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文檔簡介
菌種檢驗是開展微生物學檢驗中的一種常規(guī)技術。菌種檢驗主要是設置一個人工條件,以評估菌種的安全性,降低菌種的變異率,確保其能夠在較長時間內維持安全水平。在實驗室管理與檢驗控制中,菌種的標準化檢驗是關鍵保障。其中,標準菌株管理工作,包括但不限于菌種管理、菌株來源、標準菌株試驗條件等。1食品微生物檢驗菌種保藏的目的和原理1.1食品微生物檢驗菌種保藏的目的在開展微生物學實驗工作時,菌種保存是一項基礎性工作。在微生物實驗工作中的多個環(huán)節(jié),均需要菌種的支持,包括但不限于細菌染色、細菌分離培養(yǎng)等。通過合理保存菌種,可以保障菌種的生物學特征,防止菌種出現(xiàn)退化、污染、死亡等問題,為后續(xù)的科研工作創(chuàng)造有利條件[1]。1.2食品微生物檢驗菌種保藏的原理開展菌種保藏工作時,需要利用菌種的生化特性和生理特性,創(chuàng)設最有利于菌種進入休眠狀態(tài)的環(huán)境條件,包括但不限于低溫環(huán)境、干燥環(huán)境、氧氣環(huán)境等。如此一來,可降低菌種的代謝活動,有效避免菌種出現(xiàn)變異問題,使菌種達到長期保存的效果。通過科學保存菌種,可以保證菌種呈現(xiàn)更高的存活率以及更優(yōu)質的特性。此外,進行菌種保藏時,也需要權衡經(jīng)濟性和簡便性。2食品微生物檢測的概念及重要性在食品微生物檢驗中,工作人員要確定具體的檢測方法,開展多方面、多角度的質量控制,對食品中的各類元素種類和數(shù)量進行判斷,包括微生物、毒素等,并在定性分析和定量分析的基礎上,評價食品衛(wèi)生質量。目前,在食品質量管理中,食品微生物檢驗有著十分重要的作用,通過合理開展食品微生物檢驗工作,有利于規(guī)避食品問題,保護人體健康。另外,食品微生物檢驗是衡量食品衛(wèi)生質量的重要標準。食品微生物檢驗可針對食品生產(chǎn)、食品加工、食品運輸、食品保藏等多個環(huán)節(jié)加以檢測,判斷食品安全質量[2]。3食品微生物檢驗菌種標準化管理3.1標準菌株的驗收在接收菌株入庫期間,工作人員需要重點檢查包裝,觀察外包裝材料是否存在損壞、其是否仍在保質期內,以及是否采取的冷凍運輸方式。如果以上內容均符合條件要求,工作人員就可以進行入庫備案處理,并詳細記錄各項相關數(shù)據(jù)信息,包括但不限于接種時間數(shù)據(jù)信息、名稱數(shù)據(jù)信息、產(chǎn)地數(shù)據(jù)信息、編號數(shù)據(jù)信息、接收單位數(shù)據(jù)信息、實驗室名稱數(shù)據(jù)信息等。3.2各類標準培養(yǎng)物(1)在儲備菌株時,工作人員需要對其進行生化鑒定試驗并開展純化試驗。需要注意的是,不能直接運用凍結的標準儲存菌種,而要提前解凍標準儲備菌種。同時,建立記錄文件,保證菌種在利用、傳代、保藏等方面均能有所追溯。(2)控制菌株的傳代培養(yǎng)次數(shù)。在實踐中,工作人員需遵循標準方法中的規(guī)定,嚴格將菌株的傳代培養(yǎng)次數(shù)控制在5次以內。(3)重點關注已經(jīng)發(fā)生衰老、退化、突變、污染等問題的標準菌種。針對此類菌種,如果已完成鑒定檢驗,確定其已經(jīng)不符合標準,則可以對其進行銷毀處理。(4)判斷標準菌種。一般來說,工作菌種都是在標準菌種基礎上繁殖的商業(yè)派生菌種。商業(yè)化質控菌株一般從標準菌種機構中選取。4保藏方法4.1傳代保存方法傳代保存方法更適用于工作菌種的保藏。實踐中,工作人員需要分析菌種的特性,選擇適合菌種生長的培養(yǎng)基。一般來說,純化菌種轉接,更加適用于平板培養(yǎng)基、瓊脂斜面培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基。實踐中,工作人員需設置好溫度和時間,展開培養(yǎng),然后對管塞部分使用封口膜進行包扎處理,并設置4℃的冰箱溫度加以保存。此外,在實際操作中,對于創(chuàng)傷弧菌、副溶血性弧菌等,則需要采取室溫保存方式。在應用傳代保存方法的過程中,面對不同的微生物種類,設置的保存時間也存在差異。一般情況下,保存時間為1周至3個月不等。然而,傳代保存方法的應用,僅適用于一些短期內使用的菌種。具體來看,在傳代保存方法應用中,雖然整體操作比較簡單,但是由于存在菌種多次傳代相關問題,很容易造成菌種的變質,改變菌株的特性[3]。對此,工作人員需要限制菌種的傳代次數(shù),一般需控制在5次以內。4.2低溫冷凍保藏方法在應用低溫冷凍保藏方法時,需要在-60~-80℃的低溫冰箱內對菌種進行保藏,以此減緩菌種的生理活動。在實踐中,低溫冷凍保藏方法更加適用于一些需要長期保藏的菌種。因為大多數(shù)微生物在-60℃中,都會停止新陳代謝。一般情況下,設置的冷凍溫度越低,能夠達到的效果也就越好。同時,在應用低溫冷凍保藏方法時,為了得到滿意的冷凍效果,需要準備2.0mL的菌種凍存管,避免出現(xiàn)冰箱故障問題和停電事故。如此一來,當保藏菌種的低溫冷凍環(huán)境發(fā)生變化后,工作人員能夠及時加入干冰,以此防止培養(yǎng)物的融化。如果菌株已經(jīng)解凍,則不能直接對菌種再次進行低溫保存,而是需要開展重新移種處理,再進行冷凍保藏[4]。除此之外,在菌種保藏期間,工作人員需要檢查菌種的活力情況。一般情況下,保藏周期在1~5年。對比其他方法,低溫冷凍保藏方法的應用具有十分顯著的優(yōu)勢,如更長的保藏期限、更簡單的操作、更低的成本等,是當前菌種保藏中的一種常用保藏方式[5]。4.3冷凍真空干燥保藏方法冷凍真空干燥保藏方法是菌種保藏中最為安全的方法。一般情況下,標準菌種都會選擇應用冷凍真空干燥保藏方法。同時,保存很多活力較強的微生物和孢子時,也可以采用冷凍真空干燥保藏方法。冷凍真空干燥保藏方法,具有時間長、范圍廣、存活率高的特點。在實踐中,工作人員需要在三角瓶中放入卵白、脫脂奶、血清,然后對其進行高壓滅菌處理。之后,準備好接種環(huán),選擇生長良好的孢子、菌種,在培養(yǎng)基中對其進行懸浮處理,從而形成菌懸液。之后,選擇0.2mL菌懸液,在經(jīng)滅菌處理的玻璃安瓿瓶中,對其進行無菌操作分裝處理。同時,將安瓿瓶放入-30~-40℃的冷凍槽環(huán)境中,迅速冷凍。5菌種的管理5.1定人定點管理微生物實驗室需要建立健全完善的菌種保藏制度和使用制度,在開展菌種管理工作時要安排專門人員,一般需要選擇2人共同保管。同時,將菌種保存于安全環(huán)境中。如果需要使用冰箱、鐵箱子等容器,則需要對其進行加鎖,并采取雙人雙鎖的設置方式。此外,在面對不同菌種時,工作人員需要完善不同菌種的實驗資料,做好不同菌種的詳細記錄。之后,開展菌種管理,落實菌種的申購、領用、保管、接種傳代等方面的標準化程序。其中,工作人員需要嚴格重視菌種保存、菌種使用、菌種傳代、菌種轉移、菌種銷毀等各項處理工作,并在規(guī)定的指導下完成操作。同時,記錄具體操作流程,方便后期追溯。5.2定期檢查通過組織專業(yè)人員開展定期檢查工作,能夠檢查菌種的情況,包括但不
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