抗體/免疫球蛋白Antibody/Immunoglobulin(Ig)復(fù)習(xí)回顧1.抗原的概念是什么？？？2.完全抗原具有哪兩種特性？？？3.抗原的特異性由什么決定？？？4.根據(jù)抗原與機(jī)體的親緣關(guān)系分為哪幾類(lèi)？？？？教學(xué)內(nèi)容和目標(biāo)1.說(shuō)出抗體、免疫球蛋白的概念。2.理解免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)、功能區(qū)。3.知道木瓜蛋白酶水解IgG的片斷及功能。4.說(shuō)出各類(lèi)免疫球蛋白的主要功能。5.知道單克隆抗體。與抗體有關(guān)的諾貝爾獎(jiǎng)獲得者1901vonBering血清治療1908Ehrlich&Metchnikoff抗體生成、吞噬1972Edelman&Poter抗體分子結(jié)構(gòu)1977Yalow放射免疫測(cè)定1984Koler,Milstein&Jerne單克隆抗體1987TonegawaIg基因結(jié)構(gòu)EmilvonBehring(1845-1917)antibody是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子，是B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的糖蛋白?？贵w（antibody,Ab）:

是由B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的一類(lèi)球蛋白，主要存在于血液和組織液中，為體液免疫的重要效應(yīng)分子。怎么來(lái)的？

B漿細(xì)胞AgAb特異性結(jié)合（一）概念一，抗體的分子結(jié)構(gòu)（二）存在部位?血清、其他體液或外分泌液中。?將抗體介導(dǎo)的免疫稱(chēng)為體液免疫。?將含有抗體的血清稱(chēng)為抗血清或免疫血清。?電泳區(qū)帶：大部分在γ區(qū)帶，故曾有γ球蛋白（或丙種球蛋白）之稱(chēng)。Ig分泌型：血清、分泌液等體液中，具有抗體的各種功能。膜型：mIg,即B細(xì)胞膜上的抗原受體BCR

具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱(chēng)為免疫球蛋白。免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）鉸鏈區(qū)二硫鍵一、抗體的基本結(jié)構(gòu)-重鏈和輕鏈（一）重鏈和輕鏈輕鏈(L)NNC重鏈(H)λ型κ型

分子量約50~75KD，450~550個(gè)氨基酸殘基

分子量約25KD，214個(gè)氨基酸殘基IgGIgEIgDIgMIgAαγδεμ(IgA1、IgA2)(IgG1~IgG4)Ig的類(lèi)型類(lèi)（class）：根據(jù)CH的aa組成不同分為五大類(lèi)

γμαδεIgGIgMIgAIgDIgE

亞類(lèi)：IgG1-G4；IgA1-A2；IgM1-M2。型（type）：根據(jù)CL的aa組成不同分為兩型：κ型和λ型亞型：κ型有亞型，正常人血清中κ型和λ型Ig濃度之比為2：1（二）可變區(qū)和恒定區(qū)V區(qū)C區(qū)VLVH超變區(qū)(HVR)CLCH1CH2CH3(三)鉸鏈區(qū)NC可變區(qū)、恒定區(qū)、鉸鏈區(qū)、抗體的輔助結(jié)構(gòu)1.可變區(qū)（Variableregion,V區(qū)）包括超變區(qū)和骨架區(qū)。近N端的1/2L鏈和1/4（或1/5）H鏈，氨基酸的組成及序列變化較大，而得名。

（1）超變區(qū)（hypervariableregion，HVR）V區(qū)內(nèi)變化最為劇烈的特定部位。L鏈3個(gè)，H鏈3個(gè)。?因其在空間結(jié)構(gòu)上可與抗原決定簇形成精密的互補(bǔ)，故又稱(chēng)互補(bǔ)性決定區(qū)（complementaritydetermingregion，CDR）,是抗體與抗原結(jié)合的關(guān)鍵部位?？乖贵w結(jié)合的專(zhuān)一性?。。。?）骨架區(qū)（Frameworkregion,FR）?Ig分子V區(qū)超變區(qū)之外的部位，其氨基酸組成及排列相對(duì)保守。有4個(gè)骨架區(qū)。?作用：主要是穩(wěn)定CDR的空間構(gòu)型，以利IgCDR與抗原表位精細(xì)的特異性結(jié)合。2.恒定區(qū)（Constantregion,C區(qū)）?近C端的1/2輕鏈及3/4（或4/5）重鏈。?氨基酸組成在同一物種的同一類(lèi)Ig中相對(duì)穩(wěn)定。重鏈和輕鏈的C區(qū)分別稱(chēng)為CH和CL。?不同類(lèi)的Ab的CH的長(zhǎng)短不一。?盡管針對(duì)不同抗原同一抗體的V區(qū)不同，但C區(qū)氨基酸的組成比較恒定，其免疫原性相同?？谷薎gG抗體能與各種IgG抗體結(jié)合。IgGγ(IgG1~IgG4)IgEεIgDδαIgA(IgA1、IgA2)IgMμ3.鉸鏈區(qū)（Hingeregion）鉸鏈區(qū)(hingeregion)位于C1與C2之間,含有豐富的脯氨酸,因此易伸展彎曲,能改變Y形兩個(gè)臂之間的距離,有利于兩臂同時(shí)結(jié)合兩個(gè)相同的抗原表位。鉸鏈區(qū)易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解,產(chǎn)生不同的水解片段。

不同類(lèi)或亞類(lèi)的Ab鉸鏈區(qū)不盡相同,例如IgG1、IgG2、IgG4和IgA的鉸鏈區(qū)較短,而IgG3和IgD的鉸鏈區(qū)較長(zhǎng)。IgM和IgE無(wú)鉸鏈區(qū)。免疫球蛋白的水解片段Fab(fragmentofantigenbinding)兩個(gè)相同的的單價(jià)抗原結(jié)合片段Fc(crystallizablefragment)一個(gè)可結(jié)晶片段Fab段保留了特異性結(jié)合抗原的功能。Fc段保留了重鏈的抗原性和Ig相應(yīng)功能區(qū)的生物學(xué)活性。pFc’(anumberofsmallmoleculepeptidefragments)若干個(gè)小分子片段-無(wú)生物學(xué)活性意義1.有利于闡明Ig的結(jié)構(gòu)及生物活性。2.有利于生物制品的生產(chǎn)和純化，避免超敏反應(yīng)的發(fā)生。4.抗體的輔助結(jié)構(gòu)（1）J鏈J鏈(joiningchain)是由124個(gè)氨基酸組成,富含半胱氨酸的酸性糖蛋白,分子量約15kD,由漿細(xì)胞合成。

主要功能是將單體Ab分子連接為二聚體或多聚體。2個(gè)IgA單體由J鏈連接形成二聚體,5個(gè)IgM單體由二硫鍵相互連接,并通過(guò)二硫鍵與J鏈連接形成五聚體。gG、IgD和IgE常為單體,無(wú)J鏈。（2）分泌片（secretorypiece）/分泌成分分泌片又稱(chēng)分泌成分,是分泌型IgA分子上的輔助成分,分子量約為75kD,為含糖的肽鏈,由黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌,并結(jié)合于IgA二聚體上,使其成為分泌型IgA(SIgA)。分泌片具有保護(hù)SIgA的鉸鏈區(qū)免受蛋白水解酶降解的作用,并介導(dǎo)SIgA二聚體從黏膜下通過(guò)黏膜上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)到黏膜表面。分泌片分泌片為一含糖肽鏈?zhǔn)嵌嗑勖庖咔虻鞍资荏w(PolylgR,plgR)的胞外段，由黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌。二聚體IgA與plgR結(jié)合并轉(zhuǎn)運(yùn)到黏膜表面。只有帶有J鏈的IgA多聚體才能和plgR特異地結(jié)合。在pIgR結(jié)合了IgA后，細(xì)胞將其吞噬，再在轉(zhuǎn)運(yùn)小體里將其轉(zhuǎn)到黏膜表面。之后pIGR裂解,發(fā)揮黏膜免疫作用，并可保護(hù)硅鎵鉸鏈區(qū)，使其免遭蛋白水解酶降解?？偨Y(jié)-抗體的結(jié)構(gòu)及其功能抗體是由兩條相同的（）和（）通過(guò)（）連接呈Y形的單體。

抗體分為哪幾類(lèi)？？？？？

抗體包含那幾個(gè)區(qū)域？？？

抗體的輔助結(jié)構(gòu)有哪些？？？二，抗體的多樣性和免疫原性抗體的種類(lèi)抗原分子上有許多不同的抗原表位,每個(gè)抗原表位都可誘導(dǎo)一種以上抗體,因此一種抗原免疫后會(huì)產(chǎn)生針對(duì)各種抗原決定簇的許多不同的抗體.抗體的抗原表位

抗體既可與抗原特異性結(jié)合，本身又可作為抗原（因?yàn)榭贵w分子中包含抗原表位），激發(fā)機(jī)體特異性免疫應(yīng)答。這些抗原表位可分為-同種型、同種異型、獨(dú)特型。針對(duì)同一抗原表位的不同類(lèi)型的抗體針對(duì)不同抗原的各種特異性抗體同種型（isotype）

指同一種屬所有個(gè)體的Ig分子共有的抗原特異性標(biāo)志，位于IgC區(qū)。為種屬標(biāo)志

（顏色不一樣）

傷寒抗體（IgG）痢疾抗體（IgG）乙肝抗體（IgG）同種異型（allotype）指同一種屬不同個(gè)體間Ig分子所具有的不同的抗原特異性標(biāo)志，為個(gè)體標(biāo)志

（花紋不一樣）

獨(dú)特型（idiotype）指每個(gè)Ig分子所特有的抗原特異性標(biāo)志，其決定簇又稱(chēng)為獨(dú)特位，存在于V區(qū)。上一章所講的獨(dú)特性抗原?。?！

將某一抗體注射到另一個(gè)動(dòng)物體內(nèi)，可產(chǎn)生這一抗體的抗獨(dú)特型的抗體（anti-ids）。這一抗體“模仿”了抗原三維結(jié)構(gòu)，可被用于作為疫苗?？贵w的主要功能1、特異性結(jié)合抗原2、激活補(bǔ)體3、結(jié)合細(xì)胞表面的Fc受體4、穿過(guò)胎盤(pán)和粘膜三，抗體的生物學(xué)功能特異性結(jié)合抗原：例：中和細(xì)菌外毒素

（一）IgV區(qū)的生物學(xué)活性一與抗原特異性結(jié)合Ig可特異性識(shí)別、結(jié)合抗原。V區(qū)的CDR在識(shí)別和結(jié)合特異性抗原中起決定性作用。Ig的V區(qū)與抗原結(jié)合后，可通過(guò)其C區(qū)發(fā)揮作用，V區(qū)本身也可中和毒素或阻斷病原入侵。NeutralizationByAntiviralAntibodies病毒特異性的中和抗體抗體阻止病原菌對(duì)人體細(xì)胞的黏附（二）激活補(bǔ)體：

SRC1qSR*IgM、IgG*聚合IgAIgGIgGIg分子結(jié)合抗原前后的構(gòu)象變化FabFc補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)被屏障結(jié)合抗原之前

暴露的補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合抗原之后（三）結(jié)合細(xì)胞表面的Fc受體

1、調(diào)理作用：指抗體(IgG、IgA)、補(bǔ)體促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌等顆粒性抗原的作用。2、ADCC：即抗體依賴(lài)的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。指表達(dá)FcR的細(xì)胞通過(guò)識(shí)別抗體的Fc段直接殺傷被抗體包被的靶細(xì)胞。3、介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)

超敏反應(yīng)(hypersensitivity),又稱(chēng)為變態(tài)反應(yīng)(allergy),是指機(jī)體受到某些抗原刺激時(shí),出現(xiàn)生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷的異常適應(yīng)性免疫應(yīng)答。I型超敏反應(yīng)的特點(diǎn)是:①由IgE介導(dǎo),肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等釋放生物活性介質(zhì)引起的局部或全身反應(yīng)；②發(fā)生快,消退亦快；③常引起生理功能紊亂,少部分可發(fā)生組織細(xì)胞損傷；④具有明顯個(gè)體差異和遺傳傾向。（四）穿過(guò)胎盤(pán)和粘膜一、IgG第四節(jié)五類(lèi)Ig的特性和功能特點(diǎn)：血清中含量最高半衰期最長(zhǎng)臨床應(yīng)用最廣唯一能通過(guò)胎盤(pán)的Ig人類(lèi)的Rh血型抗體是IgG功能：是機(jī)體抗感染的主力軍激活補(bǔ)體、調(diào)理吞噬、ADCC作用γμ特點(diǎn)：五個(gè)單體組成分子量最大、半衰期短在個(gè)體發(fā)育中合成最早機(jī)體感染后出現(xiàn)最早人類(lèi)ABO血型抗體為IgM功能：機(jī)體抗感染的先頭部隊(duì)可作感染早期診斷激活補(bǔ)體、調(diào)理吞噬胎兒時(shí)期唯一能合成的抗體，新生兒臍帶血中若IgM水平升高，提示胎兒曾有宮內(nèi)感染IgMJ鏈分泌型IgM膜型IgMmIgM

IgaIgb

Iga

Igbα特點(diǎn)：血清型單體存在分泌型二聚體SIgASIgA主要存在于唾液、淚液、以及呼吸道、消化道等分泌液中初乳中含有高濃度的SIgA，故提倡母乳喂養(yǎng)功能：局部粘膜抗感染一線防御分泌片J鏈δ特點(diǎn)：表達(dá)于B細(xì)胞表面，是B細(xì)胞成熟的標(biāo)志功能：B細(xì)胞表面抗原受體，調(diào)節(jié)B細(xì)胞活化增殖分化ε特點(diǎn)：種系進(jìn)化中出現(xiàn)最晚血清中含量最低最不穩(wěn)定肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞表面存在大量IgE受體功能：介導(dǎo)I型超敏反應(yīng)抗寄生蟲(chóng)的感染第五節(jié)人工制備抗體多克隆抗體單克隆抗體基因工程抗體多克隆抗體

（polyclonalantibody）

用含多種抗原決定簇的抗原物質(zhì)免疫動(dòng)物，刺激多個(gè)B細(xì)胞克隆所獲得的免疫血清（含多種抗體的混合物），此為多克隆抗體。

來(lái)源廣泛，制備容易；特異性不高。單克隆抗體

monoclonalantibody,mAb借助小鼠B細(xì)胞雜交瘤（hybridoma）技術(shù)，所制備的高度均一（屬同一類(lèi)、亞類(lèi)、型別）、單一特異性（僅針對(duì)特定抗定抗原表位）的抗體。純度高、特異性強(qiáng)、可大量生產(chǎn)。多克隆抗體多個(gè)抗原決定基——機(jī)體——多種抗體的混合物單克隆抗體為只針對(duì)某一特定的抗原決定基，純度高的抗體單克隆抗體的臨床應(yīng)用傳染性疾病病原體及腫瘤抗原的檢測(cè)各種細(xì)胞因子、激素、神經(jīng)遞質(zhì)、細(xì)胞膜分子及受體的檢測(cè)腫瘤的體內(nèi)定位診斷和導(dǎo)向治療（生物導(dǎo)彈）治療某種自身免疫病抗T細(xì)胞單抗可用于抗移植排斥反應(yīng)基因工程抗體又稱(chēng)重組抗體借助DNA重組技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)，按人們的意愿在基因水平上對(duì)Ig進(jìn)行切割、拼接或修篩，重新組裝成為新型抗體分子基本類(lèi)型人-鼠嵌合體（chimericAb）

重構(gòu)抗體（reshapeAb）

人源化抗體（humanizedAb）雙特異性抗體（bispecificAb）

小分子抗體（minimolecularAb）嵌合抗體V(鼠)——C(人)鼠人人-鼠重構(gòu)抗體CDR(鼠)——FR,C(人)鼠人雙特異性抗體/雙功能抗體CTLTumorcellanti-CD3anti-TSA單鏈抗體(singlechainvariablefragment,ScFv)VH——連接鏈——VLFvScFv單選題1、抗體分子的抗原結(jié)合部位在A.Fc段B.Fab段C.CH2D.CH3E.CH12、木瓜蛋白酶水解產(chǎn)物是A.Fc段B.2Fab段C.2Fab段+Fc段D.Fab段+Fc段