B7-H3：肺癌診療新視角——表達特征、臨床關聯(lián)與免疫治療潛力剖析一、引言1.1研究背景肺癌是全球范圍內發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤之一，嚴重威脅人類健康。據(jù)世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構（IARC）發(fā)布的2020年全球癌癥負擔數(shù)據(jù)顯示，2020年全球肺癌新發(fā)病例220萬，死亡病例180萬，分別占全部惡性腫瘤的11.4%和18.0%，在男性中肺癌發(fā)病率居首位，在女性中居第二位。盡管在過去幾十年中，肺癌的治療取得了一定進展，如手術技術的改進、化療藥物的更新以及靶向治療的應用，但對于晚期肺癌患者，尤其是那些對傳統(tǒng)治療方法耐藥或不耐受的患者，治療仍然面臨巨大挑戰(zhàn)，總體5年生存率仍較低，徘徊在15%-20%左右。因此，尋找新的治療靶點和方法，提高肺癌患者的生存率和生活質量，是當前肺癌研究領域的重要任務。近年來，免疫治療作為一種新興的腫瘤治療方法，為肺癌患者帶來了新的希望。免疫治療通過激活機體自身的免疫系統(tǒng)，增強免疫細胞對腫瘤細胞的識別和殺傷能力，從而達到治療腫瘤的目的。其作用機制主要是通過調節(jié)腫瘤免疫微環(huán)境，打破腫瘤細胞的免疫逃逸機制，使免疫系統(tǒng)能夠有效地攻擊腫瘤細胞。免疫治療具有獨特的優(yōu)勢，如特異性高、副作用相對較小、能夠產生持久的抗腫瘤免疫反應等，為肺癌的治療開辟了新的途徑。免疫檢查點抑制劑（ICIs），如抗程序性死亡受體1（PD-1）/程序性死亡配體1（PD-L1）抗體和抗細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4（CTLA-4）抗體等，在肺癌治療中取得了顯著的臨床療效，顯著延長了部分肺癌患者的生存期，改善了生活質量。然而，并非所有肺癌患者都能從免疫治療中獲益，免疫治療的有效率仍有待提高，且存在免疫相關不良反應等問題。因此，深入研究腫瘤免疫調節(jié)機制，尋找新的免疫治療靶點，對于提高肺癌免疫治療的療效具有重要意義。共刺激分子在腫瘤免疫調節(jié)中發(fā)揮著關鍵作用，是腫瘤免疫治療的重要靶點之一。T細胞的激活需要雙信號刺激，第一信號來自T細胞受體（TCR）與抗原呈遞細胞（APC）表面的主要組織相容性復合體（MHC）-抗原肽復合物的特異性結合；第二信號即共刺激信號，主要由APC表面的共刺激分子與T細胞表面相應的受體相互作用產生。共刺激信號對于T細胞的活化、增殖、分化以及維持有效的免疫應答至關重要。若僅有第一信號而缺乏共刺激信號，T細胞將進入無反應狀態(tài)或免疫耐受狀態(tài)，甚至發(fā)生程序性死亡。共刺激分子家族成員眾多，包括B7家族、腫瘤壞死因子（TNF）超家族等，它們通過不同的信號通路調節(jié)T細胞的功能，在腫瘤免疫逃逸、免疫監(jiān)視等過程中發(fā)揮著重要作用。B7-H3（CD276）是B7家族中的重要成員，是一種跨膜蛋白，其結構包含4個Ig樣結構域（2個IgV樣結構域和2個IgC樣結構域）。B7-H3廣泛表達于多種正常組織，如胎盤、肺、腎、胸腺等，但表達水平較低；在多種腫瘤組織中，B7-H3呈高表達，包括肺癌、乳腺癌、前列腺癌、黑色素瘤、胰腺癌等。B7-H3在腫瘤免疫中的作用較為復雜，既具有共刺激作用，又具有共抑制作用，其具體功能取決于腫瘤類型、腫瘤微環(huán)境以及與之相互作用的受體等因素。一方面，B7-H3可以與T細胞表面的未知受體結合，提供共刺激信號，促進T細胞的活化、增殖和細胞因子的分泌，增強抗腫瘤免疫反應；另一方面，B7-H3也可能通過與其他免疫細胞表面的受體相互作用，抑制免疫細胞的功能，促進腫瘤細胞的免疫逃逸。此外，B7-H3還與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉移密切相關，其高表達往往與腫瘤的不良預后相關。研究表明，B7-H3可以通過激活PI3K/AKT、MAPK等信號通路，促進腫瘤細胞的增殖、存活和遷移；還可以調節(jié)腫瘤血管生成，為腫瘤的生長和轉移提供營養(yǎng)支持。在肺癌中，B7-H3的表達及其臨床意義受到了廣泛關注。越來越多的研究表明，B7-H3在肺癌組織中的表達明顯高于正常肺組織和癌旁組織，且其表達水平與肺癌的病理類型、分化程度、臨床分期、淋巴結轉移等臨床病理特征密切相關。高表達B7-H3的肺癌患者往往預后較差，提示B7-H3可能作為肺癌預后評估的潛在生物標志物。此外，B7-H3在肺癌免疫治療中也具有重要作用，靶向B7-H3的免疫治療策略，如B7-H3單克隆抗體、B7-H3抗體偶聯(lián)藥物（ADC）、CAR-T細胞治療等，在臨床前研究和臨床試驗中均顯示出了一定的抗腫瘤活性，為肺癌的治療提供了新的思路和方法。然而，目前關于B7-H3在肺癌中的作用機制尚未完全明確，其在肺癌免疫治療中的應用仍面臨諸多挑戰(zhàn)，如如何提高靶向治療的特異性和有效性、如何克服腫瘤的耐藥性、如何減少免疫相關不良反應等。因此，進一步深入研究B7-H3在肺癌中的表達及其臨床意義，探討其作用機制，對于優(yōu)化肺癌的診斷、治療和預后評估具有重要的理論和實踐意義。1.2研究目的與意義本研究旨在深入探究共刺激分子B7-H3在肺癌中的表達情況，分析其與肺癌臨床病理特征及預后的關系，并探討其在肺癌免疫治療中的潛在作用，為肺癌的診斷、治療及預后評估提供新的理論依據(jù)和臨床指導。肺癌作為全球發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤之一，給人類健康帶來了沉重負擔。盡管目前肺癌的治療手段不斷發(fā)展，包括手術、化療、放療、靶向治療及免疫治療等，但患者的總體生存率仍不理想。因此，尋找新的治療靶點和生物標志物，對于改善肺癌患者的治療效果和預后具有重要意義。從理論意義來看，B7-H3作為B7家族的重要成員，在腫瘤免疫調節(jié)中發(fā)揮著復雜而關鍵的作用。深入研究B7-H3在肺癌中的表達調控機制及其在腫瘤免疫逃逸、免疫監(jiān)視等過程中的作用，有助于進一步揭示肺癌的發(fā)病機制，豐富腫瘤免疫學理論。目前，關于B7-H3在肺癌中的具體作用機制尚未完全明確，其在不同肺癌亞型、不同腫瘤微環(huán)境中的作用差異也有待深入研究。通過本研究，有望為肺癌的免疫治療提供新的理論基礎，為開發(fā)更加有效的免疫治療策略提供科學依據(jù)。在實踐意義方面，B7-H3在肺癌組織中的高表達與肺癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉移密切相關，使其有望成為肺癌診斷和預后評估的潛在生物標志物。通過檢測肺癌患者組織或血液中B7-H3的表達水平，可能有助于早期診斷肺癌，預測肺癌患者的預后，為臨床醫(yī)生制定個性化的治療方案提供重要參考。此外，靶向B7-H3的免疫治療策略在臨床前研究和臨床試驗中已顯示出一定的抗腫瘤活性，為肺癌的治療提供了新的思路和方法。本研究對B7-H3在肺癌免疫治療中的作用及應用前景進行分析，有助于進一步優(yōu)化免疫治療方案，提高肺癌患者的治療效果，改善患者的生活質量，延長患者的生存期。1.3研究方法與創(chuàng)新點在研究方法上，本研究將綜合運用多種實驗技術，全面深入地探究B7-H3在肺癌中的表達及其臨床意義。首先，采用免疫組化（IHC）技術檢測肺癌組織及癌旁組織中B7-H3蛋白的表達水平，并通過圖像分析軟件對其表達強度進行量化分析，以直觀地觀察B7-H3在不同組織中的定位和表達差異。利用逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術檢測肺癌細胞系及組織樣本中B7-H3mRNA的表達水平，從基因轉錄層面揭示其表達情況。運用流式細胞術（FCM）對肺癌細胞表面B7-H3分子的表達進行定量分析，準確測定其表達量。同時，采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法檢測肺癌患者血清中可溶性B7-H3的含量，分析其與肺癌臨床病理特征及預后的關系。在數(shù)據(jù)分析方面，將收集的臨床病理資料及實驗數(shù)據(jù)錄入數(shù)據(jù)庫，運用SPSS、GraphPadPrism等統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。采用卡方檢驗或Fisher精確檢驗分析B7-H3表達與肺癌患者臨床病理特征（如年齡、性別、吸煙史、病理類型、腫瘤分期、淋巴結轉移等）之間的相關性；使用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，通過Log-rank檢驗比較不同B7-H3表達水平患者的生存差異；運用Cox比例風險回歸模型進行多因素分析，確定影響肺癌患者預后的獨立危險因素。通過Pearson相關分析或Spearman秩相關分析探討B(tài)7-H3表達與其他腫瘤標志物或免疫相關指標之間的相關性。本研究的創(chuàng)新點主要體現(xiàn)在以下幾個方面。在研究內容上，不僅關注B7-H3在肺癌組織中的表達情況，還深入探討其在肺癌患者血清中的可溶性形式的表達及其臨床意義，從組織和體液兩個層面全面分析B7-H3在肺癌中的作用，為肺癌的診斷和預后評估提供更全面的依據(jù)。在研究方法上，綜合運用多種先進的實驗技術和數(shù)據(jù)分析方法，從基因、蛋白和細胞水平全方位研究B7-H3，確保研究結果的準確性和可靠性。此外，本研究還將探索B7-H3與肺癌免疫治療療效的相關性，為優(yōu)化肺癌免疫治療方案提供新的思路和方法，有望為肺癌的臨床治療帶來新的突破。二、B7-H3分子生物學基礎2.1B7-H3分子結構與功能B7-H3（CD276）作為B7家族的關鍵成員，是一種I型跨膜糖蛋白，其基因位于人類染色體15q24區(qū)域。B7-H3的分子結構獨特，包含胞外域、跨膜域和胞內域。其中，胞外域由4個免疫球蛋白樣結構域組成，包括2個IgV樣結構域和2個IgC樣結構域，這種結構賦予了B7-H3與其他分子相互作用的特異性。在人類中，B7-H3存在兩種主要的剪接異構體，即2IgB7-H3和4IgB7-H3，二者的區(qū)別在于胞外Ig樣結構域的數(shù)量，4IgB7-H3包含兩對IgV-IgC結構域，而2IgB7-H3僅包含一對，4IgB7-H3是人類B7-H3的主要表達形式。相比之下，小鼠的B7-H3只有一種異構體，即2IgB7-H3。B7-H3在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮著復雜而重要的雙重作用，既是共刺激分子，也是共抑制分子。在免疫應答過程中，B7-H3的作用取決于多種因素，包括其表達水平、與之相互作用的受體以及所處的免疫微環(huán)境等。早期研究表明，B7-H3具有共刺激功能。當B7-H3作為共刺激分子時，主要通過與T細胞表面的未知受體結合，為T細胞的活化提供第二信號。在抗原呈遞細胞（APC）表面，B7-H3與T細胞表面受體的相互作用能夠促進CD4+和CD8+T細胞的增殖，增強T細胞的活性。同時，B7-H3還能刺激T細胞分泌多種細胞因子，如干擾素γ（IFN-γ）、白細胞介素8（IL-8）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）等，這些細胞因子在調節(jié)免疫反應、增強免疫細胞的殺傷活性以及招募其他免疫細胞到炎癥或腫瘤部位等方面發(fā)揮著關鍵作用。例如，IFN-γ可以激活巨噬細胞，增強其吞噬和殺傷病原體及腫瘤細胞的能力；IL-8能夠吸引中性粒細胞等免疫細胞到炎癥部位，參與免疫防御；TNF-α則可以直接殺傷腫瘤細胞，并調節(jié)免疫細胞的功能。此外，B7-H3還能增強CD8+T細胞的細胞毒作用，使其更有效地殺傷被病原體感染的細胞或腫瘤細胞，從而增強機體的抗腫瘤免疫反應。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)B7-H3具有共抑制功能。B7-H3可以通過多種機制抑制T細胞的活化和功能，促進腫瘤細胞的免疫逃逸。一方面，B7-H3能夠抑制T細胞表面受體調節(jié)基因轉錄的關鍵信號通路，如核因子活化T細胞（NFAT）、核因子κB（NF-κB）和激活蛋白1（AP-1）通路。當B7-H3與相應受體結合后，會干擾這些信號通路的正常傳導，導致T細胞無法接收到有效的活化信號，從而抑制T細胞的增殖和細胞因子的分泌。例如，B7-H3可以抑制NFAT的活化，使其無法進入細胞核調控相關基因的轉錄，進而減少IL-2和IFN-γ等細胞因子的產生，這些細胞因子對于T細胞的增殖、分化和免疫功能的發(fā)揮至關重要，它們的減少會導致T細胞免疫應答減弱。另一方面，B7-H3還可以調節(jié)調節(jié)性T細胞（Treg）的功能。Treg是一類具有免疫抑制功能的T細胞亞群，B7-H3能夠促進Treg細胞的增殖和功能活化，使其分泌更多的免疫抑制因子，如轉化生長因子β（TGF-β）和IL-10等，這些因子可以抑制其他免疫細胞的活性，包括CD4+T細胞、CD8+T細胞和自然殺傷細胞（NK細胞）等，從而營造一個有利于腫瘤細胞生長和逃逸的免疫抑制微環(huán)境。此外，B7-H3還可以通過調節(jié)腫瘤相關巨噬細胞的分化，促進M2型巨噬細胞的極化，M2型巨噬細胞具有免疫抑制功能，能夠分泌多種促進腫瘤生長和轉移的細胞因子，進一步促進腫瘤的免疫逃逸。B7-H3對NK細胞也具有調控作用。研究表明，4IgB7-H3可以和NK細胞上的不明受體結合，傳遞抑制信號，從而下調NK細胞的細胞毒性，抑制NK細胞介導的溶菌作用，致使腫瘤細胞逃脫NK細胞的免疫監(jiān)視。NK細胞是機體天然免疫的重要組成部分，具有直接殺傷腫瘤細胞和被病原體感染細胞的能力，B7-H3對NK細胞功能的抑制，削弱了機體的天然免疫防御機制，有利于腫瘤細胞的存活和發(fā)展。2.2B7-H3在免疫系統(tǒng)中的作用機制B7-H3在免疫系統(tǒng)中與多種免疫細胞存在復雜的相互作用，其作用機制涉及多個方面，對腫瘤免疫逃逸過程有著關鍵影響。在與T細胞的相互作用中，B7-H3的功能表現(xiàn)出兩面性。一方面，早期研究表明B7-H3可作為共刺激分子，與T細胞表面未知受體結合，促進T細胞的活化。當T細胞受到抗原刺激時，APC表面的B7-H3與T細胞受體相互作用，為T細胞提供第二信號，從而促進CD4+和CD8+T細胞的增殖。這種增殖使得T細胞數(shù)量增加，能夠更有效地識別和攻擊病原體或腫瘤細胞。同時，B7-H3刺激T細胞分泌IFN-γ、IL-8、TNF-α等細胞因子。IFN-γ可激活巨噬細胞，增強其吞噬和殺傷能力；IL-8能招募中性粒細胞等免疫細胞到炎癥或腫瘤部位，增強免疫防御；TNF-α則可直接殺傷腫瘤細胞，并調節(jié)免疫細胞的功能，共同增強機體的抗腫瘤免疫反應。另一方面，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)B7-H3具有共抑制作用。它能夠抑制T細胞表面受體調節(jié)基因轉錄的關鍵信號通路，如NFAT、NF-κB和AP-1通路。正常情況下，T細胞活化后，這些信號通路被激活，促進T細胞的增殖和細胞因子的分泌。然而，當B7-H3與相應受體結合后，會干擾這些信號通路的傳導。以NFAT通路為例，B7-H3抑制NFAT的活化，使其無法進入細胞核調控相關基因的轉錄，進而減少IL-2和IFN-γ等細胞因子的產生。IL-2是T細胞增殖和存活所必需的細胞因子，其減少會導致T細胞免疫應答減弱；IFN-γ的減少則削弱了免疫細胞對腫瘤細胞的殺傷能力。此外，B7-H3還能調節(jié)Treg細胞的功能，促進Treg細胞的增殖和功能活化。Treg細胞可分泌TGF-β和IL-10等免疫抑制因子，這些因子能夠抑制CD4+T細胞、CD8+T細胞和NK細胞等免疫細胞的活性，營造一個有利于腫瘤細胞生長和逃逸的免疫抑制微環(huán)境。B7-H3對NK細胞也有重要的調控作用。NK細胞是天然免疫的重要組成部分，具有直接殺傷腫瘤細胞和被病原體感染細胞的能力。研究表明，4IgB7-H3可以和NK細胞上的不明受體結合，傳遞抑制信號，從而下調NK細胞的細胞毒性，抑制NK細胞介導的溶菌作用。當NK細胞表面的受體與B7-H3結合后，細胞內的信號傳導發(fā)生改變，導致NK細胞的殺傷活性受到抑制，使腫瘤細胞能夠逃脫NK細胞的免疫監(jiān)視，有利于腫瘤細胞的存活和發(fā)展。B7-H3還可調節(jié)腫瘤相關巨噬細胞（TAM）的分化。TAM在腫瘤微環(huán)境中具有重要作用，根據(jù)其功能可分為M1型和M2型。M1型巨噬細胞具有抗腫瘤活性，能夠分泌促炎細胞因子，激活免疫細胞，殺傷腫瘤細胞；而M2型巨噬細胞具有免疫抑制功能，可分泌多種促進腫瘤生長和轉移的細胞因子。B7-H3能夠促進M2型巨噬細胞的極化，使TAM向M2型轉化。這一過程可能是通過B7-H3與TAM表面的受體相互作用，激活相關信號通路，從而調節(jié)TAM的功能和表型。M2型巨噬細胞分泌的細胞因子，如IL-10、TGF-β等，不僅抑制免疫細胞的活性，還能促進腫瘤血管生成、腫瘤細胞的增殖和轉移，進一步促進腫瘤的免疫逃逸。三、B7-H3在肺癌中的表達特征3.1臨床樣本檢測與分析為深入探究B7-H3在肺癌中的表達情況，本研究收集了[X]例肺癌患者的腫瘤組織樣本以及對應的癌旁組織樣本，這些樣本均來自于[醫(yī)院名稱]在[具體時間段]內收治的患者。納入標準為經(jīng)病理確診為肺癌，且患者在手術前未接受過放化療、免疫治療或靶向治療等可能影響B(tài)7-H3表達的抗腫瘤治療。排除標準包括合并其他惡性腫瘤、患有嚴重的自身免疫性疾病或感染性疾病、標本質量不佳無法進行有效檢測等。同時，選取了[X]例因肺部良性疾病（如肺錯構瘤、炎性假瘤等）行手術切除的患者的正常肺組織作為對照樣本。在檢測B7-H3表達的實驗技術方面，采用免疫組化（IHC）技術對組織樣本中B7-H3蛋白的表達進行檢測。具體操作如下：將組織樣本制成4μm厚的石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水；采用高溫高壓抗原修復法對切片進行抗原修復，以增強抗原抗體的結合能力；用3%過氧化氫溶液孵育切片10-15分鐘，以阻斷內源性過氧化物酶的活性；滴加正常山羊血清封閉液，室溫孵育20-30分鐘，減少非特異性染色；加入兔抗人B7-H3單克隆抗體（工作濃度為1:100-1:200，具體根據(jù)抗體說明書進行調整），4℃孵育過夜；次日，用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗切片3次，每次5分鐘，然后滴加生物素標記的山羊抗兔二抗，室溫孵育30-60分鐘；再次用PBS沖洗后，滴加鏈霉親和素-過氧化物酶復合物（SABC），室溫孵育30-60分鐘；最后，用二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色劑進行顯色，蘇木精復染細胞核，脫水、透明后封片。使用光學顯微鏡觀察切片，B7-H3陽性表達產物主要定位于細胞膜和（或）細胞質，呈棕黃色顆粒。采用半定量積分法對B7-H3的表達強度進行評估，根據(jù)陽性細胞占全部細胞的百分數(shù)（陽性細胞率）和染色強度進行評分。陽性細胞率評分標準為：陽性細胞率＜5%為0分，5%-25%為1分，26%-50%為2分，51%-75%為3分，＞75%為4分；染色強度評分標準為：無染色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。將陽性細胞率得分與染色強度得分相乘，得到最終的積分光密度值（IOD），IOD值＜4分為陰性表達，≥4分為陽性表達。利用逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術檢測組織樣本中B7-H3mRNA的表達水平。首先，使用TRIzol試劑提取組織總RNA，按照逆轉錄試劑盒說明書的步驟將RNA逆轉錄為cDNA。然后，以cDNA為模板，采用特異性引物進行PCR擴增。B7-H3上游引物序列為[具體序列]，下游引物序列為[具體序列]，內參基因GAPDH上游引物序列為[具體序列]，下游引物序列為[具體序列]。PCR反應體系為25μL，包括10×PCR緩沖液2.5μL、dNTP混合物（2.5mmol/L）2μL、上下游引物（10μmol/L）各0.5μL、TaqDNA聚合酶（5U/μL）0.2μL、cDNA模板1μL，加雙蒸水補足至25μL。PCR反應條件為：95℃預變性5分鐘；95℃變性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸30秒，共35個循環(huán)；最后72℃延伸10分鐘。擴增產物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳分離，在凝膠成像系統(tǒng)下觀察并拍照，通過QuantityOne軟件分析條帶灰度值，以B7-H3與GAPDH條帶灰度值的比值表示B7-H3mRNA的相對表達量。通過酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法檢測肺癌患者血清中可溶性B7-H3的含量。收集肺癌患者及健康對照者的清晨空腹外周靜脈血5mL，3000r/min離心10-15分鐘，分離血清，將血清樣本保存于-80℃冰箱待測。采用人可溶性B7-H3ELISA檢測試劑盒（購自[試劑盒生產廠家]），嚴格按照試劑盒說明書進行操作。首先，將包被有抗人可溶性B7-H3抗體的酶標板平衡至室溫，每孔加入100μL標準品或待測血清樣本，設置復孔，37℃孵育1-2小時；棄去孔內液體，用洗滌緩沖液洗滌5次，每次3-5分鐘；每孔加入100μL生物素標記的抗人可溶性B7-H3抗體，37℃孵育1-2小時；再次洗滌后，每孔加入100μL辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素，37℃孵育30-60分鐘；洗滌5次后，每孔加入90μL底物溶液，37℃避光孵育15-20分鐘；最后，每孔加入50μL終止液，在酶標儀上于450nm波長處測定吸光度（OD）值。根據(jù)標準品的濃度和對應的OD值繪制標準曲線，通過標準曲線計算出待測血清樣本中可溶性B7-H3的含量。對檢測結果進行分析，免疫組化結果顯示，B7-H3在肺癌組織中的陽性表達率為[X]%，顯著高于癌旁組織的[X]%和正常肺組織的[X]%（P＜0.05）。在不同病理類型的肺癌中，B7-H3的表達存在差異，在肺腺癌中的陽性表達率為[X]%，在肺鱗癌中的陽性表達率為[X]%，[具體比較結果及P值]，提示B7-H3的表達可能與肺癌的病理類型有關。此外，B7-H3的表達強度與肺癌的分化程度相關，高分化肺癌組織中B7-H3的表達強度明顯高于低分化肺癌組織（P＜0.05），表明B7-H3的表達可能與肺癌細胞的惡性程度有關。RT-PCR結果表明，肺癌組織中B7-H3mRNA的相對表達量為[X]，顯著高于癌旁組織的[X]和正常肺組織的[X]（P＜0.05），從基因轉錄水平進一步證實了B7-H3在肺癌組織中的高表達。且B7-H3mRNA的表達水平與蛋白表達水平呈正相關（r=[相關系數(shù)]，P＜0.05），說明B7-H3在肺癌中的表達在基因和蛋白層面具有一致性。ELISA檢測結果顯示，肺癌患者血清中可溶性B7-H3的含量為（[X]±[X]）ng/mL，顯著高于健康對照者的（[X]±[X]）ng/mL（P＜0.05）。進一步分析發(fā)現(xiàn)，血清可溶性B7-H3的含量與肺癌的臨床分期、淋巴結轉移和遠處轉移密切相關。Ⅲ-Ⅳ期肺癌患者血清可溶性B7-H3的含量明顯高于Ⅰ-Ⅱ期患者（P＜0.05）；有淋巴結轉移和遠處轉移的肺癌患者血清可溶性B7-H3的含量顯著高于無轉移的患者（P＜0.05），提示血清可溶性B7-H3可能作為評估肺癌患者病情進展和轉移的潛在生物標志物。3.2B7-H3在不同肺癌亞型中的表達差異肺癌主要分為非小細胞肺癌（NSCLC）和小細胞肺癌（SCLC）兩大亞型，其中NSCLC約占所有肺癌病例的85%，包括肺腺癌、肺鱗癌、大細胞癌等組織學類型；SCLC則占15%左右。這兩種亞型在生物學行為、治療方法和預后等方面存在顯著差異，B7-H3在不同肺癌亞型中的表達情況也有所不同。通過對收集的肺癌組織樣本進行進一步分析，發(fā)現(xiàn)B7-H3在NSCLC和SCLC中的表達水平存在明顯差異。在NSCLC組織中，B7-H3的陽性表達率為[X]%，而在SCLC組織中的陽性表達率為[X]%，經(jīng)統(tǒng)計學檢驗，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表明B7-H3在NSCLC中的表達水平相對較高。在不同組織學類型的NSCLC中，B7-H3的表達也呈現(xiàn)出一定特點。肺腺癌作為NSCLC中最常見的類型，B7-H3在其中的陽性表達率為[X]%；肺鱗癌中B7-H3的陽性表達率為[X]%。二者比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示B7-H3在肺腺癌和肺鱗癌中的表達存在差異，在肺腺癌中的表達可能更為普遍。研究還發(fā)現(xiàn)，B7-H3在大細胞癌組織中的陽性表達率為[X]%，與肺腺癌和肺鱗癌相比，[具體比較結果及P值]，表明B7-H3在不同組織學類型的NSCLC中的表達具有一定的異質性。B7-H3在SCLC中的表達也有其獨特之處。雖然SCLC中B7-H3的陽性表達率低于NSCLC，但在SCLC的所有分子亞型中，B7-H3均高度一致地表達。有研究表明，B7-H3在SCLC中的表達與腫瘤的增殖、侵襲和轉移密切相關，可能通過激活PI3K/AKT、MAPK等信號通路，促進SCLC細胞的增殖和存活。此外，B7-H3還可能參與SCLC的免疫逃逸過程，通過抑制免疫細胞的功能，使腫瘤細胞逃脫免疫系統(tǒng)的監(jiān)視和攻擊。B7-H3在不同肺癌亞型中的表達差異可能與腫瘤的發(fā)生發(fā)展機制、分子生物學特征以及免疫微環(huán)境等因素有關。肺腺癌和肺鱗癌在致癌因素、基因突變譜和細胞起源等方面存在差異，這些差異可能導致B7-H3的表達調控機制不同。例如，肺腺癌中常見的EGFR、ALK等基因突變可能影響B(tài)7-H3的表達，而肺鱗癌中與吸煙相關的致癌因素可能通過不同的信號通路調節(jié)B7-H3的表達。SCLC具有高度侵襲性和早期轉移的特點，其獨特的生物學行為可能與B7-H3的持續(xù)高表達有關。SCLC細胞所處的免疫微環(huán)境中，免疫細胞的功能狀態(tài)和細胞因子的分泌情況也可能影響B(tài)7-H3的表達，進而影響腫瘤的免疫逃逸和發(fā)展。3.3影響B(tài)7-H3表達的因素B7-H3在肺癌中的表達受到多種因素的調控，深入了解這些影響因素，對于揭示肺癌的發(fā)病機制以及開發(fā)靶向B7-H3的治療策略具有重要意義。從基因層面來看，B7-H3基因的轉錄調控是影響其表達的關鍵因素之一。研究表明，多種轉錄因子參與了B7-H3基因的轉錄調控過程。核因子κB（NF-κB）是一種重要的轉錄因子，在多種細胞的生理和病理過程中發(fā)揮著關鍵作用。在肺癌細胞中，NF-κB可以與B7-H3基因啟動子區(qū)域的特定序列結合，促進B7-H3基因的轉錄，從而上調B7-H3的表達。當肺癌細胞受到炎癥刺激或其他外界因素影響時，細胞內的NF-κB信號通路被激活，NF-κB從細胞質轉移到細胞核，與B7-H3基因啟動子區(qū)域結合，啟動基因轉錄，導致B7-H3表達增加。信號轉導和轉錄激活因子3（STAT3）也在B7-H3基因轉錄調控中發(fā)揮作用。STAT3可以被多種細胞因子和生長因子激活，激活后的STAT3形成二聚體，進入細胞核與B7-H3基因啟動子區(qū)域的特定序列結合，促進基因轉錄，進而提高B7-H3的表達水平。此外，其他轉錄因子如AP-1、Sp1等也可能參與B7-H3基因的轉錄調控，它們通過與B7-H3基因啟動子區(qū)域的相應順式作用元件相互作用，影響B(tài)7-H3基因的轉錄活性，具體的調控機制仍有待進一步深入研究。DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳修飾，也會對B7-H3的表達產生影響。在正常細胞中，B7-H3基因啟動子區(qū)域的某些CpG島處于高甲基化狀態(tài)，這種甲基化修飾可以抑制基因的轉錄，使得B7-H3在正常組織中表達水平較低。而在肺癌細胞中，B7-H3基因啟動子區(qū)域的甲基化模式發(fā)生改變，部分CpG島出現(xiàn)去甲基化現(xiàn)象，導致基因轉錄抑制解除，B7-H3表達上調。研究發(fā)現(xiàn)，使用DNA甲基化抑制劑處理肺癌細胞后，B7-H3基因啟動子區(qū)域的甲基化水平降低，B7-H3的表達顯著增加，進一步證實了DNA甲基化在B7-H3表達調控中的作用。此外，組蛋白修飾如組蛋白乙?；?、甲基化等也可能通過改變染色質的結構和功能，影響B(tài)7-H3基因的轉錄活性，但其具體的調控機制尚不完全清楚，需要進一步深入研究。在信號通路層面，多種信號通路參與了B7-H3表達的調控。絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路在細胞的增殖、分化、凋亡等過程中發(fā)揮著重要作用，同時也與B7-H3的表達調控密切相關。在肺癌細胞中，表皮生長因子（EGF）等生長因子與細胞表面的受體結合后，激活下游的MAPK信號通路，包括細胞外信號調節(jié)激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38MAPK等。激活的MAPK信號通路可以通過磷酸化作用激活一系列轉錄因子，如AP-1、Elk-1等，這些轉錄因子與B7-H3基因啟動子區(qū)域結合，促進B7-H3基因的轉錄，從而上調B7-H3的表達。研究表明，使用MAPK信號通路抑制劑處理肺癌細胞后，B7-H3的表達明顯降低，表明MAPK信號通路在B7-H3表達調控中具有重要作用。磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信號通路也是調節(jié)B7-H3表達的重要信號通路之一。該信號通路在細胞的生長、存活、代謝等過程中發(fā)揮著關鍵作用，并且在多種腫瘤中存在異常激活。在肺癌細胞中，PI3K/AKT信號通路的激活可以通過多種途徑促進B7-H3的表達。一方面，激活的AKT可以直接磷酸化某些轉錄因子，如NF-κB、STAT3等，增強它們與B7-H3基因啟動子區(qū)域的結合能力，促進基因轉錄。另一方面，PI3K/AKT信號通路還可以通過調節(jié)其他信號分子的活性，間接影響B(tài)7-H3的表達。例如，PI3K/AKT信號通路可以激活雷帕霉素靶蛋白（mTOR），mTOR通過調節(jié)蛋白質合成等過程，影響B(tài)7-H3的表達。使用PI3K/AKT信號通路抑制劑可以顯著降低肺癌細胞中B7-H3的表達，提示該信號通路在B7-H3表達調控中具有重要意義。腫瘤微環(huán)境因素對B7-H3的表達也有著重要影響。腫瘤微環(huán)境是一個復雜的生態(tài)系統(tǒng)，包括腫瘤細胞、免疫細胞、基質細胞以及細胞外基質等成分，其中的細胞因子、趨化因子等信號分子在B7-H3表達調控中發(fā)揮著重要作用。腫瘤壞死因子α（TNF-α）是一種重要的促炎細胞因子，在腫瘤微環(huán)境中大量存在。研究表明，TNF-α可以通過激活NF-κB信號通路，上調肺癌細胞中B7-H3的表達。當TNF-α與肺癌細胞表面的受體結合后，激活下游的信號轉導途徑，導致NF-κB的活化，活化的NF-κB進入細胞核，與B7-H3基因啟動子區(qū)域結合，促進基因轉錄，從而使B7-H3表達增加。干擾素γ（IFN-γ）也可以調節(jié)B7-H3的表達。IFN-γ與肺癌細胞表面的受體結合后，激活JAK-STAT信號通路，STAT1等轉錄因子被激活并進入細胞核，與B7-H3基因啟動子區(qū)域的相應序列結合，促進B7-H3基因的轉錄，進而上調B7-H3的表達。此外，其他細胞因子如白細胞介素6（IL-6）、轉化生長因子β（TGF-β）等也可能通過不同的信號通路影響B(tài)7-H3的表達，具體的作用機制仍有待進一步研究。腫瘤相關巨噬細胞（TAM）是腫瘤微環(huán)境中的重要免疫細胞，對B7-H3的表達也有影響。TAM根據(jù)其功能和表型可分為M1型和M2型，M1型巨噬細胞具有抗腫瘤活性，而M2型巨噬細胞具有免疫抑制功能。研究發(fā)現(xiàn)，M2型TAM可以分泌多種細胞因子和趨化因子，如IL-10、TGF-β等，這些因子可以促進肺癌細胞中B7-H3的表達。IL-10可以通過抑制免疫細胞的活性，營造一個有利于腫瘤細胞生長和逃逸的免疫抑制微環(huán)境，同時IL-10還可以通過激活STAT3信號通路，上調B7-H3的表達。TGF-β則可以通過激活Smad信號通路，調節(jié)B7-H3基因的轉錄，從而促進B7-H3的表達。此外，TAM還可以通過與肺癌細胞的直接接觸，調節(jié)B7-H3的表達，具體的分子機制尚需進一步深入探討。四、B7-H3表達與肺癌臨床病理特征的關聯(lián)4.1與肺癌患者基本特征的關系肺癌的發(fā)生是一個多因素、多步驟的復雜過程，患者的基本特征如年齡、性別、吸煙史等與肺癌的發(fā)病風險密切相關，同時也可能影響B(tài)7-H3在肺癌組織中的表達。在年齡方面，有研究表明，隨著年齡的增長，肺癌的發(fā)病率逐漸升高。這可能與老年人機體免疫力下降、長期暴露于致癌因素以及細胞修復能力減弱等因素有關。對于B7-H3表達與年齡的關系，目前研究結果尚不一致。部分研究顯示，B7-H3在肺癌組織中的表達與患者年齡無明顯相關性。然而，也有研究發(fā)現(xiàn)，在老年肺癌患者中，B7-H3的表達水平可能相對較高。一項針對[具體數(shù)量]例肺癌患者的研究表明，年齡≥60歲的患者中，B7-H3陽性表達率為[X]%，而年齡＜60歲的患者中，B7-H3陽性表達率為[X]%，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。這種差異可能與老年患者腫瘤微環(huán)境的改變有關，隨著年齡的增加，腫瘤微環(huán)境中的炎癥因子、細胞因子等信號分子水平可能發(fā)生變化，從而影響B(tài)7-H3的表達。此外，老年患者免疫系統(tǒng)功能衰退，可能導致免疫監(jiān)視作用減弱，使得腫瘤細胞更容易逃避機體的免疫攻擊，進而上調B7-H3的表達，以促進腫瘤的生長和發(fā)展。性別也是影響肺癌發(fā)生和B7-H3表達的因素之一。肺癌的發(fā)病率在男性和女性中存在一定差異，通常男性肺癌發(fā)病率高于女性。這可能與男性吸煙率較高、職業(yè)暴露等因素有關。關于B7-H3表達與性別的關系，研究結果存在分歧。一些研究認為，B7-H3在肺癌組織中的表達與患者性別無關。然而，也有研究報道顯示，B7-H3在男性肺癌患者中的表達高于女性。山東大學靳英杰等人的研究表明，B7-H3在成年男性非小細胞肺癌中的陽性表達率明顯高于女性，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。這種性別差異可能與性激素水平、遺傳因素以及生活方式等多種因素有關。性激素可以通過調節(jié)免疫細胞的功能和腫瘤細胞的生長，影響B(tài)7-H3的表達。例如，雌激素可能具有一定的免疫調節(jié)作用，能夠抑制腫瘤細胞的生長和轉移，從而降低B7-H3的表達；而雄激素可能促進腫瘤細胞的增殖和侵襲，進而上調B7-H3的表達。此外，男性和女性在遺傳易感性上可能存在差異，某些基因的突變或多態(tài)性可能影響B(tài)7-H3的表達調控。吸煙是肺癌的重要危險因素之一，大量研究表明，吸煙與肺癌的發(fā)生密切相關，吸煙者患肺癌的風險明顯高于非吸煙者。吸煙可以導致肺部細胞DNA損傷、基因突變，進而促進肺癌的發(fā)生和發(fā)展。對于B7-H3表達與吸煙史的關系，研究結果也不盡相同。多數(shù)研究顯示，B7-H3在肺癌組織中的表達與患者吸煙史無明顯相關性。然而，也有研究發(fā)現(xiàn)，吸煙可能會影響B(tài)7-H3的表達。一項研究對[具體數(shù)量]例肺癌患者進行分析，結果顯示，吸煙患者肺癌組織中B7-H3的表達水平高于非吸煙患者。吸煙可能通過激活多種信號通路，如MAPK、PI3K/AKT等，促進B7-H3的表達。香煙中的有害物質如尼古丁、多環(huán)芳烴等可以刺激肺部細胞，導致細胞內信號傳導異常，從而上調B7-H3基因的轉錄和蛋白表達。此外，吸煙還會引起肺部炎癥反應，炎癥因子的釋放可能進一步影響B(tài)7-H3的表達。4.2與腫瘤分期、轉移的相關性腫瘤分期和轉移是評估肺癌患者病情嚴重程度和預后的重要指標，B7-H3的表達與肺癌的腫瘤分期、轉移密切相關。大量研究表明，B7-H3在肺癌組織中的表達與腫瘤TNM分期存在顯著關聯(lián)。TNM分期是目前國際上通用的腫瘤分期系統(tǒng)，T代表原發(fā)腫瘤的大小和侵犯范圍，N代表區(qū)域淋巴結轉移情況，M代表遠處轉移情況。靳英杰等人研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3在非小細胞肺癌TNMⅡ-Ⅲ期組組織中的表達高于TNMI期組。這表明隨著腫瘤分期的進展，B7-H3的表達水平逐漸升高。在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中，腫瘤細胞不斷增殖、侵襲周圍組織并發(fā)生轉移，B7-H3的高表達可能為腫瘤細胞提供了生存和發(fā)展的優(yōu)勢，促進了腫瘤的進展。高水平的B7-H3可能通過抑制免疫細胞的功能，使腫瘤細胞能夠逃避機體免疫系統(tǒng)的監(jiān)視和攻擊，從而有利于腫瘤細胞在體內的生長和擴散。B7-H3還可能通過激活相關信號通路，促進腫瘤細胞的增殖、遷移和侵襲能力，進一步推動腫瘤的發(fā)展，導致腫瘤分期的升高。B7-H3的表達與肺癌的淋巴結轉移也密切相關。淋巴結轉移是肺癌常見的轉移方式之一，對患者的預后有著重要影響。研究顯示，有淋巴結轉移的肺癌患者中，B7-H3的表達水平顯著高于無淋巴結轉移的患者。B7-H3可能通過多種機制促進肺癌的淋巴結轉移。一方面，B7-H3可以調節(jié)腫瘤細胞與周圍微環(huán)境中細胞外基質的相互作用，促進腫瘤細胞的遷移和侵襲。B7-H3通過激活PI3K/AKT信號通路，上調基質金屬蛋白酶（MMPs）的表達，MMPs能夠降解細胞外基質，為腫瘤細胞的遷移和侵襲提供條件。腫瘤細胞可以通過降解的細胞外基質進入淋巴管，進而發(fā)生淋巴結轉移。另一方面，B7-H3還可能影響腫瘤細胞與淋巴管內皮細胞的黏附能力，促進腫瘤細胞在淋巴結中的定植和生長。B7-H3可以上調腫瘤細胞表面的黏附分子，如E-鈣黏蛋白、整合素等，增強腫瘤細胞與淋巴管內皮細胞的黏附，使腫瘤細胞更容易進入淋巴結并在其中生長繁殖。此外，B7-H3還可能通過調節(jié)腫瘤微環(huán)境中的免疫細胞功能，抑制機體的抗腫瘤免疫反應，為腫瘤細胞的淋巴結轉移創(chuàng)造有利條件。例如，B7-H3促進Treg細胞的增殖和功能活化，Treg細胞分泌的免疫抑制因子可以抑制CD4+T細胞、CD8+T細胞等免疫細胞的活性，使腫瘤細胞能夠逃避免疫監(jiān)視，順利發(fā)生淋巴結轉移。B7-H3在肺癌遠處轉移中也發(fā)揮著重要作用。遠處轉移是肺癌患者預后不良的重要因素，一旦發(fā)生遠處轉移，患者的治療難度大大增加，生存率顯著降低。研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3的高表達與肺癌的遠處轉移密切相關。在肺癌遠處轉移過程中，B7-H3可能通過多種途徑促進腫瘤細胞的轉移。B7-H3可以調節(jié)腫瘤細胞的上皮-間質轉化（EMT）過程，EMT是腫瘤細胞獲得遷移和侵襲能力的關鍵過程，使上皮細胞失去極性和細胞間連接，獲得間質細胞的特性，從而更容易發(fā)生轉移。B7-H3通過激活MAPK、Wnt等信號通路，上調EMT相關轉錄因子，如Snail、Slug等，促進EMT的發(fā)生，使腫瘤細胞能夠脫離原發(fā)灶，進入血液循環(huán)并在遠處器官定植。B7-H3還可以調節(jié)腫瘤血管生成，為腫瘤細胞的遠處轉移提供必要的營養(yǎng)和運輸途徑。腫瘤血管生成是腫瘤生長和轉移的重要環(huán)節(jié)，B7-H3可以促進腫瘤細胞分泌血管內皮生長因子（VEGF）等血管生成因子，刺激血管內皮細胞的增殖和遷移，形成新的血管，這些新生血管不僅為腫瘤細胞提供營養(yǎng)，還為腫瘤細胞進入血液循環(huán)提供了通道，增加了腫瘤細胞遠處轉移的機會。此外，B7-H3還可能通過調節(jié)腫瘤微環(huán)境中的免疫細胞功能，抑制機體的抗腫瘤免疫反應，使腫瘤細胞能夠在遠處器官中逃避機體的免疫監(jiān)視，存活并生長繁殖。4.3在肺癌預后評估中的價值準確評估肺癌患者的預后對于制定合理的治療方案、判斷患者的生存情況具有重要意義。B7-H3作為一種在肺癌中高表達且與腫瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關的分子，在肺癌預后評估中具有潛在的價值。生存分析是評估肺癌患者預后的常用方法，其中Kaplan-Meier法是最經(jīng)典的非參數(shù)生存分析方法之一。該方法通過計算不同時間點的生存率，繪制生存曲線，直觀地展示患者的生存情況。在研究B7-H3表達與肺癌患者生存情況的關系時，通常將患者按照B7-H3表達水平分為高表達組和低表達組，然后運用Kaplan-Meier法分別計算兩組患者的總生存期（OS）和無進展生存期（PFS），并通過Log-rank檢驗比較兩組生存曲線的差異?？偵嫫谑侵笍拇_診肺癌到患者因任何原因死亡或隨訪截止的時間；無進展生存期則是指從確診肺癌到腫瘤出現(xiàn)進展、復發(fā)或患者死亡（以先發(fā)生者為準）的時間。這兩個指標是評估肺癌患者預后的重要參數(shù)，能夠反映患者在疾病發(fā)展過程中的生存狀況和疾病控制情況。眾多研究表明，B7-H3表達與肺癌患者的總生存期和無進展生存期密切相關。一項納入[具體數(shù)量]例肺癌患者的研究顯示，B7-H3高表達組患者的總生存期明顯短于B7-H3低表達組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。在無進展生存期方面，B7-H3高表達組患者的疾病進展風險顯著增加，無進展生存期明顯縮短。B7-H3的高表達可能通過多種機制影響肺癌患者的預后。B7-H3可以抑制機體的抗腫瘤免疫反應，使腫瘤細胞能夠逃避免疫系統(tǒng)的監(jiān)視和攻擊，從而促進腫瘤的生長和轉移，縮短患者的生存時間。B7-H3還可能通過調節(jié)腫瘤細胞的增殖、凋亡和侵襲能力，直接影響腫瘤的生物學行為，導致患者預后不良。例如，B7-H3可以激活PI3K/AKT、MAPK等信號通路，促進腫瘤細胞的增殖和存活，抑制細胞凋亡，同時增強腫瘤細胞的侵襲和轉移能力，這些作用都不利于患者的預后。多因素Cox比例風險回歸模型是進一步確定影響肺癌患者預后獨立危險因素的重要方法。該模型可以同時考慮多個因素對生存時間的影響，通過計算風險比（HR）來評估每個因素對預后的影響程度。將B7-H3表達水平與其他可能影響肺癌患者預后的因素，如年齡、性別、吸煙史、腫瘤分期、病理類型、淋巴結轉移等一起納入多因素Cox比例風險回歸模型進行分析，結果顯示，B7-H3表達是影響肺癌患者預后的獨立危險因素之一。即使在調整了其他因素后，B7-H3高表達患者的死亡風險仍然顯著高于B7-H3低表達患者，HR值為[具體HR值]，表明B7-H3表達對肺癌患者預后具有獨立的預測價值。這一結果進一步證實了B7-H3在肺癌預后評估中的重要性，提示臨床醫(yī)生在評估肺癌患者預后時，應將B7-H3表達水平作為一個重要的參考指標。B7-H3作為肺癌預后標志物具有一定的優(yōu)勢。B7-H3在肺癌組織和血清中均可檢測到，檢測方法相對簡便，如免疫組化、RT-PCR、ELISA等技術已廣泛應用于臨床實踐，便于臨床醫(yī)生獲取相關檢測結果。與一些傳統(tǒng)的腫瘤標志物相比，B7-H3對肺癌預后的預測具有較高的特異性和敏感性。研究表明，B7-H3在肺癌患者中的表達與患者的生存情況密切相關，能夠更準確地預測患者的預后，為臨床治療決策提供有力的依據(jù)。此外，B7-H3還與肺癌的腫瘤分期、轉移等臨床病理特征密切相關，這些信息可以為醫(yī)生評估患者的病情嚴重程度和制定個性化的治療方案提供重要參考。然而，B7-H3作為肺癌預后標志物也存在一些局限性。雖然B7-H3在肺癌中的表達與預后相關，但在不同研究中，其表達水平與預后的相關性可能存在差異，這可能與研究對象的選擇、檢測方法的差異以及腫瘤微環(huán)境等多種因素有關。B7-H3在肺癌中的表達受到多種因素的調控，其表達機制較為復雜，這可能影響其作為預后標志物的穩(wěn)定性和可靠性。此外，肺癌是一種高度異質性的疾病，不同患者的腫瘤細胞生物學行為和分子特征存在差異，僅依靠B7-H3表達水平可能無法全面準確地評估所有肺癌患者的預后，需要結合其他臨床病理指標和分子標志物進行綜合判斷。五、B7-H3在肺癌免疫治療中的作用與前景5.1B7-H3作為肺癌免疫治療靶點的理論基礎B7-H3在腫瘤免疫逃逸中扮演著關鍵角色，這使其成為肺癌免疫治療的重要潛在靶點。腫瘤免疫逃逸是腫瘤細胞逃避機體免疫系統(tǒng)監(jiān)視和攻擊的過程，是腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉移的重要機制之一。在肺癌中，B7-H3通過多種途徑促進腫瘤免疫逃逸，為肺癌的免疫治療提供了理論依據(jù)。B7-H3對T細胞功能的抑制是其促進腫瘤免疫逃逸的重要機制之一。T細胞在抗腫瘤免疫中發(fā)揮著核心作用，其活化需要雙信號刺激，第一信號來自TCR與APC表面MHC-抗原肽復合物的結合，第二信號則由共刺激分子提供。B7-H3作為共刺激分子家族成員，卻在肺癌中主要表現(xiàn)出共抑制作用。研究表明，B7-H3可以與T細胞表面的未知受體結合，抑制T細胞表面受體調節(jié)基因轉錄的關鍵信號通路，如NFAT、NF-κB和AP-1通路。這些信號通路對于T細胞的活化、增殖和細胞因子的分泌至關重要。當B7-H3與相應受體結合后，會干擾這些信號通路的正常傳導，導致T細胞無法接收到有效的活化信號，從而抑制T細胞的增殖和細胞因子的分泌。例如，B7-H3可以抑制NFAT的活化，使其無法進入細胞核調控相關基因的轉錄，進而減少IL-2和IFN-γ等細胞因子的產生。IL-2是T細胞增殖和存活所必需的細胞因子，其減少會導致T細胞免疫應答減弱；IFN-γ具有激活免疫細胞、增強免疫細胞殺傷活性的作用，其減少會削弱免疫細胞對腫瘤細胞的殺傷能力。因此，B7-H3對T細胞功能的抑制，使得腫瘤細胞能夠逃避T細胞的免疫監(jiān)視和攻擊，促進了腫瘤免疫逃逸。B7-H3對NK細胞功能的抑制也為腫瘤免疫逃逸提供了條件。NK細胞是天然免疫的重要組成部分，具有直接殺傷腫瘤細胞和被病原體感染細胞的能力，無需預先致敏，能夠快速響應并發(fā)揮免疫防御作用。然而，B7-H3可以和NK細胞上的不明受體結合，傳遞抑制信號，從而下調NK細胞的細胞毒性，抑制NK細胞介導的溶菌作用。當NK細胞表面的受體與B7-H3結合后，細胞內的信號傳導發(fā)生改變，導致NK細胞的殺傷活性受到抑制。NK細胞功能的抑制，使得腫瘤細胞能夠逃脫NK細胞的免疫監(jiān)視，有利于腫瘤細胞的存活和發(fā)展。B7-H3還通過調節(jié)腫瘤微環(huán)境中的免疫細胞和細胞因子，營造免疫抑制微環(huán)境，促進腫瘤免疫逃逸。腫瘤微環(huán)境是一個復雜的生態(tài)系統(tǒng)，其中的免疫細胞和細胞因子在腫瘤免疫中發(fā)揮著重要作用。B7-H3可以促進Treg細胞的增殖和功能活化，Treg細胞是一類具有免疫抑制功能的T細胞亞群，能夠分泌TGF-β和IL-10等免疫抑制因子。這些因子可以抑制其他免疫細胞的活性，包括CD4+T細胞、CD8+T細胞和NK細胞等，從而營造一個有利于腫瘤細胞生長和逃逸的免疫抑制微環(huán)境。B7-H3還能調節(jié)腫瘤相關巨噬細胞（TAM）的分化，促進M2型巨噬細胞的極化。M2型巨噬細胞具有免疫抑制功能，能夠分泌多種促進腫瘤生長和轉移的細胞因子，如IL-10、TGF-β等，進一步促進腫瘤的免疫逃逸。從免疫治療靶點的角度來看，B7-H3具有諸多優(yōu)勢，使其成為肺癌免疫治療的理想靶點。B7-H3在肺癌組織中高表達，而在正常組織中表達水平較低或不表達，這種表達的差異性為靶向治療提供了特異性。通過特異性地靶向B7-H3，可以減少對正常組織的損傷，降低治療的副作用。B7-H3參與了腫瘤免疫逃逸的多個關鍵環(huán)節(jié)，阻斷B7-H3的功能有望打破腫瘤免疫逃逸機制，恢復機體的抗腫瘤免疫反應。B7-H3在肺癌中的表達與腫瘤的分期、轉移和預后密切相關，靶向B7-H3不僅可以抑制腫瘤的生長和轉移，還可能改善肺癌患者的預后。此外，B7-H3作為膜蛋白，相對容易被抗體等生物制劑識別和結合，為開發(fā)靶向B7-H3的免疫治療藥物提供了便利。5.2基于B7-H3的免疫治療策略與臨床研究進展基于B7-H3在肺癌免疫逃逸中的關鍵作用，目前針對B7-H3的免疫治療策略主要包括單克隆抗體療法、抗體偶聯(lián)藥物（ADC）療法、CAR-T細胞療法以及免疫放射療法等，這些治療策略在臨床研究中展現(xiàn)出了不同程度的療效和潛力。單克隆抗體療法是靶向B7-H3免疫治療的重要策略之一。通過制備特異性識別B7-H3的單克隆抗體，阻斷B7-H3與其受體的相互作用，從而解除其對免疫細胞的抑制作用，恢復機體的抗腫瘤免疫反應。MacroGenics公司研發(fā)的enoblituzumab（MGA271）是一種完全人源化的B7-H3單抗，含有經(jīng)過優(yōu)化的Fc結構域，能夠增強其與活化受體CD16A的結合并減少其與抑制受體CD32B的結合，從而增強抗腫瘤功能。在早期的I期試驗（NCT01391143，NCT02475213）中，enoblituzumab表現(xiàn)出良好的耐受性和安全性。在與ipilimumab聯(lián)合治療非小細胞肺癌和黑色素瘤的I期試驗（NCT02381314）以及評估新輔助enoblituzumab治療前列腺癌的II期試驗（NCT02923180）中，雖然結果尚待確定，但為B7-H3單抗聯(lián)合其他免疫治療藥物的應用提供了研究方向。2018年SITC上公布的enoblituzumab與帕博利珠單抗聯(lián)用的臨床數(shù)據(jù)顯示，與單獨使用抗PD-1阻斷的方法相比，聯(lián)用組總緩解率幾乎翻倍。針對頭頸部鱗癌，聯(lián)用組實現(xiàn)33.3%的客觀緩解率，針對非小細胞肺癌，聯(lián)用組實現(xiàn)35.7%的客觀緩解率。安全性方面，27.1%的患者經(jīng)歷了3級或以上的AE，6.8%的患者因AE退出，1名患者因肺炎不良事件死亡，聯(lián)合療法與PD-1抑制劑單藥療法的TRAE相當。然而，在2022年，MacroGenics公司宣布結束一項enoblituzumab聯(lián)合Retifanlimab（抗PD-1單克隆抗體）或Tebotelimab（PD-1×LAG-3雙特異性DART?分子）一線治療復發(fā)性或轉移性頭頸部鱗狀細胞癌患者的II期臨床試驗（CP-MGA271-06），原因是在研究的兩個組（總共62名接受治療的患者）中發(fā)生了7例可能與出血事件相關的死亡，盡管其中6例被評估為“繼發(fā)于疾病進展和/或與研究治療無關”，1例被評估為可能相關，但這一事件仍為B7-H3單抗的臨床應用敲響了警鐘，提示在臨床研究和應用中需要密切關注其安全性問題。ADC療法是將B7-H3特異性抗體與細胞毒性藥物連接起來，利用抗體的靶向性將細胞毒性藥物精準輸送至腫瘤細胞，提高療效并減少對正常細胞的損害。映恩生物與BioNTech共同開發(fā)的DB-1311/BNT324是一款基于映恩生物獨創(chuàng)的DITAC技術平臺的B7-H3靶向ADC，其細胞毒素載荷為一種拓撲異構酶I抑制劑。2024年ESMOAsia大會報道了DB-1311/BNT324的1/2a期臨床數(shù)據(jù)，在至少有一次基線后腫瘤評估的患者中（n=238），總體未確認客觀緩解率（uORR）為32.4%，疾病控制率（DCR）為82.4%。在小細胞肺癌患者中（n=73），uORR為56.2%，DCR為89.0%，絕大部分SCLC患者接受了6mg/kg和9mg/kgDB-1311/BNT324治療，兩組之間uORR無明顯差異，分別為54.5%和58.8%。在9mg/kg劑量水平下，既往接受過免疫治療、但未接受過拓撲異構酶I抑制劑治療的SCLC患者中，uORR為70.4%。非小細胞肺癌患者中，大部分為非鱗癌（n=41），uORR為22.0%；鱗癌患者（n=25），uORR為16.0%。去勢抵抗性前列腺癌患者中（n=32），DB-1311/BNT324表現(xiàn)出早期抗腫瘤活性，uORR為28.0%，DCR為92.0%，影像學無進展生存期（rPFS）數(shù)據(jù)尚未成熟，中位rPFS為7.2個月，6個月rPFS率為94.7%。其他瘤種中，如宮頸癌、肝細胞癌、頭頸部鱗癌和黑色素瘤，DB-1311/BNT324同樣表現(xiàn)出一定的抗腫瘤活性。在所有接受治療的腫瘤患者中（n=277），DB-1311/BNT324表現(xiàn)出可管理的安全性，最常見的TRAE為惡心、中性粒細胞計數(shù)降低、貧血、白細胞計數(shù)降低、食欲降低和血小板計數(shù)降低。第一三共的DS-7300a也是一種B7-H3靶向ADC，由B7-H3特異性單抗與四拓撲異構酶I抑制劑偶聯(lián)而成，目前正在進行I/II期試驗（NCT04145622）。2021年ESMO會議上公布的DS-7300的I期早期數(shù)據(jù)顯示，在70例晚期腫瘤患者中，客觀緩解率達21.42%，包括10例部分緩解的患者和5例待確認部分緩解患者，另外32例患者報告了疾病穩(wěn)定（SD=45.71%）。安全性方面，未觀察到劑量限制性毒性，31.4%患者出現(xiàn)3級及以上TRAE，最常見的為貧血和淋巴細胞計數(shù)下降，16.0mg/kg劑量組中1例患者出現(xiàn)與死亡相關（5級）的間質性肺病(ILD)，被判定為與治療相關。這些臨床數(shù)據(jù)表明，B7-H3ADC在肺癌等實體瘤治療中具有一定的療效和安全性，但仍需要進一步的臨床試驗來優(yōu)化治療方案，提高療效并降低不良反應。CAR-T細胞療法是通過基因工程技術將識別B7-H3的嵌合抗原受體（CAR）導入T細胞，使T細胞能夠特異性識別并殺傷表達B7-H3的腫瘤細胞。目前，針對B7-H3的CAR-T細胞療法在肺癌治療的臨床試驗中也取得了一定進展。Christopher及其團隊開發(fā)的新一代CAR-T細胞，使用針對B7-H3的單克隆抗體作為“導航”的抗原結合域，并首次采用名為TMIGD2的協(xié)同刺激受體，在胰腺癌、肺癌和膠質母細胞瘤等實體腫瘤模型中表現(xiàn)出顯著的治療潛力。在體外實驗中，使用該CAR-T細胞顯示出比現(xiàn)有療法更強的抗腫瘤能力，特別是在治療膠質母細胞瘤的實驗中，9只小鼠中有7只得以存活。雖然針對肺癌的臨床試驗數(shù)據(jù)尚未廣泛報道，但這些臨床前研究結果為B7-H3CAR-T細胞療法在肺癌治療中的應用提供了理論基礎和研究方向。然而，CAR-T細胞療法在實體瘤治療中仍面臨諸多挑戰(zhàn)，如如何克服實體腫瘤的免疫抑制微環(huán)境、提高CAR-T細胞在腫瘤組織中的浸潤和存活能力、降低脫靶效應等。免疫放射療法是利用放射性同位素標記的B7-H3特異性抗體，通過抗體與腫瘤細胞表面B7-H3的特異性結合，將放射性物質輸送到腫瘤部位，利用放射性物質的輻射效應殺傷腫瘤細胞。131I標記的單克隆抗體8H9（omburtamab，Y-mAbs）已用于轉移性中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)母細胞瘤（NCT00089245）患者和促結締組織增生性小圓細胞瘤（NCT01099644）患者的腹腔注射，并且耐受性良好。同樣，在彌漫性腦橋膠質瘤（NCT01502917）中測試了124I標記的單克隆抗體8H9，同樣耐受性良好。雖然目前針對肺癌的免疫放射療法臨床試驗較少，但在其他腫瘤中的良好耐受性為其在肺癌治療中的應用提供了可能性。綜上所述，基于B7-H3的免疫治療策略在肺癌臨床研究中展現(xiàn)出了一定的療效和潛力，但也面臨著諸多挑戰(zhàn)，如安全性問題、耐藥性問題以及如何進一步提高治療效果等。未來，需要進一步深入研究B7-H3的作用機制，優(yōu)化治療方案，開展更多大規(guī)模、多中心的臨床試驗，以評估這些治療策略的安全性和有效性，為肺癌患者提供更有效的治療手段。5.3聯(lián)合治療方案的探索與展望為了進一步提高肺癌免疫治療的療效，探索B7-H3靶向治療與其他治療方式的聯(lián)合應用成為當前研究的熱點。B7-H3靶向治療與其他免疫治療、化療、放療等聯(lián)合，具有潛在的優(yōu)勢和協(xié)同作用機制，有望為肺癌患者帶來更好的治療效果。在與其他免疫治療聯(lián)合方面，B7-H3單抗與免疫檢查點抑制劑（ICIs）聯(lián)合具有協(xié)同增效的潛力。ICIs，如抗PD-1/PD-L1抗體和抗CTLA-4抗體，已在肺癌治療中取得顯著療效，但仍有部分患者對其無應答或出現(xiàn)耐藥。B7-H3在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮重要作用，與ICIs聯(lián)合可以從不同角度打破腫瘤的免疫逃逸機制，增強機體的抗腫瘤免疫反應。研究表明，B7-H3單抗enoblituzumab與帕博利珠單抗聯(lián)用，在非小細胞肺癌患者中顯示出比單獨使用抗PD-1阻斷更高的總緩解率。其協(xié)同作用機制可能是enoblituzumab阻斷B7-H3對T細胞的抑制作用，恢復T細胞的活性，而帕博利珠單抗阻斷PD-1/PD-L1信號通路，進一步解除T細胞的免疫抑制，兩者聯(lián)合可使T細胞充分活化，增強抗腫瘤免疫效應。此外，B7-H3與其他新興免疫檢查點抑制劑或免疫調節(jié)劑聯(lián)合也具有廣闊的研究前景。例如，LAG-3、TIM-3等免疫檢查點在腫瘤免疫逃逸中也起著重要作用，B7-H3靶向治療與針對這些免疫檢查點的抑制劑聯(lián)合，可能通過多靶點協(xié)同作用，更全面地激活免疫系統(tǒng)，提高治療效果。B7-H3靶向治療與化療聯(lián)合也具有一定的優(yōu)勢?；熓欠伟┑膫鹘y(tǒng)治療方法之一，通過使用細胞毒性藥物殺傷腫瘤細胞。然而，化療在殺傷腫瘤細胞的同時，也會對正常細胞造成損傷，且容易產生耐藥性。B7-H3靶向治療與化療聯(lián)合，可以發(fā)揮各自的優(yōu)勢，提高治療效果?；熕幬锟梢灾苯託[瘤細胞，縮小腫瘤體積，同時還能釋放腫瘤抗原，增強機體的免疫原性。B7-H3靶向治療則可以增強機體的抗腫瘤免疫反應，清除化療后殘留的腫瘤細胞，減少腫瘤復發(fā)和轉移的風險。在非小細胞肺癌的治療中，B7-H3ADC與化療藥物聯(lián)合使用，可能通過將細胞毒性藥物精準輸送至腫瘤細胞，提高化療藥物的療效，同時減輕化療的副作用。此外，化療還可以調節(jié)腫瘤微環(huán)境，增強免疫細胞的浸潤和活性，與B7-H3靶向治療產生協(xié)同作用。例如，化療藥物可以誘導腫瘤細胞釋放細胞因子和趨化因子，吸引免疫細胞進入腫瘤組織，為B7-H3靶向治療創(chuàng)造更好的免疫微環(huán)境。B7-H3靶向治療與放療聯(lián)合同樣具有協(xié)同作用。放療是肺癌綜合治療的重要組成部分，通過高能射線照射腫瘤組織，破壞腫瘤細胞的DNA，從而殺傷腫瘤細胞。放療不僅可以直接殺傷腫瘤細胞，還能誘導腫瘤細胞發(fā)生免疫原性死亡，釋放腫瘤抗原，激活機體的抗腫瘤免疫反應。B7-H3靶向治療與放療聯(lián)合，可以增強放療的抗腫瘤效果。放療后腫瘤細胞釋放的腫瘤抗原可以激活T細胞，而B7-H3靶向治療可以解除B7-H3對T細胞的抑制作用，使T細胞能夠更好地識別和殺傷腫瘤細胞。研究表明，在小鼠肺癌模型中，放療聯(lián)合B7-H3CAR-T細胞治療，可以顯著抑制腫瘤生長，延長小鼠的生存期。放療還可以改變腫瘤微環(huán)境，增加腫瘤細胞表面B7-H3的表達，提高B7-H3靶向治療的特異性和有效性。例如，放療可以上調腫瘤細胞表面的熱休克蛋白，這些蛋白可以與B7-H3結合，增強B7-H3的表達，從而使B7-H3靶向治療更有效地作用于腫瘤細胞。未來聯(lián)合治療方案的發(fā)展方向將更加注重個性化和精準化。隨著精準醫(yī)學的發(fā)展，通過對肺癌患者的基因檢測、免疫狀態(tài)評估等，篩選出對聯(lián)合治療敏感的患者群體，實現(xiàn)個性化治療，將成為提高治