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桂林醫(yī)學院機能學實驗指導

摘要:(5)實驗結果:是實驗中最重要的部位.目前,醫(yī)學論文多

采用三線表,直方圖,曲線或文字描述等方式表達實驗結果.

要求把實驗過程獲得的數(shù)據(jù),曲線,文字等原始資料加以整

理...

關鍵詞:醫(yī)學,醫(yī)學論文

類別:論文報告

桂林醫(yī)學院機能學實驗指導

桂林醫(yī)學院機能實驗室

2006年9月

目錄

第一章緒言....................................................(1)

第二章常用的儀器及器械.......................................(6)

一、BL-410生物機能實驗系統(tǒng)............................(6)

二、721分光光計.............................................(10)

三、電刺激器具..............................................(11)

四、常用手術器材............................................(11)

第三章動物實驗的基本操作技術.................................(14)

一、實驗動物的選擇..........................................(14)

二、實驗動物的捉持法、給藥法及取血法.......................(14)

三、實驗動物的編號..........................................(21)

四、實驗動物的麻醉..........................................(22)

五、實驗動物的固定..........................................(26)

六、實驗動物的處死方法.....................................(27)

七、急性動物實驗常用手術方法...............................(27)

第四章實驗設計................................................(31)

一、實驗設計的基本要求.....................................(31)

二、實驗設計的基本步驟和內容...............................(32)

三、實驗設計的組織實施.....................................(33)

附:醫(yī)用統(tǒng)計學的基本知識...................................(34)

第五章實驗....................................................(37)

第一節(jié)基礎實驗..............................................(37)

實驗一蟾蛛神經(jīng)肌肉標本制備...............................(37)

實驗二坐骨神經(jīng)標本制備...................................(40)

實驗三神經(jīng)干動作電位的測定...............................(41)

實驗四刺激強度與刺激持續(xù)時間之間的關系..................(42)

實驗五刺激強度與組織反應的關系...........................(43)

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實驗六神經(jīng)沖動傳導速度的測定......................vZ

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實驗七神經(jīng)干不應期現(xiàn)象的觀察......................lz

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實驗八刺激頻率與骨骼肌收縮的關系..................\/

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實驗九骨骼肌動作電位和機械收縮的同時記錄..........x/

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實驗十影響血液凝固的因素...........................\5z

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實驗十一紅細胞滲透脆性的測定......................\5z

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實驗十二紅細胞沉隆率試驗...........................x

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實驗十三蛙心起搏點分析.............................\/

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實驗十四蛙心搏動的描記及興奮性變化的觀察..........\/

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實驗十五蛙心搏動與心肌動作電位(宏電極)的同時記錄X7

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實驗十六離體蛙心灌流...............................x/

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實驗十七心肌單細胞跨膜電位(錄像)................\6?

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實驗十八蟾蜂腸系膜微循環(huán)觀察(示教)..............x77

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實驗十九減壓神經(jīng)放電(錄像)......................\8

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實驗二十胸內負壓與氣胸觀察........................-g-

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實驗二十一胃腸運動的觀察...........................V/

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實驗二十二大腦皮層體感誘發(fā)電位....................?\/

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實驗二十三大腦皮層運動機能定位(錄像)............?x7/

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實驗二十四去大腦僵直(錄像)......................?x7Z

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實驗二十五藥物的基本作用...........................xc

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實驗二十六溶液PH值對藥物轉運速率的影響..........—77.

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實驗二十七藥物的協(xié)同作用...........................\8z

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實驗二十八磺胺藥血漿半衰期測定....................x1/

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實驗二十九傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥對動物血壓的影響..........x

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實驗三十Ach量效關系曲線及阿托品PA?測定........?

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實驗三十一藥物對離體氣管的作用....................x5

第二節(jié)綜合性實驗.............................

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實驗一心血管活動的神經(jīng)體液調節(jié)及藥物的影響tIH

zo

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實驗二心律失常與治療......................-

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(

實驗三呼吸運動的調節(jié)與藥物對呼吸的影響……X

實驗四理化因子及藥物對消化道平滑肌的生理特性的影響......(95)

實驗五影響尿生成的因素及利尿藥的作用.....................(97)

實驗六血液凝固過程及DIC發(fā)生發(fā)展機理和救治原則.........(101)

實驗七氨在肝性腦病發(fā)生中的作用及救治原則................(104)

第三節(jié)人體實驗.............................................(105)

實驗一ABO血型鑒定.........................................(105)

實驗二人體動脈血壓的測定................................(107)

實驗三人體心電圖(ECG)的描記..........................(110)

第四節(jié)動物疾病模型的復制實驗................................(113)

實驗一藥物對抗尼可剎米的致驚厥作用.......................(113)

實驗二杜冷丁鎮(zhèn)痛作用.....................................(113)

實驗三有機磷酸酯類中毒及解救.............................(114)

實驗四藥物的平喘作用.....................................(115)

實驗五藥物LD50及ED50的測定............................(116)

實驗六急性心力衰竭.......................................(120)

實驗七急性缺氧............................................(121)

實驗八失血性休克..........................................(122)

實驗九急性心功能不全.....................................(123)

第六章處方學..................................................(125)

附錄:常用生理溶液的成分及用途.................................(131)

實驗動物用藥劑量的計算方法...............................(131)

機能實驗學教學的目標.....................................(136)

機能實驗學教學的內容要求.................................(137)

第一章緒言

隨著自然科學的發(fā)展,醫(yī)學科學逐漸形成了許多分支學科,實驗學就是其中的一個重

要組成部分。目前,醫(yī)學實驗技術一般分為形態(tài)學、機能學、分子生物學和細胞生物學4

大類,掌握實驗學的基本技術,對于從事醫(yī)學的學生來說是具有重要意義的。

機能實驗學的研究包括臨床研究和動物實驗研究。機能實驗學的研究多采用動物實驗

方法進行(因為前者只允許在不損害機體健康、不耽誤病情、不加重病人痛苦的條件下進

行)。實驗者可以根據(jù)設計的意圖、控制或改變某些條件,探討正常、病理或藥物干預的

情況下有關器官功能的變化的規(guī)律及其機制,或進行實驗性治療和預防,為臨床工作提供

線索和依據(jù)。

機能實驗學的特點:它是一門理論性較強的學科,也是?,門實踐性較強的學科,其目

的和任務是:從不同角度、用不同方法去研究正常和患病機體的生命活動規(guī)律,闡明疾病

的原因、發(fā)生發(fā)展的過程,研究疾病過程中的機體功能、代謝和形態(tài)結構改變的特征,為

認識和掌握疾病發(fā)生發(fā)展的規(guī)律、為防病治病提供必要的理論基礎和實驗研究依據(jù)。實驗

教學是機能實驗學主要的教學形式,但它也不是附屬于某門理論課,它獨立開課,獨立考

核,自成體系。

機能實驗學的研究方法:

從研究對象來看,可分為細胞、器官和系統(tǒng)、整體三個水平的研究。

(-)細胞和分子水平

需將某種組織細胞從整體取下后,在一定的環(huán)境條件下對其功能進行研究。如:將一

個或數(shù)個細胞從整體分離出來,觀察其生物電活動等。

(二)器官和系統(tǒng)水平

以離體或在體的一個器官或系統(tǒng)為實驗研究對象,觀察其功能活動,研究其功能活動

的內在機制以及各種因素對其活動的影響。如:離體蛙心灌流、各種因素對心血管活動的

影響、各種因素對呼吸運動的影響等實驗。

(三)整體水平

以完整的機體為研究對象,觀察和研究在各種生理條件下不同的器官、系統(tǒng)之間互相

聯(lián)系、互相協(xié)調的規(guī)律,如體溫調節(jié)的研究等。

上述三個水平的實驗研究,是互相聯(lián)系、互相補充的。

從實驗的具體方法來看,可分為急性實驗和慢性實驗。

急性實驗:在較短的時間內完成。?般是在麻醉情況下對動物施行手術,將某一器官

暴露或取出,在一定的條件下對其功能活動進行觀察。急性實驗費將某一器官暴露或取出,

在一定的條件下對其功能活動進行觀察。急性實驗用時短,教學實驗多為此類實驗。

慢性實驗:此類實驗研究對象的狀況比較接近正常情況,能夠進行較長時間的連續(xù)觀

察,獲得比較系統(tǒng)的實驗資料。但往往需較長時間。

一、機能實驗學的教學目的

機能實驗學是在保留了部分經(jīng)典的電生理、人體生理和藥理實驗的基礎上,將生理、

藥理、病理生理的某些實驗有機的結合起來,使學生通過實驗,不僅掌握基本的操作技術,

而且通過各種病理動物實驗模型的制備、藥物及其他方法的救治等,將生理、藥理、病理

生理知識融會貫通,更加貼近臨床。培養(yǎng)并提高學生自學,獨立思考,獨立工作,科學思

維的能力;進行實驗設計和統(tǒng)計分析結果等分析問題、解決問題的能力;培養(yǎng)學生科學嚴

謹和實事求是的工作作風。

二、機能實驗學的教學要求

1.實驗前

(1)仔細閱讀實驗指導,了解實驗的目的、要求、操作方法及其實驗操作重點,領會

實驗原理。

(2)結合實驗內容,復習有關理論,做到充分理解,盡可能預測實驗各個步驟應得的

結果,注意和估計實驗中可能發(fā)生的誤差,以便及時糾正操作上的錯誤。

(3)根據(jù)觀察指標,設計記錄實驗數(shù)據(jù)的表格。

2.實驗時

(1)遵守課堂紀律和實驗室守則。

(2)清點所用器材和藥品,檢查儀器的功能,并正確調試儀器,按實驗步驟操作,準

確計算給藥量。

(3)仔細觀察實驗過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象,要隨時作好原始記錄并結合所學理論判斷實驗

結果。

3.實驗后

(I)將實驗用具整理就緒:所用器材擦洗干凈:按實驗前的布置整理安放好:檢查儀

器性能狀況,填寫使用單;如有損壞短少之處,立即報告實驗教師。

(2)值日同學要做好實驗室清潔衛(wèi)生工作,關好門、窗、水、電,方能離開實驗室。

(3)整理實驗記錄,作出實驗結論,認真填寫實驗報告,作到文字簡練、通順,書寫

清楚,客觀地填寫和敘述實驗結果與分析,按時交給實驗教師評閱。

三、實驗結果的處理

學生在實驗過程中通過科學方法將所觀察,檢測及計算出的實驗結果,進行分析、統(tǒng)

計和整理,轉變?yōu)榭啥ㄐ?、定量的?shù)據(jù)和圖表,以便研究其所獲得的各種變化的規(guī)律。

在實驗所得的結果中,凡屬于可以定量檢測的資料?,如長短、高低、快慢、輕重等,

均應以正確的單位和數(shù)值定量。在可以記錄到曲線的實驗項目中,應盡量采用曲線來表示

實驗結果,在曲線上應標注說明;有些實驗結果可采用表格和繪圖。制表格時可將觀察的

項目列在表內左側,右側順序填寫各項結果變化數(shù)值,亦可簡要說明;繪圖時,以橫軸表

示各種刺激條件,縱軸表示所發(fā)生的各種反應,坐標軸要有適當注解,包括劑量單位。選

擇大小適宜的標度以便作圖,根據(jù)圖的大小確定坐標的長短。繪制經(jīng)過各點的曲線或折線

要光滑。如果不是連續(xù)性變化,也可用直方圖表示,圖下注明實驗條件,實驗名稱等。需

作統(tǒng)計學處理的實驗數(shù)據(jù),應按衛(wèi)生統(tǒng)計學中所規(guī)定的統(tǒng)計學方法進行處理后(詳見第五

章),才能對實驗結果進行評價。

四、實驗作業(yè)

實驗課時或實驗課后,學生應按教師的要求,按時完成實驗作業(yè)。實驗作業(yè)有實驗報

告、填充圖表、口頭答辯等形式,下面主要介紹實驗報告的書寫要求。

實驗報告格式:

(1)試驗者姓名、班次、組別、日期。

(2)實驗序號與題目。

(3)實驗目的。

(4)實驗方法:一般不必詳盡描述,如有實驗儀器與方法臨時變動,或因操作技術影

響觀察的可靠性時,可作簡要說明。

(5)實驗結果:是實驗中最重要的部位。目前,醫(yī)學論文多采用三線表、直方圖、曲

線或文字描述等方式表達實驗結果。要求把實驗過程獲得的數(shù)據(jù)、曲線、文字等原始資料

加以整理填入實驗報告本的適當位置。

(6)討論和結論:實驗結果的討論是根據(jù)結果和現(xiàn)象用已知的理論和知識進行的解釋

和推理分析。要判斷實驗結果是否為預期的,如果出現(xiàn)非預期結果,應該再考慮和分析其

可能原因。實驗結論是從實驗結果中歸納出一般的、概括性的判斷,也就是這一實驗所能

驗證的概念、原則或理論的簡明總結。結論中一般不要羅列具體的結果。在實驗中未能得

到充分證據(jù)的理論分析不應寫入結論。

(二)寫報告應注意文字簡練、通暢,書寫整潔、清楚,正確使用標點符號。

(三)實驗的結論和討論的書寫是富有創(chuàng)造性的工作,應該嚴肅認真,不應盲目抄襲

書本,嚴禁抄襲別人的作業(yè)。參考課外讀物,應注明出處。以下為實驗報告的一般格式:

機能學實驗報告

姓名:班次:組別:日期:

實驗序號與題目:

實驗目的:

實驗對象:

實驗結果:

討論和結論:

五、自學及病例討論

人的知識主要是通過自學而獲得的。“學會學習”是學生的重要任務,大學生更應該

重視自學能力的培養(yǎng)。由于機能實驗學成為一門獨立的學科,實驗課不可避免地與有關的

理論課存在著“時間差”。這既是“缺陷”,也是培養(yǎng)同學們的自學能力的機會。因此,

熱切希望同學們能根據(jù)機能實驗學的進程,按照有關理論課的教學大綱進行復習或自學,

以求提高實驗課的質量。病例討論課的目的是培養(yǎng)同學們的臨床思維能力,把學習過的理

論知識運用到實際病例中去,解決臨床實際問題。這包括解釋疾病發(fā)生發(fā)展及臨床表現(xiàn)的

機制、提出合理的藥物治療方案和其它防治措施等。為此,希望同學們能做到以下幾點:

(1)認真預習病例及復習有關的生理學、病理生理學、藥理學的基本理論:

(2)聯(lián)系有關學科(如生物化學、病理學和診斷學等)的知識來分析病例:

(3)按照思考題,認真思考問題;

(4)討論時,要積極發(fā)言,發(fā)言時,要語言簡練,觀點明確,言之有理,言之有據(jù)。

藉此機會,訓練自己的口頭表達能力。

[附]實驗室守則

1.遵守學校紀律,準時到達實驗室并穿好實驗工作服。

2.實驗時應嚴肅認真,不得進行任何與實驗無關的活動。保持實驗室安靜。

3.參加實驗者應熟悉儀器和設備的性能及操作要求,而后動手使用。如遇儀器和設

備故障或損壞,應立即報告指導教師,以便及時維修或更換,千萬不可擅自拆修或調換。

實驗用的動物按組分發(fā),如需補充使用,需經(jīng)教師同意才能補領。

4.各實驗小組的實驗儀器和器材各自保管使用,不得隨意與他組調換娜用:如需補

發(fā)增添時,應向指導教師提出,經(jīng)同意后方能補領。每次實驗后應清點?下實驗器材用品。

5.愛惜公用財物,愛護實驗動物,注意節(jié)約各種實驗器材和用品。

6.保持實驗室清潔整齊,除實驗指導,相應的專業(yè)課教材及原始記錄紙外,不必要

的物品不要帶進實驗室。實驗完畢后,應將實驗器材、用品和實驗桌凳收拾干凈;實驗動

物的尸體及廢物應放到指定的地點,不得隨地亂丟。實驗室的清潔衛(wèi)生工作應由各實驗小

組輪流負責打掃,并最后注意關好水、電、門窗等,經(jīng)指導教師檢查后,方可離開實驗室。

第二章常用的儀器及器械

一、BL-410生物機能實驗系統(tǒng)。

BL-410生物機能實驗系統(tǒng)是一種智能化的四通道生物信號采集、顯示及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),

它具有記錄儀+示波器+放大器+刺激器+心電圖儀等傳統(tǒng)的生理儀器的全部功能。

BL-410生物機能實驗系統(tǒng)以中文操作的windows為基礎,實現(xiàn)全圖形化界面的鼠標操

作,此外還具有自動分析、參數(shù)預置、操作提示、中文顯示、鼠標驅動等功能。

(-)BL-410生物機能實驗系統(tǒng)的主界面及窗口簡介

1.主界面

使用前必須首先熟悉該系統(tǒng)的主界面及主界面上各個部分的用途。進入BL-410生物機

能實驗系統(tǒng)主界面的路徑:

(1)開機:只有當計算機各接口連接完畢后,才能開機。

(2)待進入windows界面后,鼠標雙擊左鍵“BL-410”圖標,顯示“BL-410智能型生

物信號顯示與處理系統(tǒng)”主界面(圖2-1)。

刺激器調節(jié)區(qū)標胸條左、右視分隔條菜單條工具條時間顯示窗口四個切換按鈕

r/w愀書wv恍泗陽丫神曲他州wvwwvMwaww,

<—增益、標尺耀節(jié)區(qū)顯示通道1間的分隔條分時復用區(qū)一>

122O1244143M21H?:12207244M3M214M28610.90732.42

Mark標記區(qū)狀態(tài)條數(shù)據(jù)滾動條及反演按鈕區(qū)特殊突魁標記選擇區(qū)

BL-NewCentury生物信號顯示與處理軟件主界面

總體上主界面從上到下依次分為:標題條、菜單條、工具條、生物信號波形顯示窗口、

數(shù)據(jù)滾動條及反演按鈕區(qū)、狀態(tài)條等6個部分。

主界面中間部分(即“生物信號波形顯示窗口”所處水平)從左到右主要分為:標尺調

節(jié)區(qū)、波形顯示窗口和分時復用區(qū)三個部分。

在左側的標尺調節(jié)區(qū)的上方是刺激器調節(jié)區(qū)。

生物信號顯示窗口的右邊為控制區(qū)和信息區(qū):控制區(qū)從上到下可分為兩個部分:

(1)4個通道的參數(shù)調節(jié)及掃描速度調節(jié)與顯示區(qū);

(2)特殊實驗標記選擇區(qū)。

(二)BL-410生物機能實驗系統(tǒng)使用步驟

1.開機

只有當計算機各接口連接完畢后,才能開機。

2.進入“BL-410智能型生物信號顯示與處理系統(tǒng)”

鼠標雙擊左鍵“BL-410”圖標,顯示主界面。

3.選擇實驗項目

將鼠標拖至主界面上方菜單條的“實驗項目”并單擊左鍵,打開實驗項H下拉式菜單,

選擇實驗的系統(tǒng),再選定具體實驗題目。

4.調節(jié)屏幕顯示方式

根據(jù)實驗要求選擇單通道全屏顯示或多通道同時顯示。如要以全屏方式顯示某通道信

號,只需用鼠標左鍵雙擊該通道任何一部位,即完成單通道的全屏顯示。如要恢復原來的

通道顯示,同樣鼠標左鍵雙擊全屏顯示的任-部位。用鼠標可隨意拖動每個通道間的橫分

隔條以調節(jié)通道的大小。

5.調節(jié)波形顯示的參數(shù)

根據(jù)被觀察信號的大小及波形特點,調節(jié)該通道的增益、濾波及掃描速度,它們的控制

旋鈕都位于位于波形顯示窗口的右側,具體操作如下:

①增益,即信號波形的放大倍數(shù):將鼠標移動到增益控制旋鈕(G)上,單擊鼠

標左鍵可使信號波形幅度增大,相反單擊鼠標右鍵則可使信號波形幅度變小。

②高頻濾波:作用是衰減高頻噪音而讓低頻信號通過。位于增益控制旋鈕的右側,將

鼠標移動到高頻濾波控制旋鈕(F)上,單擊鼠標左鍵可使濾波頻率增高;相反單擊鼠標右

鍵則可使濾波頻率降低。

③時間常數(shù)(低頻濾波):作用是衰減地頻噪音而讓高頻信號通過。將鼠標移動到時

間常數(shù)控制旋鈕(T)上,單擊鼠標左鍵可使濾波頻率增高;相反單擊鼠標右鍵則可使濾波

頻率降低。

④掃描速度調節(jié):將鼠標移動到所調通道的掃描速度調節(jié)區(qū)位置,在綠色柱的右邊單

擊鼠標一次,掃描速度增快一檔;而在黃色柱的左邊單擊鼠標一次,掃描速度減慢一檔;

此時該通道掃描速度顯示也將同時改變。

6.調節(jié)刺激參數(shù)

一般情況下,刺激器的參數(shù)調節(jié)面板以最小化隱藏。當需要調節(jié)刺激參

數(shù)時,用鼠標單擊顯示窗口左側的刺激器調節(jié)區(qū)內“打開刺激器調節(jié)對話框”按

鈕回,這時刺激器的參數(shù)調節(jié)面板將展開在主界面的左方??筛鶕?jù)實驗需要調節(jié),調節(jié)

方法為,用鼠標單擊某項參數(shù)右邊的兩個上、下箭頭為粗調,下邊的兩個左、右箭頭為細

調。根據(jù)實驗的要求,可選擇下列項目:

①刺激方式:有粗電壓、細電壓、粗電流、細電流等;

②刺激形式:單刺激、雙刺激、串刺激等;

③刺激強度;

④刺激波寬;

⑤刺激頻率(或刺激間隔)。

7.施行刺激

實驗中當需要給標本刺激時,用鼠標單擊工具條中的“啟動刺激”按鈕畫;需停

止刺激時,用鼠標再一次單擊該按鈕。

8.作刺激標記

在進行實驗時常需記錄刺激標記,從屏幕的右下角點擊“實驗標記項”,進入特殊實

驗標記選擇區(qū),選擇實驗項目名稱點擊選定后,在屏幕上合適的地方點擊一次,即可打上

相應的刺激標記。

9.結束實驗

當實驗完成需要結束的時候,用鼠標單擊工具條上的“實驗停止命令”鍵回,此

時會彈出一個存盤對話框,提示你給剛才記錄的實驗數(shù)據(jù)輸入文件名(文件名自定),點擊

“保存”。如沒輸入文件名,計算機將以“Temp.dat”作為該實驗數(shù)據(jù)的文件名,并覆蓋

前一次相同文件名的數(shù)據(jù)。

10.實驗結果處理

(1)圖形反演及選擇:實驗結果處理須先將存盤記錄保存的圖形重新播放(即反演)以

供處理。

用鼠標單擊菜單條上的“文件”項,顯示“打開”對話窗口。在文件名表框中找出所

需文件并單擊,即可打開該文件,用鼠標拖動屏幕下方的滾動條進行查找。主界面的右下

角設置有“波形橫向展寬”按鈕附和“波形橫向壓縮”按鈕畫,在反演時,可根據(jù)

實驗的要求,將記錄波形進行展寬或壓縮,以便在一幅圖上獲得較理想的曲線。

(2)圖形剪輯

①在實時實驗過程或數(shù)據(jù)反演中,按下“暫?!卑粹o使實驗處于暫停狀態(tài),按下''圖

形剪輯(右上方剪刀形標記)”按鈕使系統(tǒng)處于圖形剪輯狀態(tài);

②對有意義的一段波形進行區(qū)域選擇,用鼠標選定并按住左鍵拖動鼠標選擇,剪輯區(qū)

域此時被選定區(qū)域變黑,松開左鍵即可進入剪輯頁(剪輯窗口)。

③當進行了區(qū)域選擇以后,圖形剪輯窗口出現(xiàn),上一次選擇的圖形將自動粘貼進入到

圖形剪輯窗口中。

④選擇圖形剪輯窗口右邊工具條上的退出按鈕回,退出圖形剪輯窗口。

⑤重復上述步驟,剪輯其它波形段的圖形,然后拼接成?幅整體圖形,此時可以打印

或存盤。

(3)輸入實驗組號及實驗人員名單

實驗完成,需要在實驗結果上打印實驗組號及實驗人員名單。輸入方法為:用鼠標單

擊菜單條上的“編輯”項,彈出菜單,選擇“實驗人員名單編輯”項并單擊,屏幕上將顯

示“實驗人員及實驗組號”輸入對話框,用鍵盤輸入實驗人員名單及組號,最后按“OK”

即可。

(4)打印

在圖形剪輯頁中,用鼠標單擊“打印”按鈕,即可由打印機打印出一張剪輯后的圖形。

(三)BL-410生物機能實驗系統(tǒng)使用注意事項:

(1)在開機狀態(tài)"切忌插入或拔出計算機各插口的連線。

(2)切忌液體滴入計算機及附屬設備內。

(3)未經(jīng)允許,不得隨意改動計算機系統(tǒng)的設置。

(4)在實驗開始記錄時,注意是否在記錄狀態(tài)下(記錄按鈕是否已變紅),否則數(shù)據(jù)存盤

沒有進行,反演時無記錄圖形數(shù)據(jù)。

(5)未經(jīng)許可不得自帶軟盤上機操作。

二、721型分光光度計(圖2-4)

1、原理:溶液中的物質在光照時對光有吸收作用,物質對光吸收具選擇性,不同的物

質都具各自的吸收光譜。當某單色光通過溶液時,其能量就會被溶液中對其具有選擇性吸

收功能的物質所吸收而減弱。光能量減弱的程度(即被吸收的程度)與物質的濃度和數(shù)量

成一定比例關系,即符合比色原理:比耳(Beer-lamebert)定律:E=KCL?E-消光度(吸

光度),1廠溶液的光徑長度(比色杯厚度),C-溶液濃度。

2、主要結構

由下列幾部分組成:光源、單色器、狹縫、樣品池、檢測系統(tǒng),如圖2-5所示。

圖2-4721型分光光度計

1讀數(shù)表頭:2比色皿暗箱:3電源開關:4比色皿座架拉桿;5光量調節(jié)器;

6."O"電位鈕:7波長選擇鈕:8靈敏度檔

圖2—5分光光度計基本結構

3、使用方法如下:

(1)打開電源開關,使儀器預熱20min。

(2)根據(jù)實驗要求,轉運波長選擇鈕,選用所需的波長。

(3)調節(jié)“0”點,輕輕旋動“0電位鈕”,使表頭指針讀數(shù)恰好在透光度為“0處”。

(4)將盛空白溶液的比色杯放入比色杯架中的第一格內,把比色杯暗箱蓋子輕輕蓋上,

轉運光量調節(jié)器,使表頭指針指在透光度為“100”處。

(5)將盛有待測溶液的比色杯放入比色杯架中的其他格內,蓋上暗箱蓋,拉動比色杯

架的拉桿,使測定杯進入光路,此時表頭指針所示即為該待測溶液的吸光度A。讀數(shù)后,

打開比色杯暗箱蓋切斷光源。

重復上述測量操作12次,讀取相應的吸光度,取其平均值。

(6)比色完畢后,關上電源開關,取出比色杯,將比色杯暗箱蓋好,清洗比色杯并

晾干.一.?.

(一)鋅銅弓(圖2-6)

鋅銅弓是簡單的電刺激器,常用來檢驗神經(jīng)肌肉

標本的興奮性。鋅銅弓有兩臂(即刺激電極),由鋅或銅制

成。使用時將鋅銅弓的兩臂先濕少許任氏液,然后輕輕地同

時接觸被檢查的神經(jīng),即可產(chǎn)生微弱的電刺激。此時銅臂帶

正電,鋅臂帶負電,兩臂通過被檢組織形成了“接觸電位差。

(-)電子刺激器

電子刺激器?般為電脈沖刺激儀,其輸出脈沖的寬度、

幅度、頻率、間隔等都能準確地進行定量控制,故為機能實

驗中刺激組織的最常用儀器。

(三)刺激電極(圖2-7)

1.普通雙極電極

該電極由兩根金屬絲安裝在一絕緣桿內組成,一端通過導線與電子刺激器輸出端相連,

另端的金屬絲裸露少許,以便與組織接觸而施加刺激。

2.保護電極

保護電極是將金屬絲包埋在絕緣物內,一端通過導線與電子刺激器輸出端相連,另一

端挖有空槽,金屬絲在槽內裸露少許接觸組織以便刺激,保護電極一方面可刺激擬受刺激

的組織(如神經(jīng)千),同時不會刺激周圍的其他組織而起到所謂的保護作用。

四、常用手術器材

在機能實驗中所使用的手術器械,基本上與人用外科手術器械相同。但也有些外科器

械是給動物手術時使用的?,F(xiàn)將常用的手術器械及其用法,簡介于下:

1.手術刀主要用于切開和解剖組織??筛鶕?jù)手術部位與性質,更換大小不同的刀

片.手術刀片有圓、尖、彎刃及大、小、長、短之分。手術刀柄也有大小及長短之分。另

有一類手術刀柄與刀片連在一起的,也有圓刃、尖頭及眼科手術刀(柳葉刀)之分。常用

的執(zhí)刀方法有兩種(圖2-8):

(1)執(zhí)弓式為最常用的一

種執(zhí)刀方式,動作范圍廣而靈

活,用于腹部、頸部或股部的皮

膚切口。

(2)執(zhí)筆式用于切割短小圖2-8執(zhí)刀方法A,執(zhí)弓式B.執(zhí)筆式

的切口,用力輕柔而操作精確。

如解剖血管、神經(jīng),作腹膜小切口等。

2.剪刀

(1)手術剪主要用于剪皮膚或肌肉等粗軟組織。此外也可用來分離組織,即利用剪

刀的尖端插入組織間隙,分離無大血管的結締組織等.手術剪分尖頭剪和鈍頭剪,其尖端

有直、彎之別.另外還有一種小型手術剪,叫眼科剪,主要用于剪血管或神經(jīng)等柔軟組織,

眼科剪也有直頭與彎頭之分,正確的執(zhí)剪姿勢如圖2-9所示,即用拇指與無名指持剪,食

指置于手術剪上方。

(2)粗剪刀用于蛙類實驗中的剪骨、肌肉和皮膚等粗硬組織。

3.手術鎰主要用于夾住或提起組織,以便于剝離,剪斷或縫合。手術鎰分有齒和無

齒兩種,并且長短不一。有齒鑲用于夾持較堅韌的組織,如皮膚、筋膜、肌腆等。無齒鑲

用于夾持軟脆弱的組織,如血管、神經(jīng)、粘膜等。正確的執(zhí)鎰方法如圖2T0,即以拇指對

食指和中指,輕、穩(wěn)和用力適當?shù)匕殉纸M織。

圖2-9執(zhí)剪姿勢E2.10執(zhí)躡方法

4.血管鉗(止血鉗)主要用于鉗夾血管或出血點,以達到止血的目的。也用于分離

組織,牽引縫線,把持和拔出縫針等執(zhí)血管鉗的姿勢與執(zhí)手術剪姿勢相同.開放血管鉗的

手法是:利用右手已套入血管鉗環(huán)口的拇指與無名指相對擠壓,繼而以旋工的動作開放血

管鉗。

血管鉗按手術所需分直、彎、有齒、長柄、無損傷以及大中小等各類型。例如直血管

鉗用于手術野淺部或皮下止血;彎血管鉗用于較深部止血;蚊式血管鉗用于精確的止血和

分離組織。

5.骨鉗打開顱腔和骨髓腔時用于咬切骨質。

6.顱骨鉆開顱時鉆孔用。

7.金屬探針專門用來毀壞蛙類腦和脊姍的器械,分為針柄和針部。

8.玻璃解剖針專用于分離神經(jīng)與血管等組織。有直頭與彎頭,尖端圓滑。

9.蛙心夾使用時一端夾住心尖,另一端借縛線連于杠桿,以進行心臟活動的描記.

10.蛙板約為20X15厘米的木板,用于固定蛙類,可用大頭針將蛙腿釘在板上,

以便進行實驗。

11.動脈夾用于阻斷動脈血流。

12.氣管插管急性動物實驗時插入氣管,以保證呼吸暢通口。

13.血管插管動脈插管在急性動物實驗忖插入動脈,在哺乳類動物實驗中,另一端

接壓力換能器,以記錄血壓,插管腔內不可有氣泡,以免影響結果,靜脈插管還可用于向

動物體內注射藥物和溶液。

各種手術器械使用結束后,都應及時清洗。齒間軸節(jié)間的血跡和污物用小刷在水中擦

洗,后用干布擦干,忌用火焰烘干或作重擊用,以免鍍銀層剝脫生銹。久置不用的金屬器

械還需擦油劑加以保護。

第三章動物實驗的基本操作技術

一、實驗動物的選擇

“實驗動物”是指供生物醫(yī)學實驗而科學育種、繁殖和飼養(yǎng)的動物。高質量的實驗動

物是指通過遺傳學與微生物學的控制,培育出來的個體:這些個體具有較好的遺傳均,性,

對外來刺激的敏感性和實驗再現(xiàn)性。

(-)一般原則

1.年齡體重相當幼齡動物對藥物比較敏感,老齡動物代謝緩慢,生理功能低下,?般

機能實驗均應采用成年動物。常用動物成年時的體重為;小鼠18-28g,大鼠180-280g,

家免2-3kg。同-實驗的動物應當年齡?致,體重相近,相差小于10%”。

2.雌雄動物各半不同性別動物對藥物的敏感性有一定差異,雌鼠對藥物的敏感險稍大

于雄鼠。如無待殊要求,一般實驗宜選壓雌雄動物各50%。

3.健康狀況良好體弱有病的動物對各種刺激耐受性小.實驗結果不穩(wěn)定。饑餓、寒冷

與炎熱等環(huán)境條件也會影響動物的生理變化;懷孕期與喃乳期的動物對外界刺激的反應常

常有變化,在一股實驗研究中應鑒別剔除。

4.注意生物節(jié)捷動機機體的反應性有節(jié)律性變化。體溫、血糖、基礎代謝率和激素分

泌等也有晝夜節(jié)律性變化.

(二)常用實驗動物的特點

1.蟾蛛和蛙它們的離體心臟能較持久地、有節(jié)律地搏動,常用于藥物對心臟作用;坐

骨神經(jīng)膝腸肌標本可用于引導動作電位或觀察骨骼肌的收縮變化。

2.小鼠適應于需要大量動物的實驗,如篩選藥物、半數(shù)致死量等,但不同品系的小鼠

對同一刺激的反應性差異較大。

3.大鼠與小鼠相似,但大鼠的實驗動物模型較穩(wěn)定。另外,一些在小鼠身上不便進行

的實驗可選用體形較大的大鼠。如用于胃酸分泌、胃排空、水腫、炎癥、休克等研究。

4.家兔常用于藥物或其他條件對心臟、血壓、呼吸的影響及有機磷農(nóng)藥中毒和解救的

實驗。

5.豚鼠性情溫順。因其對組胺敏感,并易于致敏,故常選用于抗過敏藥如平喘藥和抗

組胺藥的實驗。又因它對結核菌敏感,故也常用于抗結核病藥的治療研究。也常用于離體

心房、心臟實驗和鉀代謝障礙、酸堿平衡紊亂的研究。

二、實驗動物的捉持法、給藥法及取血法

(-)動物的捉持方法

1.蛙和蟾蛛通常以左手握持.用食指按其頭部使略向前屈,拇指按住其背部,其余

三指則按住它的四肢和腹部;右手持金屬探針,即可用探針刺入枕骨大孔.以破壞腦和脊

翻(圖3-1).

2.小白鼠以右手提起鼠尾,將小鼠放于籠蓋或其它粗糙面上,將鼠尾向后輕拉,使

小鼠前肢固定于粗糙面上。此時迅速用左手拇指和食指捏住小鼠頸背部皮膚,并以小指與

無名指夾持其尾根部,固定于手中(圖3-2).

圖3-1蟾妹的捉持法及破環(huán)腦脊髓圖3-2小白鼠捉持法

3.大白鼠將大鼠放于粗糙面上,用右手拉其尾部,左手戴保護手套,以拇指和食指

握住頭部,其余三指握住背腹部。對于身體特大或兇狠易咬人的大鼠,可先以布巾包裹全

身,露出口、鼻.然后進行操作。

4.家兔一只手抓住頸背部皮膚,將兔輕輕提起,另一只手托住臀部,使呈蹲坐姿勢,

切忌提拿雙耳(圖3-3)。

圖3-3家兔促持法

5.狗馴服的狗可戴上特制嘴套,用繩帶固足于頸部;兇暴的狗可用長柄捕狗頭鉗住

狗的頸部,然后套上嘴套。狗嘴也可用繩帶固定,操作時先將繩帶繞過狗嘴的下領打結,

再繞到頸后部打結,以防繩帶滑脫。

6.豚鼠的捉持豚鼠性情溫和,不咬人,用手輕輕握住身體即可抓起。

(-)常用實驗動物的給藥方法

1.經(jīng)口給藥法

此法有口服與灌胃兩種方法。適用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬等動物。口服法可將

藥物放入飼料或溶于飲水中令動物自由攝取。若為保證劑量準確,可應用灌胃法。

小鼠

以左手捉持小鼠,使腹部朝上,右手持灌胃器(以1-2ml注射器上連接細玻管或把注

射針頭磨鈍制成),灌胃管長4-5cm,直徑1mm。行、

先從小鼠口角插入口腔內,然后沿著上額壁輕輕插枝[v3

入食道,稍感有阻力時(大約灌胃管插入1/2),相S

當于食道過隔肌的部位。此時,即可推動注射器,9|年汰

進行灌胃(圖3-4)。若注射器推動困難,應重插-工妾9

若插入氣管給藥.可使小鼠死亡.注藥后輕輕拔出、q

灌胃管,一次投藥為0.卜0.3ml/10g體重。\a

用左手以捉持法握住大鼠(若兩人合作時,助

圖3-4小白鼠與大白鼠諄胃法

手捉持大鼠用右手抓住后肢和尾已),灌胃方法與

小鼠相類似,僅采用安裝在5-10ml注射器上的金屬灌胃管(長6-8cm,直徑1.2mm,尖

端為球狀的金屬灌胃管)。一次投藥量為1-2ml/100g體重。

豚鼠

(1)口服(適用于固體劑型藥物)

把豚鼠放在金屬網(wǎng)上,以左手掌從背部握住豚鼠的頭頸部而固定之,以拇指和食指壓

迫其口角部使口張開。用鏡子夾住藥物,放進豚鼠舌根部的凹處,使其迅速閉口而咽下。

當證實藥物被咽下后即可放開豚鼠。

(2)灌胃(適用于液體劑型藥物)

①助手以左手從動物的背部把后腿伸開,并把腰部和后腿一起固定,用左手的拇指和

食指捏住兩前腿固定之。實驗者以右手所持的豚鼠用灌胃管沿動物上額壁滑行插入食道,

進而插入胃給藥。

②用木或竹制開口器,把導尿管或直徑1cm尼龍管經(jīng)開口器中央的孔插入胃內給藥。

上述兩種方法皆需稍回抽一下注射器的內拴.證實注射器內無空氣時,再慢慢注入藥

液,最后注入生理鹽水1-2ml,沖盡管內藥液,保證劑量的準確。

(1)口服(適用于固體劑型的藥物):將貓固定,扒開上下額的齒列,啟開貓嘴,用

鑲子夾住藥物,放在舌根部,迅速封合上下額,即可咽下藥物。特別馴服的貓,輕輕固定

全身,將頭號向上方拉,張開口,用鑲子將藥物放到舌根部即可.兇暴的貓必須用固定后

給藥。無苦味的能溶于水的藥物,也可混入飼料中.任其自己攝入。

(2)管或直徑1?的尼龍管從鼻腔或U腔插入食道內給藥。

固體劑型藥的口服法與豚鼠基本相同。液體劑型藥物灌胃法需兩人合作。一人坐好,

兩腿將兔身夾住,右手抓住雙耳,固定頭部,手抓住雙前肢。另一人將木或竹制開口器壓

下舌頭,以導尿管經(jīng)開口器中央小孔慢慢沿上額壁插入食道約5-6寸長,將導尿管端置于

一杯清水中,若無氣泡冒出,說明導尿管沒有插入氣管,這時即可用注射器抽取需要量藥

液從導尿管灌入兔胃。然后用3-5ml清水沖洗導尿管后,抽出導尿管,取出開口器。

(1)口服(適用于固體劑型藥物):其口服給藥法與貓相似,但犬較易傷人,因此,

先用鐵制犬夾夾住頭頸部,以強栓住嘴,一人以雙手抓住犬的雙耳,兩腿夾住犬身固定,

解開栓嘴繩,山另一人用木制開口器將舌壓住,用鑲子夾住藥物從開口器甲央置于犬的舌

根部后,迅速取開開口器,使犬舌下藥物給藥前若先以水濕潤口腔內部,更易吞下藥物。

(2)灌胃(適

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