2025屆福建省寧德市普通高中高三下學(xué)期聯(lián)合考試生物試題注意事項(xiàng)1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．莧菜葉片細(xì)胞中除了葉綠體含有色素外，液泡中也含有溶于水但不溶于有機(jī)溶劑的花青素（呈現(xiàn)紅色）。某探究小組用適量95%酒精提取莧菜葉片中的色素，然后用層析液分離。層析結(jié)束后濾紙條上出現(xiàn)了不同的色素帶，對色素帶由上到下分析有關(guān)敘述正確的是（）A．第一條色素帶對應(yīng)的色素是葉黃素B．第二條色素帶對應(yīng)的色素主要吸收藍(lán)紫光C．第三條色素帶對應(yīng)的色素是呈現(xiàn)紅色的花青素D．第四條色素帶對應(yīng)的色素在層析液中溶解度最大2．下列關(guān)于生物多樣性及其保護(hù)的敘述，正確的是A．保護(hù)生物多樣性，應(yīng)加強(qiáng)立法，禁止開發(fā)和利用生物資源B．濕地具有蓄洪防旱、調(diào)節(jié)氣候等作用，屬于生物多樣性的直接價(jià)值C．棲息地總量減少和棲息地多樣性降低是生物多樣性降低的重要原因D．生物多樣性包括物種多樣性、群落多樣性和生態(tài)系統(tǒng)多樣性3．日益惡化的生態(tài)環(huán)境，越來越受到各國的普遍關(guān)注。下列相關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是A．某湖泊的水質(zhì)持續(xù)惡化與該湖泊生態(tài)系統(tǒng)的負(fù)反饋調(diào)節(jié)有關(guān)B．過度放牧導(dǎo)致草原生態(tài)系統(tǒng)退化，牲畜的環(huán)境容納量會變小C．霧霾現(xiàn)象可自行退去，說明生態(tài)系統(tǒng)有一定的自我調(diào)節(jié)能力D．全球氣候變暖的主要原因是人類過度使用化石燃料4．在灌漿期后，麻雀受高粱散發(fā)的香味吸引大量遷飛至農(nóng)田，但并不是所有高粱都受麻雀青睞，有些只有極少籽粒被啄食。研究發(fā)現(xiàn)，不受青睞的高粱通過基因調(diào)控合成了高含量單寧（澀味）和低濃度香味揮發(fā)物，進(jìn)而減少被麻雀采食。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．高粱流入麻雀的能量占高粱同化量的20%B．高梁的可遺傳變異為進(jìn)化提供了原材料C．在麻雀的選擇下，高粱種群的基因頻率會發(fā)生定向改變D．高粱和麻雀之間存在共同進(jìn)化5．科學(xué)研究表明，正常細(xì)胞的離體培養(yǎng)生長過程一般分為潛伏期、指數(shù)增生期、平臺期和退化消亡期。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．平臺期時(shí)細(xì)胞分裂速率最快B．各時(shí)期細(xì)胞計(jì)數(shù)前都要用胰蛋白酶處理C．動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性D．若培養(yǎng)的是癌細(xì)胞則不會出現(xiàn)平臺期6．下列實(shí)驗(yàn)中采用的實(shí)驗(yàn)方法（原理）、實(shí)驗(yàn)步驟及結(jié)果的對應(yīng)錯(cuò)誤的是（）選項(xiàng)實(shí)驗(yàn)方法（原理）步驟結(jié)果A基因重組R型肺炎雙球菌與S型菌的提取物混合出現(xiàn)了R型菌和S型菌的菌落B同位素標(biāo)記法標(biāo)記人、鼠兩種生物細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)并融合細(xì)胞膜具有流動性C自身對照法將成熟的洋蔥根細(xì)胞浸入高濃度（50%）的紅色蔗糖溶液中細(xì)胞膜內(nèi)出現(xiàn)紅色D標(biāo)志重捕法將已經(jīng)統(tǒng)計(jì)數(shù)量且標(biāo)記的小鼠放回原環(huán)境，短時(shí)間重捕統(tǒng)計(jì)結(jié)果與重捕時(shí)間有關(guān)A．A B．B C．C D．D二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某天然池塘中生活著不同食性的多種魚類，在不受外界因素干擾的情況下，該生態(tài)系統(tǒng)可穩(wěn)定存在。有人將該天然池塘改造成了以養(yǎng)殖鯰魚為主的人工魚塘，在養(yǎng)殖過程中要投放魚飼料。回答下列問題：（1）天然池塘中不同食性的魚類往往占據(jù)不同的水層，不同食性魚類的這種分層現(xiàn)象主要是由____________決定的。天然池塘可穩(wěn)定存在是由于生態(tài)系統(tǒng)具有____________能力。（2）與天然池塘相比，人工魚塘的魚產(chǎn)量較高，若天然池塘與人工魚塘中生產(chǎn)者固定的能量相同，從能量流動的角度分析可能的原因是____________(答出兩點(diǎn))。（3）如圖為該人工魚塘中主要生物的捕食關(guān)系圖。圖中輪蟲與水蚤的種間關(guān)系是____________。若一年內(nèi)該魚塘中水草同化的能量為Q，動物X同化的能量為M，不考慮人工投放的魚飼料，理論上這一年內(nèi)鯰魚同化的能量最多為________________________。8．（10分）正常情況下，人體腎臟的持續(xù)最大利尿速度是每分鐘16mL，一旦攝取水分的速度超過了該標(biāo)準(zhǔn)，體內(nèi)以鈉為主的電解質(zhì)就會被稀釋，從而使細(xì)胞膨脹，最終引發(fā)“水中毒”一般會導(dǎo)致頭暈眼花、嘔吐、虛弱無力等癥狀，嚴(yán)重時(shí)會出現(xiàn)痙攣、昏迷甚至生命危險(xiǎn)?；卮鹣铝袉栴}：（1）在人體內(nèi)水的平衡調(diào)節(jié)過程中，下丘腦承擔(dān)的主要功能有______________（至少答出兩點(diǎn)），參與該調(diào)節(jié)過程的信息分子有______________________，信息分子發(fā)揮作用時(shí)，要與靶細(xì)胞上的________結(jié)合。這體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有______________________________的功能。（2）“水中毒”最重要的化驗(yàn)指標(biāo)是血漿滲透壓和血清鈉的稀釋性，二者的變化經(jīng)常是一致的，其原因是__________________________?？估蚣に胤置诋惓５幕颊咴谝淮涡源罅匡嬎?，在1～2天內(nèi)其血清鈉濃度從140mmol/L迅速下降至115mmol/L，其“水中毒”癥狀較為嚴(yán)重，醫(yī)生為其靜脈滴注5%高滲鹽水液的目的是_________________，以減輕細(xì)胞內(nèi)水腫、改善“水中毒”癥狀。9．（10分）荸薺又稱馬蹄，是一種果蔬兼用型的經(jīng)濟(jì)作物，在生產(chǎn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，洗得干凈的荸薺在貯藏過程中往往比帶泥荸薺更容易失水腐爛。研究者從荸薺表面泥土中分離出一些拮抗細(xì)菌，并發(fā)現(xiàn)2株拮抗細(xì)菌發(fā)酵濾液對荸薺表面細(xì)菌、霉菌具有顯著的抑制作用，為荸薺貯藏過程中新型生物貯藏保鮮技術(shù)的開發(fā)提供了一定的理論依據(jù)。分離純化拮抗細(xì)菌的操作如下，請回答：（1）從新鮮的帶泥荸薺中分離出泥土樣后，將樣品稀釋至一定濃度范圍，以保證獲得菌落數(shù)在________之間的計(jì)數(shù)平板，稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作，目的是確保________。（2）吸取1mL稀釋液涂布到培養(yǎng)基上培養(yǎng)，制備固體培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)加入_________，培養(yǎng)基采用________法滅菌。（3）從培養(yǎng)基上挑選出菌落形態(tài)不同的單菌落若干，培養(yǎng)24h后，取菌液劃線于培養(yǎng)基中，獲得單菌落，重復(fù)3次，獲得純化菌株，劃線時(shí)應(yīng)注意從________開始劃；為了防止水蒸汽凝結(jié)成的水珠影響平板內(nèi)菌落生長，培養(yǎng)時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)皿________。（4）研究發(fā)現(xiàn)2株細(xì)菌的發(fā)酵液對荸薺表面細(xì)菌、霉菌具有顯著的抑制作用，為長期保存這兩種菌種，可采用________法保存，并放在________℃的冷凍箱中。10．（10分）單寧酶是一類能夠水解單寧酸生成沒食子酸和葡萄糖的水解酶，其可應(yīng)用于鮮柿脫澀處理，可消除其中的苦澀味。注：①選擇培養(yǎng)基成分：蔗糖、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、瓊脂、單寧酸、溴酚藍(lán)②溴酚藍(lán)在單寧酸環(huán)境中為藍(lán)紫色，在沒食子酸環(huán)境中為黃色（1）菌種的分離篩選將從柿子果園所取的土樣置于富集培養(yǎng)液的三角瓶中，30℃、搖床培養(yǎng)48h。稀釋適量倍數(shù)后，采用________法接種于選擇培養(yǎng)基上。根據(jù)選擇培養(yǎng)基的_________________（現(xiàn)象）作為挑取單寧酶產(chǎn)生菌的標(biāo)志。（2）粗酶液制備向培養(yǎng)菌種的三角瓶中按照培養(yǎng)基體積:緩沖液體積=1:1的量加入pH=5.0的檸檬酸檸檬酸鈉緩沖液，在28℃條件下?lián)u床震蕩，用定性濾紙過濾，所得濾液即為粗酶液。檸檬酸-檸檬酸鈉的作用是____________________。請寫出一種純化得到單寧酶的方法及其原理_______________。（3）酶活力測定從生物體提取出的酶首先要檢測酶的活力，以便更好地將酶用于生產(chǎn)實(shí)踐，該酶活性大小的表示方法是_____________。在鮮柿脫澀的過程中，為了使酶能夠被反復(fù)利用，可采用______________技術(shù)。11．（15分）科研人員利用a，b，c三個(gè)不同的純種小麥抗病品系（由三個(gè)不同基因的突變導(dǎo)致）和純種感病品系進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題：編號雜交組合F1F2①a×感病抗病抗病∶感病=3∶1②b×感病抗病抗病∶感病=3∶1③c×感病抗病抗病∶感病=3∶1④a×b抗病抗?、輇×c抗病抗病∶感病=15∶1（1）由①②③可知，三種抗性性狀相對于感病性狀為________，其遺傳均符合________定律。（2）由④可知，a品系和b品系的抗性基因位于________對同源染色體上。F1中a品系和b品系的抗性基因分布在________上且這兩個(gè)基因所在染色體不發(fā)生________，結(jié)果F2全抗病。（3）若用①組和②組得到的F1雜交，后代抗病植株與感病植株的比例為________。（4）由⑤可知，b品系和c品系的抗性基因位于________對同源染色體上，F(xiàn)2抗病植株中純合子占________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解析】

液泡中含有溶于水但不溶于有機(jī)溶劑的花青素，用90%的乙醇提取莧菜葉片中的色素時(shí)，只能提取到葉綠體中的色素，用層析液分離時(shí)，可以得到四條色素帶，從上到下依次是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b?！驹斀狻恳号葜泻腥苡谒蝗苡谟袡C(jī)溶劑的花青素，用95%的酒精提取莧菜葉片中的色素時(shí)，只能提取到葉綠體中的色素，用層析液分離時(shí)，可以得到四條色素帶，從上到下依次是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b。第一條色素帶對應(yīng)的色素是胡蘿卜素，A錯(cuò)誤；第二條色素帶對應(yīng)的色素是葉黃素，主要吸收藍(lán)紫光，B正確：第三條色素帶對應(yīng)的色素是葉綠素a，C錯(cuò)誤；色素在層析液中的溶解度不同，溶解度越高，色素隨著層析液擴(kuò)散的速度越快，所以第四條色素帶對應(yīng)的色素在層析液中溶解度最小，D錯(cuò)誤。故選B。【點(diǎn)睛】本題考查綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)，意在考查考生的識記能力和遷移應(yīng)用能力；能獨(dú)立完成“生物知識內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用。2、C【解析】

A.保護(hù)生物多樣性，應(yīng)加強(qiáng)立法，合理開發(fā)和利用生物資源，而不是禁止開發(fā)和利用生物資源，A錯(cuò)誤；B.濕地具有蓄洪防旱、調(diào)節(jié)氣候等作用，屬于生物多樣性的間接價(jià)值，B錯(cuò)誤；C.棲息地總量減少和棲息地多樣性降低是生物多樣性降低的重要原因，C正確；D.生物多樣性包括物種多樣性、基因多樣性和生態(tài)系統(tǒng)多樣性，D錯(cuò)誤；因此，本題答案選C。3、A【解析】

提高生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的措施：

1、控制對生態(tài)系統(tǒng)的干擾程度，對生態(tài)系統(tǒng)的利用應(yīng)適度，不應(yīng)超過生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力；

2、人類利用強(qiáng)度大的生態(tài)系統(tǒng)，應(yīng)有相應(yīng)的物質(zhì)和能量投入，保證生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)和功能的協(xié)調(diào)?！驹斀狻緼、某湖泊的水質(zhì)持續(xù)惡化主要與該湖泊生態(tài)系統(tǒng)的正反饋調(diào)節(jié)或人類持續(xù)排污有關(guān)，A錯(cuò)誤；B、草原生態(tài)系統(tǒng)退化，牲畜的環(huán)境容納量一定會變小，B正確；C、環(huán)境由差變好是生態(tài)系統(tǒng)自我調(diào)節(jié)的體現(xiàn)，C正確；D、全球氣候變暖，也就是溫室效應(yīng)，而溫室效應(yīng)主要是化石燃料的過量燃燒，排放過多溫室氣體所致，D正確。故選A。4、A【解析】

現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的基本觀點(diǎn)：種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)在于種群基因頻率的改變；突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料；自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進(jìn)化的方向；隔離是新物種形成的必要條件。共同進(jìn)化是指不同物種之間以及生物與環(huán)境之間相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展，即共同進(jìn)化。【詳解】A、傳遞效率是指下一營養(yǎng)級的同化量與上一營養(yǎng)級同化量的比值，一般傳遞效率在10%~20%，因此能量傳遞效率發(fā)生在兩個(gè)營養(yǎng)級之間而不是兩種生物之間，A錯(cuò)誤；B、可遺傳變異包括突變和基因重組，突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料，B正確；C、自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變，因此在麻雀的選擇下，高粱種群的基因頻率會發(fā)生定向改變，C正確；D、根據(jù)以上分析可知，高粱和麻雀即不同物種之間在相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展，存在共同進(jìn)化，D正確。故選A。5、B【解析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)1、定義：就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。2、原理：細(xì)胞增殖。3、過程：材料處理→原代培養(yǎng)→轉(zhuǎn)代培養(yǎng)?！驹斀狻緼、平臺期時(shí)細(xì)胞分裂速率減少為0，A錯(cuò)誤；B、各時(shí)期細(xì)胞計(jì)數(shù)前都要用胰蛋白酶處理，形成單個(gè)細(xì)胞，便于顯微觀察，B正確；C、動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，C錯(cuò)誤；D、動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，由于資源和空間有限，癌細(xì)胞也會出現(xiàn)平臺期，D錯(cuò)誤。故選B。【點(diǎn)睛】本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)，意在考查學(xué)生識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理，掌握S型曲線的增長速率。6、B【解析】

1、基因重組是指在減數(shù)分裂過程中，由于四分體時(shí)期同源染色體的非姐妹染色單體的交叉互換或減數(shù)第一次分裂后期非同源染色體上的非等位基因自由組合而發(fā)生基因重組，使后代產(chǎn)生不同于雙親的基因組合。2、放射性同位素可用于追蹤物質(zhì)運(yùn)行和變化的規(guī)律，例如噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)。3、標(biāo)志重捕法是在被調(diào)查種群的生存環(huán)境中捕獲一部分個(gè)體將這些個(gè)體進(jìn)行標(biāo)志后再放回原來的環(huán)境，經(jīng)過一定期限后進(jìn)行重捕，根據(jù)重捕中標(biāo)志的個(gè)體占總捕數(shù)的比例，來估計(jì)該種群的數(shù)量，設(shè)該地段種群中個(gè)體數(shù)為N，其中標(biāo)志總數(shù)為M，重捕總數(shù)為n，重捕中被標(biāo)志的個(gè)體數(shù)為m，則N∶M=n∶m?！驹斀狻緼、R型菌與S型菌的提取物混合，可形成R型菌和S型菌的菌落，這屬于基因重組，A正確；B、利用熒光標(biāo)記法標(biāo)記人、鼠兩種生物細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)并融合，可得出細(xì)胞膜具有流動性，B錯(cuò)誤；C、利用自身對照的方法，在高濃度的蔗糖溶液中，細(xì)胞失水過快而死亡，細(xì)胞膜失去選擇透過性，內(nèi)部出現(xiàn)紅色，C正確；D、用標(biāo)志重捕法統(tǒng)計(jì)小鼠的種群密度時(shí)，放回的時(shí)間短，小鼠沒有混合均勻，短期內(nèi)再捕會影響統(tǒng)計(jì)結(jié)果，D正確。故選B。【點(diǎn)睛】本題需要考生綜合掌握生物研究過程中的各種方法，易錯(cuò)點(diǎn)是D選項(xiàng)中標(biāo)志重捕法的注意事項(xiàng)。二、綜合題：本大題共4小題7、食物自我調(diào)節(jié)人工投放的魚飼料中的能量被鯰魚利用；營養(yǎng)級較少，能量流動中損失的能量較少競爭【解析】

生態(tài)系統(tǒng)的概念：生物群落與它的無機(jī)環(huán)境相互作用而形成的統(tǒng)一整體。生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和食物鏈、食物網(wǎng)，其功能包括能量流動、物質(zhì)循環(huán)和信息傳遞?！驹斀狻浚?）天然池塘中，不同食性的魚類占據(jù)垂直空間上不同的水層，這體現(xiàn)了群落的垂直結(jié)構(gòu)，影響魚類垂直結(jié)構(gòu)的主要因素是食物。生態(tài)系統(tǒng)具有自我調(diào)節(jié)能力，所以在通常情況下生態(tài)系統(tǒng)會保持穩(wěn)定。（2）與天然池塘相比，人工魚塘的魚產(chǎn)量較高，從能量流動的角度分析，可能的原因有：人工投放的魚飼料中的能量被魚利用；營養(yǎng)級較少，能量流動中損失的能量較少等。（3）圖中輪蟲與水蚤均以水草為食，故二者的種間關(guān)系為競爭。根據(jù)題意可知，輪蟲和水蚤的最大同化量之和為Q×20%-M，故理論上鯰魚同化的能量最多為（Q×20%-M）×20%【點(diǎn)睛】本題需要考生綜合生態(tài)學(xué)的知識，難點(diǎn)是對食物網(wǎng)進(jìn)行分析，結(jié)合能量流動的特點(diǎn)進(jìn)行計(jì)算。8、做為滲透壓感受器、滲透壓調(diào)節(jié)中樞、分泌抗利尿激素神經(jīng)遞質(zhì)和激素（抗利尿激素）特異性受體(糖蛋白)細(xì)胞間信息交流維持血漿滲透壓穩(wěn)定的陽離子主要是鈉離子升高血漿滲透壓，促進(jìn)組織液中水回流到血漿【解析】

人體內(nèi)水的平衡調(diào)節(jié)中樞是下丘腦，既有神經(jīng)調(diào)節(jié)也有激素調(diào)節(jié)，以此相關(guān)知識解答?！驹斀狻浚?）在人體內(nèi)水的平衡調(diào)節(jié)過程中，下丘腦承擔(dān)的主要功能有做為滲透壓感受器、滲透壓調(diào)節(jié)中樞、分泌抗利尿激素等。在人體內(nèi)水的平衡調(diào)節(jié)過程中，既有神經(jīng)調(diào)節(jié)也有激素調(diào)節(jié)，所以參與該調(diào)節(jié)過程的信息分子有神經(jīng)遞質(zhì)和激素（抗利尿激素）。信息分子與靶細(xì)胞膜上的特異性受體結(jié)合從而發(fā)揮作用。這體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有細(xì)胞間信息交流的功能。（2）滲透壓：指溶液中溶質(zhì)微粒對水的吸引力。溶液滲透壓的大小取決于單位體積溶液中溶質(zhì)微粒的數(shù)目。“水中毒”最重要的化驗(yàn)指標(biāo)是血漿滲透壓和血清鈉的稀釋性，二者的變化經(jīng)常是一致的，其原因是維持血漿滲透壓穩(wěn)定的陽離子主要是鈉離子。“水中毒”后，醫(yī)生為其靜脈滴注5%高滲鹽水液的目的是升高血漿滲透壓，以促進(jìn)組織液中水回流到血漿?！军c(diǎn)睛】本題文需要重點(diǎn)識記抗利尿激素，其是由下丘腦神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生，由垂體釋放到血液中，其作用于腎小管和集合管對水的重吸收，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞外液滲透壓的平衡。9、30~300無菌瓊脂高壓蒸汽滅菌上次劃線的末端倒置甘油管藏-20℃【解析】

微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)常用到培養(yǎng)基，培養(yǎng)基按物理狀態(tài)分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基通常需要加入瓊脂凝固。培養(yǎng)基需要滅菌后才能用來培養(yǎng)細(xì)菌。單菌落分離法包含劃線分離法和涂布分離法，常用于分離獲得單菌落。微生物的研究通常包含微生物的獲得、分離純化、培養(yǎng)以及保存等?！驹斀狻浚?）通過統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)來計(jì)算細(xì)菌的數(shù)量，在接種時(shí)以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間的平板，才不會出現(xiàn)細(xì)菌數(shù)太少或生長時(shí)疊加的情況。稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作，目的是確保無菌。（2）固體培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)加入瓊脂，并用高壓蒸汽滅菌后備用。（3）劃線分離應(yīng)從上次劃線的末端開始劃，由于劃線過程中接種環(huán)上的菌液逐漸減少，最后可能得到單菌落。培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)可以防止水滴掉入沖散單菌落。（4）甘油具有吸濕、保水的性質(zhì)，常用來長期保存菌種，通常菌種可以放在-20℃的冰箱中保存?！军c(diǎn)睛】微生物的培養(yǎng)與分離是微生物研究中重要的內(nèi)容，微生物的無菌操作是常見的考點(diǎn)，在學(xué)習(xí)時(shí)應(yīng)注意操作的細(xì)節(jié)并理解相應(yīng)的原理。10、稀釋涂布平板法黃色圈（變色圈）直徑的大小作為緩沖溶液，抵制外界的酸和堿對溶液PH的影響，維持PH基本不變凝膠色譜法根據(jù)蛋白質(zhì)分子之間分子大小、吸附性質(zhì)等差異進(jìn)行純化（或電泳法根據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷，分子大小等差異進(jìn)行純化）（或透析法根據(jù)蛋白質(zhì)之間分子大小差異進(jìn)行純化）單位時(shí)間內(nèi)單寧的降解量（或沒食子酸或葡萄糖的生產(chǎn)量）固定化酶（固定化細(xì)胞）【解析】

微生物的篩選需要使用選擇培養(yǎng)基，進(jìn)行稀釋時(shí)需要無菌水；對微生物進(jìn)行鑒定時(shí)還需要加入鑒別的指示劑；接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。據(jù)此分析作答?！驹斀狻浚?）稀釋適量倍數(shù)后，接種到選擇培養(yǎng)基的方法為稀釋涂布平板法；由題干信息知“單寧酶能夠水解單寧酸生成沒食子酸和葡萄糖”且“溴酚藍(lán)在單寧酸環(huán)境中為藍(lán)紫色，在沒食子酸環(huán)境中為黃色”，若存在單寧酶，則會從藍(lán)紫色變?yōu)辄S色，故可根據(jù)黃色圈（變色圈）直徑的大小作為挑取單寧酶產(chǎn)生菌的標(biāo)志。（2）本實(shí)驗(yàn)中檸檬酸檸檬酸鈉的作用是作為緩沖溶液，抵制外界的酸和堿對溶液PH的影響，維持PH基本不變；可用凝膠色譜法對單寧酶進(jìn)行純化，實(shí)驗(yàn)原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子之間分子大小、吸附性質(zhì)等差異進(jìn)行純化。（或電泳法：根據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷，分子大小等差異進(jìn)行純化）（或透析法：根據(jù)蛋白質(zhì)之間分子大小差異進(jìn)行純化）（3）“單寧酶是一類能夠水解單寧酸生成沒食子酸和葡萄糖的水解酶”，故該酶活性的大小可用