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細(xì)菌染色基本程序COMMONLYUSEDDYES,BACTERIALDYEINGBASICPROCEDURES董慧細(xì)菌染色標(biāo)本檢查法細(xì)菌為無色半透明的微小生物，用光學(xué)顯微鏡直接進(jìn)行觀察通常顯示不清。為了更好的顯示細(xì)菌的形態(tài)、大小、排列、染色和結(jié)構(gòu)組成等特點，常將細(xì)菌標(biāo)本染色后再進(jìn)行鏡檢，稱為染色標(biāo)本檢查法。常用染料根據(jù)助色基解離后的帶電情況，可將染料分為堿性和酸性兩大類。此外還有復(fù)合染料和單純?nèi)玖?。染色法單染法：只用一種染料復(fù)染法：兩種或以上染料革蘭染色抗酸染色（鑒別染色法）復(fù)染法基本步驟初染媒染脫色復(fù)染初染：對已干燥固定的標(biāo)本初步染色，初步顯示細(xì)菌的形態(tài)特征。媒染：用媒染劑以增加染料與被染物的親和力或使細(xì)胞膜通透性改變，目的是加強染色效果。常用媒染劑有碳酸、碘液、明礬等。脫色：用脫色劑使某些已著色的被染物脫去顏色，檢查染料結(jié)合的穩(wěn)定性，以顯示各種細(xì)菌不同染色反應(yīng)性和結(jié)構(gòu)特點。常用脫色劑是醇類、丙酮等，95%乙醇最常用。復(fù)染：又稱對比染色，使已脫色的被染物重新著色。常用稀釋復(fù)紅、沙黃、亞甲藍(lán)等。復(fù)染法（1）革蘭染色法：（結(jié)晶紫）初染→（碘液）媒染→（95%酒精）脫色→（稀釋復(fù)紅）復(fù)染意義：①鑒定細(xì)菌（G+、G-）；②指導(dǎo)臨床選擇藥物；③與細(xì)菌的致病性有關(guān)：G+—外毒素；G-—內(nèi)毒素。（2）抗酸染色法：石炭酸復(fù)紅→3%鹽酸酒精（脫色）→堿性亞甲藍(lán)（復(fù)染）加溫紅色：抗酸性細(xì)菌。藍(lán)色：非抗酸性細(xì)菌。圖6-3葡葡球菌屬檢驗程序細(xì)菌染色的基本程序涂片干燥固定染色鏡檢涂片干燥固定染色鏡檢待干01020304如何制作一張好的片？一、涂片涂片方式因標(biāo)本而異菌膜面積約1cm2，薄而均勻二、干燥室溫中自然干燥。加速干燥，將標(biāo)本離火焰半尺高處略烘。目的：使水分充分蒸發(fā)，為固定做準(zhǔn)備。注意事項：切勿靠近酒精燈防止菌體崩解變形。三、固定火焰加熱法：玻片有菌膜一面向上，在火焰的外焰鐘擺樣速度通過三次，時間約3秒鐘。目的：使細(xì)菌蛋白凝固，殺死細(xì)菌；改變細(xì)菌對染料的通透性，利于著色使菌體牢固黏附于玻片上。思

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