核酸檢驗面試試題及答案姓名：____________________

一、選擇題（每題2分，共20分）

1.下列哪種方法不屬于核酸提取的常用方法？

A.磷酸鹽緩沖液法

B.離心法

C.沉淀法

D.紫外線照射法

2.下列哪種酶用于PCR反應中擴增DNA？

A.聚合酶

B.核酸酶

C.蛋白酶

D.磷酸酶

3.下列哪種試劑用于核酸雜交實驗？

A.磷酸鹽緩沖液

B.丙烯酰胺

C.醋酸銨

D.DNA探針

4.下列哪種方法可以檢測DNA序列中的突變？

A.Southernblot

B.Northernblot

C.DNA測序

D.Westernblot

5.下列哪種方法可以檢測RNA病毒？

A.PCR

B.ELISA

C.Westernblot

D.IFA

6.下列哪種核酸提取方法最適用于細胞核提?。?/p>

A.CTAB法

B.Trizol法

C.CTAB/CTAB法

D.CTAB/SDS法

7.下列哪種方法可以檢測RNA的完整性？

A.Northernblot

B.Southernblot

C.DNA測序

D.RT-PCR

8.下列哪種方法可以檢測DNA的完整性？

A.Northernblot

B.Southernblot

C.DNA測序

D.RT-PCR

9.下列哪種方法可以檢測病毒載量？

A.PCR

B.ELISA

C.Westernblot

D.IFA

10.下列哪種方法可以檢測細菌的核酸？

A.PCR

B.ELISA

C.Westernblot

D.IFA

二、填空題（每題2分，共20分）

1.核酸提取的常用方法包括__________、__________、__________等。

2.PCR反應的四個步驟分別是__________、__________、__________、__________。

3.核酸雜交實驗中，常用的探針類型有__________、__________、__________。

4.Southernblot實驗中，常用的標記方法有__________、__________、__________。

5.DNA測序的原理是__________、__________、__________。

6.ELISA實驗中，常用的酶聯(lián)反應底物有__________、__________、__________。

7.IFA實驗中，常用的熒光標記有__________、__________、__________。

8.PCR實驗中，常用的引物設計原則有__________、__________、__________。

9.核酸提取的步驟包括__________、__________、__________、__________。

10.核酸雜交實驗的步驟包括__________、__________、__________、__________。

三、簡答題（每題5分，共25分）

1.簡述PCR反應的原理和步驟。

2.簡述DNA測序的原理和步驟。

3.簡述核酸提取的常用方法及其原理。

4.簡述核酸雜交實驗的原理和步驟。

5.簡述ELISA實驗的原理和步驟。

四、論述題（每題10分，共20分）

1.論述核酸檢測在傳染病防控中的重要作用。

2.論述PCR技術在分子生物學研究中的應用。

五、計算題（每題10分，共20分）

1.若某基因片段長度為1000bp，設計引物時，引物長度為20bp，求引物之間的距離應為多少？

2.若某DNA片段的濃度為1ng/μl，體積為100μl，求該DNA片段的摩爾濃度是多少？

六、綜合應用題（每題10分，共20分）

1.某實驗室需要從一份含有多種病毒樣本中檢測一種特定病毒，請簡述如何利用PCR技術進行病毒檢測。

2.某研究人員在研究一種腫瘤基因的表達情況，已知該基因長度為2000bp，請簡述如何利用RT-PCR技術檢測該基因的表達水平。

試卷答案如下：

一、選擇題答案及解析思路：

1.D（紫外線照射法不屬于核酸提取的常用方法，其他選項均為提取方法）

2.A（聚合酶用于PCR反應中擴增DNA，其他選項為其他類型的酶）

3.D（DNA探針用于核酸雜交實驗，其他選項為其他類型的試劑）

4.C（DNA測序可以檢測DNA序列中的突變，其他選項為其他檢測方法）

5.A（PCR可以檢測RNA病毒，其他選項為其他檢測方法）

6.A（CTAB法適用于細胞核提取，其他選項為其他提取方法）

7.A（Northernblot可以檢測RNA的完整性，其他選項為其他檢測方法）

8.B（Southernblot可以檢測DNA的完整性，其他選項為其他檢測方法）

9.A（PCR可以檢測病毒載量，其他選項為其他檢測方法）

10.A（PCR可以檢測細菌的核酸，其他選項為其他檢測方法）

二、填空題答案及解析思路：

1.磷酸鹽緩沖液法、CTAB法、Trizol法

2.變性、退火、延伸、延伸

3.DNA探針、RNA探針、寡核苷酸探針

4.同位素標記、熒光標記、酶聯(lián)標記

5.核苷酸鏈的合成、堿基配對、鏈延伸

6.3,3'-二氨基聯(lián)苯胺（TMB）、4-甲基傘形酮（4-MU）、對硝基苯磷酸（pNPP）

7.異硫氰酸熒光素（FITC）、四甲基異硫氰酸羅丹明（TRITC）、藻紅蛋白（PE）

8.保守性、特異性、簡并性

9.樣本處理、裂解、沉淀、純化

10.樣本處理、雜交、洗滌、顯影

三、簡答題答案及解析思路：

1.PCR反應的原理是利用DNA聚合酶在特定條件下復制DNA片段，步驟包括變性、退火、延伸和延伸。

2.DNA測序的原理是利用DNA聚合酶在特定條件下合成新的DNA鏈，并通過電泳分離和讀取堿基序列，步驟包括模板制備、引物設計、PCR擴增、測序和數(shù)據(jù)分析。

3.核酸提取的常用方法包括CTAB法、Trizol法和SDS法，原理是通過裂解細胞、沉淀核酸和純化核酸來提取。

4.核酸雜交實驗的原理是利用核酸探針與目標核酸序列互補配對，步驟包括標記探針、雜交、洗滌和檢測。

5.ELISA實驗的原理是利用抗原抗體反應檢測目標蛋白，步驟包括包被、洗滌、加樣、洗滌、加酶聯(lián)抗體、洗滌、顯色和讀數(shù)。

四、論述題答案及解析思路：

1.核酸檢測在傳染病防控中的重要作用包括快速、準確地診斷傳染病、監(jiān)測病毒載量、評估疫情趨勢和制定防控策略。

2.PCR技術在分子生物學研究中的應用包括基因克隆、基因表達分析、基因突變檢測、基因編輯和基因治療。

五、計算題答案及解析思路：

1.引物之間的距離=基因片段長度/引物長度=1000bp/20bp=50bp

2.摩爾濃度=物質(zhì)的量/溶液體積=1ng/(6.022x10^23molecules/mol)/100μl=1.65x10^-1