模塊檢測(cè)卷(四)(教師獨(dú)具)(時(shí)間：90分鐘分?jǐn)?shù)：100分)1.(8分)(2021·山西長(zhǎng)治六聯(lián))乳頭瘤病毒(HPV)可導(dǎo)致人患宮頸癌，科研人員將HPV某外殼蛋白A基因構(gòu)建成表達(dá)載體，經(jīng)包裝或直接注入體內(nèi)，表達(dá)出相應(yīng)抗原，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。該方法獲得的疫苗稱為DNA疫苗。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)獲取A基因的方法：①方法一：提取HPV的DNA，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增A基因時(shí)，至少經(jīng)過(guò)________次循環(huán)才能獲得該基因，此過(guò)程中利用的原料是________________________。②方法二：從宿主細(xì)胞中提取總RNA，以與________________________互補(bǔ)的一段單鏈DNA作為引物，加入________酶獲得cDNA，然后經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得大量的A基因。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，常用不同的限制酶切割質(zhì)粒與目的基因，其具備的優(yōu)勢(shì)是 。(3)DNA疫苗是預(yù)防性生物制品，與傳統(tǒng)疫苗相比其具備的優(yōu)點(diǎn)有________________(至少一點(diǎn))，而單克隆抗體作為治療性生物制品，具備的優(yōu)點(diǎn)是________________，制備單克隆抗體需要以________________技術(shù)為基礎(chǔ)。2.(8分)(2021·寧夏統(tǒng)考)基因工程又稱基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段的技術(shù)。如圖是基因工程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)從基因文庫(kù)中提取的目的基因通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，所用的酶與細(xì)胞內(nèi)同類酶的差異在于該酶________。(2)進(jìn)行①過(guò)程時(shí)，需用________酶切開(kāi)載體以插入目的基因。若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過(guò)表達(dá)載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(3)若圖中宿主細(xì)胞為大腸桿菌，一般情況下②過(guò)程不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是________________________________________；已轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞(大腸桿菌)指的是 。(4)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用____________的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在蛋白質(zhì)純化的過(guò)程中應(yīng)添加________的抑制劑。3.(8分)(2021·江西臨川一中模擬)為生產(chǎn)高效價(jià)疫苗和簡(jiǎn)化計(jì)劃免疫程序，科學(xué)家研制出基因工程乙肝—百白破(rHB－DTP)四聯(lián)疫苗，經(jīng)各項(xiàng)檢測(cè)均通過(guò)rHB－DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的標(biāo)準(zhǔn)。四聯(lián)疫苗的有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳桿菌、白喉?xiàng)U菌和破傷風(fēng)桿菌的四種類毒素。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：(1)為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細(xì)胞中提取對(duì)應(yīng)________，在________酶的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的cDNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列________(填“相同”或“不同”)。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，因此獲得目的基因可采用________方法合成，然后通過(guò)________大量擴(kuò)增，此技術(shù)的前提是________________________，以便合成引物。(3)研究發(fā)現(xiàn)，如果利用蛋白質(zhì)工程將白喉?xiàng)U菌類毒素第20位和第24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，免疫效果更好。此種技術(shù)的基本途徑：①?gòu)念A(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)；②設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)；③________________________；④找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。4.(8分)(2021·江蘇南京一模)徑柳匙葉草是一種泌鹽植物，科研工作者將徑柳匙葉草液泡膜Na＋/K＋逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(TaNHX2基因)轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種酶的酶切位點(diǎn)；圖2是三種限制酶的識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)示意圖；圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：(1)若圖1所示DNA片段是利用徑柳匙葉草的DNA直接獲得的，則該獲取目的基因的方法為_(kāi)______________________________________。(2)不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中獲得TaNHX2基因的mRNA，其原因是。(3)若用BamHⅠ切割圖1所示的DNA片段，獲得目的基因，則需選用________切割圖3所示質(zhì)粒，以便構(gòu)建基因表達(dá)載體，該方案的缺陷是________________________________________。故切割圖1所示DNA片段的最佳方案是選用________________________。(4)用上述最佳方案構(gòu)建基因表達(dá)載體，所得重組質(zhì)粒________(填“能”“不能”或“不一定能”)被BamHⅠ切割。(5)圖3中，質(zhì)粒上的抗生素抗性基因的作用是____________________。(6)為了檢測(cè)技術(shù)成果，科研工作者將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地中，觀察其生長(zhǎng)狀況，這屬于________水平的檢測(cè)。5.(8分)(2021·廣東惠州調(diào)研)草莓芳香濃郁，營(yíng)養(yǎng)豐富。請(qǐng)回答下列與草莓栽培有關(guān)的問(wèn)題。(1)野生草莓往往是二倍體，而人工栽培的草莓往往是通過(guò)特殊技術(shù)培育成的多倍體，這利用了多倍體植株________________________的特點(diǎn)；但多倍體草莓的繁殖往往是無(wú)性繁殖，即使外植體細(xì)胞經(jīng)歷________與________過(guò)程，成為試管苗。該技術(shù)證明了已分化的植物細(xì)胞仍具有________________________________。(2)草莓植株感染病毒后會(huì)出現(xiàn)結(jié)果減少，品質(zhì)變劣。若要恢復(fù)其品質(zhì)，可選取植物的________進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗。此外，也可將抗病毒基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞細(xì)胞核中并培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因抗病毒草莓植株。為了檢測(cè)抗病毒基因是否存在于該轉(zhuǎn)基因植物的所有組織細(xì)胞中，需分別提取該轉(zhuǎn)基因植物的所有組織細(xì)胞中的________(填“蛋白質(zhì)”“總RNA”或“核DNA”)與基因探針雜交；欲從個(gè)體生物學(xué)水平來(lái)鑒定抗病毒基因是否賦予該植物抗病特性的操作是________________________。(3)在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于________狀態(tài)，可以對(duì)植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理，促使其發(fā)生突變，再進(jìn)一步培養(yǎng)篩選獲得草莓新品種。(4)若想利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培養(yǎng)出馬鈴薯—草莓雜種植物以提高土地的利用率，________(填“能”或“不能”)把兩物種細(xì)胞直接融合，理由是 。6.(8分)(2020·廣西南寧二診)人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測(cè)出HPV，從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生。回答下列問(wèn)題：(1)制備抗HPV的單克隆抗體時(shí)，給小鼠注入的抗原是________________________，然后從小鼠體內(nèi)獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的細(xì)胞，這種細(xì)胞內(nèi)參與抗體合成和分泌的細(xì)胞器有________________________。(2)制備單克隆抗體過(guò)程中用到了小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，這是因?yàn)樵摷?xì)胞具有________的特點(diǎn)。B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合時(shí)，常用的誘導(dǎo)因素有________________等。(3)在HAT培養(yǎng)基上能夠連續(xù)增殖的細(xì)胞是________，該細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體________(填“一定”或“不一定”)能抗HPV。對(duì)抗HPV抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)，先將培養(yǎng)液中的細(xì)胞濃度稀釋到3～10個(gè)/mL，然后在多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中只能加入0.1mL細(xì)胞稀釋液，絕對(duì)不能多加，原因是 。7.(8分)(2020·陜西榆林三模)某基因研究院培育出了轉(zhuǎn)基因克隆綿羊，該綿羊能合成深海魚(yú)體內(nèi)富含的不飽和脂肪酸omega－3。(1)在培育轉(zhuǎn)基因克隆綿羊過(guò)程中，應(yīng)用到的細(xì)胞工程技術(shù)有____________和核移植。核移植后的受體細(xì)胞利用物理或化學(xué)方法被激活后，應(yīng)移入____________中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查其發(fā)育能力。(2)科研人員將omega－3合成酶的基因片段導(dǎo)入受體細(xì)胞常采用________技術(shù)，使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并且在受體細(xì)胞內(nèi)________________的過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化。(3)若要鑒別XY型性別決定的動(dòng)物胚胎的性別可以獲取該種動(dòng)物囊胚的________細(xì)胞，并提取其DNA，用Y染色體上特異性DNA作探針檢測(cè)，這種技術(shù)稱為_(kāi)_______________。(4)目前，人們主要通過(guò)食用深海魚(yú)肉攝取omega－3，由于人們過(guò)度捕殺深海魚(yú)，同時(shí)環(huán)境污染等問(wèn)題也嚴(yán)重破壞了海洋生態(tài)系統(tǒng)，使生態(tài)系統(tǒng)的________能力下降。為了改善海洋環(huán)境，實(shí)現(xiàn)海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展，建造海底人工魚(yú)礁，不僅需要對(duì)破壞的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行恢復(fù)，還要考慮當(dāng)?shù)厝说慕?jīng)濟(jì)發(fā)展和生活需要，這主要遵循了生態(tài)工程的________原理。8.(8分)(2021·江蘇揚(yáng)州中學(xué)模擬)生態(tài)浮床技術(shù)是一個(gè)綜合了物理、化學(xué)、生物方法的水環(huán)境原位生態(tài)修復(fù)過(guò)程，它利用水生植物及根系微生物吸收N、P元素，同時(shí)可降解有機(jī)物和重金屬，并以收獲植物體的形式將其搬離水體，保護(hù)了水體生態(tài)環(huán)境，實(shí)現(xiàn)了景觀效益和生態(tài)功能的雙贏。下圖為某湖泊應(yīng)用生態(tài)浮床技術(shù)的示意圖，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：(1)生態(tài)浮床上的植物可供鳥(niǎo)類筑巢，下部根系為魚(yú)類和水生昆蟲(chóng)提供了棲息場(chǎng)所，這體現(xiàn)了群落的________結(jié)構(gòu)。(2)浮床下方水體中藻類植物的數(shù)量低于無(wú)浮床的水域，這主要是受_____(環(huán)境因素)的影響，因此，浮床在一定程度上能夠抑制藻類的生長(zhǎng)繁殖，防止水華發(fā)生。(3)夏季，湖泊中“聽(tīng)取蛙聲一片”，這體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)的信息傳遞具有________________________作用。(4)生態(tài)浮床既能凈化水質(zhì)、防治水華，又能美化環(huán)境，這體現(xiàn)了生物多樣性的________、________價(jià)值。9.(12分)(2021·廣東三校聯(lián)考)生態(tài)農(nóng)業(yè)是按照生態(tài)學(xué)原理和生態(tài)經(jīng)濟(jì)規(guī)律，因地制宜地設(shè)計(jì)、組裝、調(diào)整和管理農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)村經(jīng)濟(jì)的系統(tǒng)工程體系。如圖為某地區(qū)建立的生態(tài)農(nóng)業(yè)模式示意圖?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)生態(tài)農(nóng)業(yè)的建設(shè)要遵循自然界________的規(guī)律，不但要重視對(duì)________的保護(hù)，更要注重與經(jīng)濟(jì)、社會(huì)效益的結(jié)合。(2)該生態(tài)農(nóng)業(yè)模式的建立不但要考慮到自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律，還要考慮到經(jīng)濟(jì)與社會(huì)等系統(tǒng)的影響力，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的________原理。這種生產(chǎn)模式對(duì)環(huán)境的污染小，因?yàn)樯a(chǎn)一種產(chǎn)品時(shí)產(chǎn)生的有機(jī)廢物變成了________________。(3)人和動(dòng)物的糞便進(jìn)入沼氣池后，通過(guò)沼氣池中微生物的________作用可以產(chǎn)生沼氣?！暗吞肌敝篙^低的溫室氣體(二氧化碳等)排放，請(qǐng)指出圖中體現(xiàn)“低碳”的一個(gè)做法： 。10.(12分)(2021·廣東惠州調(diào)研)人體移植器官短缺是一個(gè)世界性難題。但隨著生物技術(shù)的發(fā)展，人們逐漸有了新的解決思路：Ⅰ.尋求可替代器官剔除豬的某些基因，用豬的器官作為供體。目前科學(xué)家借助CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)能夠剔除豬的某些相關(guān)基因，如圖為Cas9蛋白依據(jù)sgRNA片段切割DNA的示意圖(不同的sgRNA可以識(shí)別不同的DNA序列)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)DNA重組技術(shù)主要用到的工具酶包括DNA連接酶和________________，圖中充當(dāng)該酶的物質(zhì)是________________。(2)Cas9－sgRNA復(fù)合體能夠精準(zhǔn)識(shí)別某核苷酸序列的原因可能是。Ⅱ.自體器官培養(yǎng)大體思路是：將病人的體細(xì)胞核放入去核的卵母細(xì)胞中，讓重組細(xì)胞發(fā)育為早期胚胎，利用胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為特定的器官。(3)重組細(xì)胞體外培養(yǎng)需要一定的O2和CO2，CO2的主要作用是________________；胚胎干細(xì)胞的功能特點(diǎn)為_(kāi)_______________________________。(4)該過(guò)程的核心技術(shù)是________。這種方法獲得的器官移植時(shí)不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這是因?yàn)? 。11.(12分)(2021·云南昆明診斷)科學(xué)家利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)成功改造了獼猴基因組中與某病癥(Z癥)相關(guān)的SHANK3基因，制備出Z癥非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型，為該病的研究和治療奠定了重要基礎(chǔ)。操作過(guò)程如圖：(1)進(jìn)行甲過(guò)程前，采集的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到________________期才能與獲能的精子受精。(2)將CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)注入受精卵后，Cas9蛋白能在特定部位切割SHANK3基因(下圖虛線所示)，使該基因特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的________斷開(kāi)，經(jīng)其切割后產(chǎn)生具有________末端的DNA片段。(3)乙過(guò)程應(yīng)將受精卵移入________中繼續(xù)培養(yǎng)，該過(guò)程通常需要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是________________。丙表示的過(guò)程是________。(4)由以上技術(shù)獲得的Z癥獼猴，可通過(guò)體細(xì)胞核移植技術(shù)得到克隆Z癥獼猴，請(qǐng)寫(xiě)出基本程序(用流程圖表示)。參考答案1.(1)①3四種游離的脫氧核苷酸(dNTP)②A基因的mRNA(或A基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA)逆轉(zhuǎn)錄(或反轉(zhuǎn)錄)(2)可避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接(3)作用時(shí)間長(zhǎng)、更安全、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、更容易保存特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合解析(1)①方法一：根據(jù)PCR技術(shù)的特點(diǎn)，至少需要3次循環(huán)才能獲得目的基因；PCR技術(shù)的實(shí)質(zhì)是DNA體外復(fù)制過(guò)程，因此需要四種游離的脫氧核苷酸為原料；②方法二：利用逆轉(zhuǎn)錄方法獲得目的基因，應(yīng)以RNA為模板，以與目的基因的mRNA堿基互補(bǔ)的一段單鏈DNA為引物，在逆轉(zhuǎn)錄酶(或反轉(zhuǎn)錄酶)的作用下獲得cDNA，再在Taq酶的作用下進(jìn)行擴(kuò)增。(2)同種限制酶切割的黏性末端相同，易發(fā)生目的基因與質(zhì)粒間的任意連接及目的基因與質(zhì)粒的自身環(huán)化現(xiàn)象，用不同限制酶可防止以上現(xiàn)象的發(fā)生。(3)DNA疫苗具有作用時(shí)間長(zhǎng)、更安全、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、更容易保存等特點(diǎn)；單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備等特點(diǎn)；一般情況下制備單克隆抗體需以動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)為基礎(chǔ)。2.(1)耐高溫(或具有熱穩(wěn)定性)(2)限制(或限制性核酸內(nèi)切)目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)、目的基因無(wú)表達(dá)所需的啟動(dòng)子、目的基因無(wú)表達(dá)所需的終止子(3)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力弱已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達(dá)的細(xì)胞(4)蛋白酶缺陷型蛋白酶解析(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因需要特殊的耐高溫的DNA聚合酶。(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需用限制酶將載體切開(kāi)，以便目的基因的插入；無(wú)復(fù)制原點(diǎn)、無(wú)表達(dá)所需啟動(dòng)子和終止子的目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞是無(wú)法表達(dá)的，只有構(gòu)建成基因表達(dá)載體才能在受體細(xì)胞中表達(dá)。(3)經(jīng)鈣離子處理成為感受態(tài)細(xì)胞的大腸桿菌，吸收外源DNA的能力強(qiáng)；已轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞(大腸桿菌)指的是已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達(dá)的細(xì)胞。(4)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解，為防止蛋白質(zhì)被降解，可以選用不能產(chǎn)生該蛋白酶的缺陷細(xì)菌以及使用能夠抑制該蛋白酶活性的藥物，因此在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在蛋白質(zhì)純化的過(guò)程中應(yīng)添加蛋白酶的抑制劑。3.(1)mRNA逆轉(zhuǎn)錄不同(2)化學(xué)PCR技術(shù)要有一段已知目的基因的核苷酸序列(3)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列解析(1)為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細(xì)胞中提取對(duì)應(yīng)mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的cDNA片段只包含基因的編碼區(qū)，沒(méi)有非編碼區(qū)，因此與百日咳桿菌中該基因堿基序列不同。(2)如果基因比較小，核苷酸序列又已知，可以通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法人工合成；然后通過(guò)PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，PCR技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。(3)蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。4.(1)從基因文庫(kù)中獲取(2)基因的選擇性表達(dá)(或徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中的TaNHX2基因不能表達(dá))(3)Sau3AⅠ會(huì)出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定EcoRⅠ和BamHⅠ(4)不一定能(5)篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞(6)個(gè)體解析(1)目的基因的獲取方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。利用徑柳匙葉草的DNA直接獲得目的基因的方法為從基因文庫(kù)中獲取。(2)徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中TaNHX2基因不能表達(dá)，故不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中獲得TaNHX2基因的mRNA。(3)由圖2分析可知，用Sau3AⅠ與BamHⅠ酶切后產(chǎn)生的黏性末端相同，故若用BamHⅠ切割圖1所示的DNA片段獲得目的基因，則需選用Sau3AⅠ切割圖3所示質(zhì)粒，以便構(gòu)建基因表達(dá)載體，該方案由于酶切后的目的基因和質(zhì)粒兩端的黏性末端相同，故容易出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定的缺陷。為了防止目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化以及目的基因反接，可選用EcoRⅠ和BamHⅠ同時(shí)切割圖1所示的DNA片段。(4)用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切圖1所示DNA片段，用Sau3AⅠ、EcoRⅠ酶切圖3所示質(zhì)粒，然后再用DNA連接酶連接在一起形成的序列不一定還是BamHⅠ的識(shí)別序列，故所得重組質(zhì)粒不一定能被BamHⅠ切割。(5)圖3中質(zhì)粒上的抗生素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因，其作用是篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。(6)將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地中，觀察其生長(zhǎng)狀況，屬于個(gè)體水平的檢測(cè)。5.(1)果實(shí)比較大、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量增加脫分化再分化(一定的)全能性(或形成完整植株所需的全部基因)(2)分生區(qū)(如莖尖)部位核DNA進(jìn)行抗病毒的接種實(shí)驗(yàn)(3)分生(或分裂)(4)不能植物細(xì)胞外面有一層細(xì)胞壁，阻礙細(xì)胞間的雜交(融合)解析(1)野生草莓往往是二倍體，而人工栽培的草莓往往是通過(guò)特殊技術(shù)培育成的多倍體，這利用了多倍體植株的果實(shí)比較大、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量增加的特點(diǎn)；但多倍體草莓的繁殖往往是無(wú)性繁殖，即使外植體細(xì)胞經(jīng)歷脫分化與再分化過(guò)程成為試管苗。該技術(shù)證明了已分化的植物細(xì)胞仍具有(一定的)全能性。(2)草莓植株感染病毒后會(huì)出現(xiàn)結(jié)果減少，品質(zhì)變劣。若要恢復(fù)其品質(zhì)，可選取植物的分生區(qū)(如莖尖)部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗。此外，也可將抗病毒基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞細(xì)胞核中并培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因抗病毒草莓植株。為了檢測(cè)抗病毒基因是否存在于該轉(zhuǎn)基因植物的所有組織細(xì)胞中，需分別提取該轉(zhuǎn)基因植物的所有組織細(xì)胞中的核DNA與基因探針雜交；欲從個(gè)體生物學(xué)水平來(lái)鑒定抗病毒基因是否賦予該植物抗病特性的操作是進(jìn)行抗病毒的接種實(shí)驗(yàn)。(3)在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于分生(分裂)狀態(tài)，可以對(duì)植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理，促使其發(fā)生突變，再進(jìn)一步培養(yǎng)篩選獲得草莓新品種。(4)若想利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培養(yǎng)出馬鈴薯—草莓雜種植物以提高土地的利用率，不能把兩物種細(xì)胞直接融合，原因是植物細(xì)胞外面有一層細(xì)胞壁，阻礙細(xì)胞間的雜交(融合)。6.(1)滅活的HPV或HPV的抗原蛋白核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體(2)無(wú)限增殖PEG、滅活的病毒、電激(3)雜交瘤細(xì)胞不一定使每個(gè)孔內(nèi)的細(xì)胞不多于一個(gè)，從而達(dá)到克隆化培養(yǎng)的目的解析(1)制備抗HPV的單克隆抗體時(shí)，給小鼠注入的抗原是滅活的HPV或HPV的抗原蛋白。小鼠體內(nèi)能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞，漿細(xì)胞中參與抗體合成和分泌的細(xì)胞器有核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和線粒體。(2)小鼠骨髓瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖的特點(diǎn)。B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合時(shí)，常用的誘導(dǎo)因素有PEG、滅活的病毒、電激等。(3)在HAT培養(yǎng)基上能夠連續(xù)增殖的細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體不一定抗HPV，因?yàn)閺男∈篌w內(nèi)獲得的能產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞不一定是專門(mén)針對(duì)HPV的，也有可能是其他抗原刺激后產(chǎn)生的，漿細(xì)胞產(chǎn)生的抗體是否是抗HPV抗體，還需要進(jìn)行檢測(cè)。單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的、僅針對(duì)某一特定抗原的抗體，對(duì)抗HPV抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)，先將培養(yǎng)液中的細(xì)胞濃度稀釋到3～10個(gè)/mL，然后在多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中只能加入0.1mL細(xì)胞稀釋液，不能多加，因?yàn)槎嘤?.1mL的細(xì)胞稀釋液中可能含2個(gè)或更多個(gè)細(xì)胞，這樣每個(gè)孔內(nèi)的細(xì)胞就不是一個(gè)，就達(dá)不到克隆化培養(yǎng)的目的。7.(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)育培養(yǎng)液(2)顯微注射維持穩(wěn)定和表達(dá)(3)滋養(yǎng)層DNA分子雜交技術(shù)(4)自我調(diào)節(jié)整體性解析(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在培育轉(zhuǎn)基因克隆綿羊過(guò)程中，應(yīng)用到的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植。核移植后的受體細(xì)胞利用物理或化學(xué)方法被激活后，應(yīng)移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查其發(fā)育能力，為后續(xù)的培養(yǎng)做準(zhǔn)備。(2)將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射技術(shù)，使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化。(3)若要鑒別XY型性別決定的動(dòng)物胚胎的性別，通常在該種動(dòng)物囊胚期，提取其滋養(yǎng)層細(xì)胞DNA，然后用Y染色體上特異性DNA作探針，與滋養(yǎng)層細(xì)胞DNA混合進(jìn)行檢測(cè)，以確定待檢的滋養(yǎng)層DNA中是否含有Y染色體上特異性的DNA，該技術(shù)稱為DNA分子雜交技術(shù)。(4)人們?yōu)榱藬z取omega－3，過(guò)度捕殺深海魚(yú)，同時(shí)環(huán)境污染等問(wèn)題也嚴(yán)重破壞了海洋生態(tài)系統(tǒng)，導(dǎo)致海洋生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力下降。為了改善海洋環(huán)境，實(shí)現(xiàn)海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展，建造海底人工魚(yú)礁，不僅需要對(duì)破壞的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行恢復(fù)，還要考慮當(dāng)?shù)厝说慕?jīng)濟(jì)發(fā)展和生活需要，經(jīng)濟(jì)和生態(tài)治理兩不誤是生態(tài)工程的整體性原理的核心內(nèi)容。8.(1)垂直(2)陽(yáng)光(或光照強(qiáng)度)(3)影響種群繁衍(4)間接價(jià)值直接解析(1)生態(tài)浮床上的植物可供鳥(niǎo)類筑巢，下部根系形成魚(yú)類和水生昆蟲(chóng)的棲息環(huán)境，表現(xiàn)為垂直分層現(xiàn)象，屬于群落的垂直結(jié)構(gòu)。(2)藻類植物的正常生長(zhǎng)要進(jìn)行光合作用，浮床能遮擋陽(yáng)光，下方陽(yáng)光較弱從而抑制藻類繁殖，防止水華發(fā)生。(3)夏季，湖泊中的蛙聲是求偶信息，體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)的信息傳遞具有影響種群繁衍作用。(4)生物多樣性的間接價(jià)值也叫生態(tài)功能，生態(tài)浮床凈化水質(zhì)、防治水華的作用屬于生物多樣性的間接價(jià)值；生物多樣性的直接價(jià)值指對(duì)人類有食用、藥用和工業(yè)原料等實(shí)用意義的，以及有旅游觀賞、科學(xué)研究和文學(xué)藝術(shù)創(chuàng)作等非實(shí)用意義的價(jià)值，生態(tài)浮床美化環(huán)境的價(jià)值屬于生物多樣性的直接價(jià)值。9.(1)物質(zhì)循環(huán)生態(tài)環(huán)境(2)協(xié)調(diào)與平衡生產(chǎn)另一種產(chǎn)品的原料(或另一種產(chǎn)品的投入)(3)分解秸稈不直接焚燒，而用于培育食用菌、生產(chǎn)沼氣(合理即可)解析(1)生態(tài)農(nóng)業(yè)的建設(shè)是一種生態(tài)工程，生態(tài)工程建設(shè)的目的就是遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律，充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，防止環(huán)境污染，達(dá)到經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展。(2)在進(jìn)行生態(tài)工程建設(shè)時(shí)，要