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隨著人類(lèi)文明的進(jìn)步和社會(huì)的發(fā)展,水污染逐漸加劇。近年,隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展,污水排放量大大增加,如食品生產(chǎn)廢水、煤礦廢水、造紙廢水等。據(jù)相關(guān)資料統(tǒng)計(jì),2022年,中國(guó)污水排放總量約為616.62億m3。其中,農(nóng)副食品生產(chǎn)排放的廢水占據(jù)較大比例,對(duì)整個(gè)社會(huì)造成了嚴(yán)重危害。一方面,食品生產(chǎn)中的廢水及有機(jī)物質(zhì)會(huì)排入自然界,影響水質(zhì),進(jìn)而影響植物的光合作用;另一方面,食品廠排放的廢水中含有添加劑、色素等有害物質(zhì),會(huì)通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體,威脅人體健康。因此,對(duì)食品廠的廢水處理加以研究,尤為重要。相關(guān)研究表明,在食品廠污染的水源中,存在多種病原類(lèi)微生物,這些微生物有些是致病菌,會(huì)對(duì)人體健康造成嚴(yán)重的威脅[1]。大量的有機(jī)物質(zhì)存在于各種水體,尤其在污染水體中含量更高,這樣就為各種微生物的生長(zhǎng)提供了天然的營(yíng)養(yǎng)。因此,污染水成為微生物生長(zhǎng)的肥沃土壤。此外,人類(lèi)、動(dòng)物的排泄物污染也是微生物的一個(gè)主要來(lái)源。水體中的致病性微生物大部分不是來(lái)自水體內(nèi)部,多是受到外界環(huán)境污染而產(chǎn)生的,特別是在受到排泄物污染之后,就會(huì)產(chǎn)生致病微生物。一般來(lái)說(shuō),水中常見(jiàn)的致病性細(xì)菌有志賀氏菌、沙門(mén)氏菌等。然而,在對(duì)水的指標(biāo)控制中,尤其在衛(wèi)生指標(biāo)上,要想逐一檢測(cè)水體中各種可能存在的致病微生物,執(zhí)行起來(lái)比較困難。因此,在實(shí)際工作中一般采用比較有代表性的菌群來(lái)對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)、控制及分析,以觀察水體是否受到污染[2]、是否存在腸道病原微生物,以評(píng)價(jià)水質(zhì),從而保障水體的衛(wèi)生安全。當(dāng)前,國(guó)際上在檢測(cè)水質(zhì)受糞便污染程度時(shí),一般會(huì)通過(guò)檢測(cè)其大腸桿菌數(shù)量,判斷水體的污染程度。我國(guó)水質(zhì)控制也采用國(guó)際上的做法,以大腸菌群作為指示菌,國(guó)標(biāo)GB5749—2022《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》明確規(guī)定,在生活飲用水中不應(yīng)檢出大腸桿菌[3]。除此之外,在部分情況下,水體是否受到糞便等污染物污染,也可以用另外一個(gè)指標(biāo)來(lái)衡量,即水體中的細(xì)菌總數(shù)。一般來(lái)說(shuō),取合適的水樣在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng),48h后觀察計(jì)數(shù),此結(jié)果稱(chēng)為細(xì)菌總數(shù)。目前,世界各國(guó)對(duì)于控制飲用水的衛(wèi)生質(zhì)量,既可以采用大腸菌群等指標(biāo)衡量,也可以采用細(xì)菌總數(shù)這個(gè)指標(biāo)[4]來(lái)控制水體質(zhì)量。國(guó)標(biāo)GB5749—2022《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定,生活飲用水的細(xì)菌總數(shù)不得檢出,菌落總數(shù)不超過(guò)100CFU·mL-1或者100MPN·mL-1[3]。目前,我國(guó)現(xiàn)行的生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB5749—2022)明確規(guī)定了水中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群的限量指標(biāo),并將其作為水體是否受到微生物污染的指標(biāo)?;诖?,本研究對(duì)某食品廠排放的污水進(jìn)行了為期1個(gè)月的微生物跟蹤檢測(cè),了解其污染程度,從而探究廢水污染的現(xiàn)狀,以期為污水處理和廢水再利用提供參考。1材料與方法1.1材料分別取某食品廠的原水和排出的污水為水樣,采取每周三取樣1次的檢測(cè)方式,連續(xù)跟蹤檢測(cè)1個(gè)月。1.2方法1.2.1細(xì)菌檢測(cè)方法①細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行[4-5],先進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的制備,然后將刻度吸管、培養(yǎng)皿、試管以及培養(yǎng)基等置于121℃、大標(biāo)準(zhǔn)氣壓下,滅菌30min。實(shí)驗(yàn)前,用消毒劑或者臭氧消毒潔凈區(qū),消毒結(jié)束0.5h以上方可進(jìn)入潔凈區(qū)。②操作過(guò)程:將水樣分別制成1∶10、1∶100、1∶10003個(gè)梯度,將3個(gè)梯度水樣分別取樣1mL,移至無(wú)菌的平皿中,每個(gè)梯度均做2個(gè)平行樣。待營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基冷卻至50℃時(shí),在平皿中傾注約20mL水樣,輕微晃動(dòng),使樣品和培養(yǎng)基充分混勻,待培養(yǎng)基冷卻凝固后,將培養(yǎng)皿置于恒溫培養(yǎng)箱中,并將其溫度設(shè)置為37℃,倒置培養(yǎng),24h后觀察生長(zhǎng)情況,進(jìn)行平皿菌落計(jì)數(shù)。③計(jì)算結(jié)果時(shí),要乘以稀釋倍數(shù),得出最終結(jié)果。1.2.2大腸菌群檢測(cè)方法在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中,糞便污染的程度是用大腸菌群來(lái)衡量的。一般來(lái)說(shuō),需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌在37℃條件下生長(zhǎng),其能使乳糖進(jìn)行發(fā)酵,產(chǎn)酸產(chǎn)氣發(fā)生在24h以內(nèi),此類(lèi)菌群稱(chēng)為總大腸菌群。水樣中總大腸菌群數(shù)含量的高低,不僅可以反映糞便污染水的情況,而且可以間接說(shuō)明水體中是否存在腸道致病菌[6]。水中的大腸菌群檢驗(yàn)一般采取多管發(fā)酵法和濾膜法來(lái)進(jìn)行,本實(shí)驗(yàn)采用多管發(fā)酵法,檢驗(yàn)步驟分為初發(fā)酵試驗(yàn)、平板分離和復(fù)發(fā)酵試驗(yàn),主要操作過(guò)程如下。①將樣品制成3個(gè)稀釋梯度,每個(gè)梯度各取1mL,采用乳糖蛋白胨培養(yǎng)液對(duì)水樣進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)條件為37℃、24h,觀察有無(wú)產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況,有產(chǎn)酸產(chǎn)氣出現(xiàn)的管為陽(yáng)性。②將其培養(yǎng)物接種在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上,觀察菌落特征,并進(jìn)行革蘭氏染色和顯微鏡鑒別。③將可疑菌落接種于乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn),并檢索MPN表計(jì)算大腸菌群總數(shù)[7]。2結(jié)果與分析2.1細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果由表1可知,在1個(gè)月的追蹤檢測(cè)中,原水中細(xì)菌總數(shù)約為26CFU·mL-1,廢水中細(xì)菌總數(shù)約為19550CFU/100mL,與普通的原水相比,廢水的細(xì)菌污染水平高出3個(gè)數(shù)量級(jí),說(shuō)明該食品廠排放的污水污染程度比較嚴(yán)重。因此,在下一步的污水排放中,要采取相關(guān)措施,以降低廢水的污染程度[8]。表1細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果表2.2大腸菌群檢測(cè)結(jié)果由表2可知,原水的大腸菌群數(shù)約為0MPN/100mL,廢水約為3MPN/100mL。廢水和原水相比,污染程度大大提高,這說(shuō)明廢水嚴(yán)重受到了糞便的污染。在下一步的污水排放整改中,要采取措施對(duì)廢水進(jìn)行處理,減少污水對(duì)環(huán)境和人類(lèi)的危害[9]。表2大腸菌群檢測(cè)結(jié)果表3結(jié)語(yǔ)本次實(shí)驗(yàn)主要對(duì)某食品廠排放的廢水進(jìn)行了1個(gè)月的調(diào)查跟蹤研究,通過(guò)相關(guān)的檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn),細(xì)菌總數(shù)平均達(dá)195500CFU/100mL,總大腸菌群約為3MPN/100mL,充分說(shuō)明該廠排放的污水已經(jīng)嚴(yán)重受到微生物的污染,一旦廢水流到地下水當(dāng)中,被人類(lèi)飲用后,就會(huì)嚴(yán)重威脅人們的健康和生命安全。因此,企業(yè)必須重視廢水的排放與處理。當(dāng)然,本研究也存在一定不足。本次調(diào)查僅檢測(cè)了細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群,未對(duì)其中的致病菌進(jìn)行調(diào)查研究。未來(lái),筆者將對(duì)該廠廢水的致病菌進(jìn)行跟蹤檢驗(yàn),以期出具新的研究報(bào)告。此外,在下一步的調(diào)查研究中,筆者將針對(duì)廢水中有關(guān)的理化指標(biāo),如pH、電導(dǎo)率、TOC、COD以及重金屬等進(jìn)行追蹤檢測(cè),以綜合分析廢水的污染情況,從而更好地指導(dǎo)廢水的處理和再利用工作。目前,防止廢水微生物污染的方法有很

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