07級《獸醫(yī)微生物復習題》

一、名詞解釋

1.微生物：微生物是存在于自然界中的一群個體弱小、結構筒單、肉眼不可見，必須借助顯微鏡放大數百倍甚至數萬倍才

能觀察清晰的?類弱小生物的總稱。

2.病原微生物：凡是能夠引起動、植物疾病的微生物稱為病原微生物，有細菌、真菌（包括霉菌和酵母菌）、放線菌、螺

旋體、支原體、立克次體、衣原體、病毒等。

3.病原體：指可造成人或者動物感染疾病的微生物（包括細菌、病毒、立克次氏體、真菌）或者其他媒介（寄生蟲、微生

物重組體包括雜交體或者突變體）。

病原菌：是指那些導致機體發(fā)病的細菌，是一群高度特化了的微生物，為了自身的生存，己適應而且必須在宿主生物體內

持續(xù)存在或者增殖，有時可造成宿主發(fā)病，

4.細菌：是一類個體弱小、有細胞壁的單細胞原核微生物。它們的個體弱小，形態(tài)結構簡單，細胞壁頑強，以二等分分

裂方式繁殖。

5.L型細菌：將遺傳穩(wěn)定的細胞壁缺陷的細菌，包括原生質體及原生質球，稱為L型細菌。革蘭氏陽性菌L型稱為原生

質體，必須生存于高滲環(huán)境中。革蘭氏陰性菌L型稱為原生質球,在低滲環(huán)境中仍有一定的反抗力。

6.菌落：即某個細菌在適合生長的固體培養(yǎng)基表而或者內部，在適宜的條件下，經過一定時間的培養(yǎng)，多數為18-24h,

分裂繁殖出巨大數量的菌體，形成一個肉眼可見的，有一定數量的獨立群體，稱為菌落，又稱克隆。

7.間體：是胞膜凹入胞質內形成的一種囊狀、管狀或者層狀的結構。其功能與真核細胞線粒體相似，與呼吸有關，并有

促進細胞分裂的作用。

8.質粒：是指細菌、酵母菌等生物游離在核體以外的小型環(huán)狀雙股DNA份子。是一種獨立于體外，能進行自主復制的細

胞質遺傳物質。R因子：與抗藥性有關：F因子：與有性接合有關；其他質粒：與抗生素，色素合成有關：基因工程中作為

目的基因載體。

9.異染顆粒：是某些細菌細胞質中一種特有的酸性小顆粒。它對堿性染料的親和力特殊強。

10.英膜：某些細菌在其生活過程中可以在細胞壁的外周產生一層包圍整個菌體，邊界清晰的黏液樣物質，稱為英膜。

11.芽泡：某些細菌在其生長發(fā)育后期，在細胞內形成一個圓形或者橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強的休眠體。

未形成芽抱的菌體稱為繁殖體或者營養(yǎng)體。

12.鞭毛：生長在某些細菌體表的長絲狀蛋白質附屬物，稱為鞭毛，其數目為一至數條，具有運動功能。

13.細菌生長曲線：將細菌培養(yǎng)于適宜的液體培養(yǎng)基中，定時取樣測定其細菌總數和活菌數，以活菌數的對數為縱坐標，

以培養(yǎng)時間為橫坐標，可描繪出一條細菌生長的典型曲線，該曲線稱為細菌生長曲線.細菌的生長曲線分為遲緩期、對數

期、穩(wěn)定期和衰亡期4個時期。細菌的這種生長曲線是在體外人工培養(yǎng)條件下觀察到的，對細菌生長規(guī)律的研究有重要意

義。

14.SPF動物：即無特定病原體動物，是指不存在某些特定的具有病原性或者潛在病原性的微生物的動物。

15.無菌法：為防止任何微生物進入人和動物機體以及其他物品而采取方法均叫無菌法，其操作方法叫無菌操作。

16.巴氏消毒法：亦稱低溫消毒法，冷殺菌法，是一種利用較低的溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或者特定微生物，而又不

致嚴重傷害其營養(yǎng)成份和風味的消毒法。60、65笆作短期加熱處理，殺死有害微生物

17.濾過除菌法：是通過機械、物理阻留作用將液體或者空氣中的細菌等微生物除去的方法，但濾過除菌常不能除去病毒、

支原體以及細菌L型等小顆粒。

18.細國素：是某種細菌產生的?種具有殺困作用的蛋白質，只能作用于與它不同困株的細密以及與它米源關系相近的細

菌。例如大腸桿菌所產生的大腸桿菌素，除作用于某些型別的大腸桿菌外，還能作用于親緣關系相近的沙門菌、巴氏桿菌

等，根據其份子量的大小可分為多肽細菌素，蛋白質細菌素和顆粒細菌素三類。

19.毒力：又稱致病力，表示病原體致病能力的強弱。對細菌性病原體來說，毒力就是菌體對宿主體表的吸附，向體內侵

入，在體內定居、生長和繁殖，向周圍組織的擴散蔓延，對宿主謹防功能的反抗，以及產生傷害宿主的毒素等一系列能力

的總和。同一細菌的不同毒株，其毒力不一樣。

20.類毒素：利用外毒素對熱和某些化學物質敏感的特點，用0.3-0.4%甲醛處理，使其毒性徹底喪失，但仍保持抗原

性，這種經處理的外毒素為類毒素，常用來預防注射。也可用類毒素注射動物（如馬），以制備外毒素的抗體，稱為抗毒素，

作治療用。

21.基因轉移：供體細菌間接或者直接地將部份遺傳物質單向傳遞給受體細菌，從而導致受體細菌發(fā)生基因重組的現(xiàn)象，

稱為基因轉移。

22.包涵體：病毒感染宿主細胞后，細泡的胞核或者胞質內有病毒顆粒或者未裝配的病毒，病毒成份組成的在光學顯微鏡

下可見到的團塊，稱為包涵體?？赏ㄟ^固定染色后在光鏡下可見。可單個或者多個，有的較大，有的技小，或者圓形或者

無規(guī)律形。

可嗜酸（伊紅染成粉紅色）或者嗜堿（蘇木精染成藍色）。

23.中珠試臉：在含青綠素0.5IU/mL的培養(yǎng):基中，幼齡炭疽桿菌因細胞壁的肽聚糖合成受到抑制，原生質體相互連接成

串，稱為串珠反應

24.卡介苗：卡氏和介氏二人將牛分支桿菌在培養(yǎng)基上經13年230次傳代，使有毒菌株變?yōu)槎玖p重的菌株，哺育出無

毒的結核分支桿菌，對人、牛無致病性，用來創(chuàng)造疫苗，預防人的結核病，此種疫苗稱卡介苗（BCG）。它可以使機體產生

免疫力。

25.病毒：是由蛋白質包裹的只含一種類型的核酸（DNA或者RNA）只能在活的細胞內以復制方式增殖的非細胞微型生物。

26.病毒顆粒（病毒子）：成熟的，結構完整的，具有可感染性的單個病毒，等同于病毒?；蛘卟《咀?。病毒顆粒具有一

定的形態(tài)結構及傳染性，病毒顆粒極其弱小，測定其大小的單位通常用納米，完整的病毒顆粒主要由核酸和蛋白質組成。

27.骯病毒：是動物與人傳染性海綿狀腦病的病原，沒有核酸，是具有傳染性的蛋白顆粒。

28.病毒復制：病毒增殖只在活細胞內進行，是以病毒基因為模板，在筋的作用下，分別合成其基因及蛋白質，再組裝成

完整的病毒顆粒，這種方式稱為復制。

29.二倍體細胞株：將長成的原代細胞消化分散成單個細胞，繼續(xù)培養(yǎng)芍代，獲得的細胞染色體數與原代細胞一樣的二倍

體，又稱繼代細胞。此種細胞數目可擴大，對病毒的易感性則基本無變化。

30.噬菌體：是感染細菌、支原體、螺旋體、放線菌以及藍細菌等的一類病毒，亦稱細菌病毒。在自然界分布極廣，凡是

有上述微生物生長的地方，都有相應種類噬菌體存在，大多數為蝌蚪狀。

二、問答題

1、與醫(yī)學相關的微生物有哪些？

與醫(yī)學相關的微生物有：病毒、細菌、真函、放線菌、支原體、衣原體、立克次氏體、螺旋體。

2、微生物學的先驅有那些？他們的主要成績是什么？

先驅有呂文虎克、巴斯德、科赫、貝杰林可等

呂文虎克：十七世紀，荷蘭人呂文虎克用自制的、能放大160s200倍的顯微鏡第一次看到了微生物巴斯德是微生物的

奠基人°

（1）發(fā)現(xiàn)并證實發(fā)酵是由微生物引起的：

（2）徹底否定了“自然發(fā)生”學說：著名的曲頸瓶試驗無可辯駁地證實，空氣內確實含有微生物,是它們引起有機質的

腐敗。

（3）免疫學一一預防接種苜次制成狂犬疫苗

⑷其他貢獻巴斯德消毒法；60—65°C作短期加熱處理，殺死有害微生物

微生物的另一位奠基人是一位德國醫(yī)生柯赫

（1）微生物學基本操作技術方面的貢獻：①細菌純培養(yǎng)方法的建立

②設計了各種培養(yǎng)基，實現(xiàn)了在實驗室內對各種微生物的培養(yǎng)

（2）對病原細菌的研究作出了突出的貢獻：

①具體證實了炭疽桿菌是炭疽病的病原菌；

②發(fā)現(xiàn)了肺結核病的病原菌（1905年獲諾貝爾獎）

③證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則一一著名的柯赫原則

Lister建立消毒技術

貝杰林可用病毒命名可以通過細菌濾器的史無前例的病原體。

3、微生物有哪些特性？

1、個體弱小、結構簡單，大小通常用um（微米）或者nm（納米）表示；大多數是單細胞結構

2、吸收多、轉化快胃I」大：消耗自身分量2000倍食物的時間：大腸桿菌：1小時食譜廣:纖維素、木質素、幾丁質、角蛋

白、石汨、甲醉、甲烷、天然氣、塑料、酚類、割化物、各種有機物均可被微牛?物作為糧食

3、種類繁多，分布廣泛：已發(fā)現(xiàn)的微生物達20萬種以上，新種不斷發(fā)現(xiàn)，極端環(huán)境、土壤、空氣、水、動植物體表及某

些器官。

4、群居混雜、相生相克，共生、協(xié)同、競爭，維持著生態(tài)平衡

5、生長繁殖快：大腸桿菌，20min/代，24h可繁殖72代

6、適應能力強、易變異：抗（逆）性強：抗熱抗寒：有些微生物可以在一12c~-30°C的低溫生長：抗酸堿：細菌能耐

受并生長的pH范圍：pH0.5、13；耐滲透壓：蜜餞、腌制品，飽和鹽水（NaCl,32%）中都有微生物生長；抗壓力：有些細菌

可在1400個大氣壓下生長；當環(huán)境不良時，它們浮現(xiàn)形態(tài)、生理、毒力的變異，如芽抱菌產生芽抱、霉菌形成抱子，病原

菌產生抗藥性

7、牛物遺傳性狀典型、實驗技術體系完善

4、細菌的基本結構和特殊結構有哪些？

細菌都具有細胞壁、細胞膜、細胞質、核體等基本結構。

有些細菌在一定條件下還具有特殊結構細施的特殊結構包括莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽胞等。

5、細菌形態(tài)、結構特征在細菌鑒定中有何作用？

①細菌的大?。涸谝欢l件下，各種細菌的大小是相對穩(wěn)定而具明顯特征性的，可作為鑒定細菌的一個依據。

②細菌的基本形態(tài)：細菌有球狀、桿狀和螺旋狀三種基本形態(tài)，并因此而將細菌分為球菌、桿菌和螺旋狀菌三大類。在

自然界所存在的細菌中，以桿菌為最常見，球菌次之，而螺旋狀的細菌則至少。在正常情況下，各種細窗的基本形態(tài)和排

列方式是相對穩(wěn)定而有特征性的，可作為分類和鑒定細菌的一個依據。

（3）菌落：各種細菌菌落的人小、顏色、質地、表面性狀、邊緣、結構等均有各自的特征，以此來分離、純化、計數、鑒

定細菌。因此，在進行細菌分離時常需獲得單個菌落。

④細菌的特殊結構：有莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽抱等，這些特殊結構，與細菌的致病力有關，也有助于細菌的鑒

定。如芽抱的有無、形態(tài)、大小和著生部位是細菌分類和鑒定的重要指標

⑤細菌的內含物，如異染顆粒，伴弛晶體等也有助于細菌的鑒定。

6、繪出細菌的基本結構和特殊結構圖。

7、細菌群體生長繁殖分幾個時期？各個時期有何特點？

細菌群體的生長繁殖分4個時期：遲緩期、對數期、穩(wěn)定期、衰亡期。

遲緩期：是細菌初到新環(huán)境的適應期。此時菌體增大、代謝活躍、合成所需他系統(tǒng)。RNA含量明顯增多，）NA無變化，

此時細菌數并不增加。這一過程普通需f*4h

對數期：細菌迅速分裂繁殖，活菌數以恒定的幾何級數增長，生長曲線接近?條斜的直線。該期病原菌致病力最屈，其形

態(tài)染色特性及生理活性均較典型，對抗菌藥物等的作用較為敏感。大腸桿菌對數期可持續(xù)6-1Oh

穩(wěn)定期：因營養(yǎng)消耗、代謝產物蓄積等，此時新繁殖的活菌與死菌平衡，活菌數最多。該期形態(tài)染色不特異。產生毒素等

代謝產物.普通持續(xù)時間8ho

衰亡期：細菌死亡速度加大，繁殖速度變小。如不移植到新培養(yǎng)基，最終可全部死亡。此期菌體變形或者自溶，染色不

典型，難以鑒定。

8、細菌生長繁殖需要哪些條件？

細菌在適宜的環(huán)境條件下才干生長繁殖。影響生長的環(huán)境因素不少諸如營養(yǎng)、溫度、pH、氧及其他氣體等等。

1）營養(yǎng)物質細菌生長所需的基本營養(yǎng)物質可分為碳源、氮源、無機鹽、生長因子和水分。根據各種細窗不同的營養(yǎng)要

求，選用不同的培養(yǎng)基，以滿足其生長的需要。

2）溫度不同細菌適應的溫度范圍不同，細菌有各自的可適溫度范圍及最適溫度。根據細菌適應的溫度范圍，可將細菌分

為3類：

嗜冷菌，范圍5-30°C,最適10-20°C；嗜溫菌，范圍10-45°C,最適20-40°C：

嗜熱菌，范圍25-95°C,最適50-60°Cc病原菌均為嗜溫菌，最適溫度為37。C。

3）pH包種細菌均有可適pH范圍及最適pHo大多數細菌可以在pH6-8之間生長，但多數病原菌的最適pH為7.2-7.6。

4）氣體微生物對氣體的需求根據細菌對氧的需求可分為需氧菌、厭氧筐和兼性厭氧菌。

5）滲透壓

9、試述濕熱滅菌的原理和種類。原理：高溫對微生物具有明顯的致死作用，但不同微生物對熱的敏感性有明顯差異，細菌

的繁殖體最為敏感，其次是真菌和病毒,細菌芽抱對熱有很強的反抗力。用高溫處理微生物時，可對菌體蛋白質、核酸酶

系統(tǒng)等產生直接破壞作用，熱力可使蛋白質中的氫鍵破壞，使之變性或者凝固，使雙股DNA分開為單股，受熱而活化的核

酸酶使單股DNA斷裂，導致菌體死亡。

1、利用沸水或者水蒸汽消毒滅菌，水分容易穿透物品，熱傳導快，能迅速提高物品內部的溫度；2、蛋白質凝固是

高溫殺菌的主要環(huán)節(jié)，濕熱滅菌時蛋白質易于吸收水分，凝固變性；3、蒸汽與物品接觸凝結成水，放出潛熱，提高溫度,

加速微生物的死亡。

種類：①煮沸法②巴氏消毒法(主要用于牛乳等消毒)③流通蒸汽消毒法④流通蒸汽滅菌法⑤高壓蒸汽滅菌法

10、試述基因水平的柯赫法則。

①應在制病菌株中檢出某些基因或者其產物，而無毒力菌株中沒有

②如有毒力菌株的某個基因被破壞，則菌株的毒力應減弱或者消除?；蛘邔⒋嘶蚩寺〉綗o毒菌株內，后者成為有毒

菌株。

③將細菌接種動物時，這個基因應在感染的過程中表達

④在接種動物檢測到這個基因產物的抗體，或者產生免疫保護，該法也合用于細菌以外的微生.物，如病毒。

1k試述內毒素與外毒素的區(qū)別。

特性外毒素內毒素

存在部位1細菌細胞在牛長壑殖過程中分泌至周圍環(huán)境中存在于菌細胞內,為細胞壁結構成份細菌細胞甭解釋才解放出來

產牛苗中部為某仕匕蘇蘭氏陽區(qū)菌產牛,也有小粕陽炸苦u氏阻件苗

必學成份

蛋白質脂多健(LPS)

制病特異性不同勺1、毒素各不相同不同病原菌內毒素作用基本相同

毒性作用特異性，為細胞毒索,腸毒索或者神經毒素對特定全身性，致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐

的細晌或者組如巖僖牯窟作用

毒性程度高，往往致死弱，很少致死

致熱性對宿主不致熱(致熱性，常致宿主發(fā)熱

抗原性徹底抗原，抗原性強不徹底抗原抗原性弱

制成類毒素旎，用甲醛處理不能

右

熱穩(wěn)定比耐熱性強

12、試述細菌毒力減弱的方法。

1)長期在體外連續(xù)培養(yǎng)傳代病原菌在體外人工培養(yǎng)基上連續(xù)多次傳代后，毒力普通都能逐漸減弱乃至失去毒力。

2)在高于最適生長溫度條件下培養(yǎng)例如炭疽I號和II號疫苗，均是將炭疽桿菌強毒株在42-43笆培養(yǎng)傳代育成。

3)在含有特殊化學物質的培養(yǎng)基中培養(yǎng)如廣為采用的結核病卡介苗(BCG),是將牛型結核桿菌在含有膽汁的馬鈴薯培養(yǎng)

基上面.15天傳1代，持續(xù)傳代13年后育成。

4)在特殊氣體條件下培養(yǎng)如無能膜炭疽芽抱苗是半強毒菌株在含5胸動物血清的培養(yǎng)基上，在的條件下選育

的。

5)通過非易感動物如豬丹毒弱毒苗(GC42)是將強致病菌株通過豚鼠370代后，又通過雞42代選育而成。

6)通過基因工程的方法去除毒力基因或者用點突變的方法使毒力基因失活，可獲得無毒力菌株或者弱毒菌株。但對多

基因調控的毒力因子較難奏效。

13、常見的細菌變異現(xiàn)象有哪些？

(1)形態(tài)和結構變異：細菌外形由桿狀一圓球形，有莢膜的變?yōu)椴划a生英膜，有鞭毛的變?yōu)闊o鞭毛的而不能運動，有芽

抱的變?yōu)槭パ勘У哪芰Φ取?/p>

(2)茴落形態(tài)變異：a.S-R變異正常的光滑型菌落可能變成粗糙型稱為S-R變異，它往往伴有著其他重要特性

的改變，包括毒力的喪失和抗原結構的改變

b.粗糙型轉變?yōu)楣饣苑Q為R-S回歸變異

(3)毒力變異：病原菌的毒力可以由強變弱或者由弱變強，在自然情況下和人工誘變都可以發(fā)生

(4)耐藥性變異：臨床上選用敏感藥物，合理使用抗生素

(5)代謝變異：細菌在代謝過程中原來能合成某種營養(yǎng)成份的特性，會變異失去這種能力，成為所謂營養(yǎng)缺陷型，有利

于人為提供該種營養(yǎng)成份

(6)抗原性變異：在環(huán)境條件的影響下，一些細菌失去某種抗原或者增添某種抗原

14、何謂基因重組？細菌基因轉移和重組有幾種方式？

兩個不同性狀個體之間的遺傳物質轉移到一起，經過重新組合形成遺傳型個體的方式叫基因重組。細菌基因轉移和重組的

主要形式有轉化、轉導、接合、原生質體融合和轉染。

①轉化受體菌直接攝取供體菌的游離DNA片段，使受體菌獲得新的遺傳性狀的過程。

②轉導以溫和噬菌體為媒介，把供體菌的DNA小片段攜帶到受體菌中，通過交換與整合，使受體菌獲得供體菌的部分遺

傳性狀，稱為轉導。獲得新遺傳性狀的受體菌細胞稱為轉導子。細菌的轉導分普遍性轉導和局限性轉導。

③接合是兩個完整的細菌細胞通過性菌毛直接接觸，由供體細菌將質粒DNA轉移給受體細菌的過程。接合性質粒有F質

粒、R質粒等。

④原生質體融合：選擇具有優(yōu)良性狀的兩個菌株細胞作為親本，用人工方法去除其細胞壁，成為原生質體，使原生質體

發(fā)生融合，形成帶有雙親本菌株優(yōu)良性狀、遺傳穩(wěn)定的融合子，這種技術稱為原生質體融合。

⑤轉染：受體菌獲得從噬菌體而非從其他供體菌提取的DNA的過程，稱為轉染。另?方面，轉染?詞更廣泛地用于真核

細胞，其含義有差別，指真核細胞通過病毒感染，獲得某一段DNA或者RNA的過程。轉染通常多用于哺乳動物細胞，往往

為了獲得重組病毒而設計。

15、試述人工培養(yǎng)細菌的用途及其意義。

用人工的方法提供細菌在動物體內生長繁殖需要的基木條件，達到培養(yǎng)細菌，進行鑒定及進一步利用的目的。因此，細菌

的人工培養(yǎng)技術是微生物學研究和實踐的十分重要的手段。表現(xiàn)在醫(yī)學中的應用，在工農業(yè)生產中的應月，在基因工程中

的應用。

1）在醫(yī)學中的應用

細菌培養(yǎng)對疾病的診斷、預防、治療和科學研究等多方面都具有重要的作用。

①傳染性疾病的病原學診斷取患者標本，進行細菌分離培養(yǎng)、鑒定和藥物敏感試驗。是診斷傳染性疾病最可靠的依據，同

時也可指導臨床治療用藥。

②細菌學研究研究細菌的生理、遺傳變弁、致病性、免疫性和耐藥性等，均需人工培養(yǎng)細菌。人工培養(yǎng)細菌還是人類發(fā)

現(xiàn)尚不知道的新病原菌的先決條件之一。

③生物制品的制備將分離培養(yǎng)出來的純種細菌，制成診斷菌液，供傳染病診斷使用。制備疫苗、類毒素以供預防傳染病

使用。將制備的疫苗或者類毒素注入動物體內，獲取免疫血清或者抗毒素，用于傳染病治療。上述制備的制劑統(tǒng)稱生物制

品，在醫(yī)學上有廣泛用途。

2）在工農業(yè)生產中的應用

細菌在培養(yǎng)過程產生多種代謝產物，經過加工處理，可制成抗生素、維生素、氨基酸、有機溶劑、酒、醬油、味精等產品。

細菌培養(yǎng)物還可用于處理廢水和垃圾、創(chuàng)造菌肥和農藥，以及生產酷制劑等。

3）在基因工程中的應用

因為細菌具有繁殖快、易培養(yǎng)的特點，所以大多數基因工程的實驗和生產先在細菌中進行。如將帶有外源性基因的重組DNA

轉化給受體菌，使其在菌體內獲得表達，現(xiàn)在用此方法已成功制備出胰島素和干擾素等生物制劑。

16、試述正常菌群對機體的作用。

廣義而言，正常菌群與宿主之間形成為了一個共生關系，具體表現(xiàn)在營養(yǎng)，免疫和生物拮抗三個方面。

①營養(yǎng)，’乍用：消化道正常菌群不僅從宿主消化道獲取營養(yǎng)，同時通過匡助消化，合成維生素等對宿主遠營養(yǎng)作用，胃腸

道的消化菌參預營養(yǎng)物質的消化，如纖維素只能在微生物消化酶的作用下被分解為揮發(fā)性脂肪酸等，蛋白質和其他物質受

微生物消化酶的作用而降解，以利于機體吸收，腸道細菌能利用非蛋白氮合成蛋白質，有的合成B族維生素和維生素K,并

參預脂肪的代謝，此外消化道的正常菌群有助于破壞某些有害物質并阻撓其吸收。

②免疫作用：正常菌群對宿主的體液免疫，細胞免疫和局部免疫均有一定影響，特別對局部免疫影響更大。

③生物拮抗作用：正常菌群對包括致病菌在內的外籍菌入侵動物體有一定程度的拮抗作用，生物拮抗作用的原因是由于

厭氧菌、細菌素、及免疫結合的復雜作用以及特殊的生物物理和生物化學環(huán)境。

菌群失調；如果宿主患病、外科手術.環(huán)境改變和濫用抗菌藥物等，宿主機體某個部位的正常菌群中微生物種類、數量和

棲居處將會發(fā)生改變，即成為菌群失調。

17、細菌性病料如何進行微生物學診斷？

1）病料采集原則

①無菌概念②采取有病變部位③采取時間，瀕臨死亡，普通不超過6小時④適當保存⑤及時送檢

2）微生物診斷步驟

①形態(tài)觀察病料觸片、涂片，瑞氏染色、姬姆薩染色，鏡檢

②分離培養(yǎng)適宜培養(yǎng)基培養(yǎng)與分離觀鏢菌落形態(tài)、革蘭氏染色觀測形態(tài)

③生化鑒定

④血清學鑒定（凝集反應、瓊擴試臉、標記抗體技術等）

⑤動物忒驗：選擇敏感動物接種。

18、金黃色葡萄球菌的致病因素及所致疾病。

葡萄球菌的某些細胞壁結構具有毒力因子的作用，如葡萄球菌蛋白A、莢膜、纖連素結合蛋白等，后者屬于微生物表層成份

識別黏附基質，包括其他至少12種蛋白，最主要的毒力因子是毒素及酶°

毒力因子：毒素（a毒素?、腸毒素）密（凝固酶、耐熱核酸酶）

①a毒素：對多種哺乳動物紅細胞有溶血作用，其原理是毒素份子插入紅細胞膜疏水區(qū)，形成微孔，紅細胞溶解。

引起小血管收縮，導致局部缺血、壞死。

②腸港素：引起人類中毒，大多數動物對此毒素又很強的反抗力，外毒素，耐熱100。C30min,反抗消化道蛋白酶的水

解作用，血清型A.B.C1.C2.C3.D.E均可引起急性胃腸炎即食物中毒。常污染食物有牛奶、肉類等

③凝固酶：凝固酶是鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標。作用：能使含有抗凝劑的人’%血漿發(fā)生凝集。特點：耐熱:

易被蛋白酶分解破壞分類：1.游離凝固酶一類似凝血酶原樣物質，經激活后可使血漿中纖維蛋白原變成纖維蛋白。保護病

菌免受血清中殺菌物質的破壞，同時可使葡萄球菌感染易于局限化。2.結合凝固酎?結合在菌體表面，與血漿中纖維蛋白

結合后使血漿凝固在菌體表面，阻撓存噬細胞的吞噬，即使被吞噬也不易被殺滅

④耐熱核酸能：1.此酹能迅速分解核酸，利于病原菌擴散2.目前也將該前?的檢測作為鑒定致病菌株的重要指標之?.

⑤其他毒素及酎：細胞毒素（a、y、5,殺白細胞素）、表皮剝脫毒素、毒性休克綜合征毒素T,纖維蛋白溶酷、透明質

酸的、脂酶等。

常引起兩類疾?。?/p>

①化膿性疾病例如創(chuàng)傷感染、膿腫、蜂窩織炎、乳腺炎、關節(jié)炎、敗血癥和膿毒敗血癥等。

②毒素性疾病被葡萄球菌污染的食物或者飼料引起人或者動物的中毒性嘔吐、腸炎及人的毒素休克綜合征等。

19、試述腸桿菌科細菌的特性。

腸桿菌科細菌的特性：

①形態(tài)與結構：中等大小的兩端鈍圓的革蘭氏陰性桿菌，多數有鞭毛、菌毛，少數行英膜，無芽抱

②培養(yǎng)特性：本菌為兼性厭氧菌，在普通培養(yǎng)基上生K良好，最適生K溫度為37oC,最適生KPH為7.2-7.4,麥康凱

上形成紅色菌落；在伊紅美藍上呈黑色帶金屬閃光的菌落；在SS瓊脂上普通不生長或者生長較差，生長者呈紅色。一些致

病菌在綿陽血平板上呈8溶血

③發(fā)醉葡萄糖產酸或者兼產氣，接觸酶試驗、硝酸鹽還原試驗陽性，氧化酶陰性。

④除歐文菌，均有本科細菌的共同抗原0抗原、H抗原和K抗原

⑤反抗力：非抗酸性等

20、豬丹毒桿菌的微生物學診斷要點有哪些？

1顯微鏡檢查：可采取高熱期病豬耳靜脈血作涂片，染色、鏡檢。死后可采取心血及新鮮肝、脾、腎、淋巴結等制成涂片，

可革蘭氏染色鏡檢，革蘭氏陽性，藍色c如發(fā)現(xiàn)少量典型桿菌，可初步確診。如為慢性心內膜炎病例，可用心臟瓣膜增生

物涂片，境檢。羔羊患關節(jié)炎病時，可檢查關節(jié)滑膜囊液。

2.分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)時可用含有0.2%1W/V）的葡萄糖或者5%s10%無菌馬血清（譚/V）的半固體瓊脂培養(yǎng)基。在血瓊脂平

皿經37。C,24h培養(yǎng)可形成透明、灰白色、露珠樣小菌落，并形成a溶血環(huán)。在麥糠凱上不生長，明膠穿刺生長特殊，

沿著穿刺線向四周生長，如試管刷狀，不液化明膠。

3細菌鑒定：主要考慮與李氏桿菌鑒別診斷。

4.血清型鑒定：將待鑒定菌株的純培養(yǎng)物加入陶甲醛滅活，經洗滌、高壓、離心處理后制成沉淀原，與模式菌株的高免血

清做瓊脂擴散試驗。

21、試述炭疽芽泡桿菌的生物學特性。

⑴形態(tài)及染色特性

①本菌為G+大型桿菌；無鞭毛不能運動，芽胞橢圓形。

②動物組織內，此菌單在或者連成2-5個的短鏈，相連的菌端平截而呈竹節(jié)狀。炭疽桿菌在組織內可形成莢膜。

③炭疽桿菌惟獨當暴露空氣中的后，方能形成芽胞。在人工培養(yǎng)基中，本菌常形成長鏈。

⑵培養(yǎng)特性：

①需氧，對營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)中即能生長良好。

②在固體培養(yǎng)基表而：強毒菌株的菌落表現(xiàn)為粗糙型，菌落大而扁平，灰白色，不透明，表面較干而粗糙，邊緣呈卷發(fā)

狀。在血瓊脂上普通不溶血

③在普通肉湯中培養(yǎng)24h后，培養(yǎng)液仍然透明，管底有白色絮狀沉淀。液面無菌膜或者菌環(huán)形成。

⑶生化特性：發(fā)醉葡萄糖，產酸而不產氣，不發(fā)醉阿拉伯糖、甘露糖、木糖、VP試驗陽性、不產生呵噪和硫化氫。

⑷反抗力：

①炭疽桿菌繁殖體的反抗力不大，60笆經30-60分鐘，普通濃度的常用消毒劑，能于短時內將其殺死。在未解剖的尸

體中，細菌可隨腐敗而迅速死亡。

②芽胞的反抗力特殊強大，在干燥狀態(tài)下可長期存活。炭疽芽胞需經煮沸1—2h,121笆高壓滅菌5-10min,或者

160°C干熱滅菌2h方被殺死。

③常用的有效消毒劑是新配的20%石灰乳或者20%漂白粉作用48

h?⑸抗原結構：炭疽桿菌有下列四種主要抗原成份。

①菌體多糖抗原：這是細胞壁內存在的一種半抗原，與細菌毒力無關，性質穩(wěn)定，經高溫高壓后，抗原性不被破壞，用

于此菌鑒定和診斷。

②莢膜多肽抗原：僅見于有毒菌株，與毒力有關。

③保護性蛋白質抗原：這是炭疽桿菌生活過程中產生的細胞外蛋白質之一，具有免疫原性，能使機體產生抗炭疽感染的

保護力。

④芽抱抗原：是芽抱的外膜層含有的抗原決定簇，構成特異性抗原，具有免疫原性和血清學診斷價值

⑹致病性：炭疽桿菌可引起各種家畜、野獸和人類的炭疽，牛、綿羊、鹿等易感性最強，引起敗血癥。犬貓食肉動物等有

相當大的反抗力，禽類普通不感染。

毒力主要與莢膜和毒素有關。毒素由水腫因子、致死因子、以及保護性抗原3種亞單位構成。

22、病毒的基本特征有哪些？

病毒的基本特征：

①病毒普通以病毒顆?；蛘卟《咀拥男问酱嬖冢哂幸欢ǖ男螒B(tài)、結構以及傳染性。病毒粒子極其弱小，測定其大小的

單位通常用納米（nm）,在電鏡下才干觀察。

②病毒的形態(tài)：多形性。各種病毒顆粒形態(tài)不一，但都具有蛋白質的衣殼及其包裹的核酸芯糊，衣殼與芯摘共同構成核

衣殼。有的病毒核衣殼外還有囊膜及纖突衣殼由殼粒組成，呈20面體對稱或者螺旋狀對稱，少數為復合對稱。

③結構：完整的病毒主要由核酸和蛋白質組成。每種病毒只含?種核酸，或者是DNA,或者是RNA；每種核酸有雙股與單

股、線狀與環(huán)狀、分節(jié)段與不分節(jié)段之分。病毒的蛋白質也有結構蛋白和非結構蛋白之分。脂質與糖是構成是囊膜與纖

突的組分，可被氯仿或者乙醒等脂溶劑破壞。

④寄生生.活沒有核糖體和酶系統(tǒng)，不能獨立進行代謝活動，必須在易感活細胞內寄生，利用宿主細胞的代謝系統(tǒng)，有嚴

格的細胞內寄生性。

⑤不能進行二等分分裂，通過特有的復制方法進行繁殖。

⑥病毒對抗生素不敏感、干擾素能抑制其增殖

⑦病毒無細胞結構

23、試述病毒與其他微生物的主要區(qū)別。

細菌支原體單立克次體螺旋體放線菌直菌單、

種類/性狀結構病毒非單衣原體單于細菌與原蟲之介于細菌與真菌之間多

核酸DNA/RNAD、ARNAJA、NRNADA、NRNADAN、RNADANsRNADAN,RNADAN,

繁殖方式復制二分裂分裂蘋二分契二分裂二分裂二分裂公舞拌A殉

希細隨培養(yǎng)+++

對抗生素的敏屈一++++十++

肅午擾豪的敏屈+----一+—

24、畫出病毒顆粒的基本結構模式圖。

25、試述病毒分離培養(yǎng)的方法。

①實驗動物：病毒必須在活細胞中方能進行生命活動，因此早期對病毒生物學特性的研究主要通過動物接種（小嗣、

大鼠、家兔、家禽等。）以培養(yǎng)病毒。目前動物接種僅限于研究病毒或者甫株的致病性或者為切當診斷某種病毒為病原體。

②雞胚接種，個別病毒（如流感病毒）必須在雞胚中進行分離培養(yǎng)。受精雞胚的羊膜腔和尿囊腔均可用以分離流感病

毒C

③組織細胞培養(yǎng)：靜置培養(yǎng)和旋轉培養(yǎng)。其中細胞培養(yǎng)是培養(yǎng)病毒最常見的技術。

26、何為病毒的一步生長曲線？

一步生長曲線即以感染時間為橫坐標，病毒效價為縱坐標，繪制出的病毒特征曲線。感染比（MOD是指在一個系統(tǒng)中感染

病毒的細胞數與細胞總數之比。在人工培養(yǎng)的細胞中，接種高VOI的病等，所有細胞幾乎同時受到病毒感染，如分析該培

養(yǎng)系統(tǒng)的單個細胞，就可以代表病聲在整個體系中所有細胞的生長情況。應用這一方法，就可獲得病毒一步生長曲線的姑

果，觀察到病毒具有復制周期。一個完整的復制周期包括吸附、傳入與脫殼、生物合成、組裝與釋放等步驟。

27、病毒的復制周期包括哪些步驟？

①吸附：吸附敏感的宿主細胞是病毒復制的第一步。此過程包含靜電吸附和特異性受體吸附兩個階段。病毒的配體位

點與細胞表面的特異受體的結合

②穿入與脫殼：動物病毒穿入宿主細胞并脫殼的過程可分為：在胞漿膜穿入并脫殼、在內吞小體脫殼、在核膜脫殼

③生物合成：病毒的生物合成發(fā)生在隱蔽期，非常活躍，包括mRNA的轉錄、蛋白質或者RNA的合成等

④組裝與釋放：無囊膜病毒：簡單的20面體病毒產生的殼?？勺晕医M裝形成衣殼，進而包裝核酸形成核衣殼。大多

數無囊膜的病毒蓄枳在胞漿或者核內，當細胞徹底裂解時，釋放出病毒顆粒。

有囊膜病甫：有囊膜的病毒以出芽的方式成熟，白細胞膜出芽及胞吐兩種形式。

28、試述細胞培養(yǎng)的特點。

①細胞培養(yǎng)中的每一個細胞的生理特性基本一致，對病毒的易感性也相等。

②一塊很小的組織可以制備多個細胞培養(yǎng)瓶，每瓶代表一個實驗動物或者雞胚，而且有標準的一致性，無實驗動物的個

體差異性，從而對病毒的生長具有高度的準確性和可重復性。

③細胞培養(yǎng)本身就能顯示病毒的生長特性（如細胞產生病變）因此在不少情況卜不需要用其他系統(tǒng)來證明病毒的確實生長。

④細胞培養(yǎng)可以排除特異性抗體或者非特異性抑制因子的干擾。

⑤細胞培養(yǎng)技術可以嚴格執(zhí)行無菌操作。

⑥在細胞培養(yǎng)中可以進行許多實驗項目。

⑦應用細胞培養(yǎng)的空斑技術可以進行病毒的克隆化。

29、病毒的分離與鑒定包括哪些內容？

一、病毒的分離培養(yǎng)

（-）標本的采集、運送及處理

⑴標本的采集

①采樣的時間（發(fā)病的初期）②采集標本的容器（無菌）③標本的選擇（感染的部位）

⑵標本的運送和處理

及早送到實驗室，并即將處理和接種。較長期凍存的標本，置于-70。Co研磨法處理細胞以釋放病毒

⑶檢樣接種與感染表現(xiàn)

將處理好的標本以適當途徑接種宿主、雞胚或者培養(yǎng)細胞。觀察噬菌斑或者細胞病變效應（CPE）

經第一次接種未浮現(xiàn)病變時，需進行重復接種，即盲傳，若盲傳多代仍無表現(xiàn)，可判定為陰性。

（-）君養(yǎng)方法

①組織培養(yǎng)：將人或者動物離體或者組織或者分散的活細胞，翦擬體內的生理條件在試管或者培養(yǎng)瓶加以培養(yǎng)，使之生存

和生長，稱為組織培養(yǎng)。（目前多指單層細胞培養(yǎng)）

傳代細胞系：這是能在體外無限期傳代的細胞系，來源與腫瘤細胞或者細胞株傳代過程中變異的細胞系。

②雞胚接種：雞胚對多種病毒敏感。普通采用孵化9s14天的雞胚，根據病毒種類不同，將病毒標本接種于雞胚的不同

部位，最常用的雞胚接種部位有：羊膜腔、尿囊腔、絨毛尿囊膜和卵黃囊等。

二、病毒的感染性測定①噬斑計數（用于噬菌體的感染性測定）②蝕斑測定③終點法（TCID50）

三、病毒的純化與鑒定

⑴形態(tài)學鑒定：電鏡觀察

⑵純化：超速離心、電泳、免疫學方法對病毒進行純化

⑶理化特性測定：如病毒的囊膜可用氯仿、乙限等有機溶劑溶解使病毒失去活性

⑷免疫學分斷

①補體結合試驗②中和試驗③血凝抑制試驗④間接免疫熒光檢測⑤酶聯(lián)免疫吸附試驗

⑸份子生物學方法：聚合酶鏈式反應、核酸雜交、DNA芯片

30、舉例說明痘病毒感染的宿主譜類型。

①天花病毒，主要宿主：人，宿主范圍窄，全球已泯滅；

②痘苗病毒，主要宿主：人、牛、水牛、豬、兔，宿主范圍寬，全世界均有分布；

③牛痘病毒，主要宿主：牛、人、大鼠、貓、沙鼠、大型貓科動物、象、犀牛宿主范圍寬。分布于歐洲、亞洲：

④山羊痘病毒，主要宿主：綿羊、山羊，宿主范圍窄，分布于亞非洲。

31、試述新城疫病毒的檢測手段和預防措施。

①診斷：必須作病毒分離及血清學試驗或者RT-PCRo可取脾、腦或者肺勻漿，接種10日齡雞胚尿囊腔分離病毒,病毒能

凝集雞、人及小鼠等紅細胞，再作血吸附及HI試驗鑒別。當存在循環(huán)抗體時，可以從腸道分離病毒。氣管切片或者抹片做

免疫熒光染色診斷快速，但不太敏感。抗體檢測只合用于對未進行免疫接種雞群的診斷，可用H1試驗。在慢性新城疫流行

的地區(qū)，可用III實驗作為監(jiān)測手段。分離株有必要進一步測定其毒力，如ICPD0.7,必須向0IE申報疫情。

②預防與控制：新城疫是01E規(guī)定的A類疫病，許多國家都有相應的立法?？刂拼胧┌己眯l(wèi)生及免疫。

③免疫通常采用由天然弱毒活毒苗及強毒株的油乳劑滅活苗。弱毒只可采用飲水、氣霧、滴眼或者滴鼻途徑。小雞7-10d

一免、20-25(1二免、50-60(1三免，免疫后約3-7d可產生免疫保護，產蛋母雞應每4個月免一次，實際生產中，弱毒苗

與滅活荏配合使用，方能收到較好的免按效果。由于雞在免疫接種后15d仍能排除疫苗毒，因此有些國家規(guī)定在免疫接種

后21d后才可調運。

32、試述狂犬病毒的致病機理及綜合性的預防措施。

致病機理：

①傳播：主要傳播途徑為被帶毒動物咬傷，是否發(fā)病取決于咬傷的部位與程度以及帶毒動物的種類，病犬唾液具有高度

傳染性。

②病毒復制：病毒特異結合神經肌肉結合處的乙酰膽堿受體及神經節(jié)普脂等受體。在傷口附近的肌細胞內復制，而后侵

入外周神經系統(tǒng)，沿神經軸索上行至中樞神經系統(tǒng)，在腦的邊緣系統(tǒng)大量復制，導致腦組織損傷，行為失控浮現(xiàn)癥狀。病

毒從腦沿傳出神經擴散至唾液腺等器官，在其內復制，并以很高的滴度分泌到唾液中。在浮現(xiàn)狂暴癥狀亂咬時，唾液具有

高度感染性。

③免疫原性：病毒蛋白有很強的免疫原性。但在病毒從咬傷部位向中樞系統(tǒng)擴散的過程中，既不浮現(xiàn)體液免疫應答，也

不浮現(xiàn)細胞免疫應答。

綜合性預防措施：采取“管、免、滅”的方針

①管理家犬-一登記

②對家養(yǎng)犬、貓進行弱毒疫苗免疫接種。注意監(jiān)測帶毒的野生動物。發(fā)達國家投放含弱毒疫苗的食餌控制狐貍和狼的狂

犬病，對臭鼬和浣熊，則計劃使用金絲雀痘病毒為載體表達狂犬病毒糖蛋白的基因工程重組疫苗。

③應及時撲滅狂犬病患畜。

33、試述流感病毒的主要生物學特性。

主要特性：

①病毒顆粒多形性，多球形，直徑80-120nm

②核酸類型為單股負股RNA,分八個節(jié)段(丙型為七個節(jié)段)，每一段RNA為一個基因，復制時發(fā)生節(jié)段之間的基因重組

而導致變界，浮現(xiàn)新的亞型。

③病毒結構由內向外分三層，內層是核心，中層為內膜蛋白，外層為脂質雙層包膜，此間插有血凝素和神經氨酸的兩種

刺突。

④反抗