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文檔簡介
家畜傳染病學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)
家畜傳染病學(xué)實(shí)驗(yàn)須知
家畜傳染病往往借助人類的活動而傳播,有些是人獸共患傳染病,如炭疽、布
氏桿菌病、結(jié)核、狂犬病等。因?yàn)樵诩倚髠魅静W(xué)實(shí)驗(yàn)的對象和材料,與病畜和病
原微生物有關(guān),所以學(xué)生在操作過程中稍有疏忽,就有可能引起疫病流行,甚至感
染人身,危及生命,于是實(shí)驗(yàn)時(shí)必須遵守下列規(guī)定。
1.在實(shí)驗(yàn)時(shí)必須穿工作服,當(dāng)接觸或操作危險(xiǎn)材料時(shí),須穿戴膠靴、圍裙、手套
及眼鏡,用后應(yīng)立即消毒清洗后,方可再用。在操作時(shí),一定嚴(yán)肅認(rèn)真,勿以手指
或其他器物等接觸口唇、眼、鼻和面部,手和面部有傷口時(shí),應(yīng)避免危險(xiǎn)材料的接
觸。
2.使用危險(xiǎn)材料應(yīng)行無菌操作,盛危險(xiǎn)材料的器皿要牢固,以免操作過程破裂,
以防液體流出,造成污染。用過的尸體、內(nèi)臟、血液以及廢棄的培養(yǎng)基、生物制品
等,須嚴(yán)加,消毒或深埋。用過的棉球、紗布等污物,放在固定容器中,統(tǒng)一處理,
不得隨意拋棄。萬一危險(xiǎn)材料滴出或打翻,或發(fā)生其他意外,應(yīng)立即報(bào)告指導(dǎo)老師
及時(shí)處理。如手指或皮膚受污染,立即將手浸入消毒液中15min,然后用清水洗干
凈。
3.實(shí)驗(yàn)完畢,將操作臺面用消毒液消毒一下,自身的手也須消毒和洗刷干凈后方
得離開實(shí)驗(yàn)室。
4.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)對本次實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、有關(guān)內(nèi)容和操作技術(shù)進(jìn)行預(yù)習(xí);實(shí)驗(yàn)時(shí)在老師指導(dǎo)
下進(jìn)行,并遵守實(shí)驗(yàn)程序,均不可潦草應(yīng)付或不動手;實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)作好記錄,特別是
實(shí)驗(yàn)內(nèi)存、方法及結(jié)果應(yīng)詳細(xì)記錄,認(rèn)真做好作業(yè)。
5.愛惜藥械和儀器,特別對精密儀器一定要按照教師指導(dǎo)的方法和步驟進(jìn)行操作,
不可粗心大意,以免發(fā)生損壞。
實(shí)驗(yàn)一家畜傳染病的臨診記錄和表報(bào)
目的
1.認(rèn)識傳染病臨診記錄和表報(bào)工作的意義。
2.熟悉家畜傳染病的主要表格及其使用方法。
內(nèi)容及方法
一、傳染病臨診記錄和表報(bào)工作的實(shí)際意義
有關(guān)家畜傳染病防治工作的部門,應(yīng)建立制度,堅(jiān)持作好臨診記錄和表報(bào)工作。
臨診記錄和表報(bào)做得好壞,反映有關(guān)獸醫(yī)機(jī)構(gòu)和人員的業(yè)務(wù)水平和工作質(zhì)量。沒有
詳細(xì)的臨診記錄,就無從進(jìn)行全面的統(tǒng)計(jì)和對疾病的正確分析,因而也就不可能擬
定出有預(yù)見性的防疫計(jì)劃和有效的家畜保健措施。
二、有關(guān)家畜傳染病的主要表格
1.家畜衛(wèi)生卡片畜牧場、農(nóng)場和機(jī)關(guān)單位的養(yǎng)畜場,均應(yīng)建立家畜卡片制度,
進(jìn)行家畜健康史的登記。每頭或每群家畜填寫衛(wèi)生卡片一張,由有關(guān)的獸醫(yī)人員或
獸醫(yī)機(jī)構(gòu)統(tǒng)一管理。格式見表1??ㄆ幪栕詈煤托筇柦y(tǒng)一起來,即括號內(nèi)標(biāo)明畜
別,后面填畜號。健康史欄著重寫下列內(nèi)容:原產(chǎn)地家畜傳染病流行情況簡介;其
親代何時(shí)患過何種傳染??;該家畜在入場或建立卡片以前何時(shí)患過何種疾病或接受
過何種預(yù)防注射及檢疫。
2.家畜傳染病防疫措施登記表也可稱為免疫接種和檢疫登記簿。各農(nóng)牧場、獸
醫(yī)診
療部門和各級獸醫(yī)防治機(jī)構(gòu)均可使用。格式如表2。
3.疫情登記表供各級獸疫防治機(jī)構(gòu)作為地區(qū)的基本流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)資料。格式如
表3。
4.畜禽檢疫(驗(yàn))證明畜禽及畜禽產(chǎn)品在長途運(yùn)輸時(shí),在啟運(yùn)前須經(jīng)有關(guān)獸醫(yī)單位
進(jìn)行必要的檢疫(驗(yàn)),并經(jīng)預(yù)防接種或消毒后簽發(fā)檢疫(驗(yàn))證明;檢疫(驗(yàn))證明有:
畜禽產(chǎn)地檢疫證明、畜禽產(chǎn)品檢疫(驗(yàn))證明、畜禽及畜禽產(chǎn)品運(yùn)載工具消毒證明和
畜禽運(yùn)輸檢疫證明,檢疫(驗(yàn))證明的格式由農(nóng)業(yè)部監(jiān)制。檢疫(驗(yàn))證明一式2?3
聯(lián),第一聯(lián)存根,第二聯(lián)交畜(貨)主,第三聯(lián)同貨隨行,格式如表4一1、4一11、4一
II。運(yùn)輸時(shí)應(yīng)遵守的特殊要求,如需用不漏水的車船、沿指定路線,在限定日期內(nèi)
運(yùn)達(dá)指定地點(diǎn)和中途不得停留等限制,可在備注欄內(nèi)詳細(xì)注明。
5.其他在獸疫防治、診斷檢驗(yàn)和有關(guān)的研究工作實(shí)踐中,還需要其他一些記錄表
和報(bào)表,如家畜傳染病病歷、家畜傳染病門診病畜登記簿、家畜傳染病住院病畜登
記簿、獸醫(yī)診斷室診斷記錄表等,這些表報(bào)與一般獸醫(yī)診療部門所用的基本相同。
復(fù)習(xí)題與作業(yè)
1.試述臨診記錄和表報(bào)工作的實(shí)際意義。
2.試將附發(fā)的四種表格各填寫一份。
實(shí)驗(yàn)二消毒
目的
1.結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐掌握畜禽舍、土壤、糞便等消毒方法。
2.檢查消毒質(zhì)量的方法。
內(nèi)容及方法
一、消毒的器械和消毒劑
1.噴霧器用于噴灑消毒的器具稱為噴霧器,與吸入或壓力唧筒相似。噴霧器有
兩種,
一種是手動噴霧器,另一種是機(jī)動噴霧器。前者有背攜式和手壓式兩種(圖1一I、
II、III),常用于小量消毒;后者有背攜式和擔(dān)架式兩種(圖1—IV、V),常用于大
面積消毒。
消毒液在裝入噴霧器之前,應(yīng)先充分溶解過濾,以免可能存在的殘?jiān)氯麌婌F器
的噴嘴。
2.火焰噴燈是利用汽油或煤油作為燃料的一種工業(yè)用噴燈,常用以消毒被病原
體污染了的各種金屬制品,如鼠籠、兔籠、雞籠等。
3.化學(xué)消毒劑消毒劑是防疫工作中的重要武器之一,是消滅被傳染原污染在外
界環(huán)境中的病原微生物,可切斷傳播途徑,預(yù)防傳染病的發(fā)生和蔓延。近年來,我
國集約化養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展很快,而消毒劑日益受到重視?;瘜W(xué)消毒劑品種較多,現(xiàn)介紹
幾種常用消毒劑。
(1)二氯異氟尿酸鈉(優(yōu)氯凈)Sodiumdichloroisocyanurata含有效氯60%左
右,易溶
于水,殺菌譜廣,對細(xì)菌、病毒、真菌及細(xì)菌芽胞有較強(qiáng)的殺滅作用。用具的消毒
(0.5%?10%,15?60min);地面的消毒350?1000ml/m2,1?
3h)o同類產(chǎn)品三氯異氧尿酸(Trichloroisocynccricacid)含有效氯90%,溶解度
低..
(2)農(nóng)福NewFormulaFarmFluid醋酸、混合酚與烷基苯磺酸復(fù)配的水溶液,
易溶于水。對細(xì)菌和病毒有殺滅作用。1%?1.3%溶液用于畜禽噴灑消毒,1.7%
溶液用器具和車輛消毒。相近產(chǎn)品毒菌凈(復(fù)合酚),易溶于水,0.33%溶液用于細(xì)
菌性傳染病的畜舍、用具消毒;1%溶液用于病毒性傳染病的畜舍、籠具消毒。
(3)百毒殺Deciquam222,Bromo-sept50新型季鍍鹽類消毒劑,屬陽離子型
表面活性劑,水溶性低,對馬立克氏病病毒、新城疫病毒有較強(qiáng)滅活,對芽胞和IBDV
效力差。環(huán)境消毒時(shí)取本晶1ml加入3L水中。飲水消毒時(shí),取1ml加入10?20L
水中。
(4)碘伏Iodophors碘與表面活性劑的不定型結(jié)合物,在溶液中逐漸釋放碘,對
細(xì)菌、病毒、真菌和細(xì)菌芽胞有殺滅作用,殺菌濃度為5—10mg/L。
(5)過氧乙酸滅菌譜廣,對細(xì)菌、病毒、真菌和芽胞有較強(qiáng)滅菌作用。0.5%溶液
用于噴灑畜、禽舍、地面和食槽。70c以上易引起爆炸。
(6)漂白粉為次氯酸鈣,是一種廣泛應(yīng)用的消毒劑,殺菌效力強(qiáng)。10%?20%乳
劑用于畜、禽舍、環(huán)境的消毒,在5?log/m3水中,可作飲水消毒。
(7)福爾馬林為38%?40%甲醛的水溶液,有較強(qiáng)殺菌作用。主要用于熏蒸消
毒,用量為250ml/m3空間。還有固體福爾馬林,置容器上加熱熏蒸消毒。
二、畜、禽舍的消毒
畜、禽舍的消毒分兩個(gè)步驟進(jìn)行,第一步先進(jìn)行機(jī)械清掃,第二步是化學(xué)消毒液
消毒。
機(jī)械清掃是搞好畜、禽舍環(huán)境衛(wèi)生最基本的一種方法。據(jù)試驗(yàn),采用清掃方法,
可以使雞舍內(nèi)的細(xì)菌數(shù)減少21.5%,如果清掃后再用清水沖洗,則雞舍內(nèi)細(xì)菌數(shù)即
可減少54%?60%;清掃;沖洗后再用藥物噴霧消毒,雞舍內(nèi)的細(xì)菌數(shù)即可減少
90%。
用化學(xué)消毒液消毒時(shí),消毒液的用量一般是以畜、禽舍內(nèi)每平方米面積用1L藥液。
消毒時(shí),先噴灑地面,然后墻壁,先由離門遠(yuǎn)處開始,噴完墻壁后再噴天花板,最
后再開門窗通風(fēng),用清水刷洗飼槽,將消毒藥味除去。在進(jìn)行聲、禽舍消毒時(shí)也應(yīng)
將附近場院以及病畜、禽污染的地方和物品同時(shí)進(jìn)行消毒。
1.畜、禽舍的預(yù)防消毒在一般情況下,每年可進(jìn)行兩次(春秋各一次)。在進(jìn)行
畜、禽舍預(yù)防消毒的同時(shí),凡是家畜(禽)停留過的處所都需進(jìn)行消毒。在采取''全進(jìn)
全出"管理方法的機(jī)械化養(yǎng)畜(禽)場,應(yīng)在全出后進(jìn)行消毒。產(chǎn)房的消毒,在產(chǎn)仔前
應(yīng)進(jìn)行一次,產(chǎn)仔高峰時(shí)進(jìn)行多次,產(chǎn)仔結(jié)束后再進(jìn)行一次。
畜、禽舍預(yù)防消毒時(shí)常用的液體消毒劑有10%?20%的石灰乳和5%?10%的
漂白粉溶液。
畜、禽舍預(yù)防消毒也可用氣體消毒。所用藥品是福爾馬林和高鎰酸鉀。方法是按
照畜、禽舍面積計(jì)算所需用的藥品量。一般每立方米空間,用福爾馬林25ml,水
12.5ml,高鋅酸鉀25g(或以生石灰代替)。計(jì)算好用量以后將水與福爾馬林混合。
畜、禽舍的室溫不應(yīng)低于正常的室溫(15?18℃)。將畜、禽舍內(nèi)的管理用具、工作
服等適當(dāng)?shù)卮蜷_,箱子與柜櫥的門都開放。再在畜、禽舍內(nèi)放置幾個(gè)金屑容器,然
后把福爾馬林與水的混合液倒人容器內(nèi),將牲畜遷出,畜、禽舍門窗緊閉,其后將
高鎰酸鉀倒人,用木棒攪拌,經(jīng)幾秒鐘即見有淺藍(lán)色刺激眼鼻的氣體蒸發(fā)出來,此
時(shí)應(yīng)迅速離開畜、禽舍,將門關(guān)閉。經(jīng)過12?24h后方可將門窗打開通風(fēng)。倘若
急需使用畜、禽舍,則需用氨蒸氣來中和甲醛氣。按畜、禽舍每IOOm3取500g
氯化錢,1kg生石灰及750ml的水(加熱到75℃)。將此混合液裝于小桶內(nèi)放人畜、
禽舍?;蛘哂冒彼畞泶?,即按每IOOm3畜、,禽舍用25%氨水1250ml,中和
20?30min后,打開畜、禽舍門窗通風(fēng)20730min,此后即可飼養(yǎng)畜、禽。
在集約化飼養(yǎng)場,為了預(yù)防傳染病平時(shí)可用消毒劑進(jìn)行''帶畜消毒如用0.3%
過氧乙酸對雞舍進(jìn)行氣霧消毒,對雞舍地面、墻壁、雞被羽表面上常在菌和腸道菌
有較強(qiáng)的殺滅作用。如0.3%過氧乙酸按30ml/m3劑量噴霧消毒,對雞群和產(chǎn)蛋
雞均無不良影響。''帶畜消毒”法在疫病流行時(shí),可作為綜合防制措施之一,及時(shí)進(jìn)
行消毒對撲滅疫病起到一定作用。0.5%以下濃度的過氧乙酸對人畜無害,為了減
少對工作人員的刺激,在消毒時(shí)可配戴口罩。
2.畜、禽舍的臨時(shí)消毒和終末消毒發(fā)生各種傳染病而進(jìn)行臨時(shí)消毒及終末消毒
時(shí),用來消毒的消毒劑隨疫病的種類不同而異,一般腸道菌、病毒性疾病可選用上
述所介紹的幾種消毒劑,如5%漂白粉乳劑,1%?2%氫氧化鈉熱溶液。但如發(fā)生
細(xì)菌芽胞引起的傳染?。ㄈ缣烤?、氣腫疽等)時(shí),則需使用10%?20%漂白粉乳劑、
10%?20%氫氧化鈉熱溶液或其他強(qiáng)力消毒劑。在消毒畜、禽舍的同時(shí);在病畜、
禽舍、隔離舍的出入口處應(yīng)放置,設(shè)有消毒液的麻袋片或草墊。
三、地面土壤的消毒
被病畜(禽)的排泄物和分泌物污染的地面土壤,可用5%?10%漂白粉溶液、百
毒殺或10%氫氧化鈉溶液消毒。停放過芽胞菌所致傳染?。ㄈ缣烤?、氣腫疽等)病畜
尸體的場所,或者是此種病畜倒斃的地方,應(yīng)嚴(yán)格加以消毒,首先用10%?20%
漂白粉乳劑或5%~10%優(yōu)氯凈噴灑地面,然后將表層土壤掘起30cm左右,撤上
千漂白粉并與土混合,將此表土運(yùn)出掩埋。在運(yùn)輸時(shí)應(yīng)用不漏土的車以免沿途漏撒,
如無條件將表土運(yùn)出,則應(yīng)多加干漂白粉的用量(lm2面積加漂白粉5kg),將漂白
粉與土混合,加水濕潤后原地壓平。
四、糞便的消毒
傳染病病畜、禽糞便的消毒有多種方法,如焚燒法、化學(xué)藥品消毒法、掩埋法和
生物熱消毒法等。實(shí)踐中最常用的是生物熱消毒法,此法能使非芽胞病原微生物污
染的糞便變?yōu)闊o害,且不喪失肥料的應(yīng)用價(jià)值。
糞便的生物熱消毒法通常有兩種,一種為發(fā)酵池法,另一種為堆糞法。
1.發(fā)酵池法此法適用于飼養(yǎng)大量家畜的農(nóng)牧場,多用于稀薄糞便(如牛、豬糞)
的發(fā)酵。其設(shè)備為距農(nóng)牧場200?250m以外無居民、河流、水井的地方挖筑兩個(gè)
或兩個(gè)以上的發(fā)群池(池的數(shù)量與大小決定于每天運(yùn)出的糞便數(shù)量)。池的邊緣與池
底用磚砌后再抹以水泥,使不透水。待倒人池內(nèi)的糞便快滿時(shí),在糞便表面鋪一層
干草,上面蓋一層泥土封嚴(yán),經(jīng)1?3個(gè)月即可掏出作肥料用。幾個(gè)發(fā)酵池可依次
輪換使用。
2.堆糞法此法適用于干固糞便(如馬、羊、雞糞等)的處理。在距農(nóng)牧場100?
200m
以外韻地方設(shè)一堆糞場。堆糞的方法如下:在地面挖一淺溝,深約20cm,寬約1.5?
2m,長度不限,隨糞便多少而定。先將非傳染性的糞便或蒿稈等堆至25cm厚,
其上堆放欲消毒的糞便、墊草等,高達(dá)1?L5m,然后在糞堆外面再鋪上10cm
厚的非傳染性的糞便或谷香草,并覆蓋10cm厚的沙子或泥土。如此堆放3個(gè)星期
到3個(gè)月,即可用以肥田。
當(dāng)糞便較稀時(shí),應(yīng)加些雜草,太干時(shí)倒人稀糞或加水,以促其迅速發(fā)酵。處理牛
糞時(shí),因牛糞較稀不易發(fā)酵,可以摻馬糞或干草,其比例為4份牛糞加1份馬糞
或干草。
五、污水的消毒
被原體污染的污水,可用沉淀法、過濾法、化學(xué)藥品處理法等進(jìn)行消毒。比較實(shí)
用
的是化學(xué)藥品處理法。方法是先將污水處理池的出水管用一木閘門關(guān)閉,將污水引
人6水池后,加入化學(xué)藥品(如漂白粉或生石灰)進(jìn)行消毒。消毒藥的用量視污水量而
定(一般
1L污水用2?5g漂白粉)。消毒后,將閘門打開,使污水流人滲井或下水道。
六、皮革原料和羊毛的消毒
皮革原料和羊毛的消毒,通常是用福爾馬林氣體在密閉室中蒸熏,但此法可損壞
皮毛品質(zhì),且穿透力低,較深層的物品難于達(dá)到消毒的目的。目前廣泛利用環(huán)爭乙
烷氣體來進(jìn)行消毒。此法對細(xì)菌、病毒、立克次氏體及霉菌均有良好的消毒作用,
對皮毛等畜產(chǎn)品中的炭疽桿菌芽胞也有較好的消毒效果。消毒時(shí)必須在密閉的專用
消毒室或密閉良好的容器(常用聚乙烯或聚氯乙烯薄膜制成的蓬布)內(nèi)進(jìn)行。環(huán)氧乙
烷的用量,如消毒病原體繁殖型,每立方米用300?400g,作用8h;如消毒芽胞
和霉菌,每立方米用700?950g左右,作用24h。環(huán)氧乙烷的消毒效果與濕度、
溫度等因素有關(guān),一般認(rèn)為,相對濕度為30%?50%,溫度在18c以上,38?
54c以下,最為適宜。環(huán)氧乙烷的沸點(diǎn)為10.7℃,沸點(diǎn)m766溫度為易揮發(fā)的
液體,遇明火易燃易爆,對人有中等毒性,應(yīng)避免接觸其液體和吸入其氣體。
七、消毒質(zhì)量的檢查
為了驗(yàn)證消毒的效果,可對消毒對象進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。方法是在消毒以后由地面
(在
畜、禽舍的家畜后腳停留的地方)、墻壁上、畜、禽舍墻角以及飼槽上取樣品,用小
解剖月在上述各部位劃出大小為lOcmXIOcm的正方形數(shù)塊,每個(gè)正方形都用滅
菌的濕棉簽(干棉簽的重量為。.25-o.33g)擦拭1?2min,將棉簽置于中和劑
(30ml)中并沾上中和劑然后壓出、沾上、壓出,如此進(jìn)行數(shù)次之后,再放人中和
劑內(nèi)5?lOmin,用鑲子將棉簽擰干,然后把它移人裝有滅菌水(30ml)的罐內(nèi)。
當(dāng)以漂白粉作為消毒劑時(shí),可應(yīng)用30ml的次亞硫酸鹽中和之;堿性溶液用
0.01%醋酸30ml中和;福爾馬林用氫氧化鏤(1%?2%)作為中和劑。當(dāng)以克遼
林、來蘇兒及其他藥劑消毒時(shí),沒有適當(dāng)?shù)闹泻蛣?,而是在滅菌的水中洗?次,
時(shí)間為5Momin,依次地把棉簽從一個(gè)罐內(nèi)移人另一個(gè)罐內(nèi)。
送到實(shí)驗(yàn)室去的滅菌水里的樣品在當(dāng)天把棉簽擰干和將液體攪拌之后,將此洗液
的樣品接種在遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基上。為此,用滅菌的刻度吸管由小罐內(nèi)吸取0.3ml的
材料傾人瓊脂.平皿表面,用巴氏吸管作成的''刮",在瓊脂平皿表面涂布,然后仍
用此''刮"涂布第二個(gè)瓊脂平皿表面。將接種了的平皿置于37c溫箱內(nèi),24h檢查初
步結(jié)果,48h后檢查最后結(jié)果。如在遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基上發(fā)現(xiàn)可疑菌落時(shí),即用常規(guī)方
法鑒別這些菌落。如無腸道桿菌培養(yǎng)物存在時(shí),證明所進(jìn)行的消毒質(zhì)量是良好的,
有腸道桿菌生長,說明消毒質(zhì)量不良。
復(fù)習(xí)題與作業(yè)
1.試述消毒的種類和意義。
2.分別列舉適用于殺滅芽胞菌、非芽胞菌和病毒的化學(xué)消毒藥。
3.糞便生物熱消毒的原理為何?
4.如何進(jìn)行畜、禽舍消毒質(zhì)量的微生物學(xué)檢查?
實(shí)驗(yàn)三傳染病病畜(禽)尸體的處理
目的
結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐,掌握尸體的運(yùn)送及處理方法。
內(nèi)容及方法
一、尸體的運(yùn)送
尸體運(yùn)送前,工作人員應(yīng)穿戴工作服、口罩、風(fēng)鏡、膠鞋及手套。運(yùn)送尸體應(yīng)用
特制的運(yùn)尸車(車的內(nèi)壁襯釘鐵皮,以防漏水)。裝車前應(yīng)將尸體各天然孔用蘸有消
毒液的濕紗布、棉花嚴(yán)密填塞,小動物和禽類可用塑料袋盛裝,以免流出糞便、分
泌物、血液等污染周圍環(huán)境。在尸體躺過的地方,應(yīng)用消毒液噴灑消毒,如為土壤
地面,應(yīng)鏟去表層土,連同尸體一起運(yùn)走。運(yùn)送過尸體的用具、車輛應(yīng)嚴(yán)加消毒,
工作人員用過的手套、衣物及膠鞋等亦應(yīng)進(jìn)行消毒。
二、處理尸體的方法
尸體的處理方法有多種,各具優(yōu)缺點(diǎn),在實(shí)際工作中應(yīng)根據(jù)具體情況和條件加以
選
擇。
1.掩埋法這種方法雖不夠可靠,但比較簡單,所以在實(shí)際工作中仍常應(yīng)用。
(1)墓地的選擇選擇遠(yuǎn)離住宅、農(nóng)牧場、水源、草原及道路的僻靜地方;土質(zhì)宜
干而多孔(沙土最好),以便尸體加快腐敗分解;地勢高、地下水位低,并避開山洪
的沖刷;墓地應(yīng)筑有2m高的圍墻,墻內(nèi)挖一個(gè)4m深的圍溝,設(shè)有大門,平時(shí)落
鎖。
(2)挖坑坑的長度和寬度以能容納側(cè)臥之尸體即可,從坑沿到尸體表面不得少于
1.5?2m。
(3)掩埋坑底鋪以2?5cm厚的石灰,將尸體放入,使之側(cè)臥,并將污染的土層、
捆尸體的繩索一起拋入坑內(nèi),然后再鋪2?5cm厚的石灰,填土夯實(shí)。尸體掩埋后,
上面應(yīng)作0.5m高的墳丘。
2.焚燒法這是毀滅尸體最徹底的方法,可在焚尸爐中進(jìn)行。如無焚尸爐,則可
挖掘焚尸坑。焚尸坑有以下幾種:
(1)十字坑按十字形挖兩條溝,溝長2.6m,寬0.6m,深0.5m。在兩溝交
叉處坑底堆放干草和木柴,溝沿橫架數(shù)條粗濕木棍,將尸體放在架上,在尸體的周
圍及上面再放上木柴,然后在木柴上倒以煤油,并壓以磚瓦或鐵皮,從下面點(diǎn)火,
直到把尸體燒成黑炭為止,并把它掩埋在坑內(nèi)。
(2)單坑挖一長2.5m,寬1.5m,深0.7m的坑,將取出的土堵在坑沿的
兩側(cè)??觾?nèi)用木柴架滿,坑沿橫架數(shù)條粗濕木棍,將尸體放在架上,以后處理如(1)
法。
(3)雙層坑先挖一長、寬各2m,深0.75m的大溝,在溝的底部再挖一長2m、
寬1m、深0.75m的小溝,在小溝溝底鋪以干草和木柴,兩端各留出18?20cm
的空隙,以便吸人空氣,在小溝溝沿橫架數(shù)條粗濕木棍,將尸體放在架上,以后處
理如(1)法。
3.化制法這是一種較好的尸體處理方法,因它不僅對尸體作到無害化處理,并
保留了有價(jià)值的畜產(chǎn)品,如工業(yè)用油脂及骨、肉粉。此法要求在有一定設(shè)備的化制
廠進(jìn)行?;剖w時(shí),對烈性傳染病,如鼻疽、炭疽、氣腫疽、羊快疫等病畜尸體
可用高壓滅菌;對于普通傳染病可先切成4?5kg的肉塊,然后在水鍋中煮沸2?
3ho
4.發(fā)酵法這種方法是將尸體拋入專門的尸體坑內(nèi),利用生物熱的方法將尸體發(fā)
酵分解以達(dá)到消毒的目的。這種專門的尸體坑是貝卡里氏設(shè)計(jì)出來的,所以叫做貝
卡里氏坑。建筑貝卡里氏坑應(yīng)選擇遠(yuǎn)離住宅、農(nóng)牧場、草原、水源及道路的僻靜地
方。尸坑為圓井形,深9?10m,直徑3m,坑壁及坑底用不透水材料作成(可用水
泥或涂以防腐油的木料)??涌诟叱龅孛婕s30cm,坑口有蓋,蓋上有小的活門(平
時(shí)落鎖),坑內(nèi)有通氣管。如有條件,可在坑上修一小屋??觾?nèi)尸體可以堆到距坑口
1.5m處。經(jīng)3?5個(gè)月后,尸體完全腐敗分解,此時(shí)可以挖出作肥料。
如果土質(zhì)干硬,地下水位又低,加之條件限制,可以不用任何材料,直接按上述
尺寸挖一深坑即可,但需在距坑口Im處用磚頭或石頭向上砌一層坑緣,上蓋木蓋,
坑口應(yīng)高出地面30cm,以免雨水流入。
復(fù)習(xí)題與作業(yè)
1.運(yùn)送尸體時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)?
2.常用的處理尸體方法共有幾種?各述其優(yōu)缺點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)四免疫接種
目的
1.結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐掌握免疫接種的方法和步驟。
2.熟悉獸醫(yī)生物制品的保存、運(yùn)送和用前檢查方法。
內(nèi)容及方法
一、免疫接種的方法
免疫接種的方法很多,主要有注射免疫法、經(jīng)口免疫法、氣霧免疫法等。
1.注射免疫法注射免疫法中可分為皮下接種、皮內(nèi)接種、肌肉接種和靜脈接種
等四種。
(1)皮下接種法對馬、牛等大家畜皮下接種時(shí),一律采用頸側(cè)部位,豬在耳根后
方,家禽在胸部、大腿內(nèi)側(cè)。根據(jù)藥液的濃度和家畜的大小而異,一般用16?20
號針頭,長約1.2~2.5cm。家禽則應(yīng)采用針孔直徑小于20號的針頭。
皮下接種的優(yōu)點(diǎn)是操作簡單,吸收較皮內(nèi)接種為快,缺點(diǎn)是使用劑量多。而且同一
疫苗,應(yīng)用皮下接種時(shí),其反應(yīng)較皮內(nèi)為大。大部分常用的疫苗和免疫血清,一般
均采用皮下接種。
(2)皮內(nèi)接種法馬的皮內(nèi)接種采用頸側(cè)、眼瞼部位。牛及羊除頸側(cè)外,可在尾根
或肩胛中央部位。豬大多在耳根后。雞在肉髯部位。
現(xiàn)用獸醫(yī)生物制品用作皮內(nèi)接種的,僅有羊痘弱毒菌苗、豬瘟結(jié)晶紫疫苗等少數(shù)
制品,其他均屬于診斷液方面。一般使用專供皮內(nèi)注射的注射器(容量2?10ml),
0.6~1.2cm長的螺旋針頭(針孔直徑19—25號),也可使用藍(lán)心注射器(容量
1ml)和相應(yīng)的注射針頭。
皮內(nèi)接種的優(yōu)點(diǎn)是使用藥液少,同樣的疫苗皮內(nèi)注射較之于皮下注射反應(yīng)小。同時(shí),
真皮層的組織比較致密,神經(jīng)末梢分布廣泛,特別是豬的耳根皮內(nèi)比其他部位容易
保持清潔。同量藥液皮內(nèi)注射時(shí)所產(chǎn)生的免疫力較皮下注射為高。
皮內(nèi)接種的缺點(diǎn)是手續(xù)比較麻煩。提高工作人員的操作技術(shù),可以克服這一缺點(diǎn)。
(3)肌肉接種法馬、牛、豬、羊的肌肉接種,一律采用臀部和頸部兩個(gè)部位。雞
可在胸肌部接種。
現(xiàn)有獸醫(yī)生物制品,除豬瘟弱毒疫苗、牛肺疫弱毒疫苗以及在某些情況下接種血
清采用肌肉接種外,其他生物制品一般都不應(yīng)用此法進(jìn)行接種。一般使用16?20
號針頭,長約2.5~3.7cm。
肌肉接種的優(yōu)點(diǎn)是藥液吸收快,注射方法也較簡便。其缺點(diǎn)是在一個(gè)部位不能大
量注射。同時(shí)臀部接種如部位不當(dāng),易引起跛行。
(4)靜脈接種法馬、牛、羊的靜脈接種,一律在頸靜脈部位,豬在耳靜脈部位。
雞則在翼下靜脈部位。
現(xiàn)用獸醫(yī)生物制品中的免疫血清,除了皮下或肌肉接種外,亦可采用靜脈接種,
特別在急于治療傳染病患畜時(shí)。疫苗、菌苗、診斷液一般不作靜脈注射。馬、牛、
羊的靜脈接種部位在左右頸側(cè)均可,一般以右側(cè)較方便。根據(jù)家畜的大小和注射劑
量的多寡,一般使用14?20號針頭,長約2.5~3.7cm。豬的靜脈接種在耳朵
正面下翼的兩則。一般使用19?23號針頭,長約2.5?5cm。
靜脈接種的優(yōu)點(diǎn)是可使用大劑量,奏效快,可以及時(shí)搶救病畜。缺點(diǎn)是手續(xù)比較
麻煩,如設(shè)備與技術(shù)不完備時(shí),難以進(jìn)行。此外,如所應(yīng)用的血清為異種動物者,
可能引起過敏反應(yīng)(血清?。?。
2.經(jīng)口免疫法分飲水免疫和喂食免疫兩種。前者是將可供口服的疫苗混于水中,
畜、禽通過飲水而獲得免疫,后者是將可供口服的疫苗用冷的清水稀釋后拌人飼料,'
畜、禽通過吃食而獲得免疫。疫苗經(jīng)口免疫時(shí),應(yīng)按畜、禽頭數(shù)和每頭畜、禽平均
飲水量或吃食量,準(zhǔn)確計(jì)算需用的疫(菌)苗劑量。免疫前,應(yīng)停水或停料半天,夏
季停水或停料時(shí)間可以縮短,以保證飲喂疫(菌)苗時(shí),每頭畜、禽都能飲入一定量
的水或吃入一定量的料。飲水免疫時(shí),一定要增加飲水器,讓每頭畜、禽同時(shí)都能
飲到足夠量的水。稀釋疫(菌)苗應(yīng)當(dāng)用清潔的水,禁用含漂白粉的自來水?;煊幸撸ň?/p>
苗的飲水和飼料一般不應(yīng)超過室溫。已稀釋的疫(菌)苗,應(yīng)迅速飲喂。本法具有省
時(shí)、省力的優(yōu)點(diǎn),適用規(guī)?;B(yǎng)畜、禽場的免疫。缺點(diǎn)是由于畜、禽的飲水量或吃
食量有多有少,因此進(jìn)人每頭畜、禽體內(nèi)的疫(菌)苗量不同,出現(xiàn)免疫后畜、禽的
抗體水平不均勻,較離散,不能象其他免疫法那樣準(zhǔn)確一致。
3.氣霧免疫法此法是用氣泵產(chǎn)生的壓縮空氣通過氣霧發(fā)生器(即噴頭),將稀釋
疫苗噴出去,使疫(菌)苗形成直徑1?10/|jm的霧化粒子,均勻地浮游在空氣之
中,畜、禽通過呼吸道吸人肺內(nèi),以達(dá)到免疫。雞感染支原體病時(shí)禁用氣霧免疫,
因?yàn)槊庖吆笸ぐl(fā)支原體病發(fā)生,雛雞首免時(shí)使用氣霧免疫應(yīng)慎重,以免發(fā)生呼
吸道疾病而造成損失。
氣霧免疫的裝置由氣霧發(fā)生器(即噴頭)及動力機(jī)械組成??梢虻刂埔?,利用各種
氣泵或用電動機(jī)、柴油機(jī)帶動空氣壓縮泵。無論以何種方法做動力,都要保持每平
方厘米有2kg以上的壓力,才能達(dá)到疫(菌)苗霧化的目的。
霧化粒子大小與免疫效果有很大關(guān)系。一般粒子大小在1~10/1pm為有效粒子。
氣霧發(fā)生器的有效粒子在70%以上者為合格。測定霧化粒子大小時(shí),用一拭好的蓋
玻片,周圍涂以凡士林油,在蓋玻片中央滴一小滴機(jī)油,用拇指印食指持蓋玻片,
機(jī)油液面朝噴頭,在距噴頭10?30cm處迅速通過,使霧化粒子吹于機(jī)油面上,然
后將蓋玻片液面朝下放于凹玻片上,在顯微鏡下觀察,移動視野,用目測微尺測量
其大?。ǚ椒ㄅc測量細(xì)菌大小相同),并計(jì)算其有效粒子率。
(1)室內(nèi)氣霧免疫法此法需有一定的房舍設(shè)備。免疫時(shí),疫(菌)苗用量主要根據(jù)
房舍大小而定,可按下式計(jì)算:
疫(菌)苗用量=;DxA/TxV
式中:D——計(jì)劃免疫劑量;
A一一免疫室容積(1);
T一一免疫時(shí)間(分鐘);
V一一呼吸常數(shù),即動物每分鐘吸人的空氣量(L),如對綿羊免疫,即為3?6。
疫(菌)苗用量計(jì)算好以后,即可將動物趕入室內(nèi),關(guān)閉門窗。操作者將噴頭由門
窗縫伸A室內(nèi),使噴頭保持與動物頭部同高,向室內(nèi)四面均勻噴射。噴射完畢后,
讓動物在自內(nèi)停留20?30min。操作人員要注意自身防護(hù),戴上大而厚的口罩,
如出現(xiàn)癥狀,應(yīng)及時(shí)就醫(yī)。
(2)野外氣霧免疫法疫(菌)苗用量主要以動物數(shù)量而定。以羊?yàn)槔?,如?000
只,每羊免疫劑量為50億活菌,則需50000億,如果每瓶疫苗含活菌4000億,
則需12.5瓶,月500ml滅菌生理鹽水稀釋。實(shí)際應(yīng)用時(shí),往往要比實(shí)際用量略
高一些。免疫時(shí),將畜群趕入四周有矮墻的圈內(nèi)。操作人員手持噴頭,站在畜群中,
噴頭與動物頭部同高,朝動物頭部方向噴射。操作人員要隨時(shí)走動,使每一動物都
有吸人機(jī)會。如遇微風(fēng),操作者應(yīng)站在上風(fēng)向,以免霧化粒子被風(fēng)吹走。噴射完畢,
讓動物在圈內(nèi)停留數(shù)分鐘即可放出。野外氣霧免疫時(shí),操作者更應(yīng)注意自身防護(hù),
要穿工作衣褲和膠靴,戴大而厚的口罩,如出現(xiàn)癥狀,應(yīng)及時(shí)就醫(yī)。
氣霧免疫時(shí),如霧化粒子過大或過小,溫度過高,濕度過高或過低,野外免疫時(shí)
風(fēng)力過大、風(fēng)速過急,均可影響免疫效果。本法具有省時(shí)、省力的優(yōu)點(diǎn),適于大群
動物的免疫,缺點(diǎn)是需要的疫(菌)苗數(shù)量較多。
二、免疫接種用生物制品的保存、運(yùn)送和用前檢查
1.保存獸醫(yī)生物制品應(yīng)保存在低溫、陰暗、干燥的場所,滅活菌(死苗)、致弱
的細(xì)菌性菌苗、類毒素、免疫血清等應(yīng)保存在2?15℃,防止凍結(jié);致弱的病毒性
疫苗,如豬瘟弱毒疫苗、雞新城疫弱毒疫苗等,應(yīng)置放在0℃以下,凍結(jié)保存。
2.運(yùn)送要求包裝完善,盡快運(yùn)送,運(yùn)送途中避免日光直射和高溫。致弱的病毒
性疫苗應(yīng)放在裝有冰塊的廣口瓶或冷藏箱內(nèi)運(yùn)送。
3.用前檢查獸醫(yī)生物制品在使用前,均需詳細(xì)檢查,如有下列情況之一者,不
得使用:沒有瓶簽或瓶簽?zāi):磺?,沒有經(jīng)過合格檢查的;過期失效的;制品的質(zhì)
量與說明書不符,如色澤、沉淀有變化,制品內(nèi)有異物、發(fā)霉和有臭味的;瓶塞不
緊或玻璃破裂的;沒有按規(guī)定方法保存的。不能使用的疫(菌)苗應(yīng)立即廢棄,致弱
的活苗應(yīng)煮沸消毒或予以深埋。
三、家畜免疫接種前及接種后的護(hù)理與觀察
免疫接種前,應(yīng)對家畜進(jìn)行健康檢查(包括體溫檢查),根據(jù)檢查結(jié)果,作如下處
理:完全健康的家畜可進(jìn)行自動免疫接種;衰弱、妊娠后期的家畜不能進(jìn)行自動免
疫接種,而應(yīng)注射免疫血清;疑似病畜和發(fā)熱病畜應(yīng)注射治療量的免疫血清或給予
其他治療。
經(jīng)受自動免疫的家畜,應(yīng)有較好的護(hù)理和管理?xiàng)l件,要特別注意控制家畜的使役,
以避免過分勞累和接種疫(菌)苗后出現(xiàn)的暫時(shí)性抵抗力降低而產(chǎn)生不良后果。有時(shí)
家畜接種疫(菌)苗后可能會發(fā)生反應(yīng),故在接種后應(yīng)詳細(xì)觀察7?10天。如有反應(yīng),
可給予適當(dāng)治療,反應(yīng)極為嚴(yán)重的,可予以屠宰。
四、免疫接種的組織及接種時(shí)的注意點(diǎn)
在某一地區(qū)或農(nóng)牧場進(jìn)行免疫接種時(shí)的組織工作好壞,決定著免疫接種的結(jié)果和
成效,其內(nèi)容包括:對飼養(yǎng)人員講解有關(guān)接種工作的基本原理及其在防制家畜傳染
病上的重要性、接種后家畜的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件等;準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)膱龅睾捅6üぞ?;?zhǔn)備
給家畜編號的器具;編訂登記表冊。
接種時(shí),應(yīng)注意以下幾點(diǎn):工作人員需穿著工作服及膠鞋,必要時(shí)戴口罩,工作
前后均應(yīng)洗手消毒,工作中不準(zhǔn)吸煙和吃食;注射器、針頭、鏡子等,臨用時(shí)煮沸
消毒至少15分鐘,注射時(shí)每頭家畜須調(diào)換一個(gè)針頭,如針頭不足,也應(yīng)每吸液一
次調(diào)換一個(gè)針頭;針筒排氣溢出的藥液,應(yīng)吸積于酒精棉花上,并將其收集于專用
瓶內(nèi),用過的酒精棉花或碘酒棉花和吸人注射器內(nèi)未用完的藥液也應(yīng)收集于或注入
專用瓶內(nèi),集中后燒毀之。
復(fù)習(xí)題與作業(yè)
1.試述免疫接種在獸疫防治上的意義。
2.常用的免疫接種法有幾種,各有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?
實(shí)驗(yàn)五病料的取材和送檢
目的
結(jié)合病例診斷工作,學(xué)會被檢病料的采取、保存、包裝和記錄的方法
內(nèi)容及方法
一、病料的采取
1.剖檢前檢查凡發(fā)現(xiàn)患畜(包括馬、牛、羊及豬等)急性死亡時(shí),必須先用顯微
鏡檢查其末梢血液抹片中是否有炭疽桿菌存在。如懷疑是炭疽,則不可隨意剖檢,
只有在確定不是炭疽時(shí)方可進(jìn)行剖檢。
2.取材時(shí)間內(nèi)臟病料的采取,須于死亡后立即進(jìn)行,最好不超過6h,否則時(shí)間
過長,由腸內(nèi)侵入其他細(xì)菌,易使尸體腐敗,影響病原微生物的檢出。
3.器械的消毒刀、剪、鑲子、注射器、針頭等煮沸消毒30min。器皿(玻璃制
品、陶制品、玦瑯制品等)可用高壓滅菌或-干烤滅菌。軟木塞、橡皮塞置于0.5%
石炭酸水溶液中煮沸l(wèi)Omin。采取一種病料,使用一套器械和容器,不可混用。
4.病料采取應(yīng)根據(jù)不同的傳染病,相應(yīng)地采取該病常侵害的臟器或內(nèi)容物。如
敗血性傳染病可采取心、肝、脾、肺、腎、淋巴結(jié)、胃、腸等;腸毒血癥采取小腸
及其內(nèi)容物;有神經(jīng)癥狀的傳染病采取腦、脊髓等。如無法估計(jì)是哪種傳染病,可
進(jìn)行全面采取。檢查血清抗體時(shí),采取血液,凝固后析出血清,將血清裝入滅菌小
瓶送檢。為了避免雜菌污染,病變檢查應(yīng)待病料采取完畢后再進(jìn)行。各種組織及液
體的病料采取方法如下。
(1)膿汁用滅菌注射器或吸管抽取或吸出膿腫深部的膿汁,置于滅菌試管中。若
為開口的化膿灶或鼻腔時(shí),則用無菌棉簽浸蘸后,放在滅菌試管中。
(2)淋巴結(jié)及內(nèi)臟將淋巴結(jié)、肺、肝、脾及腎等有病變的部位各采取1?2cm3
的小方塊,分別置于滅菌試管或干皿中。若為供病理組織切片的材料,應(yīng)將典型病
變部分及相連的健康組織一并切取,組織塊的大小每邊約2cm左右,同時(shí)要避免
使用金屬容器,尤其是當(dāng)病料供色素檢查時(shí)(如馬傳貧、馬腦炎及焦蟲病等),更應(yīng)
注意。
(3)血液
血清:以無菌操作吸取血液10ml,置于滅菌試管中,待血液凝固(經(jīng)1?2天)析
出血清后,吸出血清置于另一滅菌試管內(nèi),如供血清學(xué)反應(yīng)時(shí),可于每毫升中加入
5%石炭酸水溶液1?2滴。
全血:采取10ml全血,立即注入盛有5%檸檬酸鈉1ml的滅菌試管中,搓轉(zhuǎn)混
合片刻后即可。
心血:心血通常在右心房處采取,先用燒紅的鐵片或刀片烙燙心肌表面,然后用
滅菌的尖刃外科刀自烙燙處刺一小孔,再用滅菌吸管或注射器吸出血液,盛于滅菌
試管中。
(4)乳汁乳房先用消毒藥水洗凈(取乳者的手亦應(yīng)事先消毒),并把乳房附近的毛
刷濕,最初所擠的3—4股乳汁棄去,然后再采集10ml左右乳汁于滅菌試管中。若
僅供顯微鏡直接染色檢查,則可于其中加入0.5%的福爾馬林液。
(5)膽汁先用燒紅的刀片或鐵片烙燙膽囊表面,再用滅菌吸管或注射器刺人膽囊
內(nèi)吸取膽汁,盛于滅菌試管中。
(6)腸用燒紅刀片或鐵片將欲采取的腸表面烙燙后穿一小孔,持滅菌棉簽插入腸
內(nèi),以便采取腸管粘膜或其內(nèi)容物;亦可用線扎緊一段腸道(約6cm)兩端,然后
將兩端切斷,置于滅菌器皿內(nèi)。
(7)皮膚取大小約lOcmXIOcm的皮膚一塊,保存于30%甘油緩沖溶液中,或
10%飽和鹽水溶液中,或10%福爾馬林液中。
(8)胎兒將流產(chǎn)后的整個(gè)胎兒,用塑料薄膜、油布或數(shù)層不透水的油紙包緊,裝
入木箱內(nèi),立即送往實(shí)驗(yàn)室。
(9)小家畜及家禽將整個(gè)尸體包入不透水塑料薄膜、油紙或油布中,裝入木箱內(nèi),
送往實(shí)驗(yàn)室。
(10)骨頭需要完整的骨頭標(biāo)本時(shí),應(yīng)將附著的肌肉和韌帶等全部除去,表面撤上
食鹽,然后包于浸過5%石炭酸水或0.1%升汞液的紗布或麻布中,裝于木箱內(nèi)送
到實(shí)驗(yàn)室。
(11)腦、脊髓如采取腦、脊髓作病毒檢查,可將腦、脊髓浸入50%甘油鹽水液
中或?qū)⒄麄€(gè)頭部割下,包人浸過0.1%升汞液的紗布或油布中,裝入木箱或鐵桶中
送檢。
供顯微鏡檢查用的膿汁、血液及粘液;可用載玻片作成抹片;組織塊可作成觸片,
然后在兩塊玻片之間靠近兩端邊沿處各墊一根火柴棍或牙簽十以免抹片或觸片上的
病料互相接觸。如玻片有多張,可按上法依次墊火柴棍或牙簽重疊起來,最上面的
一張玻片上的涂、抹面應(yīng)朝下,最后用細(xì)線包扎,玻片上應(yīng)注明口碼,并另附說明。
二、病料的保存
病料采取后,如不能立即檢驗(yàn),或需送往有關(guān)單位檢驗(yàn),應(yīng)當(dāng)加入適量的保存劑,
使病料盡量保持新鮮狀態(tài)。
1.細(xì)菌檢驗(yàn)材料的保存將采取的臟器組織塊,保存于飽和的氯化鈉溶液或30%
甘油緩沖鹽水溶液中,容器加塞封固。如系液體,可裝在封閉的毛細(xì)玻管或試管運(yùn)
送;飽和氯化鈉溶液的配制法是:蒸儲水100ml,氯化鈉38?39g,充分?jǐn)嚢枞芙?/p>
后,用數(shù)層紗布過濾,高壓滅菌后備用。30%甘油緩沖鹽水溶液的配制法是:中性
甘油30ml,氯化鈉牛5g,堿性磷酸鈉10g,加蒸儲水至100ml,混合后高,壓滅
菌備用。
2.病毒檢驗(yàn)材料的保存將采取的臟器組織塊,保存于50%甘油緩沖鹽水溶液或
雞蛋生理鹽水中,容器加塞封固,50%甘油緩沖鹽水溶液的配制法是:氯化鈉2.5g,
酸性磷酸鈉0.46g,堿性磷酸鈉10.74g,溶于100ml中性蒸儲水中,加純中性
甘油150mL中性蒸儲水50mL混合分裝后,高壓滅菌備用。雞蛋生理鹽水的配
制法是:先將新鮮的雞蛋表面用碘酒消毒,然后打開將內(nèi)容物傾入滅菌容器內(nèi),按
全蛋9份加入滅菌生理鹽水1份,搖勻后用滅菌紗布過濾,再加熱至56?58℃,
持續(xù)30min,第2天及第3天按上法再加熱一次,即可應(yīng)用。
3.病理組織學(xué)檢驗(yàn)材料的保存將采取的臟器組織塊放人10%福爾馬林溶液或
95%酒精中固定;固定液的用量應(yīng)為送檢病料的10倍以上。如用10%福爾馬林溶
液固定,應(yīng)在24h后換新鮮溶液一次。嚴(yán)寒季節(jié)為防病料凍結(jié),可將上述固定好的
組織塊取出,保存于甘油和10%福爾馬林等量混合液中。
三、病料的運(yùn)送
裝病料的容器要一一標(biāo)號,詳細(xì)記錄,并附病料送檢單(格式如表5)。病料包裝容
器要牢固,做到安全穩(wěn)妥,對于危險(xiǎn)材料、怕熱或怕凍的材料要分別采取措施。一
般病原學(xué)檢驗(yàn)的材料怕熱,應(yīng)放入加有冰塊的保溫瓶或冷藏箱內(nèi)送檢,如無冰塊,
可在保溫瓶內(nèi)放入氯化鏤450?500g,加水1500ml,上層放病料,這樣能使保
溫瓶內(nèi)保持0℃達(dá)24h。供病理學(xué)檢驗(yàn)的材料放在10%福爾馬林溶液中,不必冷藏。
包裝好的病料要盡快運(yùn)送,長途以空運(yùn)為宜。
復(fù)習(xí)題與作業(yè)
1.試述正確采取病料和運(yùn)送病料的實(shí)際意義。
2.現(xiàn)有疑似豬瘟病豬尸體,以及疑似腦炎病馬尸體各一具,試分別敘述其病料采
取、包裝和運(yùn)送方法。
實(shí)驗(yàn)六家畜傳染病的疫情調(diào)查和統(tǒng)計(jì)
目的
學(xué)會家畜傳染病疫情調(diào)查的一般方法和調(diào)查資料的初步統(tǒng)計(jì)。
內(nèi)容及方法
一、家畜傳染病疫情調(diào)查的項(xiàng)目
1.農(nóng)牧場及居民點(diǎn)的名稱及地址。
2.疫場或疫點(diǎn)的一般特征:包括地理情況;地形特點(diǎn);氣象資料(季節(jié)、天氣、
雨量等);農(nóng)牧場的獸醫(yī)干部和畜牧干部人數(shù)、文化程度、技術(shù)水平和對職責(zé)的態(tài)度;
該居民點(diǎn)與鄰近居民點(diǎn)在經(jīng)濟(jì)和業(yè)務(wù)上的聯(lián)系;家畜數(shù)目(按種類)、品種和用途。
3.疫場的獸醫(yī)衛(wèi)生特征:
(1)動物的飼養(yǎng)(共同的或是單個(gè)的)、護(hù)理和使役。
(2)畜、禽舍及其鄰近地區(qū)的狀況(從衛(wèi)生觀點(diǎn)來看)。
(3)飼料的品質(zhì)和來源地,其保藏、調(diào)配和飼喂的方法。
(4)水源的狀況和飲水處(水井、水池、小河等)的情況。
(5)放牧場地的情況和性質(zhì)。
(6)有無昆蟲和岬一一傳染病的傳遞者,它們大量出現(xiàn)的時(shí)間。
(7)畜、禽舍內(nèi)有無嚙齒動物。
(8)廄肥的清理及其保存,廄肥貯存場所的位置和狀況。
(9)預(yù)防消毒和一般預(yù)防措施的執(zhí)行情況。
(10)尸體的處理、利用和毀滅的方法;有無運(yùn)尸體的專用車。
(11)獸墓、尸體發(fā)酵坑和廢物利用場的位置、其設(shè)備和衛(wèi)生狀況,獸醫(yī)監(jiān)督等。
(12)有無檢疫室、隔離室、屠宰場、產(chǎn)房及其獸醫(yī)衛(wèi)生狀況。
(13)污水處理及排出情況。
4.一般流行病學(xué)資料:
(1)農(nóng)牧場補(bǔ)充牲畜的條件、預(yù)防檢疫規(guī)則的執(zhí)行情況。
(2)何時(shí)由該場運(yùn)出家畜和原料以及運(yùn)往何處。
(3)該農(nóng)牧場的家畜何時(shí)患過何種傳染病、患病家畜數(shù)和死亡數(shù)。
(4)鄰近地區(qū)的疫情。
5.該次傳染病流行過程的特征:
(1)診斷結(jié)果。
(2)所采用的診斷方法。
(3)鑒別診斷。
(4)最早一些病例出現(xiàn)的時(shí)間。
(5)在發(fā)現(xiàn)最早的一些病例之前有無不明顯的病例。
(6)推測傳染源推測傳染病暴發(fā)的原因或傳染病由外面?zhèn)魅撕蛡鞑サ耐緩郊坝欣?/p>
于傳染病的傳播條件(是否由于放牧場、貯水池、飼料、處理尸體欠妥,昆蟲、婢和
嚙齒動物所引起;是否由于動物去過市場和疫點(diǎn),或從這些地方運(yùn)來,以及飼料和
生的畜產(chǎn)品帶人引起)。
(7)按照月、日登記發(fā)病率。
(8)患病的和死亡的家畜總數(shù),死亡家畜的數(shù)目和患病家畜的比例(病死率)。
(9)傳染病的散播情況。
(10)臨床資料明顯型的、頓挫型的、典型的、非典型的和并發(fā)的病例數(shù)目。
(11)隱性病畜(帶菌者、帶毒者)的數(shù)目(按細(xì)菌學(xué)、血清學(xué)、變態(tài)反應(yīng)等檢查的資
料)。
(12)病理變化的資料(指出主要的和最為特征的變化)。
(13)已采取的措施及其效果(如緊急預(yù)防接種、隔離、消毒等)。
6.補(bǔ)充資料執(zhí)行和解除封鎖的日期,封鎖規(guī)則有無破壞,最終的措施是如何進(jìn)行
的,等等。
7.結(jié)論。
8.建議。
調(diào)查者簽名:
調(diào)查的日期:
上述格式所包括的內(nèi)容,只適用于疫區(qū)的一般調(diào)查,如果調(diào)查特定傳染病的流行
病學(xué)特征及其發(fā)生、發(fā)展以及終熄的規(guī)律時(shí),還須另訂適于該特定傳染病的調(diào)查項(xiàng)
目。
二、家畜傳染病疫情調(diào)查材料的初步整理
由于調(diào)查所獲得的原始材料是復(fù)雜而紊亂的,說明不了什么問題,只是一堆數(shù)字
而已,所以應(yīng)當(dāng)把它們整理成有系統(tǒng)的資料,再進(jìn)一步地研究和處理。
1.依次表統(tǒng)計(jì)處理的第一步,是將原始數(shù)字由小而大,按次序排列成一依次表,
此種排列方法名為整列。由依次表可以看出數(shù)字大概變異的情形來。最小數(shù)與最大
數(shù)之差叫做''全距"。全距愈大,表示變異愈大,反之則表示變異愈小。這種方法是
最粗放的,一般用于小樣本得到的少數(shù)(10?30個(gè))數(shù)字材料。
2.次數(shù)分布表由大樣本所得到的大量數(shù)字材料,整理的方法比較復(fù)雜,一般多
采用次數(shù)分布表。其法是按數(shù)字的大小分組,在某一限度之內(nèi)者歸為一組,在另一
限度之內(nèi)者歸為另一組,然后按每組的次數(shù)排列成表。所謂次數(shù)(一般以f代表),
即在各組中變數(shù)(一般以x為代表)出現(xiàn)的次數(shù)。對非連續(xù)性變數(shù),并且變異范圍較
小的樣本,可以采用其自然單位進(jìn)行分組。
例1:70個(gè)村豬瘟的發(fā)病數(shù)為:7、10、12、10、11、13、10、8、10、12、
9、11、10、7、11、11、10、11、13、10、10、14、10、11、12、11、9、
13、10、10、8、10、14、II、12、12、11、10、12、13、11、12、11、9、
8、9、10、8、13、10、12、10、9、11、9、10、10、8、11、11、13、9、
11、9、10、13、10,11、11、9(單位:頭)。
上列變數(shù)中每村發(fā)病數(shù)量最小為7頭,最多為14頭。了解這個(gè)變異范圍以后,
即可按次序排列如下表。
如果樣本的變異范圍非常大,或者屬于連續(xù)性變數(shù),在兩效之間可以有無數(shù)其他
變數(shù),這樣的變數(shù)整理主要用''組距方法”。其步驟及方法如下:
(1)首先決定組數(shù)組數(shù)的多少系根據(jù)觀察總次數(shù)(n)的大小而有不同,一般按下
列情況分組:當(dāng)n:40---60時(shí),分成6?8組;當(dāng)n=60?100時(shí),分成7?
10組;當(dāng)n=100?200時(shí):分成9?12組;當(dāng)n:200?500時(shí),分成12?17
組。這樣看來,上列資料可分為6組。
(2)決定組距以組數(shù)除全距,取其商數(shù)的近似整數(shù)作為組距。
最大值一最小值12—75
組距(i)===----=0.8=1
組距66
(3)決定各組的組限根據(jù)已確定的組數(shù)和組距,確定各組的組限,然后將各組的
組限由小而大,自上而下列于表的第一行,例如第一組為7.0-7.99,第二組為
8.0-8.99.......等。
(4)計(jì)算中價(jià)例如第一組的中價(jià)為7.5,第二組的中價(jià)為8.5……等。將中價(jià)列于
表的第二行。
(5)將所有數(shù)字依其大小分別記于各組,再總計(jì)各組出現(xiàn)的次數(shù),列在表的最后一行。
這樣次數(shù)分布表
3.次數(shù)分布圖調(diào)查數(shù)字的分布情形,尚可利用圖解法表示,此種圖名為次數(shù)分
布圖。常用的有下列各種:
(1)一般條圖表示變量(指標(biāo)的參數(shù))之間對比、變異和構(gòu)成。以同樣寬的直條長
度表示事物的數(shù)量多少,可以對比,用絕對數(shù)與相對數(shù)均可(圖4)。繪圖時(shí),要注
意各直條寬度及各條間的間隔要相等,間隔的寬度約為條寬的一半到與條相等;各
直條除有自然順序的資料之外,應(yīng)由高到矮依次排列;各直條須有共同的基線,從、'0"
開始,如直條過長,中間可用折線折斷,用數(shù)字標(biāo)明。
(2)構(gòu)成條圖以長條代表整體,即100%,長條中各段的長度代表其百分此。把
長穿長8條之旁。構(gòu)成條圖是專為表示組成成分的比例的
(3)圓面圖以圓面積內(nèi)所占部分大小,說明事物總體的構(gòu)成。繪制時(shí)以全面積為
100%,每3.6。角的面積為1%??梢杂闷浒俜直葦?shù)乘以3.6即可知該數(shù)所占角的
面積,用量角器繪制;各部分角面積的排列,應(yīng)按順時(shí)針方向依次排列,而且要從
12點(diǎn)鐘處開始;圓內(nèi)各部分應(yīng)標(biāo)明百分?jǐn)?shù),如將兩種相似的資料對比時(shí),應(yīng)取直徑
相同之圓,且圓內(nèi)各部分排列次序也應(yīng)一致。
(4)自然線圖把觀察的數(shù)據(jù)(相對數(shù)或絕對數(shù))直接點(diǎn)在座標(biāo)圖上,用線連接各點(diǎn),
表示指標(biāo)的分布、動態(tài)、趨勢和相關(guān)等特點(diǎn)。作圖時(shí),以橫軸表示時(shí)間或其他變量,
縱軸表示指標(biāo)的數(shù)據(jù)(相對數(shù)或絕對數(shù));用線條連接各點(diǎn),以線條的起伏表現(xiàn)現(xiàn)象
變動的趨勢;縱軸一定從、'0”開始,橫軸則可根據(jù)需要而定??v軸尺度距離應(yīng)與橫軸
的間隔相適應(yīng)??v軸和橫軸總長度之比一般為7:5或5:7。如需在同一圖內(nèi)有不
同曲線相比較時(shí),則線條不宜太多(一般少于4條),而且要用粗細(xì)、虛實(shí)和不同符
號標(biāo)志出來(如圖6)。
(5)半對數(shù)線圖當(dāng)變化的數(shù)據(jù)的基數(shù)不同,或指標(biāo)變化速度特大而資料本身要反映
其變動連勢時(shí),可用半對數(shù)線圖。這種線圖的縱軸為對數(shù)尺度,橫軸為等距的算數(shù)
尺度,組合一起叫半對數(shù)。如甲乙兩縣乙腦死亡的變化情況如下表.
甲乙兩縣乙腦病死率的比較
甲乙
1960
1970100/10萬25/10萬
50/10萬12.5/10萬
4.統(tǒng)計(jì)表經(jīng)過整理和計(jì)算得出的數(shù)量結(jié)果(統(tǒng)計(jì)指標(biāo)),例如各組的均數(shù)或百分?jǐn)?shù),
可以用表格的形式表達(dá)出來,以便使資料的主要內(nèi)容一目了然,易于比較,并可免
除繁瑣.的文字說明。
統(tǒng)計(jì)表一般包括有表號、標(biāo)題(表目)、,表頭、表身、說明或腳注等部分。表頭指表
上端兩橫線之間的部分,由文字排列成若干列,最左側(cè)一列為主詞所在位置,右側(cè)
各列為賓詞一一縱表目所在位置。表身指表頭兩橫線以下的部分,其最左側(cè)為體現(xiàn)
主詞即被說明事物特征的所在位置一一橫標(biāo)目,其右側(cè)為體現(xiàn)賓詞特征的統(tǒng)計(jì)指標(biāo),
填寫統(tǒng)計(jì)指標(biāo)的方格總稱表體。說明或腳注(包括資料來源)放在表最下方橫線的下
邊。如下兩表所示。
上列豬傳染性胃腸炎發(fā)病和死亡統(tǒng)計(jì)表中,①為主詞(有時(shí)可留空),②為賓詞,
⑧為橫標(biāo)目,④為縱標(biāo)目(賓詞與縱標(biāo)目之間也可加一橫線隔開),⑤為表體中的統(tǒng)
計(jì)指標(biāo)。
設(shè)計(jì)統(tǒng)計(jì)表時(shí),要注意以下各點(diǎn):內(nèi)容要簡明,標(biāo)題要明確(包括何事、何時(shí)、何地);
統(tǒng)計(jì)指標(biāo)的單位一律附于標(biāo)目之后,表體方格內(nèi)不再寫單位,只寫阿拉伯?dāng)?shù)字,較
復(fù)雜的單位也可在腳注中加以說明;表內(nèi)盡量少用線條,最基本的線條是三條橫線,
第一條將標(biāo)題與縱標(biāo)目隔開,第二條將縱標(biāo)目與橫標(biāo)目和表體隔開,第三條封閉(結(jié)
束)表格,并與腳注隔開;表內(nèi)盡量少用文字說明,必要時(shí)可在欲說明處的右上角加
星號,然后在表格底下加腳注(用同樣星號)說明之。
復(fù)習(xí)題與作業(yè)
1.家畜傳染病疫情調(diào)查及統(tǒng)計(jì)的意義是什么?
2.試設(shè)計(jì)布氏桿菌病或豬氣喘病疫區(qū)疫情調(diào)查表格。
實(shí)驗(yàn)七炭疽的診斷和防治
目的
掌握炭疽實(shí)驗(yàn)室診斷的步驟和方法、熟悉炭疽的治療要點(diǎn)、學(xué)會炭疽的預(yù)防接種技
術(shù)。
內(nèi)容及方法
一、炭疽病畜的生前檢查
流行病學(xué):應(yīng)了解病畜所在地區(qū)以往有無炭疽的發(fā)生、流行形式、發(fā)病季節(jié)、動物
種類、發(fā)病和死亡情況、采取哪些相應(yīng)的措施、對尸體如何處理以及近年來炭疽預(yù)
防接種工作進(jìn)行等情況。
臨診檢查:除精神、食欲、結(jié)膜、體溫等一般檢查外,應(yīng)特別注意喉部、腹下等處
有無腫脹、腫脹的性質(zhì),病畜有無疝痛癥(應(yīng)與真疝痛區(qū)別),糞便是否帶血。
二、炭疽的實(shí)驗(yàn)室診斷
1.檢驗(yàn)材料的采取疑為炭疽死亡的動物尸體,通常不作剖檢,應(yīng)先自末梢血管采
血涂片鏡檢,作初步診斷。不進(jìn)行剖檢的尸體可作局部解剖采取小塊脾臟,然后將
切口用浸透了濃漂白粉液的棉花或紗布堵塞,妥為包裝后送檢。
2.鏡檢取病畜瀕死時(shí)或剛死亡動物的血液作涂片標(biāo)本,最好用瑞氏或姬姆薩染色
法染色,牛羊炭疽??梢姷綌?shù)量很多的有莢膜炭疽桿菌,單個(gè)或成對存在,偶有短
鏈,菌端成方形,莢膜呈深紅紫色;豬炭疽要采取病變部淋巴結(jié)或滲出液涂片檢查。
3.培養(yǎng)檢查無菌采取病畜瀕死期或剛死動物的病理材料,直接接種于普通瓊脂平
板及肉湯中,置37c培養(yǎng)18?24h,檢查有無炭疽桿菌生長。如果檢查材料已經(jīng)
陳舊或污染時(shí);可將血液或組織乳劑先放到肉湯中加溫65?70℃經(jīng)lOmin,殺死
無芽胞的細(xì)菌,然后吸取0.5ml,接種于普通瓊脂平板進(jìn)行分離培養(yǎng)。
檢查生長的菌落,如有疑似炭疽的菌落,則應(yīng)取得純培養(yǎng)。為了鑒定分離的細(xì)菌為
炭疽桿菌,必須接種各種培養(yǎng)基,觀察菌體的形態(tài),菌落的形態(tài)及生化反應(yīng),同時(shí)
接種實(shí)驗(yàn)動物觀察菌體的致病能力。炭疽桿菌與偽炭疽桿菌有某些類似之處,可參
照表7予以鑒別。
上述的試驗(yàn)中,以運(yùn)動力測定、莢膜形成、致病力,以及卵磷脂酶試驗(yàn)較為重要。
4.串珠試驗(yàn)炭疽桿菌在適當(dāng)濃度青霉素溶液作用下,菌體腫大形成串珠,這種反
應(yīng)為炭疽桿菌所特有,因此可用此法與其他需氧芽胞桿菌相鑒別。取培養(yǎng)4?12h
的肉湯培養(yǎng)物三管,其中二管各及時(shí)加入每毫升含5單位和10單位青霉素溶液
0.5ml(最終濃度含0.5和1.0單位)混勻,另一管加生理鹽水0.5ml,作為對照。
置37c孵育1?4h(時(shí)間過久,串珠繼續(xù)腫脹,容易破裂),取出加入20%福爾馬
林溶液0.5ml,固定lOmin后,涂片顯微鏡檢查,找到典型串珠狀者可判定為炭
疽桿菌。
5.Ascoli試驗(yàn)這是一種熱沉淀反應(yīng),己被用于檢查可疑尸體的感染獸皮、器官
和組織中炭疽桿菌(炭疽免疫血清能與炭疽芽胞桿菌的抗原浸出物形成一種沉淀
物)。這種試驗(yàn)是有一定特異性,仍在許多國家應(yīng)用。操作方法,采集1g左右可疑
病畜的組織,經(jīng)研磨碎后,用5?10ml含10%醋酸的碳酸生理鹽水稀釋,煮沸
5min,冷卻后過濾即成抗原。然后取一支小試管,加入0.5ml抗炭疽血清,再小
心將抗原濾液置于其上,如在15min內(nèi),在抗原和血清接觸面形成一種環(huán)狀混濁
的沉淀環(huán),則表示陽性反應(yīng)。本試驗(yàn)應(yīng)設(shè)正常血清和正常組織作對照。
6.炭疽桿菌莢膜熒光抗體染色:
(1)抗炭疽桿菌沉淀素?zé)晒饪贵w的制備取生物制品廠所生產(chǎn)的炭疽沉淀血清,或用
炭疽桿菌免疫家兔制得抗血清,用硫酸鏤沉淀提純所得球蛋白與異硫氟酸熒光素標(biāo)
記。
(2)以病死畜的血液或脾臟涂片,固定后滴加標(biāo)記過的抗體,滿蓋玻片,置室溫或
37c染色30min,傾去熒光抗體液,采用pH8的PBS浸洗lOmin(中間換液一次),
最后用蒸儲水輕輕沖洗2次,晾干。
(3)在熒光顯微鏡下檢查,找到菌體周圍有發(fā)光的莢膜,菌體較暗或不被染色,可判
為陽性。如發(fā)現(xiàn)不帶莢膜而發(fā)均勻熒光的桿菌,則不能判定為炭疽桿菌。
三、炭疽的預(yù)防接種和治療
1.炭疽的預(yù)防接種在疫區(qū)對易感染家畜每年應(yīng)進(jìn)行炭疽芽胞苗預(yù)防注射。炭疽
芽胞苗有兩種:
(1)無毒炭疽芽胞苗一歲以上的馬、牛皮下注射1ml,一歲以下的馬和牛及豬和
綿羊皮下注射0.5ml。但不適用于山羊的預(yù)防注射。
(2)二號炭疽芽胞苗馬、牛、羊和豬皮下注射1ml。注射后一周產(chǎn)生免疫力,免
疫期為一年。
2.緊急預(yù)防接種適用于發(fā)生炭疽的核心地區(qū)或發(fā)生炭疽后,對健康家畜或有被
感染
危險(xiǎn)的健康家畜進(jìn)行緊急預(yù)防接種??刹捎每固烤已搴蜔o毒炭疽芽胞苗或二號
炭疽芽胞苗同時(shí)注射,使被注射家畜先產(chǎn)生被動免疫,繼而產(chǎn)生自動免疫。注射方
法是在一側(cè)頸部皮下注射10-20ml的抗炭疽血清,另一側(cè)頸部皮下注射炭疽芽胞
苗。此種緊急預(yù)防注射的免疫期為半年。另一種用抗炭疽血清進(jìn)行緊急預(yù)防注射,
使被注射的家畜迅速獲得被動免疫。大家畜皮下注射30?40ml,豬羊?yàn)?5?
20ml。如疑有潛伏感染時(shí),大家畜皮下注射或靜脈注射100?250mI,豬羊?yàn)?0?
120mL此種緊急預(yù)防注射免疫期為10?14天。
3.炭疽的治療
(1)血清療法馬牛一次用量為100?300ml,豬羊30?8clmI。用血清治療炭疽
癰時(shí),可行局部分點(diǎn)注射。
(2)抗生素、磺胺類藥療法青霉素馬牛按每公斤體重2000?4000單位;鏈霉素
馬每次2g,每日肌肉注射2次?;前粪赀迕抗矬w重0.2g,每4h內(nèi)服一次。
復(fù)習(xí)題與作業(yè)
1.簡述炭疽的綜合性診斷要點(diǎn)和炭疽病畜的治療原則。
2.進(jìn)行炭疽預(yù)防接種時(shí)應(yīng)注意哪些?
實(shí)驗(yàn)八鏈球菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷
目的
初步掌握馬腺疫鏈球菌和豬、羊鏈球菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷步驟和方法。
內(nèi)容及方法
一、檢查材料的采集
1.采取腺疫病馬的鼻液和頜下淋巴結(jié)的膿汁,或以無菌注射器抽取未破潰的淋巴
結(jié)內(nèi)的膿汁,放人滅菌的試管或小瓶送檢,或用滅菌的棉球,蘸取鼻漏或膿汁置于
盛有25%甘油鹽水的試管或小瓶中,但甘油鹽水的分裝量不宜過多,以將棉球潤濕
為宜。在送檢的病料中,不可加入其他的防腐劑或抗生素。在惡性腺疫時(shí),除采取
膿汁和鼻漏外,也可采取臟器和淋巴結(jié)。
2.豬、羊鏈球菌病可采取腫脹的淋巴結(jié),頸部淋巴結(jié);敗血性鏈球菌病時(shí),采取
病畜的鼻漏、唾液、氣管分泌物、血液、肝、脾、腎、肺、肌肉和膿腫的關(guān)節(jié)等。
二、檢查方法
1.涂片鏡檢將新鮮病料(心血、肝、脾、腎、肺、腦、淋巴結(jié)或胸水等)制成涂
片,用革蘭氏法染色或堿性美藍(lán)染色法染色后鏡檢。鏈球菌的直徑為0.5?l.Opm,
圓形或橢圓形,成對或3?5個(gè)菌體排列成短鏈。偶而可見30?70個(gè)菌體相連接
的長鏈,但不成叢、成堆,不運(yùn)動,無芽胞,偶見有莢膜存在。革蘭氏染色陽性,
經(jīng)數(shù)日培養(yǎng)的老齡鏈球菌可染成革蘭氏陰性。
2.分離培養(yǎng)將膿汁或其他分泌物、排泄物劃線接種于血液瓊脂平板上,置37℃
培養(yǎng)24h或更長。已干涸的病料棉拭可先浸于無菌的腦心浸液或肉湯中,然后擠出
0.5ml進(jìn)行培養(yǎng)。為了提高鏈球菌的分離串,先將培養(yǎng)基置于37c溫箱中預(yù)熱2?
6ho培養(yǎng)基中加有5%無菌的綿羊血液,細(xì)菌生長良好并可發(fā)生溶血。有的實(shí)驗(yàn)室
用牛血瓊脂平板進(jìn)行劃線接種培養(yǎng)較為滿意。鏈球菌在普通培養(yǎng)基上多生長不良。
鏈球菌在血液瓊脂上呈小點(diǎn)狀,培養(yǎng)24h溶血不完全,48?72h菌落直徑大約
為1mm,呈露珠狀,中心渾濁,邊緣透明,有些粘性菌株融合粘連,菌落呈單凸或
雙凸,有a—溶血(綠色),B—溶血(完全透明)或Y—溶血(無變化),這在鏈球菌的
鑒定中是很重要的。多數(shù)具有致病性的鏈球菌呈口一溶血。
3.動物接種將病料制成5?10倍生理鹽水懸液,接種家兔和小鼠,劑量為兔腹腔
注射1?2ml,小鼠皮下注射0.2?0.3mL接種后的家兔于12?26h死亡;小鼠
于18?24h死亡。死后采心血、腹水、肝、脾抹片鏡檢,均見有大量單個(gè)、成對
或3?5個(gè)菌體相連的球菌。也可用細(xì)菌培養(yǎng)物制成的菌液或肉湯培養(yǎng)物接種家兔
或小鼠。
三、培養(yǎng)特性
1.馬腺疫鏈球菌營養(yǎng)要求較高,初次分離時(shí),培養(yǎng)基里需要加血液、血清或腹
水。在血液瓊脂平板上形成透明、閃光、微隆起有粘性的露珠狀菌落,產(chǎn)生明顯的
3型溶血,
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