ICS65.020.30DB12B44天津市地方標(biāo)準(zhǔn)DB12/T974—2020奶牛性控凍精人工授精技術(shù)規(guī)范Regulationaboutartificialinseminationwithsex-sortedsemenindairycattle天津市市場(chǎng)監(jiān)督管理委員會(huì)發(fā)布DB12/T974—2020前言本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由天津市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：天津市畜牧獸醫(yī)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：馬毅、陳麗麗、趙康、姚大為、趙慶彬、劉景喜、韓克元、尹春博。IDB12/T974—2020奶牛性控凍精人工授精技術(shù)規(guī)范12范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了奶牛性控凍精人工授精的方法和規(guī)范。本標(biāo)準(zhǔn)適用于應(yīng)用性控凍精對(duì)母牛進(jìn)行人工授精的奶牛場(chǎng)、奶牛養(yǎng)殖小區(qū)及奶牛養(yǎng)殖戶等。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4143牛冷凍精液NY/T1335-2007牛人工授精技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)與定義NY/T1335-2007界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件，為方便使用，以下重復(fù)列出了某些術(shù)語(yǔ)性控凍精sex-controlledcryogen對(duì)公牛所產(chǎn)生的精液，通過(guò)人為方法將X、Y精子進(jìn)行科學(xué)分離，將分離后的X精子進(jìn)行分裝冷凍制3.2人工授精artificialinsemination判斷母畜是否發(fā)情和確定適時(shí)配種的技術(shù)。[NY/T1335-2007，定義3.4]4達(dá)到適配標(biāo)準(zhǔn)的育成牛，初配月齡在13～15月齡之間，體重達(dá)380kg以上，體高124cm以上；健康，1DB12/T974—20205發(fā)情鑒定5.1外部觀察通過(guò)母牛的外部表現(xiàn)癥狀和生殖器官的變化判斷母牛是否發(fā)情和發(fā)情程度，見(jiàn)附錄A。5.25.3直腸檢查通過(guò)直腸檢查卵巢，觸摸卵泡發(fā)育程度，判斷發(fā)情程度及排卵時(shí)間，見(jiàn)附錄A?；顒?dòng)量監(jiān)測(cè)利用計(jì)步器或其他電子監(jiān)測(cè)裝置監(jiān)測(cè)牛的活動(dòng)量來(lái)判斷發(fā)情牛。發(fā)情牛表現(xiàn)為活動(dòng)量增加，并伴有5.1所描述的全部或部分特征。6輸精準(zhǔn)備6.1輸精器具清洗和消毒6.1.16.1.2凡是接觸精液和母牛生殖道的輸精用器具都應(yīng)進(jìn)行清洗和消毒。玻璃器皿使用前用水浸泡和洗滌。若有污物用加洗滌劑的溫水或重鉻酸鉀洗液浸泡數(shù)小時(shí)后，用水洗凈晾干，放置在電熱鼓風(fēng)干燥箱160℃烘烤1h，冷卻備用。6.1.36.1.4金屬器械洗凈后，放置于電熱鼓風(fēng)干燥箱120℃烘烤1h，自然冷卻備用。輸精用的橡膠、塑料品用高壓蒸汽消毒滅菌，或用濃度為75%的酒精消毒。冷凍精液應(yīng)浸泡在液氮生物容器中貯存，包裝好的冷凍精液由一個(gè)液氮容器轉(zhuǎn)換到另一液氮容器7相比應(yīng)用常規(guī)凍精配種的輸精時(shí)間向后推遲3h～4h，見(jiàn)NY/T1335-2007中7.1。母牛活動(dòng)量開(kāi)始增加，并表現(xiàn)出5.1所描述的特征后10h～16h左右輸精。2DB12/T974—2020剪去性控精液封口，剪口應(yīng)正，斷面應(yīng)齊。將剪去封口的細(xì)管精液迅速裝入輸精器管內(nèi)，步驟為：剪去封口端的為前端，輸精器推桿后退，細(xì)管裝至管內(nèi)，輸精器管進(jìn)入塑料外套管，管口頂緊外套管中固定圈，輸精器管前推到頭，外套管后部與輸精器后部螺紋處擰緊，全部結(jié)合要緊密。7.3輸精方法使用直腸把握輸精法，輸精人員一手五指并握，呈圓錐形從肛門(mén)伸進(jìn)直腸，動(dòng)作要輕柔，在直腸內(nèi)觸摸并把握住子宮頸，使子宮頸把握在手掌之中，另一手將輸精器從陰道下口斜上方約45°角向里輕輕插入，雙手配合，輸精器頭對(duì)準(zhǔn)子宮頸口，輕輕旋轉(zhuǎn)插進(jìn)，過(guò)子宮頸口螺旋狀皺壁1cm～2cm即可到達(dá)輸精部位。一頭母牛應(yīng)使用一支輸精器或者一支消毒塑料輸精外套管。直腸把握輸精使用器械及其操作分為：a)用球式玻璃輸精器的，注入精液前略后退約0.5cm，手捏橡膠頭注入精液，輸精管抽出前不得松開(kāi)橡膠頭，以免回吸精液；b)用金屬輸精器的，注入精液前略后退約0.5cm，把輸精器推桿緩緩向前推，通過(guò)細(xì)管中棉塞向前注入精液。7.4輸精部位越過(guò)子宮頸和子宮角分叉處，排卵側(cè)子宮角。8妊娠診斷8.1外部觀察妊娠母牛外部表現(xiàn)發(fā)情周期停止，食欲增進(jìn)，毛色潤(rùn)澤，性情變溫和，行為變安穩(wěn)。懷孕中后期腹輸精后二個(gè)情期未發(fā)情（40天左右），通過(guò)直腸觸摸檢查子宮，可查出兩側(cè)子宮角不對(duì)稱(chēng)，孕側(cè)子宮角較另側(cè)略大，且柔軟。60天后直腸觸摸可查出妊娠子宮增大、胎兒和胎膜。直腸觸摸同側(cè)卵巢較另用B超檢查母牛的子宮及胎兒、胎動(dòng)、胎心博動(dòng)等，最佳檢測(cè)時(shí)間為29天～31天，檢查時(shí)發(fā)現(xiàn)一個(gè)或是數(shù)個(gè)圓形或橢圓形的、規(guī)則分布的無(wú)回聲暗區(qū)，或是在沒(méi)有回聲的暗區(qū)內(nèi)有胚胎出現(xiàn)即可判斷為懷孕。9輸精后，應(yīng)做好繁殖及育種等相關(guān)數(shù)據(jù)記錄，記錄內(nèi)容包括母牛號(hào)、配種日期、與配公牛號(hào)或性控3DB12/T974—2020AA附錄A（規(guī)范性附錄）發(fā)情外部表現(xiàn)癥狀和生殖器官的變化表A.1發(fā)情外部表現(xiàn)癥狀和生殖器官的變化期別發(fā)情初期（不接受爬跨期）發(fā)情盛期（接受爬跨期）發(fā)情末期（拒絕爬跨期）母牛興奮不安，牟叫，游走，采食漸少，奶牛產(chǎn)奶量降低，追逐、爬跨它牛，而它牛爬跨不予接受，一爬即跑母牛游走減少，它牛爬跨時(shí)站立不動(dòng)、后肢張開(kāi)，頻頻舉尾，接受爬跨母牛轉(zhuǎn)入平靜，它牛爬跨時(shí)，臂部避開(kāi)，但很少奔跑外觀表現(xiàn)陰戶腫脹、松弛、充血、發(fā)亮，子宮頸口微張，有稀薄透明黏液流出，陰道壁潮紅子宮頸口紅潤(rùn)開(kāi)張，陰道壁充血，黏液量減少，混濁黏稠。子宮頸生殖器官變化卵泡變化黏液顯著增加，流出大量透明而黏稠的分泌物口緊閉，有少量濃稠黏液。陰唇消腫起皺、尾根緊貼陰門(mén)卵泡增大，波動(dòng)明顯，泡壁由厚變薄一側(cè)卵巢增大卵泡直徑0.5cm～1.0cm卵巢變