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項(xiàng)目2蘆薈的組培快速繁殖主講人:呂曼01040302生根培養(yǎng)繼代培養(yǎng)煉苗初代培養(yǎng)任務(wù)任務(wù)一、初代培養(yǎng)3.1、愈傷組織培養(yǎng)定義原理愈傷組織(callus):離體組織或器官進(jìn)行離體培養(yǎng)時(shí),進(jìn)行細(xì)胞分裂,形成一種高度液泡化的無定形的薄壁細(xì)胞。愈傷組織培養(yǎng):將外植體(explaut)在無菌條件下接種到培養(yǎng)基上,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)、生長和發(fā)育的一門技術(shù)。細(xì)胞全能性(celltotipetency):植物細(xì)胞具有全套遺傳信息,在特定環(huán)境條件下能進(jìn)行表達(dá),而產(chǎn)生一個(gè)獨(dú)立完整的植株個(gè)體。脫分化:一個(gè)成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)的過程。恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。再分化:經(jīng)脫分化的組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細(xì)胞類型的過程。任務(wù)一、初代培養(yǎng)3.1、愈傷組織培養(yǎng)形成條件脫離母體植株:擺脫了原來所受到的遺傳上的控制和生理上的制約;一定的培養(yǎng)條件:最重要的是激素的種類和濃度;(2,4-D)內(nèi)源激素水平:外植體的類型和外植物體原來在植株上所處的位置。任務(wù)一、初代培養(yǎng)3.1、愈傷組織培養(yǎng)形成過程外植體中已分化的活細(xì)胞,在外源激素的誘導(dǎo)下通過脫分化后形成愈傷組織,這一過程被大致劃分為三個(gè)時(shí)期:誘導(dǎo)期分裂期形成期任務(wù)一、初代培養(yǎng)3.1、愈傷組織培養(yǎng)誘導(dǎo)期(起始期)細(xì)胞分裂的準(zhǔn)備期特點(diǎn):(1)細(xì)胞大小變化不大,外觀無明顯特征(2)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)代謝旺盛,RNA含量迅速增加,細(xì)胞核體積明顯增大誘導(dǎo)期的長短,因植物種類、外植體的生理狀況和外部因素而異,如胡蘿卜的誘導(dǎo)期要幾天,新鮮的菊芋塊莖則只要22h,但菊芋塊莖經(jīng)過5個(gè)月的貯藏后,誘導(dǎo)期則須延長到40h以上。任務(wù)一、初代培養(yǎng)3.1、愈傷組織培養(yǎng)分裂期外植體細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)以后脫分化,不斷分裂增生子細(xì)胞的過程特點(diǎn):(1)細(xì)胞的數(shù)目迅速增加,但平均鮮重下降(2)細(xì)胞體積小,無液泡。如同根尖和莖尖的分生組織細(xì)胞特性(3)細(xì)胞的核及核仁增大到最大(4)細(xì)胞中RNA含量減少,而DNA含量保持不變
任務(wù)一、初代培養(yǎng)3.1、愈傷組織培養(yǎng)形成期(分化期)是指外植體經(jīng)過誘導(dǎo)期和分裂期后形成了無序結(jié)構(gòu)的愈傷組織進(jìn)行分化并形成器官的時(shí)期。特點(diǎn):(1)細(xì)胞的平均大小相對(duì)穩(wěn)定(2)細(xì)胞分裂由原來局限在組織外緣分裂轉(zhuǎn)為組織內(nèi)部較深層局部細(xì)胞的分裂(3)形成分生組織結(jié)節(jié)。瘤狀或片狀的擬分生組織,分生組織結(jié)節(jié)可以成為愈傷組織的生長中心(4)形成維管組織結(jié)節(jié)。由分生組織結(jié)節(jié)外圍的細(xì)胞作平周分裂形成層狀細(xì)胞,并形成了部分維管組織如管胞、纖維細(xì)胞等,但不形成維管系統(tǒng)(5)形成不同形態(tài)和功能的細(xì)胞,因此有人又將此期稱為分化期。
任務(wù)一、初代培養(yǎng)3.1、愈傷組織培養(yǎng)優(yōu)良
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