克隆抗體的應(yīng)用等等。但在目前檢疫上仍采用免疫熒光染色結(jié)合致病性測定確診的方法。

癥狀檢驗(yàn)梨火疫病的癥狀很典型，是鑒定的重要方法，但必須與其他癥狀相似的梨梢枯病區(qū)分開。

梨梢枯病僅限于為害花器、葉片和嫩梢，不為害枝條和莖干，病部無細(xì)菌溢膿，為深褐色斑點(diǎn)，周圍有紅色暈圈，枯死的病葉不會長期掛在樹上。

病原分離對于癥狀明顯材料可直接分離病原，而癥狀不明顯的材料如水果、幼枝等，可先進(jìn)行IF（免疫熒光法）檢測，再進(jìn)行分離。分離可采用選擇性培養(yǎng)基和鑒別性培養(yǎng)基進(jìn)行。

1.MS培養(yǎng)基這是Miller和Schroth專為梨火疫病菌設(shè)計(jì)的選擇性培養(yǎng)基。梨火疫病菌菌落為紅橙色，背景為藍(lán)綠色。（配方如下：瓊脂20g，甘露醇10g，L-天門冬酰胺3g，牛膽酸鈉2.5g，磷酸氫二鉀2.0g，煙酸0.5g，MgSO4·7H2O0.2g，次氮基三乙酸0.2g，硫酸十七烷基鈉0.1ml，0.5%溴麝香草酚蘭水溶液9ml，0.5%中性紅2.5ml，蒸餾水970ml，pH7.3滅菌后加1%放線菌酮5ml，1%硝酸銫水溶液1.75ml。）

2.CG培養(yǎng)基這是Cross和Googman設(shè)計(jì)的高糖培養(yǎng)基，梨火疫病菌在28℃培養(yǎng)60小時后形成典型的火山口狀菌落，特別是在立體顯微鏡下。（配方如下：水380ml，蔗糖160g，營養(yǎng)瓊脂12g，結(jié)晶紫0.8ml（1%乙醇溶液），0.1%放線菌酮20ml。）

3.TTC培養(yǎng)基該培養(yǎng)基是Weise(1981)設(shè)計(jì)的四氮銼-福美聯(lián)培養(yǎng)基。梨火疫病菌在27℃培養(yǎng)2～3天后，可產(chǎn)生紅色肉疣狀菌落。（配方如下：營養(yǎng)瓊脂37g，蔗糖100g，酵母粉5g，葡萄糖15g,水100ml，pH6.8～7.2。滅菌后加0.5%TTC10ml，福美聯(lián)85～250ml。）

4.CCT半選擇性培養(yǎng)基這是Tshimaru和Kios于1984設(shè)計(jì)的。梨火疫病菌28℃培養(yǎng)48小時后，形成淡紫色透明菌落，中央顏色略深。（配方如下：蔗糖10g；山梨醇10g；1%SDS30ml，0.1%結(jié)晶紫乙醇溶液2ml，營養(yǎng)瓊脂23g，蒸餾水970ml。滅菌后加入1%硝酸銫水溶液2ml和放線菌酮0.05g。）

5.Zeller改良高糖培養(yǎng)基梨火疫病菌在此培養(yǎng)基上27℃培養(yǎng)2～3天后，菌落大小為3～7mm，橙紅色半球形，高度凸起，中心色深，有蛋黃狀中心環(huán)，表面光滑，邊緣整齊。（配方如下：牛肉浸膏8g，蔗糖50g，放線菌酮50mg，0.5%溴百里酚蘭9ml，0.5%中性紅2.5ml，瓊脂20g，水1000ml，pH7.4。）另外，梨火疫病菌在NA+5%蔗糖等培養(yǎng)基上，典型菌落果聚糖陽性，在紫外燈下無熒光。致病性測定梨火疫病菌致病性試驗(yàn)可用梨片或梨嫩枝測定，亦可用煙草過敏反映檢查。NA上培養(yǎng)48小時的細(xì)菌配成108cells/ml的懸液，注入煙草葉片或接種于1cm厚梨片、或針刺接種于1丈長的巴黎枝條，28℃下培養(yǎng)，一般10～12小時后，煙草注射區(qū)出現(xiàn)白色壞死斑。1～3天后，梨片或枝條上出現(xiàn)白色菌膿，則可確診。形態(tài)特征觀察菌落白色，粘性，圓頂狀，27℃培養(yǎng)2天，菌落直徑3～7cm，有1稠絨毛狀的中心環(huán)，表面光滑，邊緣整齊。病原鑒定其他鑒定方法梨火疫病的檢測鑒定技術(shù)發(fā)展較快，其中目前應(yīng)用較多有脂肪酸分析，該方法在美國、英國用于鑒定菌種，并建立了相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫(Zwet)。另外，DNA探針、PCR技術(shù)亦用于梨火疫病菌的檢測和鑒定，特別是美國、新西蘭、德國、加拿大等均已開始應(yīng)用于實(shí)際檢疫，特別是新西蘭利用DNA探針檢測水果的帶菌情況。檢疫處理方法根據(jù)梨火疫病的傳播途徑，各國相繼開展了針對種苗繁殖材料（內(nèi)生細(xì)菌）、水果（表生細(xì)菌）等帶菌體的檢疫處理研究，包括γ-射線、熱處理、化學(xué)藥劑處理（溴甲烷熏蒸）及冷藏處理等。1.繁殖材料的熱處理研究發(fā)現(xiàn)，自然感病枝條經(jīng)45℃5-7小時的濕熱處理或45℃3-7小時的干熱處理后，均不能分離到病原。2.水果表生細(xì)菌的化學(xué)處理使用乙酸、潔爾滅、次氯酸鈉和檸檬酸緩沖液。效果最好的是檸檬酸緩沖液，雖然1400mg/l的潔爾滅能殺滅表生細(xì)菌，卻是美國聯(lián)邦食品法所不允許的，但從檢疫角度看，它仍不失為降低水果攜帶表生細(xì)菌風(fēng)險(xiǎn)的一種途徑。病害防治

1.加強(qiáng)農(nóng)業(yè)防治：建園應(yīng)選擇肥沃的沙壤土；園內(nèi)可增施有機(jī)肥以提高土壤