1外周血單個核細(xì)胞（PBMC）全封閉自動化分離技術(shù)規(guī)范外周血單個核細(xì)胞（PBMC）PeripheralBloodMononuclearCe5.1組織結(jié)構(gòu)及職責(zé)5.1.1應(yīng)建立與PBMC生產(chǎn)相適應(yīng)的管理機(jī)構(gòu)，并有組織機(jī)構(gòu)圖。5.1.2應(yīng)設(shè)立獨立的質(zhì)量管理部門，履行質(zhì)量保證和質(zhì)量控制的職責(zé)。質(zhì)量管理部門可以分別設(shè)立質(zhì)5.1.3質(zhì)量管理部門應(yīng)當(dāng)參與所有與質(zhì)量有關(guān)的活動，負(fù)責(zé)審核所有與本文件有關(guān)的文件。5.2人員要求5.2.1應(yīng)當(dāng)配備足夠數(shù)量并具有適當(dāng)資質(zhì)（含學(xué)歷、培訓(xùn)和實踐經(jīng)驗）的管理和操作人員，應(yīng)當(dāng)明確5.2.2所有人員應(yīng)當(dāng)明確并理解自己的職責(zé)，熟悉與其職責(zé)相關(guān)的要求，并接受必要的培訓(xùn)，包括上5.2.3職責(zé)不應(yīng)委托給他人。確需委托的，其職責(zé)可委25.3環(huán)境要求5.3.1廠房的選址、設(shè)計、布局、建造、改造和維護(hù)應(yīng)符合PBMC生產(chǎn)要求，應(yīng)當(dāng)能夠最大限度地避5.3.2應(yīng)當(dāng)根據(jù)廠房及生產(chǎn)防護(hù)措施綜合考慮選址，廠房所處的環(huán)境應(yīng)當(dāng)能夠最大限度地降低物料或5.3.3應(yīng)當(dāng)有整潔的生產(chǎn)環(huán)境；廠區(qū)的地面、路面及運輸行政、生活和輔助區(qū)的總體布局應(yīng)當(dāng)合理，不得互相妨5.3.5廠房應(yīng)當(dāng)有適當(dāng)?shù)恼彰?、溫度、濕度和通風(fēng)，確保生產(chǎn)和貯存的產(chǎn)品質(zhì)量以及相關(guān)設(shè)備性能不5.3.6廠房、設(shè)施的設(shè)計和安裝應(yīng)當(dāng)能夠有效防止昆蟲或其它動物進(jìn)入。應(yīng)當(dāng)采取必要的措施，避免所使用的滅鼠藥、殺蟲劑、煙熏劑等對設(shè)備、物料、產(chǎn)品造成5.3.7應(yīng)當(dāng)采取適當(dāng)措施，防止未經(jīng)批準(zhǔn)人員的進(jìn)入。生產(chǎn)、貯存和質(zhì)量控制區(qū)不應(yīng)當(dāng)作為非本區(qū)工應(yīng)至少滿足：離心杯容量應(yīng)≥300mL；180mL外周血回收PBMC數(shù)應(yīng)≥1.5E8、完成全部操作時長≤75min、最小能滿足1mL小體積分裝能力；全流程應(yīng)密閉化操作，并按照工3c)一次性細(xì)胞處理套件：配套密閉自動化設(shè)備使用，實現(xiàn)全流程密閉化，能夠靈活進(jìn)行不同規(guī)格凍存袋連接，并能夠?qū)崿F(xiàn)一次分裝多袋次，避免反復(fù)進(jìn)行接管-熱合注：C級環(huán)境指生產(chǎn)環(huán)境的一般區(qū)域，要求空前采血，有利于分離存儲活力較好的PBMC，采集量180mL～200mL之間；人員采集前需進(jìn)行體檢，7.3.1外周血采集后，使用2℃~8℃低溫轉(zhuǎn)運箱運輸至樣本接收處。7.3.2接收人員核對血液樣本標(biāo)識信息（如患者姓名7.3.3生產(chǎn)人員在生產(chǎn)前再次確認(rèn)樣本信息及采集時間，確保血液采集時間至開始生產(chǎn)時間在規(guī)定的4），7.4.2.1手動轉(zhuǎn)袋：分別將標(biāo)準(zhǔn)凍存液、Ficoll、清洗液手動轉(zhuǎn)移至相應(yīng)無菌液袋7.5.3點擊“選擇工藝”進(jìn)入工藝選擇界面，選擇工藝，設(shè)備自動進(jìn)行壓力傳感器初始化檢測，確7.5.4按照設(shè)備屏幕提示將一次性細(xì)胞處理套件等耗材安裝在設(shè)備上，隨后將耗材附帶的耗材激活卡置于設(shè)備刷卡區(qū)進(jìn)行耗材驗證并激活程序，保證耗材與設(shè)備匹配且功能正常。7.5.5點擊“開始”按鈕，跳出“電子簽名”框，手寫簽式進(jìn)行，如管路的打開與關(guān)閉、耗材安裝位置及必要7.5.8設(shè)備運行過程中，根據(jù)凍存需求使用凍存袋標(biāo)簽專用打印紙打印凍存標(biāo)簽，標(biāo)簽內(nèi)容包含產(chǎn)品7.5.9設(shè)備能夠自動進(jìn)行PBMC清洗，第二次清洗結(jié)束后自動從分離杯中抽取上清液至檢測袋用于無7.5.10按照程序開始分裝操作，設(shè)備自動按照設(shè)置規(guī)格分裝，并記錄開始分7.5.11待分裝結(jié)束后，按照操作規(guī)程使用手持式熱合機(jī)熱合凍存袋，確保凍存袋密封良7.6.1程序降溫盒入庫準(zhǔn)備：熱合完成后，取下凍存袋，貼上產(chǎn)品標(biāo)簽，將產(chǎn)品放入提前準(zhǔn)備的程序7.6.2程序降溫儀入庫準(zhǔn)備：操作同程序降溫盒入庫準(zhǔn)備，將凍存袋裝入程序降溫儀專用凍存盒（冰），7.6.4待產(chǎn)品處理完成后，熱合取下檢測袋，用于無菌、內(nèi)毒素及支原7.7.1完成生產(chǎn)后，立即通知保存庫取走樣品，由保存庫人員確認(rèn)樣本信息7.7.2根據(jù)實際情況選擇程序降溫盒降溫或程57.7.4.1選擇降溫程序，確認(rèn)參數(shù)，并錄入“產(chǎn)品批次信息”和“數(shù)據(jù)標(biāo)簽”，程序降溫儀參數(shù)應(yīng)符并將樣本依次盡快轉(zhuǎn)移至氣相液氮罐中，記錄轉(zhuǎn)移完成7.7.4.3收集紙質(zhì)降溫曲線，復(fù)印后進(jìn)行將其附入7.7.5凍存檢測樣本，可按照檢測計劃進(jìn)行取作日提出請驗，確保產(chǎn)品凍存達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。檢驗項目應(yīng)符合表2注：可根據(jù)需求增加細(xì)胞表型檢測（CD14+、CD45+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD56+、CD3+CD52℃~8℃8.1.1應(yīng)當(dāng)配備適當(dāng)?shù)脑O(shè)施、設(shè)備、儀器和經(jīng)過培訓(xùn)的人員，有效、可靠地完成所有質(zhì)量控制的相關(guān)6檢驗以及產(chǎn)品的穩(wěn)定性考察,必要時進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測，以確保符合本規(guī)范8.1.3由經(jīng)授權(quán)的人員按照規(guī)定的方法對原輔料、包裝材料、中8.1.5取樣、檢查、檢驗應(yīng)當(dāng)有記錄，偏差應(yīng)當(dāng)經(jīng)過調(diào)查并記錄。8.1.6物料、中間產(chǎn)品、待包裝產(chǎn)品和成品必須按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢查和檢驗，并有記錄。8.1.7在生產(chǎn)過程中，各操作步驟需按照本文件執(zhí)行，操作人員應(yīng)及時記錄關(guān)鍵操作信息，如設(shè)備運8.1.8每批產(chǎn)品生產(chǎn)過程中，對中間產(chǎn)品進(jìn)行無菌、內(nèi)毒素檢測，確保中間產(chǎn)品質(zhì)量符合要求，避免8.3.1生產(chǎn)過程中發(fā)現(xiàn)的不合格中間產(chǎn)品應(yīng)立即停止后續(xù)操作，標(biāo)識并隔離，分析不合格原因，采取8.3.2成品檢測不合格時，對不