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實驗一培養(yǎng)基的制備消毒與滅菌及超凈工作臺的使用課堂紀律嚴格遵守實驗室規(guī)章制度嚴肅課堂紀律不允許無故曠課、早退(1次)遲到(3次)不能做與實驗無關(guān)得事實驗室安全和衛(wèi)生安全實驗室嚴禁吸煙。注意用水、防電和防火正確使用化學試劑和儀器衛(wèi)生每次實驗需留下6位同學值日,協(xié)助保持實驗室清潔1、了解培養(yǎng)基得概念、種類和用途,明確培養(yǎng)基得配制原理。2、學習掌握培養(yǎng)基配制得一般方法和步驟。3、掌握高壓蒸汽滅菌得原理和方法步驟。實驗目得一、培養(yǎng)基得配制
培養(yǎng)基(culturemedium)就是指人工配制得、適合微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物得營養(yǎng)基質(zhì)。自然界中微生物種類繁多,營養(yǎng)類型多樣,加之實驗和研究目得不同,所以培養(yǎng)基得種類很多,不同種類得培養(yǎng)基一般都應含有微生物生長所需得碳源、氮源、能源、無機鹽、生長因子和水六大營養(yǎng)要素,且各成分比例應合適。為了滿足微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物得要求,還必須控制培養(yǎng)基合適得pH。實驗原理常用凝固劑就是瓊脂,固體培養(yǎng)基瓊脂加量通常為1、5%-2%;半固體培養(yǎng)基瓊脂加量為0、5%-0、8%。實驗原理常用培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基廣泛用于細菌得培養(yǎng);高氏一號培養(yǎng)基用于培養(yǎng)放線菌;麥芽汁培養(yǎng)基和豆芽汁培養(yǎng)基通常用于酵母菌得培養(yǎng);馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)霉菌。實驗分組安排5-6人一組,配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基每組配500mL牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基斜面1支(每人),其余分裝在兩個500mL三角瓶。
10大家應該也有點累了,稍作休息大家有疑問的,可以詢問和交流包扎:
加塞后,試管通常每7支一起,包上一層牛皮紙或兩層報紙,用線繩扎緊。三角瓶加塞后也用牛皮紙包扎。
以活結(jié)形式扎緊,以便使用時容易解開。
用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、配制日期、配制人或?qū)嶒灲M。滅菌時包牛皮紙、報紙滅菌:
培養(yǎng)基滅菌一般采用壓力蒸汽滅菌
通常滅菌條件為1、05kg/cm2,121℃滅菌20-30分鐘;含糖量高得培養(yǎng)基,如馬丁氏培養(yǎng)基則為0、56kg/cm2,115℃滅菌30分鐘。二、消毒與滅菌紫外線滅菌----紫外線波長在200-300nm,具有殺菌作用,其中以265-266nm殺菌力最強。無菌室或無菌接種箱空氣可用紫外線燈照射滅菌。干熱滅菌電烤箱1、干熱滅菌2、壓力蒸汽滅菌干熱滅菌1、裝入待滅菌物品2、升溫:接通電源,加熱升溫至160-170℃。3、恒溫:保持160-170℃2小時。4、降溫:切斷電源,自然降溫。5、開
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