2025屆廣東省新興第一中學(xué)高三第五次模擬考試生物試卷注意事項(xiàng)1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1．某高等雄性動物（2n=6、XY型）的基因型為AaBb，下圖表示其體內(nèi)某細(xì)胞分裂示意圖，敘述正確的是（）A．該細(xì)胞正處于減數(shù)第二次分裂的后期，有6條染色體B．該細(xì)胞中染色體①、②分別為性染色體X、YC．形成該細(xì)胞過程中發(fā)生了基因突變和染色體變異D．該細(xì)胞分裂形成的配子基因型為aBX、aBXA、AbY、bY2．狂犬病病毒是一種嗜神經(jīng)病毒，可由神經(jīng)-肌肉接點(diǎn)處入侵神經(jīng)細(xì)胞，過程如圖所示。目前疫苗接種是預(yù)防和控制狂犬病發(fā)病最有效的措施。下列選項(xiàng)正確的（）A．狂犬病病毒與乙酰膽堿（興奮型神經(jīng)遞質(zhì)）的受體結(jié)合，有利于興奮的傳遞B．吞噬細(xì)胞吞噬侵入人體的部分病毒，此過程屬于人體第三道防線發(fā)揮作用C．人被咬傷后可注射狂犬疫苗，以刺激T細(xì)胞產(chǎn)生抗體直接消滅病毒D．狂犬病病毒被胞吞進(jìn)入突觸小體并沿著軸突逆行，與神經(jīng)沖動傳導(dǎo)方向相反3．下列關(guān)于生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能的敘述，正確的是（）A．可以利用樣方法調(diào)查陸地某群落中植物的物種豐富度B．所有生態(tài)系統(tǒng)中各營養(yǎng)級的生物數(shù)量與能量均為正金字塔形C．生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)是指生態(tài)系統(tǒng)的食物鏈和食物網(wǎng)D．抵抗力穩(wěn)定性低的生態(tài)系統(tǒng)，其恢復(fù)力穩(wěn)定性一定高4．下列有關(guān)噬菌體侵染細(xì)菌的過程，敘述正確的是（）A．35S和32P標(biāo)記同一個噬菌體，通過上清液和沉淀物放射性的差異證明DNA是遺傳物質(zhì)B．噬菌體DNA含n個堿基，轉(zhuǎn)錄得到的mRNA堿基數(shù)一定為n/2個C．噬菌體在細(xì)菌內(nèi)繁殖的過程中存在氫鍵的斷裂和形成D．一個15N標(biāo)記的噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌，繁殖多代最終獲得均被15N標(biāo)記的噬菌體5．有關(guān)神經(jīng)細(xì)胞的敘述，正確的是（）A．神經(jīng)細(xì)胞中的大部分ATP在線粒體基質(zhì)產(chǎn)生B．突觸小泡受刺激后釋放神經(jīng)遞質(zhì)不消耗ATPC．興奮可從一神經(jīng)元樹突傳導(dǎo)至同一神經(jīng)元的軸突D．神經(jīng)元受刺激興奮后恢復(fù)為靜息狀態(tài)不消耗ATP6．下圖為甲、乙兩種遺傳病的遺傳系譜圖，其中Ⅱ-4不含甲病治病基因，乙病在人群中的發(fā)病率為1/625。下列敘述正確的是（）A．乙病為伴X染色體隱性遺傳病B．Ⅲ-10的致病基因來自Ⅰ-1C．若Ⅱ-5和Ⅱ-6再生一個孩子，只患一種病的概念為5/8D．若Ⅲ-11與某正常男性婚配，后代患兩病的概率為1/312二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）果蠅（2N=8）的體色灰身和黑身受一對等位基因控制（用A和a表示），其眼色受位于另一對等位基因控制（用B和b表示），現(xiàn)有兩只雌雄果蠅為親本進(jìn)行雜交，雜交后代F1的表現(xiàn)型比例為：灰身白眼（雄性）：灰身紅眼（雌性）：黑身白眼（雄性）：黑身紅眼（雌性）=3：3：1：1，回答下列問題：（1）果蠅的一個精細(xì)胞的染色體組成可表示為___________________________，測定果蠅的一個基因組需要測定_____________條染色體上的堿基序列。（2）親本果蠅的基因型為____________________________________。選擇F1中的灰身雌雄果蠅進(jìn)行自由交配，則交配后后代灰身紅眼雌性個體所占的比例為__________。（3）若親本的雌雄果蠅中的A基因所在的染色體都缺失了一個片斷，（缺失片斷不包含A基因），含有片斷缺失的染色體的卵細(xì)胞無法參與受精，而對精子無影響，則該親本果蠅隨機(jī)交配兩代，產(chǎn)生的F2中灰身果蠅：黑身果蠅=____________。8．（10分）Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T利用胚眙干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療，其技術(shù)流程如圖（圖中數(shù)字序號表示的是相關(guān)過程）。請回答:（1）過程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于__________________時期。（2）過程②利用的技術(shù)是____________________，當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其_________分離出ES細(xì)胞。（3）過程③中獲取的目的基因是____________________，若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，需要構(gòu)建_______________________，構(gòu)建之前可以根據(jù)_______________________設(shè)計引物，利用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。為了檢測ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用______________技術(shù)。（4）按此方法和圖示技術(shù)流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________和耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）等。通測Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用__________________進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。9．（10分）某種質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，它們的識別序列和黏性末端各不相同，該質(zhì)粒同時含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因?？茖W(xué)家利用此質(zhì)粒培育轉(zhuǎn)基因抗鹽作物，提高糧食種植面積取得重大進(jìn)展。其培育過程如下圖，請回答下列問題。（1）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應(yīng)選用________兩種酶對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割，以保證重組質(zhì)粒序列的唯一性。（2）基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，下圖表示運(yùn)用影印培養(yǎng)法（使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法）檢測重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入了土壤農(nóng)桿菌。培養(yǎng)基除了含有土壤農(nóng)桿菌生長繁殖必需的成分和瓊脂外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還要含有______、______________。從檢測篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是____（填數(shù)字）菌落中的細(xì)菌。（3）為了確定抗鹽作物是否培育成功，要用__________標(biāo)記的含抗鹽基因的DNA片段作探針進(jìn)行分子雜交檢測，還要從個體水平用__________（方法）鑒定作物的耐鹽性。（4）將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的工程細(xì)胞培育成完整植株需要用組織培養(yǎng)技術(shù)，組織培養(yǎng)技術(shù)依據(jù)的原理是________________________。（5）將抗鹽基因?qū)胱魑锛?xì)胞內(nèi)，使作物具有了抗鹽性狀，這種變異類型屬于_________。10．（10分）科學(xué)家發(fā)現(xiàn)將外源生長激素基因?qū)司d羊體內(nèi)后，轉(zhuǎn)基因綿羊的生長速率比普通綿羊提高30%，體型增大50%?；卮鹣铝袉栴}。（1）若要獲得豬的生長激素基因，應(yīng)從豬的______________________內(nèi)提取mRNA作為模板，不能從豬其他細(xì)胞提取mRNA的原因是_____________________。以mRNA為模板，在___________酶的催化下合成cDNA，然后利用_____________________技術(shù)在體外大量擴(kuò)增生長激素基因，該技術(shù)消耗的原料是dCTP、dATP、dGTP、dTTP，而不是4種脫氧核苷酸，推測原因是______________________。（2）將生長激素基因?qū)刖d羊的_____________________（細(xì)胞）之前，需要先構(gòu)建________。該過程用到的工具酶是_____________________。（3）為了檢測獲得的轉(zhuǎn)基因綿羊中外源生長激素基因是否表達(dá)，在分子水平上，可采用的方法是______________________；在個體水平上，可以采用的鑒定方法是____________________。11．（15分）科研人員利用基因編輯技術(shù)刪除小鼠母本基因組的相關(guān)印記區(qū)域，培育出了由母本單倍體干細(xì)胞融合發(fā)育而來的孤雌生殖小鼠，為探索生殖奧秘作出了貢獻(xiàn)。過程見下圖：（1）上圖孤雌小鼠的獲得，用到動物細(xì)胞培養(yǎng)_________、_________、_________胚胎移植等生物技。（2）孤雌小鼠培育過程中需要用基因編輯技術(shù)刪除母本基因組的相關(guān)印記區(qū)域。為了檢測刪除是否成功，在分子水平需要應(yīng)用______________________________技術(shù)進(jìn)行檢測。（3）常用的基因編輯系統(tǒng)是crispr-cas9，其過程為：先讓一段RNA與特征DNA序列結(jié)合，由此引導(dǎo)Cas9酶對特征DNA序列切割。因?yàn)椤耙欢蜶NA”能與特征DNA序列_________，才能特異性結(jié)合。Cas9酶作用于特征DNA序列的____________________（填DNA分子的相關(guān)結(jié)構(gòu)）。（4）上圖中的“卵母細(xì)胞”應(yīng)處于________________（時期）。應(yīng)用卵母細(xì)胞培育孤雌小鼠容易成功，其原因是_______________________。并且由上述卵母細(xì)胞發(fā)育而來的胚胎能在代孕母鼠體內(nèi)存活的原因是____________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1、D【解析】

該題主要考察了細(xì)胞分裂過程中發(fā)生變異的情況，首先需要根據(jù)圖示判斷細(xì)胞的分裂方式，由于存在同源染色體彼此分離的現(xiàn)象，所以推測該細(xì)胞處于減數(shù)第一次分裂后期，圖示顯示了A/a、B/b的位置關(guān)系，可以發(fā)現(xiàn)其中一個A基因所在的片段易位到了非同源染色體上，所以該過程發(fā)生了染色體變異。【詳解】A、該細(xì)胞中正在發(fā)生同源染色體的分離，應(yīng)該屬于減數(shù)第一次分裂后期，A錯誤；B、題干表示，該動物為雄性，其體內(nèi)的性染色體組成為XY，X和Y雖然屬于同源染色體，但形態(tài)和大小并不相同，所以可以判定中間的一對染色體為性染色體，①、②的形態(tài)相同，應(yīng)該為常染色體，B錯誤；C、由于在圖示中其中一個A基因發(fā)生了易位，因此存在染色體變異，但基因型依然為AAaaBBbb，所以細(xì)胞并沒有發(fā)生基因突變，C錯誤；D、圖中已經(jīng)顯示了同源染色體的分離和非同源染色體的組合情況，該細(xì)胞后續(xù)可以產(chǎn)生的配子種類已定，為aBX、aBXA、AbY、bY，D正確；故選D。2、D【解析】

非特異性免疫（先天性免疫）第一道防線：皮膚、粘膜等第二道防線：體液中的殺菌物質(zhì)和吞噬細(xì)胞特異性免疫（獲得性免疫）第三道防線：由免疫器官和免疫細(xì)胞借助血液循環(huán)和淋巴循環(huán)組成。1、體液免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：除少數(shù)抗原可以直接刺激B細(xì)胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細(xì)胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞，再由T細(xì)胞呈遞給B細(xì)胞；（2）反應(yīng)階段：B細(xì)胞接受抗原刺激后，開始進(jìn)行一系列的增殖、分化，形成記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞；（3）效應(yīng)階段：漿細(xì)胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應(yīng)。2、細(xì)胞免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：吞噬細(xì)胞攝取和處理抗原，并暴露出其抗原決定簇，然后將抗原呈遞給T細(xì)胞；（2）反應(yīng)階段：T細(xì)胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞，同時T細(xì)胞能合成并分泌淋巴因子，增強(qiáng)免疫功能。（3）效應(yīng)階段：效應(yīng)T細(xì)胞發(fā)揮效應(yīng)?！驹斀狻緼、狂犬病病毒與乙酰膽堿（興奮型神經(jīng)遞質(zhì)）的受體結(jié)合，不利于興奮的傳遞，A錯誤；B、吞噬細(xì)胞吞噬侵入人體的部分病毒，此過程屬于人體第二道防線發(fā)揮作用，B錯誤；C、抗體是由漿細(xì)胞合成分泌的，C錯誤；D、狂犬病病毒被胞吞進(jìn)入突觸小體并沿著軸突逆行，與神經(jīng)沖動傳導(dǎo)方向相反，D正確。故選D。3、A【解析】

生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的成分和食物鏈、食物網(wǎng)兩部分，生態(tài)系統(tǒng)的成分包括非生物的物質(zhì)和能量，生產(chǎn)者，消費(fèi)者和分解者。食物鏈和食物網(wǎng)是生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)，能量流動、物質(zhì)循環(huán)和信息交流是生態(tài)系統(tǒng)的功能?！驹斀狻緼、一般可用樣方法調(diào)查群落中植物的物種豐富度，只是用樣方法調(diào)查植物的豐富度時，應(yīng)該調(diào)查植物的種類總數(shù)，不能取平均值，A正確；B、所有生態(tài)系統(tǒng)中各營養(yǎng)級的能量均為正金字塔形，各營養(yǎng)級的生物數(shù)量一般為正金字塔形，有時會出現(xiàn)倒置情況，B錯誤；C、生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)是指生態(tài)系統(tǒng)的食物鏈和食物網(wǎng)，C錯誤；D、抵抗力穩(wěn)定性低的生態(tài)系統(tǒng)，恢復(fù)力穩(wěn)定性不一定高，例如荒漠生態(tài)系統(tǒng)，D錯誤。故選A。4、C【解析】

噬菌體是一種專門寄生在大腸桿菌體內(nèi)的病毒，外殼是蛋白質(zhì)，頭部內(nèi)含DNA。同位素示蹤法探究證明其遺傳物質(zhì)是DNA，用35S標(biāo)記的蛋白質(zhì)的噬菌體，上清液放射性高、沉淀物放射性低；用32P標(biāo)記的DNA的噬菌體，上清液放射性低、沉淀物放射性高。DNA的復(fù)制為半保留復(fù)制，在解旋酶的作用下打開氫鍵?！驹斀狻緼、用35S和32P標(biāo)記同一個噬菌體，上清液和沉淀物均含放射性，應(yīng)該用35S和32P應(yīng)該分別標(biāo)記噬菌體，A錯誤；B、轉(zhuǎn)錄過程不一定將DNA分子的一條單鏈完全轉(zhuǎn)錄，mRNA是經(jīng)過剪切之后的所以堿基數(shù)比n/2少，B錯誤；C、噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA，其復(fù)制過程既要?dú)滏I斷裂又要形成，C正確；D、不管繁殖多少代，子代中只有2個帶標(biāo)記15N，D錯誤。故選C?！军c(diǎn)睛】答題的關(guān)鍵在于掌握噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)、DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄等的過程，將DNA有關(guān)知識建立聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)。5、C【解析】

興奮是以電信號的形式沿著神經(jīng)纖維傳導(dǎo)，傳導(dǎo)方向是雙向的，靜息狀態(tài)時，K+外流，膜電位外正內(nèi)負(fù)；興奮時，Na+內(nèi)流，膜電位外負(fù)內(nèi)正。神經(jīng)元之間的興奮傳遞是通過突觸實(shí)現(xiàn)的，傳遞是單向的，當(dāng)興奮通過軸突傳導(dǎo)到突觸小體時，突觸前膜中的突觸小泡釋放神經(jīng)遞質(zhì)進(jìn)入突觸間隙，作用于突觸后膜，使另一神經(jīng)元興奮或抑制。【詳解】A、有氧呼吸第三階段在線粒體內(nèi)膜上產(chǎn)生大量ATP，A錯誤；B、神經(jīng)遞質(zhì)通過胞吐被釋放，胞吐方式消耗ATP，B錯誤；C、興奮在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)是雙向的，不僅可由軸突傳給細(xì)胞體或樹突，也可從一神經(jīng)元樹突傳導(dǎo)至同一神經(jīng)元的軸突，C正確；D、神經(jīng)元受刺激興奮后恢復(fù)為靜息狀態(tài)，由鈉鉀泵通過主動運(yùn)輸跨膜運(yùn)輸鈉、鉀離子，消耗ATP，D錯誤。故選C?！军c(diǎn)睛】本題主要考查興奮在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)和興奮在神經(jīng)元之間的傳遞過程，答題關(guān)鍵在于建立興奮的傳導(dǎo)、物質(zhì)運(yùn)輸方式和細(xì)胞呼吸等知識的內(nèi)在聯(lián)系。6、D【解析】

據(jù)圖分析，Ⅱ-3、Ⅱ-4不患甲病，其兒子Ⅲ-7患甲病，說明甲病是隱性遺傳病，又因?yàn)棰?4不含甲病治病基因，因此甲病為伴X隱性遺傳??；Ⅱ-5、Ⅱ-6不患乙病，其女兒Ⅲ-9患乙病，說明乙病為常染色體隱性遺傳?。挥捎谝也≡谌巳褐械陌l(fā)病率為1/625，假設(shè)乙病致病基因?yàn)閎，則b的基因頻率為1/25，B的基因頻率為24/25，因此正常人群中雜合子的概率=2Bb÷（2Bb+BB）=2b÷（2b+B）=1/13?！驹斀狻緼、根據(jù)以上分析已知，乙病為常染色體隱性遺傳病，A錯誤；B、Ⅲ-10患甲病，而甲病為伴X隱性遺傳病，則來自于Ⅱ-5，而Ⅱ-5的致病基因又來自于Ⅰ-2，B錯誤；C、假設(shè)甲病致病基因?yàn)閍，則Ⅱ-5基因型為AaXBXb，Ⅱ-6AaXbY，后代甲病發(fā)病率為1/4，乙病發(fā)病率為1/2，因此后代只患一種病的概率=1/4+1/2-1/4×1/2×2=1/2，C錯誤；D、Ⅲ-11基因型為2/3AaXBXb，正常男性為甲病致病基因攜帶者（AaXBY）的概率為1/13，兩者婚配，后代患甲病的概率為2/3×1/13×1/4=1/78，患乙病的概率為1/4，因此后代患兩病的概率=1/78×1/4=1/312，D正確。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、3+X或3+Y5AaXBY和AaXbXb2/91：3【解析】

基因自由組合定律的實(shí)質(zhì)是：控制不同性狀的遺傳因子的分離和組合是互不干擾的；在形成配子時，決定同一性狀的成對的遺傳因子彼此分離，決定不同性狀的遺傳因子自由組合?！驹斀狻浚?）雄性果蠅體內(nèi)含有4對染色體，其染色體組成為8+XY，精細(xì)胞的染色體數(shù)目減半，其染色體組成可表示為3+X或3+Y，測定一個果蠅的基因組，要測定3對常染色體中的任意一條，以及兩條性染色體，因此一共要測定5條染色體上的堿基序列。（2）由題干信息可知，F(xiàn)1中雌性果蠅和雄性果蠅中灰身：黑身均為3：1，因此灰身和黑身是由常染色體上的等位基因控制的，親本基因組成為Aa×Aa，F(xiàn)1中雌性均為紅眼，雄性均為白眼，因此控制紅眼和白眼的基因位于X染色體上，親本的基因組成為XBY和XbXb，因此親本的基因組成為AaXBY和AaXbXb。F1中的灰身雌雄果蠅進(jìn)行自由交配，兩對性狀分別考慮，灰身果蠅中AA：Aa=1：2，因此a的基因頻率為1/3，自由交配后代灰身果蠅的概率為1－1/3×1/3=8/9，F(xiàn)1的基因型為XBXb和XbY，后代的紅眼雌性占1/4，因此交配后后代灰身紅眼雌性個體所占的比例為8/9×1/4=2/9。（3）若親本雌雄果蠅的A基因所在的染色體都缺失了一個片斷，設(shè)為A0a，親本的基因型為A0a，由于A0的卵細(xì)胞無法受精，F(xiàn)1的基因型比例為A0a：aa=1：1，同理，繼續(xù)交配后代精子比例為A0：a=1：3，由于只有a的卵細(xì)胞能受精，后代的基因型比例為A0a：aa=1：3，即灰身果蠅：黑身果蠅=1：3?！军c(diǎn)睛】本題考查自由組合定律的實(shí)質(zhì)及應(yīng)用的相關(guān)知識點(diǎn)，意在考查學(xué)生對所學(xué)知識的理解與掌握程度，培養(yǎng)了學(xué)生分析題意、獲取信息、解決問題的能力。8、MⅡ中早期胚胎培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（正常的）Rag2基因含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體（正常的）Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對序列或遺傳信息）DNA分子雜交限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶抗Rag2蛋白的抗體【解析】

題圖分析：圖示是利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的過程圖解，其中①表示核移植過程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過程，③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。然后將改造后的受體細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)之后回輸?shù)交蛉毕菪∈篌w內(nèi)獲得治療?！驹斀狻浚?）MII中期的卵母細(xì)胞含有細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和環(huán)境條件，故接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于MII中期，即過程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的處于MII中期的卵母細(xì)胞中。（2）過程②利用的技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胚胎的各種組織，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤，故當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出具有全能性的ES細(xì)胞。（3）根據(jù)題干信息可知，過程③中獲取的目的基因是（正常的）Rag2基因，若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，需要構(gòu)建含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體，構(gòu)建之前可以根據(jù)Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對序列或遺傳信息）設(shè)計引物，利用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。將目的基因?qū)隕S細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，為了檢測ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)。（4）按此方法和圖示技術(shù)流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的技術(shù)包括基因工程、PCR技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，其中基因工程涉及的酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶，動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)涉及的酶有胰蛋白酶，PCR技術(shù)涉及的酶有耐高溫DNA聚合酶（Taq酶）等。檢測Rag2基因的表達(dá)情況，可采用抗原一抗體雜交法，即提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)?！军c(diǎn)睛】熟知圖中個步驟的含義以及操作流程是解答本題的關(guān)鍵！掌握關(guān)于基因治療的各個環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)知識是解答本題的另一關(guān)鍵！9、SalⅠHindⅢ氨芐青霉素四環(huán)素（或答氨芐青霉素和四環(huán)素）4和6放射性同位素（或熒光素）一定濃度的鹽水澆灌作物（將作物移栽到鹽堿地中種植）細(xì)胞的全能性基因重組【解析】

分析第一個圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗鹽作物的培育過程，首先構(gòu)建基因表達(dá)載體；其次采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（作物細(xì)胞）；再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將含有目的基因的作物細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因抗鹽作物。分析第二個圖：圖示為篩選含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌的過程，培養(yǎng)基A和B中應(yīng)該分別加入氨芐青霉素、四環(huán)素?！驹斀狻浚?）質(zhì)粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，其中BamHⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，用該酶切割會破壞目的基因；若只用SalⅠ一種限制酶切割可能會導(dǎo)致目的基因與運(yùn)載體反向連接；因此在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應(yīng)選用SalⅠ和HindⅢ兩種限制酶對質(zhì)粒和抗鹽基因進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。（2）用SalⅠ和HindⅢ兩種限制酶對質(zhì)粒進(jìn)行切割時，會破會四環(huán)素抗性基因，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌能在含有氨芐青毒素的培養(yǎng)基上能生存，但不能在含有四環(huán)素培養(yǎng)基上生存，所以培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有氨芐青霉素、四環(huán)素，含目的基因的是4和6菌落中的細(xì)菌。（3）探針是指用放射性同位素標(biāo)記的目的基因（抗鹽基因）。除了從分子水平上進(jìn)行檢測，還可以從個體水平上進(jìn)行鑒定，即用一定濃度的鹽水澆灌作物來鑒定作物的耐鹽性。（4）將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，組織培養(yǎng)技術(shù)依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性。（5）將抗鹽基因?qū)胱魑锛?xì)胞內(nèi)，使作物具有了抗鹽性狀，這屬于基因工程技術(shù)，變異類型是基因重組?！军c(diǎn)睛】本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因抗鹽作物的培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)等知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，能根據(jù)圖中限制酶的位置及題干要求選擇正確的限制酶；能根據(jù)題中信息判斷培養(yǎng)基中抗生素的名稱；識記植物組織培養(yǎng)過程及條件。10、垂體細(xì)胞生長激素只在垂體細(xì)胞中表達(dá)，在其他細(xì)胞中不表達(dá)逆轉(zhuǎn)錄酶PCR這些物質(zhì)作用除了能為反應(yīng)提供原料，還能提供能量受精卵基因表達(dá)載體限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶抗原—抗體雜交轉(zhuǎn)基因羊的體重和生長速率【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2、基因工程的基本工具為限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體?！驹斀狻浚?）生長激素只在垂體細(xì)胞中表達(dá)，在其他細(xì)胞中不表達(dá)，所以如果要獲得豬的生長激素基因，應(yīng)從豬的垂體細(xì)胞內(nèi)提取mRNA作為模板，以mRNA為模板在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成cDNA，利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因，根據(jù)ATP可以為細(xì)胞提供能量進(jìn)行推測，采用的原料是dCTP、dATP、dGTP、dTTP，而不是4種脫氧核苷酸，原因是這些物質(zhì)作用除了能為反應(yīng)提供原料，還能提供能量。（2）動物的常用的受體細(xì)胞是受精卵，導(dǎo)入之前需要先構(gòu)建基因表