甲型肝炎病毒抗體電化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒說明書ElecsysAnti-HAVElecsys2010/MODULARANALYTICSE17011820605100人份【名稱】通用名：甲型肝炎病毒抗體電化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒英文名：ElecsysAnti-HAV漢語拼音：Jiaxingganyanbingdukangtidianhuaxuefaguangjianceshijihe【使用目的】用免疫學(xué)方法定量測定人血清或血漿中的甲型肝炎病毒總抗體。甲型肝炎病毒抗體檢測有助于檢測過去或現(xiàn)在的甲肝病毒感染，觀察甲肝疫苗注射后的免疫反應(yīng)。電化學(xué)發(fā)光免疫測定試劑，適用于羅氏Elecsys2010和MODULARANALYTICSE170免疫測定分析儀。【概述】甲肝病毒是一種沒有胞膜的RNA病毒。它屬于細(xì)小的核糖核酸病毒家族。至今，僅1種人血清型和7種基因型被記述。病毒衣殼由三種蛋白(VP1-VP3)組成，在病毒顆粒表面形成一個免疫決定簇結(jié)構(gòu)，它被高度表達(dá)在所有基因型。在注射疫苗后或正常感染后這個結(jié)構(gòu)誘發(fā)免疫反應(yīng)1。甲型肝炎是最普通的急性病毒性肝炎，通過消化道傳播。這種肝炎不會發(fā)展成慢性肝炎，病毒也不會持續(xù)存在組織中2。甲型肝炎病毒是引起病毒性肝炎爆發(fā)流行的最常見原因(10-20%)3。甲型肝炎感染發(fā)作時總的甲型肝炎抗體呈陽性。在自然感染后，抗HAV-IgG抗體能夠終生存在，如果組織再次感染會對機(jī)體起到保護(hù)作用4?，F(xiàn)在已經(jīng)有甲肝病毒疫苗和甲肝和乙肝混合疫苗5。在注射甲肝疫苗后,抗HAV-IgG抗體兩周后就可以檢測到。在完全免疫過程中，這種保護(hù)作用可以持續(xù)很多年6。免疫保護(hù)作用對于抗體值沒有限定，但是抗HAV濃度在10-20IU/L以上對機(jī)體有保護(hù)作用?？笻AV抗體檢測用于檢查甲型肝炎病毒存在或過去感染過。同時也用于觀察甲肝疫苗注射后的免疫反應(yīng)?！驹怼扛偁幏ǎ嚎倷z測時間18分鐘?！さ?步孵育：50μl標(biāo)本；標(biāo)本中的抗-HAV與HAV抗原結(jié)合。·第2步孵育：加入生物素化的和釕標(biāo)記的抗HAV抗體以及鏈霉親和素包被的微粒，HAV抗原上仍然游離的位點(diǎn)被占據(jù)。形成的免疫復(fù)合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。·反應(yīng)混和液吸到測量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管進(jìn)行測定。·檢測結(jié)果由機(jī)器自動從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。此曲線由儀器通過2點(diǎn)定標(biāo)校正，由從試劑條形碼掃描入儀器的原版標(biāo)準(zhǔn)曲線而得?！驹噭┲饕煞荨縈：鏈霉親和素包被的微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml：鏈霉親和素包被的微粒：0.72mg/ml，生物素結(jié)合能力：470ng生物素/mg微粒。含防腐劑。R1：HAV抗原（灰蓋），1瓶，10ml：HAV抗原(人)：40U/ml（羅氏單位），HEPES緩沖液50mmol/l，pH7.2，含防腐劑。R2：生物素化的抗HAVAg抗體；Ru(bpy)32+標(biāo)記的抗HAVAg－Ab（黑蓋），1瓶，10ml：生物素化的抗HAVAg單克隆抗體(鼠)：0.25ug/ml；Ru(bpy)32+標(biāo)記的抗HAVAg單克隆抗體(鼠)：0.15ug/ml；HEPES緩沖液50mmol/l，pH7.2，含防腐劑。Cal1定標(biāo)液1（白蓋），2瓶，1.0ml/瓶：抗HAV陰性人血清,含防腐劑。Cal2定標(biāo)液2（黑蓋），2瓶，1.0ml/瓶,抗HAV（人）濃度約46IU/L在人血清中,含防腐劑?！绢A(yù)防措施和警告】僅用于體外診斷。采用正確的預(yù)防措施，遵照實驗室試劑使用規(guī)定。所有廢物的丟棄應(yīng)遵循當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)的要求。定標(biāo)液（Cal1和Cal2）制備使用的獻(xiàn)血者血清經(jīng)FDA批準(zhǔn)的方法檢定HBSAg、HCV抗體、HIV1＋2抗體均為陰性。含有Anti-HAV(定標(biāo)液2)和HAV-Ag(人,R1)的血清使用β-丙稀內(nèi)酯和UV射線低溫消毒。但由于任何實驗方法都不能絕對地排除潛在感染的危險，故該產(chǎn)品仍需視作病人標(biāo)本一樣仔細(xì)處理。一旦泄漏，應(yīng)遵循權(quán)威機(jī)構(gòu)的指令7，8。超過保質(zhì)期后，不能再使用?！驹噭┦褂谩?/p>

試劑盒為即用型,提供的試劑瓶與分析系統(tǒng)是相容的。Elecsys2010：定標(biāo)物Cal1和Cal2只有在定標(biāo)過程中才被放在分析儀上(在20-25°C)。定標(biāo)物用完后,應(yīng)立即蓋好瓶蓋并儲存在2-8°C。確保在打開蓋子后沒有定標(biāo)物粘在蓋子上。因為可能會揮發(fā)，每瓶定標(biāo)液定標(biāo)次數(shù)不宜超過5次。E170：除非在E170上定標(biāo)需要全部容量，否則將部分準(zhǔn)備使用的定標(biāo)液裝入空的帶標(biāo)簽的有蓋小瓶（CALSET），并將提供的標(biāo)簽貼在分裝的其余小瓶上。儲存在2－8°C。每瓶分裝物只用作一次定標(biāo)。所有必要的操作信息,可分別通過試劑的二維條碼讀取。【儲存和穩(wěn)定性】存放在2－8℃。為了確保使用前自動混勻期間有足夠量的磁性微粒,Anti-HAV試劑盒（M,R1,R2）儲存,切莫倒置。2－8℃下未開封，可穩(wěn)定至標(biāo)明的保質(zhì)期。M，R1，R2試劑開封后：2－8℃,8周；在E170和Elecsys2010上：20－25℃，8周；Cal1和Cal2開封后：2－8℃,8周；在Elecsys2010上（20－25℃）：最多5小時在E170上：一次性使用注意：定標(biāo)液要垂直保存。確保定標(biāo)液不污染瓶蓋?！緲?biāo)本采集和準(zhǔn)備】標(biāo)本只有按照下列方法收集、檢測才能被接受。血清標(biāo)本采集用標(biāo)準(zhǔn)樣本試管或含分離膠的試管。血漿：肝素(Li-,Na-)、K3－EDTA或枸櫞酸鈉抗凝。關(guān)于使用含分離膠試管的血清的穩(wěn)定性的資料,要注意試管制造商提供的資料。（標(biāo)準(zhǔn):血清值的批內(nèi)回收率90-110%或斜率0.9-1.1+相關(guān)系數(shù)>0.95+批內(nèi)干擾±2×分析靈敏度(LDL)）。標(biāo)本在2－8℃可穩(wěn)定7天，-20℃可穩(wěn)定3個月。標(biāo)本可凍融6次9。凍融樣本和含沉淀的標(biāo)本使用前需離心。不要加熱滅活標(biāo)本。標(biāo)本和質(zhì)控品禁用疊氮鈉作穩(wěn)定劑。確保病人樣本、定標(biāo)物、質(zhì)控物在測試前溫度達(dá)到室溫20-25℃.因為可能揮發(fā)的影響,放在分析儀上的樣本、定標(biāo)物、質(zhì)控物應(yīng)在兩小時內(nèi)測試完?！緳z測步驟】提供的材料：貨號：11820605，100人份的Elecsys抗HAV試劑盒包含：·M 鏈霉親和素包被的微?！1 HAVAg·R2 生物素化的抗HAVAg抗體，三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記的抗HAVAg抗體·Cal1 定標(biāo)液1·Cal2 定標(biāo)液2·2×6 小瓶標(biāo)簽需要的材料（未提供）：·Elecsys抗HAV質(zhì)控品1和2，每個8×1.0ml,貨號11876350·Elecsys甲型肝炎稀釋液，2×15ml樣本稀釋液，貨號11361252·Elecsys定標(biāo)液小瓶，2×56帶蓋空瓶，貨號11776576·常用實驗室設(shè)備·Elecsys2010或MODULARANALYTICSE170Elecsys2010分析儀需要:·Elecsys系統(tǒng)緩沖液（ProCell）,6×380ml，貨號11662988·Elecsys測量池清洗液（CleanCell），6×380ml，貨號11662970·Elecsys添加劑液（SysWash），1×500ml，貨號11930346·Elecsys系統(tǒng)清洗液支架（AdapterforSysClean），貨號11933159·Elecsys2010反應(yīng)杯（AssayCup），60×60，貨號11706802·Elecsys2010吸樣頭（AssayTip），30×120，貨號11706799MODULARANALYSISE170分析儀需要:·Elecsys系統(tǒng)緩沖液（ProCellM）,1×2L,貨號12135019·Elecsys測量池清洗液（CleanCellM）,1×2L,貨號12135027·Elecsys系統(tǒng)緩沖液/測量池清洗液預(yù)熱杯（PC/CC-Cup）,50個,貨號03023141【參考文獻(xiàn)】RobertsonBH,NainanOV.GeneticandantigeneticvariantsofhepatitisAvirus.In:ViralHepatitisandLiverDisease.Eds:RizzetoM,PurcellRH,GerinJL,VermeG,EdizioniMinervaMedica,Turin1997;14–18.KoffRS.HepatitisA.Lancet1998;341:1643–49.LemonML,DaysSL.TypeAhepatitis.In:GorbachS,BartlettJG,BlacklownNL(eds).In-fectiousDiseases.SaundersWB,Philadelphia,1992;705–708.StapletonJT.HostImmuneResponsetoHepatitisAVirus.JID1995;171(Suppl1):9-14.AmbroschF,WiedermannG,AndréFE,DelemA,GregorH,HofmannH,et.al.ClinicalandImmunologicalInvestigationofaNewCombinedHepatitisAandHepatitisBVaccine,JMedVirol1994;44:452–456.DoblerG,NitschkoH,Fr?snerGG,LangerBCA.HepatitisA:MedizinischeBedeutung,Klinik,Diagnostik,AussagewertdiagnostischerVerfahren.In:Fr?snerG(Hrsg.).ModerneHepa-titisdiagnostik,KilianVerlag2001;19–30,2ndedition.DepartmentofLabor,OccupationalSafetyandHealthAdministration-29CFRPart1910.1030-OccupationalSafetyandHealthStandards.BloodbornePathogens