課時(shí)分層作業(yè)(三十六)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1．(2021·淄博高三模擬)微生物實(shí)驗(yàn)需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作以防止污染，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．紫外線用于實(shí)驗(yàn)室空氣及實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的消毒B．無(wú)菌技術(shù)可有效地避免實(shí)驗(yàn)操作者自身被微生物感染C．為防止DNA污染，PCR用水應(yīng)來(lái)自加熱煮沸的自來(lái)水D．使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要滅菌處理C[紫外線能破壞DNA的結(jié)構(gòu)，故紫外線可用于實(shí)驗(yàn)室空氣及實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的消毒，A正確；無(wú)菌技術(shù)可以避免實(shí)驗(yàn)材料被感染，也可以避免操作者自身被微生物感染，B正確；為防止DNA污染，PCR用水應(yīng)為高壓的雙蒸水，加熱煮沸的自來(lái)水也仍存在細(xì)菌等微生物，C錯(cuò)誤；使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要高壓蒸汽滅菌處理，以免污染環(huán)境，D正確。]2．(2021·江蘇新高考適應(yīng)性測(cè)試)平板涂布是分離菌種常用的方法，下列相關(guān)敘述不恰當(dāng)?shù)氖?)A．固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至50℃B．倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影響菌的生長(zhǎng)C．平板涂布分離得到的單菌落需進(jìn)一步劃線純化D．平板涂布法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計(jì)數(shù)B[固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至50℃3．(2021·濱州高三模擬)藝術(shù)不止存在于紙筆之間，我們可以用培養(yǎng)皿當(dāng)紙，接種環(huán)當(dāng)筆，各種形態(tài)顏色的細(xì)菌和真菌當(dāng)顏料，畫(huà)出別具風(fēng)格的作品。如在下列作品培養(yǎng)過(guò)程中，白色霉菌帶有毛茸茸的感覺(jué)，可描繪大熊貓的皮毛，紅色大腸桿菌可以描繪鵝嘴、水波則由假單胞桿菌繪就。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()圖甲圖乙A．制備培養(yǎng)基時(shí)要經(jīng)過(guò)計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板等步驟B．圖甲作品培養(yǎng)基的pH需為酸性，圖乙作品培養(yǎng)基的pH則需為中性或微堿性C．使用接種環(huán)接種時(shí)，取菌種前和接種后都需將接種環(huán)進(jìn)行干熱滅菌D．培養(yǎng)成型的作品應(yīng)低溫保存，以免菌株瘋長(zhǎng)影響整體效果C[培養(yǎng)基配制過(guò)程要稱量、溶化、調(diào)pH滅菌，倒平板之前調(diào)節(jié)pH到適宜范圍以利于真菌或者細(xì)菌的繁殖，A正確；培養(yǎng)真菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，B正確；每次使用接種環(huán)前后都要進(jìn)行灼燒滅菌，灼燒待冷卻后，才能置于菌液中使用，C錯(cuò)誤；培養(yǎng)成型的作品應(yīng)低溫保存，以免菌株瘋長(zhǎng)影響整體效果，D正確。]4．(2021·大連高三模擬)某種細(xì)菌的培養(yǎng)和分離過(guò)程示意圖如下。圖中①～③表示實(shí)驗(yàn)過(guò)程，A1、B1、B2和B3代表平板，a1、a2、b1、b2和b3代表菌落，B1～B3中添加了適宜濃度的青霉素。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中必須打開(kāi)超凈臺(tái)上的紫外燈滅菌B．平板接種細(xì)菌后，放入恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)C．原始菌株的①擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)D．依圖示結(jié)果，說(shuō)明b1、b2、b3具備抗青霉素的特性A[紫外線對(duì)人有害，在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，不需要打開(kāi)超凈臺(tái)上的紫外燈消毒，因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)操作前已經(jīng)打開(kāi)紫外燈進(jìn)行過(guò)消毒，A錯(cuò)誤；平板接種細(xì)菌后，放入恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)，這樣可以防止冷凝水滴落到培養(yǎng)基表面，B正確；原始菌株的①擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)，這樣可保證菌體與培養(yǎng)液充分接觸，保證營(yíng)養(yǎng)獲取，C正確；依圖示結(jié)果，由于B1～B3中添加了適宜濃度的青霉素，同時(shí)采用了影印法接種，根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的情況可知以看出b1、b2、b3均具備抗青霉素的特性，D正確。]5．(2021·泰安高三模擬)處理生活垃圾的有效方法之一是用微生物對(duì)其進(jìn)行降解。下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過(guò)程。相關(guān)分析正確的是()A．篩選所用培養(yǎng)基中的碳源應(yīng)為牛肉膏和蛋白胨B．將菌液接種到培養(yǎng)基的方法是平板劃線法C．菌落①與菌落②透明圈大小不同的原因是其對(duì)碘的分解能力不同D．?dāng)U大培養(yǎng)時(shí)用不加瓊脂的液體培養(yǎng)基效果更好D[篩選所用培養(yǎng)基應(yīng)以淀粉作為唯一碳源，這樣才能將降解淀粉的菌種篩選出來(lái)，A錯(cuò)誤；由培養(yǎng)基上的單個(gè)菌落可知，將菌液接種到培養(yǎng)基的方法是稀釋涂布法，B錯(cuò)誤；由于培養(yǎng)基中的唯一碳源是淀粉，而淀粉遇碘液會(huì)變藍(lán)，故菌落①與②周圍透明圈的大小不同原因可能是兩個(gè)菌群對(duì)淀粉的分解能力不同，C錯(cuò)誤；液體培養(yǎng)基可增大溶氧量，也能增加菌種與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，故擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)用不加瓊脂的液體培養(yǎng)基效果更好，D正確。]6．(2021·河北衡水中學(xué)檢測(cè))秸稈還田可增加土壤肥力，緩解環(huán)境污染。為分離分解纖維素的微生物菌種，實(shí)現(xiàn)廢物的資源化利用，研究人員設(shè)計(jì)了“土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌株”的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之后調(diào)節(jié)pHB．選擇培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基C．進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作D．挑選菌株后，應(yīng)將使用過(guò)的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后再丟棄A[配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之前調(diào)節(jié)pH，避免滅菌之后調(diào)pH造成雜菌污染，A錯(cuò)誤；選擇培養(yǎng)時(shí)，為分離分解纖維素的微生物菌種，應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基，B正確；進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，為了無(wú)菌操作，應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作，C正確；挑選菌株后，為了防止造成污染，應(yīng)將使用過(guò)的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后再丟棄，D正確。]7．(2021·菏澤高三模擬)精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌缺乏將鳥(niǎo)氨酸轉(zhuǎn)化為精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，但可作為鳥(niǎo)氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。如圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌并進(jìn)行篩選的過(guò)程示意圖，過(guò)程②將紫外線照射處理的菌液接種在某培養(yǎng)基上。培養(yǎng)至菌落不再增加時(shí)，平板上的菌落如圖甲所示。過(guò)程③向培養(yǎng)基中添加某種物質(zhì)，繼續(xù)培養(yǎng)，得到如圖乙所示平板，下列敘述正確的是()A．紫外線照射可導(dǎo)致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生基因突變或染色體變異B．圖乙中菌落B為精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌C．過(guò)程③向培養(yǎng)基中添加的某種物質(zhì)是谷氨酸D．過(guò)程②所用培養(yǎng)基是一種鑒別培養(yǎng)基B[谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，其細(xì)胞中不含染色體，因此不會(huì)發(fā)生染色體變異，A錯(cuò)誤；由以上分析可知，圖乙中菌落B為精氨酸依賴營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌，B正確；過(guò)程③向培養(yǎng)基中添加的某種物質(zhì)是精氨酸，C錯(cuò)誤；過(guò)程②所用培養(yǎng)基缺少精氨酸，只有能產(chǎn)生精氨酸的微生物才能生存，因此該培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。]8．大腸桿菌的體積通常在0.5～3μm，為分離獲得某噬菌體，實(shí)驗(yàn)操作如圖。據(jù)圖分析，下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．選擇污水，因?yàn)槠渲泻写罅康拇竽c桿菌，容易分離獲得B．離心是為了促進(jìn)噬菌體和大腸桿菌的分離C．孔徑0.22μm是為了過(guò)濾大腸桿菌和其他細(xì)菌D．過(guò)程①表示平板劃線法，結(jié)果表明濾液中含有噬菌體C[選擇污水是因?yàn)槠渲泻写罅康拇竽c桿菌，易分離獲得寄生于大腸桿菌體內(nèi)的噬菌體，A錯(cuò)誤；離心是為了得到含大腸桿菌和噬菌體的上清液，B錯(cuò)誤；孔徑0.22μm，大腸桿菌無(wú)法通過(guò)，C正確；過(guò)程①表示稀釋涂布平板法，結(jié)果出現(xiàn)噬菌斑，表明濾液中有噬菌體，D錯(cuò)誤。]9．(2021·德州二模)溫泉中含有能夠分解淀粉的耐熱古細(xì)菌，在固體培養(yǎng)基中，該類細(xì)菌分解淀粉會(huì)形成透明圈。下圖表示篩選能高效產(chǎn)生淀粉酶的耐熱古細(xì)菌的過(guò)程，下列分析正確的是()A．②過(guò)程是利用稀釋涂布平板法分離并篩選古細(xì)菌B．配制Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基時(shí)需要加入瓊脂，先滅菌再調(diào)節(jié)pHC．為防止污染需要對(duì)Ⅰ、Ⅱ培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌D．從Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中選擇透明圈最小的菌落接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基A[據(jù)圖可知，該平板上形成的單個(gè)菌落分布均勻，②過(guò)程是利用稀釋涂布平板法分離并篩選古細(xì)菌，A正確；配制Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基時(shí)需要加入瓊脂，先調(diào)節(jié)pH再滅菌，B錯(cuò)誤；為防止污染需要對(duì)Ⅰ、Ⅱ培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌，C錯(cuò)誤；在固體培養(yǎng)基中，耐熱古細(xì)菌分解淀粉會(huì)形成透明圈，透明圈越大說(shuō)明分解淀粉的能力越強(qiáng)。為篩選能高效產(chǎn)生淀粉酶的耐熱古細(xì)菌，從Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中選擇透明圈最大的菌落接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。]10．乳酸有L-乳酸、D-乳酸和DL-乳酸三類，人體只能代謝L-乳酸，而過(guò)多攝入D-乳酸會(huì)危害健康；傳統(tǒng)酸菜發(fā)酵產(chǎn)物多為D-乳酸。為了從酸菜中篩選出高產(chǎn)L-乳酸的菌株，某科研小組進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)材料和步驟：①準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料：酸菜汁、發(fā)酵培養(yǎng)基、MRS培養(yǎng)基(成分見(jiàn)下表，pH6.2～6.4)等。②篩選高產(chǎn)L-乳酸菌種：將酸菜汁稀釋107倍，取0.1mL稀釋液涂抹在MRS培養(yǎng)基中于32℃下培養(yǎng)2～4d獲得單菌落，鑒定后將獲得的L-乳酸菌種接種于MRS液體培養(yǎng)基中，在32℃下培養(yǎng)24h，③發(fā)酵條件優(yōu)化：分別探究發(fā)酵時(shí)間、溫度等因素對(duì)發(fā)酵效果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：高產(chǎn)L-乳酸菌株的最佳發(fā)酵溫度是2℃、發(fā)酵最佳時(shí)間是20h、發(fā)酵的初始pH是6.2請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)在MRS培養(yǎng)基中添加葡萄糖的作用是__________________，無(wú)機(jī)鹽可能起到________的作用。MRS培養(yǎng)基常用________法滅菌，使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)應(yīng)注意__________________________________________________________________________________________________________________________。(2)將用________稀釋后的酸菜汁涂布在MRS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后可通過(guò)菌落的____________________________________________________________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn))等特征將目的菌株鑒定出來(lái)；將獲得的目的菌株接種于液體MRS培養(yǎng)基中可達(dá)到______________________________的目的。(3)如何確定發(fā)酵的最佳時(shí)間？____________________________________________________________________________________________________。[解析](1)在MRS培養(yǎng)基中添加葡萄糖的作用是為乳酸菌生長(zhǎng)提供碳源和能源。無(wú)機(jī)鹽可能起到調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的作用。MRS培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)應(yīng)注意要先向滅菌鍋內(nèi)倒入適量水，并加熱煮沸，將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。(2)將用無(wú)菌水梯度稀釋菌液涂布在MRS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后可通過(guò)菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征將目的菌株鑒定出來(lái)；將高產(chǎn)L-乳酸菌株接種于液體MRS培養(yǎng)基中可達(dá)到增加高產(chǎn)L-乳酸菌株數(shù)目的目的。(3)每隔相同時(shí)間，測(cè)定培養(yǎng)基中L-乳酸的含量，L-乳酸的含量最高的組對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為發(fā)酵的最佳時(shí)間。[答案](1)為乳酸菌生長(zhǎng)提供碳源和能源調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓高壓蒸汽滅菌要先向滅菌鍋內(nèi)倒入適量水，并加熱煮沸，將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉(2)無(wú)菌水梯度形狀、大小、隆起程度和顏色增加高產(chǎn)L-乳酸菌株數(shù)目(3)每隔相同時(shí)間，測(cè)定培養(yǎng)基中L-乳酸的含量，L-乳酸的含量最高的組對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為發(fā)酵的最佳時(shí)間11．聚對(duì)苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料類水瓶的重要原料，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了以PET為碳源和能量來(lái)源的細(xì)菌，該發(fā)現(xiàn)對(duì)PET類材料的回收利用、環(huán)境治理意義重大。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中獲取PET降解菌，需將土壤樣品置于以________為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行選擇培養(yǎng)，其目的是______。(2)該實(shí)驗(yàn)小組選取PET濃度為800mg·L－1的富集液進(jìn)行系列稀釋，分別取10－3、10－4和10－5倍數(shù)的稀釋液0.1mL涂布于培養(yǎng)基上，每個(gè)稀釋倍數(shù)涂布三個(gè)平板，各平板的菌落數(shù)分別為(35、32、31)，(286、298、297)，(36、7、2)，不適合用于計(jì)數(shù)的為_(kāi)_________倍數(shù)的稀釋液，用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進(jìn)行計(jì)數(shù)得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是_______________________________________________________________________________________________。(3)倒平板時(shí)應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰，目的是______。在倒平板的過(guò)程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則這個(gè)平板不能用來(lái)培養(yǎng)目的菌，原因是___________________。用平板劃線法純化PET降解菌的過(guò)程中，在第二次及其后的劃線操作時(shí)，須從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線，原因是________________________________________________________________________。(4)在保藏PET降解菌菌種時(shí)，可采取________的方法進(jìn)行長(zhǎng)期保存。[解析](1)欲從土壤中獲取PET降解菌，需將土壤樣品置于以PET為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行選擇培養(yǎng)，其目的是增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌。(2)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，據(jù)此結(jié)合題意可知：不適合用于計(jì)數(shù)的為10－5倍數(shù)的稀釋液。用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進(jìn)行計(jì)數(shù)，得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是稀釋倍數(shù)為10－3時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10－4組的結(jié)果。(3)倒平板時(shí)應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰，其目的是滅菌，防止微生物污染。在倒平板的過(guò)程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此這個(gè)平板不能用來(lái)培養(yǎng)目的菌。用平板劃線法純化PET降解菌的過(guò)程中，為使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的菌落，在第二次及其后的劃線操作時(shí)，須從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。(4)對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。[答案](1)PET增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌(2)10－5稀釋倍數(shù)為10－3時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10－4組的結(jié)果(3)滅菌，防止微生物污染空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的菌落(4)甘油管藏12．(2021·德州高三大聯(lián)考)聚羥基脂肪酸酯(PHA)是一類由微生物合成，在自然條件下可完全降解的生物塑料，可替代傳統(tǒng)塑料成為新型生物材料。某科研團(tuán)隊(duì)以餐廚垃圾作為碳源，按照如圖所示流程從含鹽量高的餐廚垃圾滲瀝液處理系統(tǒng)中篩選分離出PHA合成能力較強(qiáng)的耐鹽菌株，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()(注：尼羅紅是細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存的脂類物質(zhì)的熒光染色劑，在紫外光的照射下顯示紅色，靈敏度較高，可用于PHA和非PHA脂類物質(zhì)熒光顯微鏡觀察，并能在一定程度上將兩者區(qū)分開(kāi)來(lái)。)A．配制甲培養(yǎng)基時(shí)可適當(dāng)提高培養(yǎng)基的鹽濃度，接種后應(yīng)置于搖床中振蕩培養(yǎng)B．在乙培養(yǎng)基中加入尼羅紅熒光染色劑，接種后將培養(yǎng)皿倒置在恒溫箱中培養(yǎng)C．①過(guò)程采用稀釋涂布平板法，②過(guò)程中應(yīng)挑選有紅色熒光的菌落進(jìn)行培養(yǎng)D．經(jīng)過(guò)多次稀釋和篩選，形成的單菌落中所有細(xì)胞的遺傳物質(zhì)均相同D[由題干可知，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選分離出PHA合成能力較強(qiáng)的耐鹽菌株，甲為選擇培養(yǎng)基，作用是進(jìn)行選擇培養(yǎng)，配制時(shí)應(yīng)適當(dāng)提高鹽濃度，抑制非目的菌株生長(zhǎng)。振蕩培養(yǎng)的目的是讓目的菌與培養(yǎng)液充分混合，增加目的菌的數(shù)量，A正確；選擇培養(yǎng)后，將菌液經(jīng)稀釋涂布到平板上，并在平板中加入尼羅紅熒光染色劑，在紫外燈下出現(xiàn)紅色熒光的菌株代表可產(chǎn)生PHA，接種后將培養(yǎng)皿倒置在恒溫箱中培養(yǎng)，B、C正確，細(xì)菌為原核生物，進(jìn)行二分裂增殖，不能保證遺傳物質(zhì)平均分配，D錯(cuò)誤。]13．(2021·江蘇百校聯(lián)考)下圖表示采用富集方法從土壤中分離能降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程。下列有關(guān)敘述，不正確的是()A．該實(shí)驗(yàn)所用的器具、培養(yǎng)基均需滅菌處理B．①～②～③重復(fù)培養(yǎng)能提高目的菌的比例C．④～⑤的培養(yǎng)過(guò)程可以純化并計(jì)數(shù)目的菌D．⑥⑦中的培養(yǎng)基中都應(yīng)含有對(duì)羥基苯甲酸D[圖示為微生物的實(shí)驗(yàn)，需要進(jìn)行無(wú)菌操作，所以該實(shí)驗(yàn)所用的器具、培養(yǎng)基均需滅菌處理，A正確；①～②～③是將土壤提取液置于含對(duì)羥基苯甲酸的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，重復(fù)多次可以提高目的菌的比例，B正確；④～⑤的培養(yǎng)過(guò)程采用稀釋涂布平板法，所以可以純化并計(jì)數(shù)目的菌，C正確；⑥⑦的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖钦f(shuō)明通過(guò)選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物，有一組作為對(duì)照不含有對(duì)羥基苯甲酸，D錯(cuò)誤。]

14．(2021·青島膠州實(shí)驗(yàn)中學(xué))某同學(xué)從植物中提取了W物質(zhì)，并研究其抑菌效果。在平板中央處打孔后加入提取物W，測(cè)量抑菌圈的大小和計(jì)算抑菌圈平均增幅速率，實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果如圖所示。據(jù)圖分析下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．將一定量菌液與冷卻后的滅菌的培養(yǎng)基混勻后傾倒平板可得到試驗(yàn)菌平板B．在平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，目的是防止微生物污染平板C．抑菌圈直徑的大小與菌體濃度、提取物W的濃度和預(yù)擴(kuò)散時(shí)間密切相關(guān)D．提取物W在培養(yǎng)基中擴(kuò)散，加入提取物W后的2小時(shí)可獲得最佳抑菌效果D[將一定量菌液與冷卻后的滅菌的培養(yǎng)基混勻后傾倒平板可得到試驗(yàn)菌平板，A正確；在試驗(yàn)平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，灼燒時(shí)鋼管上的微生物死亡，進(jìn)行打孔操作時(shí)可防止微生物對(duì)平板造成污染，B正確；抑菌圈直徑的大小與菌體濃度、提取物W的濃度和預(yù)擴(kuò)散時(shí)間有很大關(guān)系，C正確；提取物W在培養(yǎng)基中擴(kuò)散，加入提取物W后的2小時(shí)獲得抑菌圈最大平均增幅速率，說(shuō)明提取物在2小時(shí)內(nèi)擴(kuò)散得較快，但不能確定是否為最佳抑菌效果，上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，24小時(shí)抑菌圈的直徑最大，抑菌效果更佳，D錯(cuò)誤。]15．(2021·唐山高三模擬)海洋細(xì)菌A78篩選自腐爛的海帶，能在48h內(nèi)高效降解海帶塊，具有較強(qiáng)的褐藻膠降解功能。某研究小組進(jìn)行海洋細(xì)菌A78產(chǎn)生的褐藻膠裂解酶的誘導(dǎo)培養(yǎng)及特性研究。回答下列問(wèn)題。(1)海洋細(xì)菌A78的褐藻膠裂解酶的誘導(dǎo)培養(yǎng)。將海洋細(xì)菌A78接種于經(jīng)過(guò)________滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，A、B、C三個(gè)培養(yǎng)基中分別添加0.5%、1%、1.5%的褐藻酸鈉和________，一段時(shí)間后結(jié)果如圖。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明_______________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)為得到單菌落，最常用的兩種接種方法是_____________。