上海市寶山區(qū)高境一中2025年高三考前熱身生物試卷考生請(qǐng)注意：1．答題前請(qǐng)將考場(chǎng)、試室號(hào)、座位號(hào)、考生號(hào)、姓名寫(xiě)在試卷密封線(xiàn)內(nèi)，不得在試卷上作任何標(biāo)記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫(xiě)在試卷指定的括號(hào)內(nèi)，第二部分非選擇題答案寫(xiě)在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請(qǐng)將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下圖是某動(dòng)物細(xì)胞分裂過(guò)程中部分染色體示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．此動(dòng)物的基因型不可能是AAB．圖中的變異是由于染色體結(jié)構(gòu)變異造成的C．該細(xì)胞有可能為體細(xì)胞D．此時(shí)核DNA數(shù)與染色體數(shù)相同2．某植物長(zhǎng)葉形對(duì)圓葉形為顯性，抗病對(duì)易感病為顯性?，F(xiàn)有長(zhǎng)葉形抗病與質(zhì)葉形易感病植株雜交，F(xiàn)1均為長(zhǎng)葉形抗病植株。若F2自交獲得400株，其中圓葉形易感病植株為64株，則F2中雜合圓葉形抗病植株所占的比例是（）A．16% B．8% C．32% D．10%3．圖甲、乙、丙為某一動(dòng)物細(xì)胞分裂后期的示意圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．由圖示判斷該動(dòng)物是雌性B．甲細(xì)胞通過(guò)分裂最終形成4個(gè)生殖細(xì)胞C．三個(gè)細(xì)胞都含有同源染色體D．丙細(xì)胞變異的原因是減數(shù)第一次分裂后期一對(duì)同源染色體沒(méi)有分開(kāi)4．如圖所示為神經(jīng)調(diào)節(jié)中兩個(gè)重要的結(jié)構(gòu)模式圖，下列選項(xiàng)中錯(cuò)誤的是（）A．圖甲中③內(nèi)的物質(zhì)為神經(jīng)遞質(zhì)，它可以與⑥上的特異性受體結(jié)合B．圖乙b受損情況下，刺激a仍有感覺(jué)但是肌肉不能收縮C．圖乙中的x所示神經(jīng)纖維屬于傳入神經(jīng)D．圖甲為圖乙中結(jié)構(gòu)c的局部放大圖像5．果蠅的性染色體有如下異常情況：XXX與OY（無(wú)X染色體）為胚胎期致死型、XXY為可育雌蠅、XO（無(wú)Y染色體）為不育雄蠅。摩爾根的同事完成多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)白眼雌蠅與紅眼雄蠅雜交，1/2000的概率出現(xiàn)白眼雌蠅和不育的紅眼雄蠅。若用XA和Xa表示控制果蠅紅眼、白眼的等位基因，下列敘述錯(cuò)誤的是A．親本紅眼雄果蠅不正常的減數(shù)分裂產(chǎn)生異常的精子致使例外出現(xiàn)B．親本白眼雌蠅不正常的減數(shù)分裂產(chǎn)生異常的卵細(xì)胞致使例外出現(xiàn)C．F1白眼雌蠅的基因型為XaXaYD．不育的紅眼雄蠅的基因型為XAO6．艾滋病(AIDS)是感染人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)導(dǎo)致的傳染性疾病。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A．HIV侵入機(jī)體后，機(jī)體可以產(chǎn)生相應(yīng)的抗體與之結(jié)合B．HIV侵入機(jī)體后，B細(xì)胞和T細(xì)胞均可被激活而增殖分化C．艾滋病可通過(guò)血液傳播、性傳播，也可由母親遺傳給子女D．艾滋病患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能遭到破壞，監(jiān)控和清除功能也受到影響二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）下圖為紅綠色盲、抗維生素D佝僂病的遺傳家系圖（不考慮基因突變與四分體中非姐妹染色單體間的交叉互換）。已知紅綠色盲是伴X染色體隱性遺傳?。ㄔO(shè)基因?yàn)锳、a），抗維生素D佝僂病是伴X染色體顯性遺傳?。ㄔO(shè)基因?yàn)锽、b），請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）Ⅰ-1與Ⅰ-4的基因型分別為_(kāi)_____________________________。（2）Ⅲ-2與一個(gè)只患紅綠色盲男性婚配，則他們生一兩病都不患的孩子的概率為_(kāi)__，他們所生的男孩中，患抗維生素D佝僂病的概率為_(kāi)____。（3）經(jīng)檢查發(fā)現(xiàn)，Ⅲ-1不攜帶任何致病基因，但卻患有遺傳病，請(qǐng)簡(jiǎn)要說(shuō)明兩種可能原因：_______________、__________________。（4）計(jì)算人群中的紅綠色盲的發(fā)病率時(shí)，所調(diào)查的群體應(yīng)_______，以保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)論的準(zhǔn)確性。8．（10分）玉米和小麥?zhǔn)俏覈?guó)兩種重要的糧食作物，圖甲和圖乙分別是不同條件下兩種農(nóng)作物的凈光合作用速率測(cè)定結(jié)果。請(qǐng)回答：（1）結(jié)合圖甲分析，如果將小麥和玉米幼苗種植在同一密閉溫室（光照、溫度等條件適宜）內(nèi)一段時(shí)間，可能最先死亡的是__________________原因是_________________細(xì)胞間隙CO2濃度在C時(shí)，小麥和玉米實(shí)際光合作用速率是否相等?為什么?_______________。（2）圖乙中，小麥在10～12時(shí)、16~18時(shí)光合作用速率下降的主要原因分別是____和____。（3）為探究高溫（35°C）對(duì)小麥、玉米凈光合速率的影響，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)簡(jiǎn)要的實(shí)驗(yàn)思路（常溫為25°C）_________________________。9．（10分）為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用__________技術(shù)從陸地棉基因文庫(kù)中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫(kù)中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因。在上述引物設(shè)計(jì)時(shí)，分別在引物中加入上圖所示酶的識(shí)別序列，這樣可以用____________________酶處理兩個(gè)基因后，得到____________端（填圖中字母）相連的融合基因。（2）將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T－DNA中，構(gòu)建_______________并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含______________的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過(guò)程的目的是_________________________，進(jìn)一步篩選后培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因油菜。（4）提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA，在____________酶的作用下獲得cDNA，再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)，可判斷融合基因是否________。10．（10分）科學(xué)家利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育了OsPHDI（水稻內(nèi)原本也存在該基因>過(guò)量表達(dá)的水稻植株，以提高水稻的抗逆性（如抗干旱、抗高鹽）?；卮鹣铝袉?wèn)題：（l）為了驗(yàn)證OsPHDI基因的表達(dá)是否受逆境誘導(dǎo)，實(shí)驗(yàn)組需要給兩葉期水稻設(shè)置_______條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示_______，說(shuō)明OsPHDI基因的表達(dá)受逆境誘導(dǎo)。（2）為了培育OsPHDI基因過(guò)量表達(dá)植株進(jìn)行如下操作：①利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得大量OsPHDI基因，該操作的前提是_______。②將OsPHDI基因與含有GFP（綠色熒光蛋白基因）的載體結(jié)合，此處GFP的作用是_______。③常用_______法將表達(dá)載體導(dǎo)入水稻細(xì)胞；若受體細(xì)胞中出現(xiàn)綠色熒光，能否說(shuō)明OsPHDI基因已成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，并說(shuō)出理由______________。④最后利用_______技術(shù)培育出完整的抗逆性植株，該技術(shù)利用的生物學(xué)原理是______________11．（15分）細(xì)胞生命活動(dòng)的穩(wěn)態(tài)離不開(kāi)基因表達(dá)的調(diào)控，mRNA降解是重要調(diào)控方式之一。（1）在真核細(xì)胞的細(xì)胞核中，_________酶以DNA為模板合成mRNA。mRNA的5′端在相關(guān)酶作用下形成帽子結(jié)構(gòu)，保護(hù)mRNA使其不被降解。細(xì)胞質(zhì)中D酶可催化脫去5′端帽子結(jié)構(gòu)，降解mRNA，導(dǎo)致其無(wú)法_________出相關(guān)蛋白質(zhì)，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)基因表達(dá)調(diào)控。（2）脫帽降解主要在細(xì)胞質(zhì)中的特定部位——P小體中進(jìn)行，D酶是定位在P小體中最重要的酶。科研人員首先構(gòu)建D酶過(guò)量表達(dá)細(xì)胞。①科研人員用_________酶分別切割質(zhì)粒和含融合基因的DNA片段，連接后構(gòu)建圖1所示的表達(dá)載體。將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入Hela細(xì)胞（癌細(xì)胞）中，獲得D酶過(guò)量表達(dá)細(xì)胞，另一組Hela細(xì)胞轉(zhuǎn)入_________作為對(duì)照組。在含5%_________的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)兩組Hela細(xì)胞。②通過(guò)測(cè)定并比較兩組細(xì)胞的D酶基因表達(dá)量，可確定D酶過(guò)量表達(dá)細(xì)胞是否制備成功。請(qǐng)寫(xiě)出從RNA和蛋白質(zhì)水平檢測(cè)兩組細(xì)胞中D酶量的思路。RNA水平：_________。蛋白質(zhì)水平：_________。（3）為研究D酶過(guò)量表達(dá)是否會(huì)促進(jìn)P小體的形成，科研人員得到圖2所示熒光測(cè)定結(jié)果。①D酶過(guò)量表達(dá)的Hela細(xì)胞熒光結(jié)果表明，D酶主要分布在_________中。②比較兩組熒光結(jié)果，推測(cè)_________。（4）研究發(fā)現(xiàn)細(xì)菌mRNA雖沒(méi)有帽子結(jié)構(gòu)，但其與mRNA降解相關(guān)的R酶也具有脫帽酶活性，可推測(cè)脫帽活性可能出現(xiàn)在真核生物mRNA的帽子結(jié)構(gòu)出現(xiàn)_________；從進(jìn)化的角度推測(cè)，D酶和R酶的_________序列具有一定的同源性。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、A【解析】

識(shí)圖分析可知，圖中染色體的著絲點(diǎn)分裂，染色體數(shù)目加倍，此時(shí)細(xì)胞內(nèi)有4條染色體，4個(gè)核DNA分子，染色體上存在等位基因A和a，而等位基因位于同源染色體上，但是圖中A、a所在的染色體在形態(tài)上存在差異性，可能發(fā)生了染色體結(jié)構(gòu)變異中的易位或者缺失的現(xiàn)象導(dǎo)致的，該細(xì)胞可能處于有絲分裂的后期。【詳解】A、根據(jù)以上分析可知，圖中染色體上存在基因A、a，可能是由于發(fā)生了基因突變導(dǎo)致等位基因的出現(xiàn)，因此動(dòng)物的基因型可能是AA，A錯(cuò)誤；B、根據(jù)以上分析，圖中同源染色體的形態(tài)存在差異性，可能是由于染色體結(jié)構(gòu)變異造成的，B正確；C、根據(jù)以上分析可知，該細(xì)胞可能處于有絲分裂的后期，因此該細(xì)胞有可能為體細(xì)胞，C正確；D、根據(jù)以上分析可知，此時(shí)核DNA數(shù)與染色體數(shù)都是4個(gè)，D正確。故選A。2、B【解析】

長(zhǎng)葉形對(duì)圓葉形為顯性，用Aa表示，抗病對(duì)易感病為顯性用Bb表示，長(zhǎng)葉形抗病與質(zhì)葉形易感病植株雜交，F(xiàn)1均為長(zhǎng)葉形抗病植株，說(shuō)明親本基因型是AABB和aabb，F(xiàn)1全是AaBb，F(xiàn)2中圓葉形易感病植株aabb為64株，比例為4/25，說(shuō)明ab的比例為2/5，說(shuō)明兩對(duì)基因不遵循自由組合定律?！驹斀狻扛鶕?jù)分析，兩對(duì)基因不遵循自由組合定律，因此這兩對(duì)基因位于一對(duì)同源染色體上，并且發(fā)生了交叉互換，ab的比例為2/5=0.4，AB的比例和ab相等為0.4，Ab=aB=（1-0.4×2）/2=0.1，因此雜合圓形抗病植株aaBb的比例為2×0.1×0.4=0.08=8%。故選B?！军c(diǎn)睛】本題關(guān)鍵是從F2中圓葉形易感病植株的比例分析出ab配子的比例，結(jié)合連鎖互換定律進(jìn)行計(jì)算。3、B【解析】

據(jù)圖分析，圖示甲細(xì)胞中同源染色體分離，處于減數(shù)第一次分裂后期，且其細(xì)胞質(zhì)不均等分裂，說(shuō)明該細(xì)胞為初級(jí)卵母細(xì)胞，該動(dòng)物是雌性的；乙細(xì)胞含有同源染色體，且著絲點(diǎn)分裂，姐妹染色單體分離，處于有絲分裂后期；丙細(xì)胞同一極的染色體為3條（奇數(shù)），而體細(xì)胞中染色體數(shù)目為4條，且著絲點(diǎn)分裂，姐妹染色單體分離，則該細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂后期，其細(xì)胞質(zhì)均等分裂，因此該細(xì)胞為第一極體，又因?yàn)樵摷?xì)胞中有一條染色體出現(xiàn)了同源染色體，說(shuō)明該對(duì)同源染色體在減數(shù)第一次分裂后期沒(méi)有分開(kāi)并都進(jìn)入了第一極體。【詳解】A、根據(jù)以上分析已知，該動(dòng)物是雌性的，A正確；B、甲細(xì)胞為初級(jí)卵母細(xì)胞，其通過(guò)分裂最終形成1個(gè)生殖細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、根據(jù)以上分析已知，三個(gè)細(xì)胞中都有同源染色體，C正確；D、根據(jù)以上分析已知，丙細(xì)胞變異的原因是減數(shù)第一次分裂后期一對(duì)同源染色體沒(méi)有分開(kāi)，D正確。故選B。4、B【解析】

圖甲為兩個(gè)神經(jīng)元相聯(lián)系的結(jié)構(gòu)圖，①為軸突末端，②是線(xiàn)粒體，③是突觸小泡，④是突觸前膜，⑤是突觸間隙，⑥是突觸后膜；圖乙是反射弧的結(jié)構(gòu)模型圖，X所在的神經(jīng)元是傳入神經(jīng)元，b所在的神經(jīng)元為傳出神經(jīng)元，c代表突觸，興奮在反射弧上的傳導(dǎo)是單向的，只能是感受器→傳入神經(jīng)→神經(jīng)中樞→傳出神經(jīng)→效應(yīng)器?！驹斀狻緼、圖甲中③突觸小泡內(nèi)含有神經(jīng)遞質(zhì)，神經(jīng)遞質(zhì)由突觸前膜釋放后，與⑥突觸后膜上的特異性受體結(jié)合，引起突觸后膜所在的神經(jīng)元興奮或抑制，A正確；B、b所在的神經(jīng)元為傳出神經(jīng)元，由于興奮在反射弧上的傳導(dǎo)是單向的，若b受損的情況下，刺激a不會(huì)有感覺(jué)，肌肉也不能收縮，B錯(cuò)誤；C、根據(jù)突觸結(jié)構(gòu)c可知，圖乙中的X所示神經(jīng)纖維屬于傳入神經(jīng)，C正確；D、甲圖為圖乙中結(jié)構(gòu)c的局部放大圖象，D正確。故選B。5、A【解析】

正常情況下，白眼雌蠅XaXa與紅眼雄蠅XAY雜交，后代中雌果蠅應(yīng)該為紅眼XAXa，雄果蠅應(yīng)該為白眼XaY。出現(xiàn)的白眼雌蠅應(yīng)該為XaXaY，不育的紅眼雄蠅應(yīng)該為XAO?！驹斀狻堪籽鄞葡墸╔aXa）與紅眼雄蠅（XAY）雜交，F(xiàn)1出現(xiàn)的白眼雌蠅為XaXaY，是異常卵細(xì)胞（XaXa）和正常精子（Y）結(jié)合的結(jié)果。不育的紅眼雄蠅為XAO，是異常卵細(xì)胞（O）和正常精子（XA）結(jié)合的結(jié)果；因此，A錯(cuò)誤，B、C、D正確。故選A?！军c(diǎn)睛】本題的關(guān)鍵是確定異常后代的基因型為XaXaY和XAO，進(jìn)而分析出是母本減數(shù)分裂異常所致。6、C【解析】

HIV侵入人體，攻擊的主要對(duì)象是T淋巴細(xì)胞，病毒在寄主細(xì)胞內(nèi)能逆轉(zhuǎn)錄形成病毒DNA并整合到染色體的DNA上，并能隨寄主細(xì)胞染色體的復(fù)制而復(fù)制，大量的T淋巴細(xì)胞的死亡導(dǎo)致患者免疫功能?chē)?yán)重缺陷，各種病原體乘虛而入，最終病人大多死于其他病原微生物的感染或惡性腫瘤。【詳解】A.HIV侵入機(jī)體后，機(jī)體可以產(chǎn)生相應(yīng)的抗體與之結(jié)合形成沉淀，經(jīng)吞噬細(xì)胞吞噬，A正確；B.HIV侵入機(jī)體后，能引起機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫，故B細(xì)胞和T細(xì)胞均可被激活而增殖分化，B正確；C.艾滋病主要通過(guò)性接觸、血液和母嬰三種途徑傳播，屬于傳染病，可由母親感染女兒，但不是遺傳，C錯(cuò)誤；D.HIV主要攻擊T細(xì)胞，使得體液免疫功能降低，細(xì)胞免疫缺失，最終導(dǎo)致免疫能力幾乎全部喪失，艾滋病患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能遭到破壞，監(jiān)控和清除功能也受到影響，D正確。二、綜合題：本大題共4小題7、XAbY、XAbXaB1/21/2Ⅲ-1的染色體數(shù)目異常，如21三體綜合征Ⅲ-1的染色體結(jié)構(gòu)異常，如貓叫綜合征（其它合理答案也可）足夠大【解析】

伴性遺傳指位于性染色體上的基因所控制的性狀表現(xiàn)出與性別相聯(lián)系的遺傳方式。自然界中由性染色體決定生物性別的類(lèi)型，主要有XY型和ZW型，XY型在雌性的體細(xì)胞內(nèi)，有兩個(gè)同型的性染色體，在雄性的體細(xì)胞內(nèi)，有兩個(gè)異型的性染色體。受精作用的實(shí)質(zhì)是雌雄配子的結(jié)合，因此可以用配子法來(lái)解答相應(yīng)的問(wèn)題。【詳解】（1）由于Ⅰ-1的表現(xiàn)型正常，故其基因型為XAbY。再根據(jù)Ⅰ-4與Ⅱ-4、Ⅱ-5的表現(xiàn)型，可分析出Ⅰ-4的基因型為XAbXaB（答XABXab不給分）。（2）Ⅰ-4的基因型為XAbXaB，根據(jù)Ⅱ-3與Ⅱ-4及Ⅲ-2的表現(xiàn)型可推知Ⅲ-2的基因型為XABXAb，她與一個(gè)只患紅綠色盲男性（XabY）婚配，他們的后代的基因型及比例為：1XABXab、1XAbXab、1XABY、1XAbY。因此，他們生一兩病都不患的孩子的概率為1/2，他們所生的男孩中，患抗維生素D佝僂病的概率為1/2。（3）Ⅲ-1不攜帶任何致病基因，但卻患有遺傳病，此問(wèn)題可從染色體異常角度去分析。（4）計(jì)算人群中的紅綠色盲的發(fā)病率時(shí)，所調(diào)查的群體應(yīng)足夠大，以保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)論的準(zhǔn)確性?！军c(diǎn)睛】本題考查的是兩對(duì)基因在X染色體上的連鎖遺傳，難度較大，在計(jì)算時(shí)應(yīng)注意基因在染色體上的位置及標(biāo)注，運(yùn)用孟德?tīng)柕姆蛛x定律解答該類(lèi)問(wèn)題。8、小麥小麥固定低濃度CO2的能力較差，需要較高濃度的CO2不一定相等，凈光合速率相等，呼吸速率不一定相等（或不相等，凈光合速率相等，呼吸速率不相等）CO2攝入不足光照強(qiáng)度減弱將小麥、玉米都分別置于25℃，35℃，而其他條件一致的條件中；并分別比較它們?cè)诓煌瑴囟认翪O2吸收速率（或O2的釋放速率）【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：圖甲中，A、B都表示光合作用速率與呼吸作用速率相等。C點(diǎn)表示玉米和小麥的凈光合速率相等。圖乙中玉米的凈光合作用速率大于小麥的凈光合作用速率，且在中午沒(méi)有出現(xiàn)“午休現(xiàn)象?！驹斀狻浚?）結(jié)合圖甲分析，圖甲中玉米的二氧化碳補(bǔ)償點(diǎn)低于小麥，說(shuō)明則玉米固定CO2的能力高于小麥，如果將小麥和玉米幼苗種植在同一密閉溫室（光照、溫度等條件適宜）內(nèi)一段時(shí)間，可能最先死亡的是小麥，原因是小麥固定低濃度CO2的能力較差，需要較高濃度的CO2；細(xì)胞間隙CO2濃度在C時(shí)，小麥和玉米實(shí)際光合作用速率不一定相等，因?yàn)閷?shí)際光合速率=凈光合速率+呼吸速率，二者的凈光合速率相等，但呼吸速率不一定相等。（2）乙圖中小麥在10～12時(shí)的光合作用出現(xiàn)“午休現(xiàn)象”，是因?yàn)闇囟冗^(guò)高，氣孔關(guān)閉，CO2攝入不足，暗反應(yīng)速率下降；16~18時(shí)光合作用速率下降的主要原因是光照強(qiáng)度減弱。（3）為探究高溫（35°C）對(duì)小麥、玉米凈光合速率的影響，可將小麥、玉米都分別置于常溫25℃、35℃下，而其他條件一致的條件中；并分別比較它們?cè)诓煌瑴囟认翪O2吸收速率（或O2的釋放速率）即可。【點(diǎn)睛】本題以圖形為載體，考查了C3植物和C4植物的特點(diǎn)、影響光合作用速率的環(huán)境因素等相關(guān)知識(shí)，考查了學(xué)生識(shí)圖、析圖能力，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)分析和解決問(wèn)題的能力。9、PCRClaⅠ（限制酶）和DNA連接A、D表達(dá)載體（或“重組質(zhì)?！保┧沫h(huán)素利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄【解析】

1、基因文庫(kù)包括cDNA文庫(kù)、基因組文庫(kù)等。某個(gè)群體包含一種生物所有的基因的文庫(kù)叫基因組文庫(kù)，而用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA片段屬于cDNA文庫(kù)。2、限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專(zhuān)一性。同種限制酶切割能夠產(chǎn)生相同的黏性末端，便于質(zhì)粒和目的基因連接?！驹斀狻浚?）擴(kuò)增目的基因常用PCR技術(shù)。切割獲得酶D基因和轉(zhuǎn)基因肽基因時(shí)，應(yīng)該用同種限制酶，以獲得相應(yīng)的黏性末端。因此，可用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個(gè)基因后，得到A、D端相連的融合基因。

（2）將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建基因表達(dá)載體即重組質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。由于質(zhì)粒上含有四環(huán)素抗性基因作為標(biāo)記基因，所以將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落。（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過(guò)程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞。

（4）提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下獲得cDNA，再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)，可判斷融合基因是否完成轉(zhuǎn)錄?！军c(diǎn)睛】本題以增加油菜種子的含油量為材料背景，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握目的基因獲取的方法，能夠結(jié)合圖解中限制酶切點(diǎn)選擇合適的工具酶獲得融合基因，同時(shí)掌握目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞以及目的基因檢測(cè)與鑒定的方法等。10、干旱，高鹽（逆境）實(shí)驗(yàn)組（逆境）植株OsPHDl基因的表達(dá)量高于對(duì)照（適宜條件）組（需要一段已知OsPHDl基因的核苷酸序列以便）合成引物作為標(biāo)記基因（檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)人受體細(xì)胞）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化不能，有可能導(dǎo)入了不含OsPHDl基因的GFP載體植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞具有全能性【解析】

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（適用于目的基因的核苷酸序列已知的情況）

①概念：PCR全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

②原理：DNA復(fù)制

③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）?！驹斀狻浚╨）通過(guò)個(gè)體水平上驗(yàn)證OsPHDI基因的表達(dá)是否受逆境誘導(dǎo)，實(shí)驗(yàn)組需要給兩葉期水稻設(shè)置干旱，高鹽（逆境）條件，如果實(shí)驗(yàn)組（逆境）植株OsPHDl基因的表達(dá)量高于對(duì)照（適宜條件）組，說(shuō)明OsPHDI基因的表達(dá)受逆境誘導(dǎo)。（2）①利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得大量目的基因，需要加入相應(yīng)的引物，故利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得大量OsPHDI基因，該操作的前提是合成引物。②GFP（綠色熒光蛋白基因）的作用是作為標(biāo)記基因，便于后期的篩選。③表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；若受體細(xì)胞中出現(xiàn)綠色熒光，不能說(shuō)明OsPHDI基因已成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，因?yàn)橛锌赡軐?dǎo)入了不含OsPHDl基因的GFP載體。④植物組織培養(yǎng)的生物學(xué)原理是植物體細(xì)胞具有全能性。故可通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育出完整的抗逆性植株?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，只要考生識(shí)記基因工程的操作步驟，明確基因表達(dá)載體的構(gòu)建是其核心步驟，注意從題干中獲取有效信息。11、RNA聚合翻譯XhoⅠ和SalⅠ空質(zhì)粒（不含融合基因的質(zhì)粒）CO2分別提取兩組細(xì)胞總RNA，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA，用D酶基因的特異性序列設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR技術(shù)，測(cè)定并比較兩組細(xì)胞D-mRNA量（提取兩組細(xì)胞的總RNA，用D酶基因的特異性序列設(shè)計(jì)基因探針，測(cè)定并比較兩組D-mRNA量）檢測(cè)兩組細(xì)胞中紅色熒光的量來(lái)反映D酶的量細(xì)胞質(zhì)D過(guò)量表達(dá)會(huì)促進(jìn)P小體形成之前氨基酸【解析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。目的基因的檢測(cè)與鑒定

①首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。②其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，方法是采用分子雜交技術(shù)。③最后檢測(cè)目的基因是翻譯成蛋白質(zhì)，方法是采用抗原一抗體雜交技術(shù)。④講行個(gè)體生物學(xué)鑒定。生物進(jìn)化的方向是：從簡(jiǎn)單到復(fù)雜，從低級(jí)到高級(jí)，水生到陸生，由原核到真核。基因能夠通過(guò)控制蛋白質(zhì)的合