玻璃器皿的準(zhǔn)備玻璃器皿的要求玻璃器皿的包扎玻璃器皿的清洗方法

玻璃器皿一般要求硬質(zhì)玻璃，才能承受高溫和短暫灼燒而不致破裂；

玻璃器皿的游離堿含量要少，否則會(huì)影響培養(yǎng)基的酸堿度；

玻璃器皿的形狀和包裝方法要求能防止污染雜菌為準(zhǔn)；

洗滌玻璃器皿方法不當(dāng)會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一、玻璃器皿的要求1、新購(gòu)的玻璃器皿首先浸泡于１～２％的鹽酸或洗滌液中數(shù)

小時(shí)，最后用流水沖凈。二、玻璃器皿的清洗方法2、使用過(guò)的玻璃器皿的清洗方法試管、培養(yǎng)皿、等可用瓶刷及去污粉刷洗然后自來(lái)水沖洗干凈。若內(nèi)壁水均勻分布成一薄層而不出現(xiàn)水珠，為油污完全洗凈。否則，再浸泡數(shù)小時(shí)。裝有固體培養(yǎng)基的器皿，應(yīng)先將其刮去，再洗滌；

帶菌的先浸在2%煤酚皂溶液或0.25%新潔爾；

滅消毒液內(nèi)24h或煮沸0.5h，再洗滌；

帶病原菌的先高壓蒸汽滅菌，然后將培養(yǎng)物倒去，再進(jìn)行洗滌。

3、玻璃吸管立即浸泡在自來(lái)水中，免得干燥后難以沖洗干凈，待實(shí)驗(yàn)結(jié)束后集中沖洗。

若吸管頂部塞有棉花，則先用水將棉花沖出，再洗滌吸過(guò)微生物培養(yǎng)物的吸管應(yīng)立即浸泡在盛有2%的煤酚皂溶液或

0.25%新潔爾滅消毒液內(nèi)，24h后方可取出沖洗吸管內(nèi)部如有油垢，同樣應(yīng)先在洗滌液中浸泡數(shù)小時(shí)，然后沖洗。4、載玻片與蓋玻片若滴加有香柏油，先用鄒文紙擦去或浸在二甲苯里搖晃幾次，再在肥皂水中煮沸5～15min；用軟紙或脫脂棉花擦拭，立即沖洗，然后在稀洗滌液中浸泡0.5～2h，自來(lái)水沖洗，最后用蒸餾水換洗幾次，干后浸于95%乙醇中保存。

使用時(shí)在火焰上燒去乙醇檢查過(guò)活菌的先2%煤酚皂溶液或0.25%的新潔爾滅溶液中浸泡24h，然后按上述洗滌和保存。三、空玻璃器皿的包扎玻璃器皿在滅菌前必須經(jīng)正確包裹和加塞，以保證玻璃器皿于滅菌后不被外界雜菌所污染。1、平皿包扎將平皿用紙包扎好，以5～8個(gè)為一包；2、吸管的包裝

粗頭頂端約0.5cm處塞1.5cm長(zhǎng)的棉花，報(bào)紙條包裝每只吸管，與報(bào)紙約呈45°，并將左端多余的部分覆折在吸管上，再將整根吸管卷入報(bào)紙，有段多余的紙條打一小結(jié)。再用大報(bào)紙包裝單只吸管，干熱滅菌報(bào)紙條包裝好的許多單只吸管，也可裝入金屬筒中干熱滅菌。若一次滅菌的吸管可一次用完，也可將玻璃吸管直接放入金屬筒內(nèi)，管尖朝筒底，粗端在筒口，干熱滅菌。使用時(shí)，筒橫臥，手持粗端取用3、試管和三角燒瓶的包裝洗凈干燥后的試管和三角燒瓶，管口和瓶口塞棉花塞。許多試管裝入鐵絲筐內(nèi)，再用大張報(bào)紙或牛皮紙捆扎，干熱或濕熱滅菌。三角燒瓶再用報(bào)紙或牛皮紙包扎，細(xì)線捆之附：棉塞的制作棉塞的作用防止雜菌污染保證通氣良好棉塞：加塞時(shí)，1／3在試管口外，2／3在試管

口內(nèi)。如圖2-2所示。做棉塞的棉花要選

纖維較長(zhǎng)的，一般不用脫脂棉做棉塞通氣塞：幾層紗布（一般8層）相互重疊，或兩

層紗布間均勻鋪一層棉花而成培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基配制的基本原理培養(yǎng)基配制步驟培養(yǎng)基配制的藥品和器材培養(yǎng)基配制總結(jié)一、培養(yǎng)基配制的基本原理以營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配制為例是人工配制的適合細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基本培養(yǎng)基；含有牛肉膏，蛋白胨、NaCL和瓊脂，以利于細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。牛肉膏：為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供碳源、能源、磷酸鹽和維生素；蛋白胨：提供氮源和維生素；NaCL：提供無(wú)機(jī)鹽；瓊脂：凝固劑。器材：天平、藥匙、稱量紙；燒杯、量筒、玻棒、電爐；過(guò)濾裝置、三角瓶、試管、牛皮紙、棉線、記號(hào)筆。藥品：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（配方：牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、

瓊脂15g、pH7.3±1）二、培養(yǎng)基配制的藥品和器材以營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配制為例三、培養(yǎng)基配制步驟以營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配制為例配制步驟:1、稱量稱量前天平要預(yù)熱、校正用稱量紙稱量、稱量紙要去皮藥匙要干凈，避免污染培養(yǎng)基易吸潮，稱量要快稱量完畢及時(shí)蓋好試劑瓶蓋Notice！??！培養(yǎng)基的配制先向燒杯內(nèi)加入所需水量的一部分，將培養(yǎng)基連同稱量紙一起放入燒杯中，于電爐上稍微加熱后，用玻棒挑出稱量紙，然后邊加熱邊不斷進(jìn)行攪拌，直到培養(yǎng)基完全溶解后補(bǔ)足水分繼續(xù)加熱至微沸即可。1、電爐上要墊石棉網(wǎng)；2、要邊加熱邊攪拌，以防瓊脂糊底燒焦。

注意?。?！配制步驟：3、過(guò)濾除去培養(yǎng)基里面的微小顆粒雜質(zhì)，以利于某些實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察。目的要求：趁熱進(jìn)行過(guò)濾紗布最好疊六層應(yīng)透明無(wú)沉淀配制步驟：4、分裝要求管口和瓶口不要沾上培養(yǎng)基；

裝試管:裝量不要超過(guò)試管的1/5；

錐形瓶:一般以其容積的1/2為宜。制作平板培養(yǎng)基：分裝于錐形瓶?jī)?nèi)；制作斜面培養(yǎng)基：分裝于試管中；配制步驟：5、加塞目的過(guò)濾空氣，避免污染注意事項(xiàng)：

棉塞應(yīng)采用新鮮干燥的普通棉花制作、忌用脫脂棉；棉塞不要過(guò)緊過(guò)松。塞好后，以手提棉塞,管、瓶不下落；拔出時(shí)能聽(tīng)到“嘭”的一聲為合適。配制步驟：6、包扎包扎

試管包扎加塞先用麻繩捆好，再在棉塞外包一層牛皮紙或雙層報(bào)紙，其外再用一道麻繩活結(jié)扎好；注明培養(yǎng)基名稱，配制日期，待滅菌。

錐形瓶包