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徐州市感染性腹瀉綜合監(jiān)測工作方案
(2023年,試行)
一、背景
感染性腹瀉病仍然是當(dāng)今全球性重要公共衛(wèi)生問題之一,尤其在發(fā)展中國家,其發(fā)病率高,危
害大,是影響人類身體健康,尤其是青少年、小朋友生長發(fā)育的重要疾病。我國腹瀉病發(fā)病率很高,
感染性腹瀉H勺發(fā)病率居傳染病首位。引起該病的病原諸多,其中以細(xì)菌引起腹瀉者占比例最大,伴
隨抗生素藥物在感染性腹瀉病治療中口勺廣泛應(yīng)用,出現(xiàn)了耐藥及新的腸道致病原。因此,監(jiān)測腸道
致病菌的種類具有十分重要的意義,以掌握本省感染性腹瀉流行特性和病原菌(毒)株變化趨勢,
為制定有效的防止控制措施提供科學(xué)根據(jù),特制定此方案。
二、監(jiān)測工作目的
I、掌握本市感染性腹瀉的發(fā)病強度,及時理解感染性腹瀉疫情動態(tài),為制定防治對策提供參
照根據(jù)。
2、理解本市重點感染性腹瀉病原分布特性和變化趨勢,為防止控制提供科學(xué)根據(jù)。
三、監(jiān)測病例定義
腹瀉病監(jiān)測病例定義:
(1)1歲及以上小朋友、青少年及成人:每日排便3次及以上,并伴有大便性狀的變化,呈
稀便、水樣便、粘液便或膿血便等;
(2)嬰兒:大便次數(shù)比平常增長,大便性狀變化,伴嘔吐、或/和食欲下降、或/和脫水(如尿
少、口渴);6個月內(nèi)母乳喂養(yǎng)兒排便達(dá)每日6次及以.上、人工喂養(yǎng)兒每日排便4次以上,6個月?
1歲每口排便4次以上;
(3)同一患者間隔7d(含7d)再次腹瀉,為發(fā)生另1次腹瀉。
霍亂、傷寒、副傷寒、細(xì)菌性痢疾、其他感染性腹瀉病的診斷參攝影應(yīng)日勺國家衛(wèi)生行業(yè)診斷原
則。
四、監(jiān)測點設(shè)置
選擇銅山區(qū)、泉山區(qū)和睢寧縣為綜合監(jiān)測區(qū)。
選擇市級醫(yī)院I家(徐州市第一人民醫(yī)院)、區(qū)及縣級醫(yī)院各I家(銅山區(qū)中醫(yī)院和睢寧縣中
醫(yī)院)、小區(qū)服務(wù)中心(城區(qū)和農(nóng)村)各2家(銅山區(qū)漢王鎮(zhèn)衛(wèi)生院和棠張鎮(zhèn)衛(wèi)生院、睢寧縣王集
鎮(zhèn)衛(wèi)生院和高集鎮(zhèn)衛(wèi)生院)開展腹瀉病流行病學(xué)監(jiān)測和病原學(xué)監(jiān)測標(biāo)本采集;醫(yī)療機構(gòu)監(jiān)測科室應(yīng)
包括內(nèi)科(消化內(nèi)科)、兒科和感染科的門診(腸道門診)、急診部門。
五、監(jiān)測工作內(nèi)容
(-)感染性腹瀉綜合監(jiān)測
1、流行病學(xué)綜合監(jiān)測
通過長期、持續(xù)監(jiān)測腹瀉病例就診數(shù)及占就診總數(shù)比例的動態(tài)變化、腹瀉病人的流行病學(xué)特點,
并綜合腹瀉病原分離狀況,分析判斷當(dāng)?shù)貐^(qū)感染性腹瀉流行趨勢。
監(jiān)測哨點醫(yī)院整年開展腹瀉病監(jiān)測,對符合病例定義原則的各年齡組所有就診腹瀉病人專冊登
記(附表1),逢瀉必登。監(jiān)測醫(yī)院每旬逢3前將上一旬資料負(fù)責(zé)整頓到附表2中并報至屬地區(qū)縣
疾控中心,區(qū)縣疾控中心每旬逢4前將上旬報表(附表2)匯總上報至市疾控中心。市疾控中心每
旬逢5前將上旬報表(附表2)匯總上報至省疾控中心。
已建立完善HIS系統(tǒng)的監(jiān)測哨點醫(yī)院,可逐漸開發(fā)運用HIS系統(tǒng)診斷信息,從信息系統(tǒng)獲取“腸
炎、腹瀉、腹痛、嘔吐、食物中毒”等胃腸道有關(guān)癥狀及診斷信息,實現(xiàn)監(jiān)測工作的信息化.
2、病原學(xué)常規(guī)監(jiān)測
綜合監(jiān)測點醫(yī)院整年開展細(xì)菌性痢疾及病毒性腹瀉病原監(jiān)測。
(1)標(biāo)本采集:監(jiān)測哨點醫(yī)院有關(guān)科室U勺醫(yī)護人員發(fā)現(xiàn)符合感染性腹瀉病例定義11勺患者(尤
其是診斷為細(xì)菌性痢疾和病毒性腹瀉病例)時,按照方案規(guī)定搜集有關(guān)信息(附表3),并采集糞
便或嘔吐物標(biāo)本,一式兩份。一份標(biāo)本12小時內(nèi)送檢進行細(xì)菌性痢疾檢測,另一份置于-20℃或如
下冷凍保留,用于病毒性腹瀉檢測。標(biāo)本采集時注意做好標(biāo)本編號記錄。每月采集標(biāo)本總數(shù)不少于
20份(泉山區(qū)不少于4份、銅山區(qū)和睢寧縣各不少于8份)。標(biāo)本采集、保留、運送規(guī)定詳見附錄
1。
(2)病原檢測:檢測細(xì)菌性痢疾和病毒性腹瀉有關(guān)病原(輪狀病毒、星狀病毒、札如病毒、
諾如病毒、腺病毒)。
細(xì)菌性痢疾標(biāo)本檢測由有條件U勺醫(yī)院負(fù)責(zé),不具有條件的由屬地區(qū)、縣疾控中心負(fù)責(zé),檢測內(nèi)
容包括病原分離、生化鑒定和血清學(xué)分型。病毒性腹瀉檢測由市級疾控中心負(fù)責(zé)每月統(tǒng)一檢測。當(dāng)
月病毒性腹瀉標(biāo)本檢測應(yīng)在下月5日前所有完畢。病原檢測措施詳見附錄lo
(3)信息匯報:各地疾控中心每月5日前將上月病原檢測成果上報市疾控中心,市疾控中心
每月7口前將匯總成果(附表4和附表5)上報到省疾控中心急傳所;每月10日前將上月分離痢
疾菌株和病毒性腹瀉PCR陽性標(biāo)本上送至省疾控中心急傳所。
3、病原學(xué)加強監(jiān)測
綜合監(jiān)測區(qū)各監(jiān)測醫(yī)院,在4月、8月、12月開展感染性腹瀉病原學(xué)加強監(jiān)測,檢測6種細(xì)菌
性病原、5種病毒性病原。根據(jù)腸道傳染病防制形勢的需要,可適時增長需關(guān)注的I病原監(jiān)測種類和
樣本數(shù)量。
(1)標(biāo)本采集:監(jiān)測醫(yī)院按季節(jié)不一樣,分三批次(4月、8月、12月份)集中采莫持續(xù)3
日內(nèi)(標(biāo)本量局限性的,適時延長期限)的就診腹瀉病例樣本:其中4月和12月每批次標(biāo)本采集
數(shù)不少于20份(泉山區(qū)不少于4份、銅山區(qū)和睢寧縣各不少于8份),8月標(biāo)本采集數(shù)不少于30
份(泉山區(qū)不少于6份、銅山區(qū)和睢寧縣各不少于12份)。有關(guān)科室日勺醫(yī)生或護士在發(fā)現(xiàn)符合病例
定義的患者時,按照方案規(guī)定搜集有關(guān)信息,并采集糞便標(biāo)本(填寫附表3);標(biāo)本采集后12小時
內(nèi),連同附表3一起送至屬地區(qū)縣疾控中心,區(qū)縣疾控中心登記整頓后立?.即送市級疾控中心試驗室
檢測。標(biāo)本采集、保留、運送規(guī)定詳見附錄I。
(2)標(biāo)本檢測:①細(xì)菌性病原:沙門菌、志賀菌、空腸彎曲菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、致
各感染性腹瀉病原日勺檢出狀況等。
(2)數(shù)據(jù)匯報與反饋:區(qū)縣疾控中心腹瀉病流行病學(xué)監(jiān)測數(shù)據(jù)每旬逢4前上報到市疾控中心
疾控科。市疾控中心每旬逢5前上報到省疾控中心,每月7日前將上月病原檢測成果(附表4和附
表5)上報到省疾控中心;每月10日前將上月分離陽性菌株和病毒性腹瀉PCR陽性標(biāo)本上送至省
疾控中心。年度總結(jié)于下年度1月10日前上報至省疾控中心。
3、監(jiān)測工作質(zhì)量評估
對監(jiān)測工作有關(guān)單位開展督導(dǎo)檢查,評估并增進各級單位監(jiān)測工作II勺質(zhì)量。
評估指標(biāo)包括工作及時性、精確性和覆蓋范圍等,包括:資料搜集的完整性、精確性和及時性;
人員培訓(xùn)狀況;信息匯報及時性和規(guī)范性;標(biāo)本送檢的及時性和試驗室檢測口勺及時性;試驗室檢測
的規(guī)范性:技術(shù)資料檔案管理,包括原始記錄規(guī)范性和完整性等。(附錄6)
六、監(jiān)測系統(tǒng)構(gòu)成與職責(zé)
監(jiān)測系統(tǒng)由各級衛(wèi)生行政部門、各級疾病防止控制中心、醫(yī)療機構(gòu)構(gòu)成。
(一)各級衛(wèi)生行政部門
各級衛(wèi)生行政部門負(fù)責(zé)組織開展本轄區(qū)內(nèi)感染性腹瀉綜合監(jiān)測工作,提供所需監(jiān)測補助經(jīng)費并
監(jiān)督經(jīng)費使用狀況,保證監(jiān)測工作日勺順利開展。
(二)市級疾病防止控制中心
負(fù)責(zé)當(dāng)?shù)貐^(qū)感染性腹瀉綜合監(jiān)測H勺平常管理、業(yè)務(wù)指導(dǎo)工作;負(fù)責(zé)對監(jiān)測資料進行搜集、匯總
和分析,開展病原學(xué)檢測,并及時對各項成果進行匯報與反饋,保質(zhì)保量地完畢監(jiān)測任務(wù)。
(三)區(qū)縣級疾病防止控制中心
按監(jiān)測工作方案規(guī)定,配合醫(yī)院完畢標(biāo)本送檢以及進行部分試驗室檢測等工作;對轄區(qū)內(nèi)哨點
醫(yī)院的監(jiān)測工作開展質(zhì)量控制和業(yè)務(wù)指導(dǎo);按規(guī)定期限向市級疾控中心匯報監(jiān)測資料。
(四)醫(yī)療機構(gòu)
醫(yī)療機構(gòu)處在發(fā)現(xiàn)感染性腹瀉病例的最前沿,負(fù)責(zé)完畢門(就)診和住院病例的腹瀉病人日勺登
記和標(biāo)本采集,有條件叫參與部分試驗室檢測任務(wù);配介疾病防止控制機構(gòu)完畢本方案所規(guī)定啊其
他監(jiān)測工作等。
七、技術(shù)支持與聯(lián)絡(luò)方式
市疾控中心對承擔(dān)感染性腹瀉綜合監(jiān)測的區(qū)縣疾控中心、哨點醫(yī)院提供技術(shù)支持與指導(dǎo)。
技術(shù)支持部門:徐州市疾控中心疾控科。
現(xiàn)場聯(lián)絡(luò)人:孫傳武(),石春雷()。
試驗室聯(lián)絡(luò)人:
病毒檢測:童晶(85956780)
細(xì)菌檢測:郭惠(85956780)
八、附表與附錄
附表I醫(yī)療機構(gòu)腹瀉門診病例登記表
附表2感染性腹瀉病人登記檢索旬報表
附表3感染性腹瀉標(biāo)本采集登記表
附表4感染性腹瀉綜合監(jiān)測細(xì)菌性病原檢測成果反饋表
附表5感染性腹瀉綜合監(jiān)測病毒性病原檢測成果反饋表
附表6感染性腹瀉綜合監(jiān)測疑似病原菌菌株送檢表
附錄標(biāo)本采集、保留、運送及檢測技術(shù)指南
附表2感染性腹瀉病人登記檢索旬報表(月旬)
分年齡組腹瀉病匯報數(shù)門/急診
日期
就診總數(shù)
0歲?5歲?15歲?60歲?
本旬合計
附表6感染性腹瀉綜合監(jiān)測疑似病原菌菌株送檢表
標(biāo)本編號病人姓名分離病原菌名稱菌株編號API編碼VITEK2編碼血清型
填報單位:送檢人:送檢口期:
附表1醫(yī)療機構(gòu)腹瀉門診病例登記表(醫(yī)院名稱:門診:)
撿
送
聯(lián)絡(luò)發(fā)病重要初步采樣檢直醫(yī)師
期
日期姓名性別工作單位職業(yè)住址初,復(fù)診日
(歲)日期癥狀診斷狀況項目成果簽名
填表人:填表日期:年月日
附表3感染性腹瀉標(biāo)本梟集登記表
重要臨床癥狀采樣方式
標(biāo)本患者性年發(fā)病與否服抗采樣日期
職業(yè)現(xiàn)住址及聯(lián)絡(luò)
編號姓名別齡期生素體溫惡心(詳細(xì)到“時”)養(yǎng)使股拭嘔吐
H腹痛腹瀉其他炎便
C嘔吐性狀物
月日時
月日時
月日時
月日時
月H時
&患者姓名:5歲如卜患兒加注家長姓名.
*英便性狀:1.蚱血樣便2.血便相混3.膿血便4.黑便5.粘液便6.米潛水樣便7.水樣便8.稀便9.正常便
填表人:填喪日期:年月日
附表4感染性腹瀉綜合監(jiān)濯細(xì)菌病原檢測成果反饋表(年月)
標(biāo)本細(xì)菌性病原體
患者年齡發(fā)病檢測
編號性別職業(yè)
姓名(歲)日期日期
霍亂瓠菌副溶血如菌致瀉性大腸埃希菌空腸彎曲菌沙門菌志賀函
*病原體陽性檢;則成果而詳細(xì)到血清亞型
填報單位:填報人:填報日期:
時表5感染性腹瀉綜合監(jiān)測病毒性病原檢測成果反饋表(年月)
輪狀病毒杯狀病毒如
標(biāo)本諾如星狀
病人姓名性別年齡職業(yè)發(fā)病日期檢測日期有腺病超
編號病毒病毒
G分型P分型
填報單位:填報人:埴報日期:
附錄:
標(biāo)本采集、保留、運送及檢測技術(shù)指南
一、標(biāo)本采集
(-)標(biāo)本的采集
采集糞便標(biāo)本,由受過專門培訓(xùn)的人員來施行,并填寫附表3。優(yōu)先采集就診時未使用過抗
生素的病例標(biāo)本。注意生物安全防護,防止污染、傳播和自身感染。標(biāo)本應(yīng)做好對應(yīng)標(biāo)識。
采集糞便使用無菌容器。用6支無菌棉拭多點采集糞便標(biāo)本(如有膿血或黏液應(yīng)挑取膿血、
黏液部分,液體糞便應(yīng)取絮狀物,使棉拭表面充滿糞便),分別插入1支C-B運送培養(yǎng)基,棉拭子
應(yīng)盡量所有插入培養(yǎng)基內(nèi),以保證彎曲菌所需的微需氧環(huán)境,迅速擰緊管口。此外再分5ml糞便
放到無菌糞便采樣杯(盒)(不加任何培養(yǎng)基和試劑),置于-20C或-20C如下冷凍保留。
(二)標(biāo)本的保留和運送
用于細(xì)菌檢測的糞便標(biāo)本如不能立即送檢,需保留于4c冰箱或冷藏包,但不應(yīng)超過12小時%
用于病毒檢測的糞便樣本采集后30min內(nèi)放入-20C冰箱中,保留期內(nèi)防止樣本發(fā)生反復(fù)凍
融。所有標(biāo)本置于冷藏包(配置冰排),由專職人員運送至監(jiān)測點試驗室,在動輸過程中需防止
容器破碎、灑漏、顛倒,注意生物安全防護。糞便樣本的保留、運送和檢測培養(yǎng)條件見表1。
二、細(xì)菌檢測
(-)標(biāo)本處理
1、直接分離培養(yǎng):采集II勺標(biāo)本直接劃線接種選擇性平板進行培養(yǎng),包括麥康凱平板、XLD平
板、STEC平板、科瑪嘉沙門菌顯色平板、科瑪嘉弧菌顯色平板、TCBS平板,放置37℃培養(yǎng);接種
mCCD平板,放置42℃微需氧環(huán)境下培養(yǎng)。
2、增菌培養(yǎng):將標(biāo)本同步接種于堿性蛋白陳水,于培養(yǎng)6小時后,接種科瑪嘉弧菌顯色
平板或TCBS平板;接種SGB增菌37c培養(yǎng)18小時后,接種科瑪嘉沙門菌顯色平板;接種跳氯化鈉
蛋白陳水增菌液,37c培養(yǎng)12?16小時后,接種于科瑪嘉弧菌顯色平板或TCBS平板:接種Preston
肉湯增菌42℃微需氧培養(yǎng)24?48小時,接種改良CCD平板,42℃微需氧培養(yǎng)1天?5天。
(-)菌株分離和鑒定
1、菌落形態(tài)鑒定:在STEC顯色平板上挑取5個形態(tài)特性經(jīng)典的可疑產(chǎn)毒性大腸桿菌菌落分別
保留在半固體培養(yǎng)基中送省CDC進行后續(xù)檢測;在其他多種選擇性培養(yǎng)基上分別挑取5個形態(tài)特性
經(jīng)典的可疑菌落(參照附錄3有關(guān)內(nèi)容:病原體在不一樣選擇性培養(yǎng)基上的菌落特性)進行純化或
血清凝集試驗,同步進行革蘭染色。
2、生化鑒定:初步生化鑒定包括氧化酶試驗、動力、雙糖等。對經(jīng)初步生化鑒定成果符合
的菌株用API生化鑒定條或全自動生化鑒定儀進行系統(tǒng)生化鑒定。如使用VITEK2鑒定者,規(guī)定將
每株疑似菌株鑒定匯報附于菌株送檢單背面。
3、血清學(xué)鑒定:使用病原菌特異血清進行玻片凝集,初步血清鑒定后再進行血清分型。
(三)疑似菌株的保留和運送
除志賀菌、空腸彎曲菌和副溶血性弧菌不上送外,其他菌株分別接種半固體瓊脂,37c過夜,
在室溫下保留送檢,不要冷藏。病毒核酸檢測陽性口勺糞便標(biāo)本冷藏送省CDC。
表1糞便樣本的保留、運送和檢測培養(yǎng)條件
項目培養(yǎng)基目口勺病原體溫度
細(xì)菌標(biāo)本保
1.Cary-Blair氏運送培養(yǎng)基所有感染性腹瀉綜合監(jiān)測致病菌4℃
留和運送
1.3%氯化鈉堿性蛋白陳水副溶血性弧菌37℃
增菌液
2.堿性蛋白膾水霍亂弧菌37℃
3.Preston肉湯彎曲菌微需氧42℃
4.SBG增菌液沙門菌37℃
1.Mac平板EPEC、STEC、ETEC、37℃
EIEC、EAEC、志賀菌
2.XLD平板志賀菌37℃
選擇性3.mCCD平板彎曲菌微需氧42℃
分離平板4.科瑪嘉沙門氏菌顯色平板沙門菌37℃
5.科瑪嘉沙門氏菌顯色平板弧菌37℃
6.TCBS平板弧菌37℃
7.STEC平板產(chǎn)志賀樣毒索大腸桿菌37℃
病毒標(biāo)本1.采便盒輪狀病毒、諾如病毒、札如病毒、—20C如下
星狀病毒、腺病毒
(四)檢查措施與工作流程
1、工作流程與措施匯總
糞便標(biāo)本------>3%氯化鈉堿性蛋白陳水
736℃±1℃.I2h-I6h
TCBS或科瑪嘉弧菌顯色培養(yǎng)基
360c±1℃I8h?24h
挑取3個或以上可疑菌落,接呷于3%氯化鈉胰蛋白陳大豆瓊脂
7360c±1℃18h~24h
氧化酶試驗,3%氯化鈉三糖鐵瓊脂,嗜鹽性試驗
進行系統(tǒng)生化鑒定
▽:
血清學(xué)分型——>1~匯報成果
3、沙門菌和志賀菌檢查程序
4、彎曲菌檢查程序
匯報成果
5、病原體在不一樣選擇性培養(yǎng)基上的菌落特性
選擇性瓊脂平板病原體菌落特性
MAC瓊脂平板志賀菌屬菌落光滑、無色,直徑2?3nlm
XLD瓊脂平板志賀菌屬菌落呈紅色,直徑2?4nlm
科瑪嘉沙門菌
沙門菌(大多數(shù))紫色或酒紅色
顯色培養(yǎng)基
圓形、半透明、表面光滑的綠色菌落,用接種
副溶血性弧菌
環(huán)輕觸,有類似口香糖H勺質(zhì)感,直徑2?3mm
TCBS瓊脂平板
霍亂弧菌光滑、凸起、邊緣完整、黃色菌落
圓形、半透明、表面光滑啊粉紫色菌落,
副溶血性弧菌
科瑪嘉弧菌直徑2~3mm
顯色培養(yǎng)基
霍亂弧菌綠松石藍(lán)色
改良CCD
空腸彎曲菌灰綠色菌落、非常干燥,有或無金屬光澤
瓊脂平板
大腸桿菌0157:H7紫色
大腸桿菌026紫色帶熒光
STEC大腸
顯色培養(yǎng)基
桿菌其他產(chǎn)志賀毒索大腸桿菌紫色,熒光或有或無
其他腸桿菌無色、藍(lán)色或被克制
三、腹瀉病毒檢測
(-)檢測流程
(二)核酸提?。翰捎肎eneaid病毒核酸提取試劑盒。
(=)病毒檢測;采用QIAGENProbeRT-PCRKiI熒光定量檢測多種腹瀉病毒。
1、引物及探針:省CDC合成并下發(fā)。
2、反應(yīng)體系(模板2.5ul)
試劑體積(卜1)
DEPCH>02.875
MasterMIX6.250
RT-M1X0.125
引物+0.250
引物一0.250
探針0.250
3、反應(yīng)條件
病原種類溫度時間循環(huán)數(shù)
50℃30min
95℃15min
輪狀病毒
95℃15s
45Cycle
60℃Imin
50℃45min
95℃15min
星狀病毒
94℃15s
45Cycle
55℃Imin
50℃30min
95℃15min
札如病毒
94℃15s
40Cycle
55℃34s
50℃30min
95℃15min
諾如病毒
95℃10s
45Cycle
60℃Imin
95℃15min
腺病毒95℃15s
45Cycle
60℃Imin
4、成果分析條件設(shè)定和成果判斷:
Ct值無數(shù)值的標(biāo)本為陰性樣本;Ct值<35.0的樣本為陽性。
注:Ct值235.0的樣本提議重做;重做成果無數(shù)值者為陰性,否則為陽性。
(四)輪狀病毒陽性的標(biāo)本進行血清型分型和基因型分型
采用QIAGENOneStepRT-PCRKit及GenStar企業(yè)的2XMix.
1、RT-PCR所用的引物
(1)VP7RT-PCR*
NucleotidePosition(expected
PrimerSequence5'3
sizecDNA881bp)
VP7FATGTATGGTATTGAATATACCAC51-71
VP7RAACTTGCCACCATTTTTTCC932-914
*(IturrizaGomaraetal.,(2023)JClinMicro)
(2)G-TypingPCR*
NucleotideSizePCR
TypePrimerSequence5'-3'
Positionproduct(bp)
G1aBTlCAAGTACTCAAATCAATGATGG314-335618
G2aCT2CAATGATATTAACACATTTTCTGTG411-435521
G3G3ACGAACTCAACACGAGAGG250-269682
G4aDT4CGTTTCTGGTGAGGAGTTG480-499452
G8aAT8GTCACACCATTTGTAAATTCG178-198754
G9G9CTTGATGTGACTAYAAATAC757-776179
*(Gouveaeta/.,(1990)JClinMicro;IturrizaGomaraetal.,(2023)JClinMicro)
(3)VP4RT-PCR*
NucleotidePosition(expected
PrimerSequence5'-3'
sizecDNAis663bp)
VP4FTATGCTCCAGTNAATTGG132-149
VP4RATTGCATTTCTTTCCATAATG775-795
*(Simmondeta/.,(2023)JClinVirol)
(4)P-TypingPCR*
NucleotideSizePCR
TypePrimerSequence5'-3'
Positionproduct(bp)
P[4]2T-1CTATTGTTAGAGGTTAGAGTC492-474362
P⑹3T-1TGTTGATTAGTTGGATTCAA278-259146
P[8]IT-IDTCTACTGGRTTRACNTGC356-339224
P[9]4T-1TGAGACATGCAATTGGAC402
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