放線菌屬、諾卡菌屬、分枝桿菌屬檢驗(yàn)檢驗(yàn)系柴志欣CompanyLogoCompanyLogo放線菌屬與諾卡菌屬

Actinomyces&Nocardia放線菌目（Actinomycetales）分枝桿菌屬（Mycobacterium）諾卡菌屬（Nocardia）棒狀桿菌屬（Corynebacterium）放線菌屬（Actinomyces）（1）含分枝菌酸

-諾卡菌屬（Nocardia）-分枝桿菌屬（Mycobacterium）

-棒狀桿菌屬(Corynebacterium)（2）不含分枝菌酸

-放線菌屬（Actinomyces）分類放線菌屬與諾卡菌屬的比較特征放線菌屬諾卡菌屬培養(yǎng)特性厭氧或微需氧專性需氧抗酸性非抗酸性弱抗酸性分布人體的正常菌群存在于自然環(huán)境中感染性內(nèi)源性感染外源性感染致病性慢性化膿性感染以及齲齒和牙周炎化膿性感染，如肺炎，足分枝菌病正常寄居：人和動(dòng)物口腔、上呼吸道、胃腸道和泌尿生殖道；大部分為正常菌群，主要引起內(nèi)源性感染，對(duì)人致病的主要為衣氏放線菌；放線菌是制備抗生素的重要來(lái)源。據(jù)估計(jì)，已發(fā)現(xiàn)的4000多種抗生素中，如紅霉素、鏈霉素等，有2/3是放線菌產(chǎn)生的。放線菌屬Actinomyces

放線菌科→放線菌屬（Actinomycete）→12個(gè)種。放線菌：自然界廣泛存在，主要存于土壤及正常人口腔、上呼吸道、胃腸道和泌尿生殖道等與外界相通的腔道，屬正常菌群。存于人體、動(dòng)物體內(nèi)的有：衣氏（以色列）放線菌（A.israelii）、內(nèi)氏放線菌（A.naeslundii）、黏性放線菌（A.viscosus）、齲齒放線菌（A.odontolyticus）、丙酸蛛網(wǎng)菌（Arachniapropionica）牛型放線菌（A.bovis）等——衣氏放線菌（A.israelii)G+、絲狀桿菌、非抗酸性，培養(yǎng)困難，厭氧或微需氧生物學(xué)性狀主要致病菌放線菌屬內(nèi)源性感染：機(jī)體抵抗力↓、口腔衛(wèi)生不良、拔牙或外傷時(shí)引起，導(dǎo)致軟組織化膿性炎癥。若無(wú)繼發(fā)感染，大多呈慢性無(wú)痛性過(guò)程，并常伴有多發(fā)性瘺管形成，排出黃色硫磺顆粒（sulfurgranule），此即放線菌病。硫磺樣顆粒：放線菌的菌絲團(tuán)，淡黃色、黃色或灰白色，形似硫磺顆粒，約粟粒大小。硫磺樣顆粒：在患者病灶組織和瘺管中流出的膿汁中，肉眼可見(jiàn)黃色小顆粒，稱硫磺樣顆粒，是放線菌在組織中形成的菌落。將硫磺樣顆粒制成壓片或組織切片，在鏡下可見(jiàn)放射狀排列的菌絲，形似菊花狀。衣氏放線菌硫磺顆粒壓片（革蘭染色，壓片鏡檢呈菊花狀）據(jù)感染途徑和涉及器官，臨床上分面頸部、胸部、腹部和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等感染。最常見(jiàn)：面頸部感染，約占患者60％。衣氏放線菌主要寄生在口腔，經(jīng)破損處引起臨近面、頸部感染，即放線菌病，也可吸入肺部起肺和胸部放線菌病。放線菌與齲齒和牙周炎有關(guān)。牛型放線菌→牛放線菌病。放線菌能產(chǎn)一種黏性很強(qiáng)的多糖物質(zhì)6-去氧太洛糖（6-deoxytalose，6-DOT），使口腔中其他細(xì)菌也黏附在牙釉質(zhì)上，形成菌斑。細(xì)菌對(duì)食物中糖類分解產(chǎn)酸，致腐蝕牙釉質(zhì)。細(xì)菌能進(jìn)一步引起牙齦炎和牙周炎。厭氧或微需氧（放線菌培養(yǎng)較困難，除牛型放線菌和麥?zhǔn)戏啪€菌為嚴(yán)格厭氧或罕見(jiàn)微需氧外，其他都為厭氧或微需氧）氣體環(huán)境：有氧環(huán)境一般不生長(zhǎng)，初次分離加5％CO2可促進(jìn)其生長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基：牛心腦浸液瓊脂平板培養(yǎng)生長(zhǎng)緩慢，4～6天生長(zhǎng)出灰白色、粗糙的小菌落（蜘蛛狀、不規(guī)則結(jié)節(jié)狀或臼齒狀菌落）生化特性：溶血(-)、葡萄糖(+)、甘露醇(+)、吲哚(-)、過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)(-)放線菌菌落固體培養(yǎng)基上菌落中的菌絲常從一個(gè)中心向四周輻射呈放射狀生長(zhǎng)而得名。大多數(shù)有發(fā)達(dá)的分枝菌絲。衣氏放線菌在厭氧血瓊脂平板上的光滑型菌落（3-4d）衣氏放線菌在厭氧血瓊脂平板上的粗糙菌落（3-4d）人工多次移種培養(yǎng)后獲得純培養(yǎng)，光滑型、白色有光澤、柔軟、易于挑取的菌落。牛心腦浸液瓊脂培基上，37℃厭氧培養(yǎng)18～24h，扁平、光滑、邊緣整齊、顆粒狀似小菌落。繼續(xù)培養(yǎng)7～14天，菌落增大。放線菌屬鑒定：以形態(tài)、培養(yǎng)特征為主；觀察痰液顏色、粘度、有無(wú)血絲和是否呈膿性，如有顆粒存在，注意可能與放線菌屬及奴卡菌屬感染有關(guān)。最主要和簡(jiǎn)單方法：膿液、痰液和組織切片中尋找硫磺樣顆粒；菌體分枝，呈網(wǎng)狀、柵狀或X、Y、V狀排列，有琥珀酸氣味者，大多是放線菌；種屬鑒定常見(jiàn)放線菌菌種的生物學(xué)特性鑒別致病性放線菌為人體正常菌群。當(dāng)機(jī)體抵抗力下降，口腔衛(wèi)生不良、拔牙，或口腔黏膜受損時(shí)，可致內(nèi)源性感染，引起放線菌病。放線菌病是軟組織的化膿性炎癥，若無(wú)繼發(fā)感染，多呈慢性無(wú)痛性過(guò)程，常伴有多發(fā)性瘺管形成，膿汁中可找到特征性的硫磺樣顆粒，可引起不同器官和組織感染。放線菌與齲齒和牙周炎有關(guān)。微生物學(xué)檢查在膿液、痰液和組織切片中，尋找硫磺樣顆粒，將可疑顆粒制成壓片，在鏡下觀察特征性的放射狀排列的菊花狀菌絲。防治原則預(yù)防：注意口腔衛(wèi)生，及時(shí)治療牙周炎等牙病。治療：膿腫及瘺管要及時(shí)進(jìn)行外科清創(chuàng)處理；使用足量的抗生素。諾卡菌屬（Nocardia）專性需氧含分枝菌酸分布：土壤中，多數(shù)：非致病菌引起人或動(dòng)物急性或慢性諾卡菌病，主要是：

-星形諾卡菌（N.asteroides）

-巴西諾卡菌（N.brasiliensis）

生物學(xué)性狀形態(tài)：與以色列放線菌相似革蘭染色：陽(yáng)性抗酸染色：陽(yáng)性脫色時(shí)間延長(zhǎng)：陰性(與TB區(qū)別)滲出液、痰或膿汁中有時(shí)可見(jiàn)淡黃、紅色或黑色小顆粒類似硫磺樣顆粒，稱色素顆粒。星形諾卡菌純培養(yǎng)的鏡下形態(tài)（革蘭染色）

培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求：不高（沙氏或普通瓊脂培養(yǎng)基）氣體環(huán)境：需氧，有氣生菌絲培養(yǎng)溫度：室溫或37℃生長(zhǎng)速度：緩慢生長(zhǎng)，約1周色素：星形諾卡菌：黃色或深橙色，無(wú)白色菌絲巴西諾卡菌：有白色菌絲菌絲斷裂：5天后鏡檢可見(jiàn)鏈球狀或鏈桿狀（放線菌屬：24h開(kāi)始)培養(yǎng)特征：菌落：有皺褶、顆粒狀諾卡菌菌落致病性侵入途徑：呼吸道或皮膚創(chuàng)傷所致疾?。褐Z卡菌?。╪ocardiosis）外源性感染

化膿性感染

肺部：肺炎、肺膿腫、肺空洞腦部：腦膿腫、腦膜炎其他：腎、肝、脾、心包等（慢性肉芽腫，瘺管）好發(fā)于免疫缺陷患者臨床意義主要累及嚴(yán)重免疫功能低下者30-40歲男性吸入,皮膚接觸少星形奴卡氏菌(星狀)和巴西奴卡菌最常見(jiàn)免疫正常:外科手術(shù)感染免疫低下:肺部感染臨床癥狀不明顯,進(jìn)程慢抗生素治療頭孢類、喹諾酮類百炎凈艾滋病合并感染者口服利福平加大環(huán)內(nèi)酯類抗生素微生物學(xué)檢查1.色素顆粒（即類似硫磺顆粒）壓片2.取痰、腦脊液、膿汁：涂片---

革蘭染色及抗酸染色3.分離培養(yǎng)：沙保弱或普通瓊脂培養(yǎng)基，星形諾卡菌可在45℃生長(zhǎng)。4.生化試驗(yàn)檢查要點(diǎn)涂片鏡檢活菌與培養(yǎng)相結(jié)合生長(zhǎng)緩慢,無(wú)菌體液推薦使用血培養(yǎng)瓶,最長(zhǎng)需3周時(shí)間.目前尚無(wú)特別有效的培養(yǎng)基,有人建議使用培養(yǎng)奈瑟氏菌的含萬(wàn)古霉素的培養(yǎng)基或含活性炭酵母粉的培養(yǎng)基(軍團(tuán)菌)肉眼觀察色素顆粒瓊脂向內(nèi)生長(zhǎng)粗燥顏色:星形橙紅色巴西橙棕色分枝桿菌屬（Mycobacterium）1.

結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群;2.

非結(jié)核分枝桿菌;3.麻風(fēng)分枝桿菌。該屬細(xì)菌分三類：分枝桿菌屬（Mycobacterium）菌群生長(zhǎng)特性人類常見(jiàn)致病菌種致人類主要疾病結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群緩慢生長(zhǎng)、不產(chǎn)色結(jié)核分枝桿菌(最常見(jiàn))結(jié)核病牛分枝桿菌結(jié)核病非洲分枝桿菌結(jié)核病非結(jié)核分枝桿菌光產(chǎn)色菌緩慢生長(zhǎng)、光產(chǎn)色堪薩斯分枝桿菌慢性肺部感染暗產(chǎn)色菌緩慢生長(zhǎng)、暗產(chǎn)色瘰疬分支桿菌兒童淋巴腺炎不產(chǎn)色菌緩慢生長(zhǎng)、不產(chǎn)色……迅速生長(zhǎng)菌快速生長(zhǎng)、不產(chǎn)色或產(chǎn)色……麻風(fēng)分支桿菌人工培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)麻風(fēng)病共同特點(diǎn)細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì)，可達(dá)菌體干重的60%左右。并與其染色性、抵抗力和致病性密切相關(guān)。G染色陽(yáng)性，無(wú)鞭毛、芽孢。需氧。多數(shù)生長(zhǎng)緩慢（2～8周），營(yíng)養(yǎng)要求較高(血清和甘油等）。不產(chǎn)生內(nèi)外毒素，致病性與菌體成分有關(guān)。一類細(xì)長(zhǎng)或稍彎的桿菌，在繁殖時(shí)呈分枝生長(zhǎng)而得名。此菌屬的最顯著的特性為其胞壁中含有大量脂類，可達(dá)菌體干重的60%左右。一般不易著色。若設(shè)法使之著色后，又不易被含3%HCI的酒精脫色。因能抵抗鹽酸酒精脫色，又稱為抗酸桿菌（acid-fastbacilli）。又稱為結(jié)核桿菌，引起結(jié)核病。結(jié)核分枝桿菌（M.Tuberculosis）“她有如此的美貌根本不必有如此的演技；她有如此的演技根本不必有如此的美貌。”這句話是對(duì)費(fèi)雯麗最高也是最中肯的評(píng)價(jià)。她出生于1913年是個(gè)學(xué)過(guò)芭蕾舞畢業(yè)于英國(guó)皇家戲劇學(xué)院的小姑娘，她是英國(guó)籍的好萊塢女演員，她獲過(guò)兩次奧斯卡最佳女主角，她是人們心目中永遠(yuǎn)的斯嘉麗。費(fèi)雯麗因《亂世佳人》而名聲大噪?！秮y世佳人》給費(fèi)雯麗帶來(lái)了第一個(gè)奧斯卡最佳女演員獎(jiǎng)，卻讓她付出了健康的代價(jià)。這部電影的拍攝場(chǎng)景地，莊園的紅土，雖然給了斯嘉麗勇氣和力量，卻令費(fèi)雯麗染上了肺結(jié)核。1967年7月7日費(fèi)雯麗因病去世，享年53歲。1882年3月24日德國(guó)細(xì)菌學(xué)家羅伯特·郭霍（Koch,HeinrichHermannRobert）發(fā)現(xiàn)結(jié)核分枝桿菌（M.tuberculosis）是結(jié)核病的病原菌，俗名結(jié)核桿菌。世界結(jié)核病防治現(xiàn)狀自發(fā)現(xiàn)MTB以來(lái)，全球約有兩億人死于TB，且疫情發(fā)展日趨嚴(yán)重。WHO已將TB作為重點(diǎn)控制的傳染病之一，并于1995年起將每年的3月24日定為“世界防治結(jié)核病日”，以提醒公眾加深對(duì)TB的認(rèn)識(shí)。主題：2017年：聯(lián)合起來(lái)消除結(jié)核：不讓任何人掉隊(duì)2016年：社會(huì)共同努力，消除結(jié)核危害。2015年：“你我共同參與，依法防控結(jié)核——發(fā)現(xiàn)、治療并治愈每一位患者”。2014年：“你我共同參與，依法防控結(jié)核”。我國(guó)屬于全球22個(gè)TB高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一，TB的患病人數(shù)在世界各國(guó)中居于第2位。我國(guó)TB的流行具有“五多一高”的特點(diǎn)：MTB感染人數(shù)多?，F(xiàn)患肺TB病人多。TB死亡人數(shù)多。耐藥TB人多。農(nóng)村TB人多。傳染性肺TB患者疫情居高不下。肺結(jié)核離你我并不遙遠(yuǎn)抗酸染色陽(yáng)性、細(xì)長(zhǎng)略彎曲桿菌。呈單個(gè)、分枝排列，或聚集成團(tuán)；在陳舊的病灶和培養(yǎng)物中，形態(tài)常不典型，可呈顆粒狀、串珠狀、短棒狀、長(zhǎng)絲形等。無(wú)芽胞、鞭毛,細(xì)胞壁外有一層莢膜。形態(tài)與染色某些藥物可影響結(jié)核桿菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)而成為L(zhǎng)型菌此時(shí)，菌細(xì)胞的形態(tài)變?yōu)轭w粒狀或絲狀；菌落由粗糙型變?yōu)楣饣涂顾嵝詼p弱或消失

青霉素、環(huán)絲氨酸、溶菌酶→干擾肽聚糖的合成；異煙肼（INH）→影響細(xì)胞壁分枝菌酸的合成；L型結(jié)核桿菌絲狀型細(xì)菌型顆粒型抗酸染色萋-尼氏(Ziehl-Neelsen)抗酸性染色法：分枝桿菌屬的細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高結(jié)核桿菌染成紅色，其他非抗酸性細(xì)菌呈藍(lán)色。結(jié)核分枝桿菌純培養(yǎng)的鏡下形態(tài)(抗酸染色)分枝桿菌屬的細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高，約占干重的60%，特別是有大量分枝菌酸（mycolicacid）包圍在肽聚糖層的外面，可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用萋-尼（Ziehl-Neelsen）抗酸染色法，以5%

石碳酸復(fù)紅加溫染色后可以染上，但用3%鹽酸乙醇不易脫色。若再加用美藍(lán)復(fù)染，則分枝桿菌呈紅色，而其他細(xì)菌和背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。

抗酸染色涂片鏡檢的報(bào)告方式－：未發(fā)現(xiàn)抗酸菌（至少300個(gè)油鏡視野）；±：1～2個(gè)抗酸菌/300個(gè)油鏡視野；（可疑，再送）＋：1～9個(gè)抗酸菌/100個(gè)油鏡視野；2＋：1～9個(gè)抗酸菌/10個(gè)油鏡視野；3＋：1～9個(gè)抗酸菌/每個(gè)油鏡視野；4＋：≥10個(gè)抗酸菌/每個(gè)油鏡視野。革蘭氏染色：由于不易染色，通常視為陽(yáng)性。熒光染色：金胺“O”染色，結(jié)核分枝桿菌呈現(xiàn)金黃色熒光。培養(yǎng)特性1．營(yíng)養(yǎng)要求較高：Lowenstein—Jensen（L-J）即羅氏培養(yǎng)基（含蛋黃、甘油、馬鈴薯、無(wú)機(jī)鹽和孔雀綠）含脂質(zhì)生長(zhǎng)因子，刺激生長(zhǎng)抑制雜菌生長(zhǎng)⑴2～4周見(jiàn)菌落生長(zhǎng)←呈顆粒、結(jié)節(jié)或花菜狀；乳白色或米黃色；不透明⑵液體培養(yǎng)基上呈菌膜生長(zhǎng)←含脂質(zhì)量多；專性需氧2．專性需氧；PH6.5

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6.8培養(yǎng)特點(diǎn)：饞、懶、丑。饞--營(yíng)養(yǎng)要求較高，必須在含血清、卵黃、馬鈴薯、孔雀綠、甘油以及含某些無(wú)機(jī)鹽類的特殊培養(yǎng)基（羅氏）上才能生長(zhǎng)良好。懶--生長(zhǎng)緩慢，18h分裂1次，在固體培養(yǎng)基上2～4周才出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的菌落。丑--典型菌落為粗糙型，表面干燥呈顆粒狀，不透明，乳白色或淡黃色，如菜花樣。培養(yǎng)特性生化反應(yīng)結(jié)核桿菌不發(fā)酵糖類1.人型與牛型結(jié)核桿菌的區(qū)別：人型可合成煙酸及還原硝酸鹽，而牛型不能2.結(jié)核桿菌與非結(jié)核桿菌的區(qū)別：熱觸酶試驗(yàn)⑴結(jié)核桿菌觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性，熱觸酶試驗(yàn)陰性；⑵非結(jié)核桿菌觸酶試驗(yàn)、熱觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性※熱觸酶試驗(yàn)：將濃的細(xì)菌懸液置68℃水浴加溫20分鐘，然后再加H202→觀察是否產(chǎn)生氣泡，有氣泡的為陽(yáng)性。鑒別試驗(yàn)：

NAP(p-nitro-α-acetylamino-β-hydroxy-propiophenome)抑制試驗(yàn)；NAP能抑制結(jié)核分枝桿菌的生長(zhǎng)，對(duì)非結(jié)核分枝桿菌則不能抑制。(NAP:p-硝基-α-乙酰氨基-β-苯丙酮)

抵抗力對(duì)理化因素抵抗力較強(qiáng)：

1、抗干燥：在干燥的痰中可活6～8個(gè)月；在塵埃中活8～10天。

2、抗酸堿：3％HCI、6%H2SO4、4％NaOH中可活15min。

3、抗染料：對(duì)龍膽紫和孔雀綠有抵抗力。

4、對(duì)濕熱、酒精及紫外線敏感對(duì)濕熱敏感；在70%～75%乙醇中數(shù)分鐘即被殺死；對(duì)紫外線敏感：直接日光照射數(shù)小時(shí)可被殺死，可用于結(jié)核患者衣服、書(shū)籍等的消毒。5、對(duì)抗結(jié)核藥物敏感

結(jié)核分枝桿菌對(duì)鏈霉素、異煙肼、利福平、環(huán)絲氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、對(duì)氨基水楊酸等敏感，但長(zhǎng)期用藥容易出現(xiàn)耐藥性。結(jié)核分枝桿菌易發(fā)生形態(tài)、菌落、毒力以及耐藥性等的變異。卡介苗（BCG）:由法國(guó)有兩位細(xì)菌學(xué)家——卡默德（LeonCalmette）和介蘭（CamileGuerin）1908開(kāi)始在含甘油、膽汁、馬鈴薯的培養(yǎng)基中將牛型結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)13年、230次傳代獲得的減毒活疫苗，現(xiàn)廣泛用于預(yù)防接種。耐藥性，尤其是耐異煙肼菌株。故聯(lián)合交替用藥。變異性那是秋天的一個(gè)下午，卡默德和介蘭走在巴黎近郊的馬波泰農(nóng)場(chǎng)的一條小路上做實(shí)驗(yàn)，試圖把結(jié)核桿菌接種到兩只公羊身上，但每次都失敗了。走著走著，他們發(fā)現(xiàn)田里的玉米桿兒很矮，穗兒又小，便關(guān)心的問(wèn)旁邊的農(nóng)場(chǎng)主：“這些玉米是不是缺乏肥料呢？”農(nóng)場(chǎng)說(shuō)：“不是，先生。這玉米引種到這里已經(jīng)十幾代了，可能有些退化了。”“什么？請(qǐng)您再說(shuō)一遍！”農(nóng)場(chǎng)主笑著說(shuō)：“是退化了，一代不如一代啦！”看著匆匆離去的兩個(gè)人，他覺(jué)得很好笑。卡默德和介蘭從玉米的退化馬上聯(lián)想到：如果把毒性強(qiáng)烈的結(jié)核桿菌一代代培養(yǎng)下去，它的毒性是否也會(huì)退化呢？用已退化了毒性的結(jié)核桿菌再注射到人體中，不就可以既不傷害人體，也能使人體產(chǎn)生免疫力了嗎？?jī)晌豢茖W(xué)家足足花了13年的時(shí)間，終于成功培育了第230代被馴服的結(jié)核桿菌，作為人工疫苗！

結(jié)核桿菌無(wú)侵襲性酶，不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素，其致病性主要由于：細(xì)菌繁殖引起炎癥菌體成分代謝產(chǎn)物毒性作用抗體對(duì)菌體成分產(chǎn)生免疫病理?yè)p傷致病性和免疫性脂質(zhì)——存在細(xì)胞壁，含量與毒力平行（1）索狀因子（糖脂—分枝菌酸+海藻糖）（2）磷脂（3）蠟質(zhì)D（分枝菌酸+肽糖脂）（4）硫酸腦苷脂作用：引起結(jié)核結(jié)節(jié)，慢性肉芽腫及組織細(xì)胞干酪樣壞死等病變蛋白質(zhì)有抗原性、本身無(wú)毒，如結(jié)核菌素蛋白質(zhì)+蠟質(zhì)D——遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)組織壞死、全身中毒癥狀結(jié)核結(jié)節(jié)形成莢膜：①粘附和入侵②分解物質(zhì)提供營(yíng)養(yǎng)③防止有害物質(zhì)入侵致病物質(zhì)--菌體成分1.脂質(zhì)－脂質(zhì)占菌體干重的20～40%，占胞壁干重的60%。①磷脂：能刺激單核細(xì)胞增生，并可抑制蛋白酶的分解作用，使病灶形成干酷樣壞死。②索狀因子：是分枝菌酸與海藻糖的復(fù)合物，具有破壞細(xì)胞線粒體膜，毒害微粒體酶類，抑制中性粒細(xì)胞游走和吞噬作用，引起慢性肉牙腫。具有該物質(zhì)的TB菌毒株，在液體培養(yǎng)基中能緊密粘成索狀。

③蠟質(zhì)D：是一種肽糖脂與分枝菌酸復(fù)合物，能引起遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，并具有佐劑作用。

④硫酸腦苷脂：TB菌毒株胞壁中含有，能抑制吞噬細(xì)胞中的吞噬體與溶酶體融合，使結(jié)核桿菌在細(xì)胞內(nèi)存活。致病物質(zhì)2.莢膜－主要為多糖，少量脂質(zhì)和蛋白質(zhì)。①粘附和入侵②分解物質(zhì)提供營(yíng)養(yǎng)③防止有害物質(zhì)入侵3.蛋白質(zhì)－TB菌菌體內(nèi)都含有數(shù)種蛋白質(zhì)，其中重要的蛋白質(zhì)是結(jié)核菌素。結(jié)核茵素與蠟質(zhì)D結(jié)合，能引起較強(qiáng)的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。其他蛋白質(zhì)可引起機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，但無(wú)保護(hù)作用。致病物質(zhì)結(jié)核菌素試驗(yàn)測(cè)定機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌有無(wú)變態(tài)反應(yīng)。將一定量結(jié)核菌素注入皮內(nèi)，如受試者曾感染結(jié)核桿菌，則在注射部位出現(xiàn)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)炎癥，為陽(yáng)性，未感染結(jié)核桿菌則為陰性。此法可用檢測(cè)可疑病人曾否感染結(jié)核菌，接種卡介苗后是否陽(yáng)轉(zhuǎn)以及檢則機(jī)體細(xì)胞免疫功能?！驹怼?/p>

結(jié)核菌素皮膚反應(yīng)是遲發(fā)型細(xì)胞超敏反應(yīng)。它是抗原(結(jié)核菌或卡介苗)進(jìn)入機(jī)體使機(jī)體的免疫T淋巴細(xì)胞致敏，并大量分化增殖。當(dāng)已致敏的機(jī)體再次遭受到抗原入侵時(shí)，致敏淋巴細(xì)胞就會(huì)與之結(jié)合，引起變態(tài)反應(yīng)性炎癥。表現(xiàn)在結(jié)核菌素注射部位形成硬結(jié)甚至發(fā)生水泡、壞死。結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)核菌素是結(jié)核桿菌的菌體成分，有兩種：舊結(jié)核菌素（oldtuberculin，OT）和純蛋白衍生物（purifiedproteinderivative，PPD）?！静僮鞒绦颉?/p>

將OT或PPD用無(wú)菌生理鹽水稀釋成不同濃度，標(biāo)準(zhǔn)劑量是5結(jié)核菌素單位（0.1毫升），進(jìn)行皮內(nèi)注射，并在48～72小時(shí)后觀察結(jié)果。一個(gè)曾經(jīng)暴露在病菌的人會(huì)顯示出免疫反應(yīng)。

這個(gè)測(cè)試的結(jié)果通過(guò)硬結(jié)（明顯突起的硬化區(qū)）的直徑（垂直于手臂）來(lái)反映。如果不存在任何硬結(jié)，結(jié)果應(yīng)記錄為0mm。皮膚的紅斑不應(yīng)加以測(cè)量。結(jié)核菌素試驗(yàn)【判斷方法】我國(guó)規(guī)定以72小時(shí)為觀察反應(yīng)時(shí)間，48-96小時(shí)內(nèi)皆可測(cè)量反應(yīng)，記錄方法是將測(cè)得的硬結(jié)橫徑毫米數(shù)×縱徑毫米數(shù)表示，如有水泡、硬結(jié)、壞死和淋巴結(jié)炎時(shí)，應(yīng)作記錄。陰性反應(yīng)：無(wú)硬結(jié)或硬結(jié)平均直徑＜5mm者。陽(yáng)性反應(yīng)：硬結(jié)平均直徑在5mm或5mm以上者為陽(yáng)性，5～9mm為一般陽(yáng)性，10～19mm為中度陽(yáng)性，20mm以上局部有水泡，出血、壞死及淋巴管炎者均為強(qiáng)陽(yáng)性。結(jié)核菌素試驗(yàn)【臨床意義】陽(yáng)性反應(yīng)表明機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌有變態(tài)反應(yīng)，過(guò)去曾感染過(guò)結(jié)核，但不表示有病，因接種過(guò)卡介苗的人也呈陽(yáng)性反應(yīng)。

強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)則表明可能有活動(dòng)性感染，應(yīng)進(jìn)一步檢查是否有結(jié)核病。

陰性反應(yīng)表明無(wú)結(jié)核菌感染，但應(yīng)考慮以下情況：如受試者處于原發(fā)感染早期，尚未產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)，或正患嚴(yán)重結(jié)核病，機(jī)體已喪失反應(yīng)能力，或受試者正患其他傳染病，在此類情況下，均可暫時(shí)出現(xiàn)陰性反應(yīng)。結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)果：紅腫硬結(jié)＞5mm，陽(yáng)性（＞15mm，強(qiáng)陽(yáng)性）紅腫硬結(jié)＜5mm，陰性陽(yáng)性：過(guò)去/BCG成功，有免疫力強(qiáng)陽(yáng)性：現(xiàn)在活動(dòng)性結(jié)核感染，應(yīng)進(jìn)一步檢查陰性：無(wú)/未接種BCG假陰性：感染初期，老年人，嚴(yán)重結(jié)核合并其它傳染病使用免疫抑制劑艾滋病等免疫功能低下者意義結(jié)核桿菌可通過(guò)呼吸道、消化道和破損的皮膚粘膜進(jìn)入機(jī)體，侵犯多種組織器官，引起相應(yīng)器官的結(jié)核病，其中以肺結(jié)核最常見(jiàn)。結(jié)核桿菌的致病作用可能是細(xì)菌在組織細(xì)胞內(nèi)頑強(qiáng)增殖引起炎癥反應(yīng)，以及誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)性損傷。所致疾病肺部感染（1）原發(fā)感染——常見(jiàn)兒童（外源性感染）肺泡滲出性炎癥（原發(fā)灶）肺門(mén)淋巴結(jié)（腫大）沿淋巴管擴(kuò)散（炎癥）原發(fā)綜合癥（啞鈴型）特點(diǎn)：特異免疫沒(méi)有建立，故局部病變較輕，但易擴(kuò)散結(jié)局機(jī)體抵抗力強(qiáng)形成結(jié)核結(jié)節(jié)→纖維化→鈣化→自愈（但病灶內(nèi)常有細(xì)菌的潛伏）機(jī)體抵抗力差活動(dòng)性肺結(jié)核→干酪樣壞死

全身播散→粟粒樣結(jié)核臨床類型（2）繼發(fā)感染——常見(jiàn)成人（原發(fā)病灶——內(nèi)源性感染）

特點(diǎn)：局部病變重，但不易擴(kuò)散一般局限于肺部，易發(fā)生干酪樣壞死，可形成空洞和開(kāi)放性肺結(jié)核傳染源：開(kāi)放性肺結(jié)核病人痰傳播途徑：呼吸道、消化道、皮膚黏膜肺外感染腸結(jié)核，結(jié)核性腦膜炎，皮膚結(jié)核，腎結(jié)核，骨結(jié)核等一般治療合理營(yíng)養(yǎng)，注意休息抗結(jié)核藥物的治療原則早期、聯(lián)合、適量、規(guī)律、分階段治療和堅(jiān)持全程抗結(jié)核菌藥物：鏈霉素、異煙肼、對(duì)氨基水楊酸鈉、利福平等。治療預(yù)防：卡介苗接種（初種年齡：生后2~3天到2個(gè)月內(nèi)）近20年國(guó)際組織提出控制結(jié)核病主要方法有發(fā)現(xiàn)和治療痰菌陽(yáng)性者新生兒接種卡介苗凍干疫苗核糖體RNA(rRNA)疫苗

卡介苗接種后的局部反應(yīng)與其他疫苗有所不同，絕大部分兒童接種卡介苗后3～4周（初種）或1～2周（復(fù)種）會(huì)出現(xiàn)局部反應(yīng)，經(jīng)過(guò)紅腫浸潤(rùn)、膿皰形成、破潰、結(jié)痂這樣一個(gè)過(guò)程，一般在3個(gè)月左右脫痂，局部形成疤痕。這是卡介苗接種后的正常反應(yīng)過(guò)程，是有效接種的標(biāo)志，如不出現(xiàn)此反應(yīng)，反而提示接種失敗，應(yīng)考慮補(bǔ)種。

人類對(duì)結(jié)核桿菌的感染率很高，但發(fā)病率卻較低，這表明人體感染結(jié)核桿菌可獲得一定的抗結(jié)核免疫力。但不能預(yù)防再感染。傳染性免疫：結(jié)核分枝桿菌（或BCG）進(jìn)入機(jī)體后使機(jī)體對(duì)細(xì)菌再次入侵有免疫力，而當(dāng)細(xì)菌或其成分從體內(nèi)徹底消失后機(jī)體的免疫力也隨之消失。免疫性臨床標(biāo)本涂片檢查分離培養(yǎng)核酸檢測(cè)抗體檢測(cè)直接涂片集菌涂片處理標(biāo)本或無(wú)污染標(biāo)本染色抗酸..金胺O..液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基（羅氏或米氏）動(dòng)物試驗(yàn)儀器培養(yǎng)快速生長(zhǎng)菌慢生長(zhǎng)菌涂片鏡檢菌種鑒定抗酸染色菌落特點(diǎn)鑒定試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)＜7天生長(zhǎng)＞7天生長(zhǎng)微生物學(xué)檢驗(yàn)微生物學(xué)檢查根據(jù)結(jié)核菌感染的類型，采取病灶部位的標(biāo)本。肺炎結(jié)核——痰腎或膀胱結(jié)核——中段尿液腸結(jié)核——糞便結(jié)核性腦膜炎——腦脊液1.直接檢查涂片檢查抗酸染色法：萋-尼氏(Ziehl-Neelsen)抗酸染色熒光染色法：金胺O染色集菌涂片法：

咯痰可直接涂片。用萋～納氏法染色，若鏡檢找到抗酸性桿菌，可能是結(jié)核桿菌，但通常應(yīng)報(bào)告：“查到抗酸性桿菌”，因標(biāo)本中可能混雜有非致病性抗酸桿菌，單憑形態(tài)染色不能確定是結(jié)核桿菌，需進(jìn)一步分離培養(yǎng)鑒定。如標(biāo)本中結(jié)核桿菌量少，雜菌和雜質(zhì)多時(shí)，直接涂片不易檢出（一般需要每毫升痰液含有結(jié)核桿菌10萬(wàn)個(gè)以上才能檢出），應(yīng)濃縮集菌后，再涂片染色鏡檢，以提高陽(yáng)性檢出率。無(wú)菌直接采取的腦脊液、導(dǎo)尿或中段尿可直接用離心沉淀集菌。咯痰和糞便標(biāo)本濃縮集菌因含雜菌多，需用4%NaOH或3%HCL或6%H2SO4處理，然后，用離心沉淀法將結(jié)核桿菌濃縮聚集于管底，再取沉淀物涂片作抗酸染色檢查、分離培養(yǎng)或動(dòng)物試驗(yàn)。前處理：集菌、除雜菌培養(yǎng)：結(jié)核桿菌生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)期長(zhǎng)。接種于固體培養(yǎng)基上。37℃培養(yǎng)4～6周后檢查結(jié)果。結(jié)果：根據(jù)生長(zhǎng)緩慢，菌落干燥、顆粒狀、乳酪色，菜花狀，菌體染色抗酸性強(qiáng)，多數(shù)為結(jié)核桿菌。如菌落、菌體染色都不典型，則可能為非典型分枝桿菌，應(yīng)進(jìn)一步作鑒別試驗(yàn)。2.分離培養(yǎng)活動(dòng)性肺結(jié)核病例的診斷1.胸部影像2.傳統(tǒng)培養(yǎng)法3.核酸擴(kuò)增技術(shù)及基因探針結(jié)核分枝桿菌感染的診斷目的:預(yù)防潛伏性感染進(jìn)展為活動(dòng)性結(jié)核病:結(jié)核菌素皮膚實(shí)驗(yàn)臨床診斷比較涂片陽(yáng)性結(jié)果:一個(gè)視野見(jiàn)到3個(gè)抗酸菌要求標(biāo)本:6000-10000/ml.培養(yǎng)陽(yáng)性:一個(gè)菌落對(duì)應(yīng)于原始標(biāo)本:100/ml敏感性:涂片:55%,培養(yǎng):80%特異性:涂片:5～50%,培養(yǎng)有1～2%假陽(yáng)性

常用豚鼠或地鼠鑒別凝似結(jié)核桿菌的分離培養(yǎng)物和毒力測(cè)定。取經(jīng)濃縮集菌處理的標(biāo)本1.0毫升注射于豚鼠腹股溝皮下，經(jīng)3～4周飼養(yǎng)觀察，如出現(xiàn)局部淋巴結(jié)腫大，消瘦或結(jié)核菌素試驗(yàn)陽(yáng)性，可及時(shí)剖檢若觀察6～8周后，仍未見(jiàn)發(fā)病者，也要剖檢。剖檢時(shí)應(yīng)注意觀察淋巴結(jié)、肝、脾、肺等臟器有無(wú)結(jié)核病變。3.動(dòng)物試驗(yàn)

應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌，克服了傳統(tǒng)檢測(cè)方法的諸多不足，能夠?qū)﹄y以培養(yǎng)、生長(zhǎng)緩慢的結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行更加敏感、特異、準(zhǔn)確、快速的鑒定和藥物敏感性評(píng)價(jià)。

4.分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)M.tuberculosisM.bovis形態(tài)細(xì)長(zhǎng)短粗煙酸+-煙酰胺酶+-硝酸鹽還原試驗(yàn)+-5.與牛分枝桿菌（M.bovis)的鑒別結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)的新進(jìn)展噬菌體法快速檢測(cè)試劑分子生物學(xué)鑒定：PCR限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析、PCR單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析、核酸探針、核酸序列分析、多重PCR、高效液相色譜法等免疫學(xué)檢測(cè)：結(jié)核菌素試驗(yàn)、抗原/抗體檢測(cè)、全血干擾素測(cè)定法等

又稱麻風(fēng)桿菌，是麻風(fēng)病的病原體，目前尚不能人工培養(yǎng)。麻風(fēng)是一種慢性傳染病，侵犯皮膚、粘膜和外周神經(jīng)組織，晚期還可侵入深部組織和臟器，形成肉芽腫病變。在世界各地均有流行，我國(guó)不少地區(qū)亦可見(jiàn)，但經(jīng)大力開(kāi)展防治工作后，病例已逐漸減少。麻風(fēng)分枝桿菌(M.leprae)形態(tài)上麻風(fēng)桿菌與結(jié)核桿菌酷似，難以區(qū)別。典型的胞內(nèi)寄生菌，有該菌寄生的細(xì)胞呈泡沫狀，稱為麻風(fēng)細(xì)胞。表現(xiàn)明顯的抗酸染色特性。革蘭氏陽(yáng)性。無(wú)鞭毛、芽孢、莢膜。生物學(xué)性狀目前體外人工培養(yǎng)尚未成功動(dòng)物模型：犰狳，對(duì)該菌高度易感，接種后引起瘤型麻風(fēng)，人對(duì)該菌抵抗力強(qiáng)，接觸者僅少數(shù)發(fā)病長(zhǎng)期以來(lái)麻風(fēng)病被學(xué)界認(rèn)為只在人類間傳播。而2011年4月底，美國(guó)研究人員稱，美國(guó)首例麻風(fēng)病人可能由犰狳傳染而來(lái)。人類為唯一宿主和唯一傳染源，致病因素不清----不準(zhǔn)確犰狳（讀音：qiúyú），又稱“鎧鼠”。犰狳是生活在巴西內(nèi)陸地區(qū)的一種瀕危物種。傳染源：病人（瘤型麻風(fēng)病人通過(guò)皮膚黏膜及外分泌液向外排菌）傳播途徑：皮膚、黏膜、呼吸道及密切接觸傳播（家庭內(nèi)傳播多見(jiàn)）潛伏期：2-5年，長(zhǎng)者