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文檔簡介

生長的菌落我們?nèi)绾斡梦⑸飦碇谱鞒鲞@樣美麗的藝術(shù)作品呢?發(fā)酵工程的培養(yǎng)基1認(rèn)識(shí)菌落2培養(yǎng)基的類型3配制培養(yǎng)基本節(jié)內(nèi)容認(rèn)識(shí)菌落前言菌落單個(gè)微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度后形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。觀察各種微生物形成的菌落幾種菌落及其形態(tài)幾種菌落及其形態(tài)培養(yǎng)基的類型第二部分123培養(yǎng)基都包括哪些成分?培養(yǎng)基都有哪些類型?它們的主要區(qū)別在哪里?說一說

培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)主要是指為人工培養(yǎng)微生物等而制備的,適合微生物等生長、繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。1.培養(yǎng)基內(nèi)所含的基本物質(zhì)最基本的物質(zhì)(1)水(2)碳源(3)氮源(4)無機(jī)鹽以及生長因子、氧氣、二氧化碳、滲透壓、PH等的特殊要求

★碳源★

凡能提供碳元素的物質(zhì)可作為碳源的物質(zhì)有:無機(jī)碳源:、、有機(jī)碳源:蛋白質(zhì)脂肪酸碳酸鹽碳酸氫鹽糖類(主要)葡萄糖乳糖二氧化碳不同微生物所利用的碳源不同異養(yǎng)型微生物的碳源為自養(yǎng)型微生物的碳源為含碳有機(jī)物(有機(jī)碳)含碳無機(jī)物(無機(jī)碳)作用:構(gòu)成微生物體的重要成分,也是微生物生命活動(dòng)的能源物質(zhì)?!锏础?/p>

凡能提供氮元素的物質(zhì)可作為氮源的物質(zhì)有:無機(jī)氮源:、、、有機(jī)氮源:蛋白胨牛肉膏尿素固氮微生物所利用的氮源是氮?dú)獍睔庀跛猁}氨鹽氮?dú)庾饔茫簶?gòu)成微生物細(xì)胞中蛋白質(zhì)、核酸的主要元素?!锷L因子★細(xì)菌生長必需,而自身不能合成的微量有機(jī)物如:維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等作用:合成酶和核酸★水★

在生物體內(nèi)含量很高的無機(jī)物作用:不僅是優(yōu)良的溶劑,而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定★無機(jī)鹽★為微生物提供除碳、氮外的各種重要元素作用:細(xì)胞的組成成分、生理調(diào)節(jié)物質(zhì)、某些化學(xué)自養(yǎng)菌的能源、酶的激活劑指出下列培養(yǎng)基配方中的碳源、氮源分別什么?2.培養(yǎng)基的類型和用途(1)按化學(xué)成分來分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。(2)按物理性質(zhì)來分:培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等,而液體培養(yǎng)基一般用于工業(yè)生產(chǎn)。(3)按用途來分,可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基和特殊培養(yǎng)基(4)按功能(特殊用途)來分,可分為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基。按化學(xué)成分來分天然培養(yǎng)基有血清、血漿、和組織提取液(如雞胚和牛胚浸液)。優(yōu)點(diǎn):取材便利、營養(yǎng)豐富、配制簡便、培養(yǎng)效果好缺點(diǎn):來源受限、營養(yǎng)成分復(fù)雜難以控制、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性差,影響對(duì)某些實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物的提取和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析天然培養(yǎng)基:適用于工業(yè)化生產(chǎn)按化學(xué)成分來分根據(jù)細(xì)胞生存所需物質(zhì)的種類和數(shù)量,用人工方法模擬合成的。合成培養(yǎng)基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。優(yōu)點(diǎn):化學(xué)成分和含量明確、實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性好缺點(diǎn):成本較高、配制過程繁瑣、缺少某些成分,不能完全滿足體外細(xì)胞生長需要。合成培養(yǎng)基:用于研究和育種液體培養(yǎng)基:表面生長均勻混濁生長沉淀生長按物理狀態(tài)來分增菌、工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基:菌落,菌苔按物理狀態(tài)來分純化(分離)鑒定活菌計(jì)數(shù)保藏菌種半固體培養(yǎng)基:無動(dòng)力有動(dòng)力(彌散)觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)、厭氧菌的分離和菌種鑒定、保存按物理狀態(tài)來分瓊脂選擇培養(yǎng)基加入10%的酚溶液:抑制細(xì)菌和霉菌的生長,分離放線菌加入亞硫酸鉍:分離出傷寒沙門氏菌加入青霉素、四環(huán)素的培養(yǎng)基:分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基:分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基:分離自養(yǎng)型微生物按功能來分鑒別培養(yǎng)基1可溶性淀粉培養(yǎng)基一些微生物可以產(chǎn)生胞外淀粉酶,將樣品微生物培養(yǎng)在添加可溶性淀粉的培養(yǎng)基中,如果其菌落周圍形成淀粉水解圈,可用來鑒定產(chǎn)淀粉酶的菌株。按功能來分鑒別培養(yǎng)基2溴甲基紫培養(yǎng)基一些微生物可以產(chǎn)生乳酸、醋酸或丙酸等代謝產(chǎn)物,與溴甲基紫發(fā)生顏色反應(yīng)由紫色轉(zhuǎn)為黃色。常用溴甲基紫培養(yǎng)基鑒別產(chǎn)酸微生物。鑒別培養(yǎng)基3伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基當(dāng)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落,并帶有金屬光澤。常用的伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基,可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細(xì)菌。鑒別培養(yǎng)基4尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種細(xì)菌后,細(xì)菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨,氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),使PH升高,從而使酚紅指示劑變紅。以鑒定這種細(xì)菌能否分解尿素。剛果紅是一種染料,能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后,剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。鑒別培養(yǎng)基5剛果紅纖維素培養(yǎng)基加富培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入有利于某些微生物生長和繁殖所需的特殊物質(zhì),如血液、血清、酵母浸膏、動(dòng)植物組織液。一般適用于培養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)微生物。從某種意義上來說,加富培養(yǎng)基類似于選擇培養(yǎng)基:加富培養(yǎng)基是增加所需分離的微生物的數(shù)量;選擇培養(yǎng)基是抑制不需要的微生物生長和繁殖。血清中含有:①多種蛋白質(zhì)(白蛋白、球蛋白、鐵蛋白等)②多種金屬離子;③激素;④促貼附物質(zhì),如纖粘蛋白、冷析球蛋白、膠原等。⑤各種生長因子⑥轉(zhuǎn)移蛋白⑦不明成分人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存,要想使細(xì)胞生長和繁殖,還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基(如血清)。3.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方細(xì)菌喜葷,真菌喜素大腸桿菌配方酵母提取物:0.25g蛋白胨:0.5gNacl:0.5g瓊脂:1g水:50ml酵母菌、霉菌常用培養(yǎng)基麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基☆依據(jù)微生物的生長需要確定培養(yǎng)基的成分和含量1.關(guān)于配制培養(yǎng)基的有關(guān)敘述中,正確的是(

)A.制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂B.一般常用的是固體培養(yǎng)基C.氮源主要是為微生物提供能量D.牛肉膏只為微生物提供氮元素B隨堂練習(xí)2.下表為某培養(yǎng)基的配方,下列敘述正確的是(

)成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水含量10g10g2g0.4g0.065g1000mLA.從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基,從用途看該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B.該培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C.該培養(yǎng)基缺少提供生長因子的物質(zhì)D.該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后就可以接種使用B配制馬鈴薯葡糖糖瓊脂培養(yǎng)基第三部分1.培養(yǎng)基配制原則①目的要明確:根據(jù)培養(yǎng)的微生物種類、培養(yǎng)的目的等確定培養(yǎng)基的類型和配制量。②營養(yǎng)要協(xié)調(diào):培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。例如:碳氮比4∶1時(shí),谷氨酸棒狀桿菌大量繁殖而產(chǎn)生谷氨酸少;碳氮比為3∶1時(shí),菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。③pH要適宜:細(xì)菌培養(yǎng)基pH中性或偏堿性,霉菌培養(yǎng)基呈酸性。2.配置培養(yǎng)基的步驟:1.配制培養(yǎng)基2.調(diào)節(jié)pH3.分裝4.包扎5.滅菌6.擱置斜面7.無菌

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