第第頁2026屆高考生物一輪復(fù)習(xí)：人教版（2019）選擇性必修3《生物技術(shù)與工程》問答式讀背提綱發(fā)酵工程第一節(jié)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.P5腐乳制作的微生物主要是什么？原理是什么？豆腐發(fā)酵制作腐乳的過程中參與的微生物有酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉；豆腐發(fā)酵的原理：毛霉等微生物的發(fā)酵把豆腐中的蛋白質(zhì)被分解為小分子的肽和氨基酸2.P5泡菜制作利用的微生物是什么？原理是什么？泡菜制作利用乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，乳酸菌代謝類型為異養(yǎng)厭氧型，在無氧的情況下能將葡萄糖分解成乳酸，反應(yīng)簡式：C6H12O6eq\o(→,\s\up15(酶))2C3H6O3(乳酸)＋能量。3.P6用水密封泡菜壇的目的？給泡菜壇內(nèi)創(chuàng)造無氧環(huán)境，嚴(yán)格控制厭氧條件。4.P6泡菜壇應(yīng)裝至八成滿？為什么？防止由于產(chǎn)生CO2而導(dǎo)致發(fā)酵液溢出壇外（初期大腸桿菌、酵母菌會(huì)產(chǎn)生）防止因裝太滿使鹽水未完全淹沒菜料而導(dǎo)致菜料變質(zhì)腐爛。5.為什么含有抗生素的牛奶不易發(fā)酵為酸奶？牛奶發(fā)酵為酸奶主要依靠乳酸菌的作用，而抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌。6．P6在制作泡菜前可以向泡菜壇中加一些“陳泡菜水”。加入“陳泡菜水”的目的是什么？“陳泡菜水”中含有純度較高的乳酸菌，加入“陳泡菜水”相當(dāng)于接種乳酸菌。7.P6制作出的泡菜“咸而不酸”，造成這個(gè)結(jié)果最可能的原因是什么?可能是食鹽濃度過高，抑制乳酸菌生長，產(chǎn)生乳酸較少，導(dǎo)致泡菜未能正常發(fā)酵（也可能是由于溫度較低）。8.P6果酒的制作利用的微生物是什么？原理是什么？發(fā)酵條件一般控制在多少？新鮮水果的果皮表面附著有大量的不同種類的野生酵母菌；發(fā)酵原理：酵母菌是兼性厭氧型單細(xì)胞真菌酵母菌在有氧條件通過有氧呼吸大量繁殖，無氧條件通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精②相關(guān)反應(yīng)式C6H12O6＋6O2＋6HO2eq\o(→,\s\up15(酶))6CO2＋12HO2＋能量C6H12O6eq\o(→,\s\up15(酶))2C2H5OH(酒精)＋2CO2＋能量制作果酒發(fā)酵條件：(1)溫度：將溫度控制在18-30℃進(jìn)行發(fā)酵；(2)氧氣：先通氧使酵母菌大量繁殖后密封無氧條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵.9.P7果醋的制作利用的微生物是什么？原理是什么？溫度等發(fā)酵條件控制在多少？制作果醋參與發(fā)酵的主要微生物及來源：空氣中的醋酸菌。制作果醋的發(fā)酵原理：在有氧的條件下，果酒經(jīng)醋酸菌的作用可以進(jìn)一步發(fā)酵成果醋；當(dāng)糖源、氧氣充足時(shí)，醋酸菌還可以直接將糖分解為醋酸C6H12O6＋2O2eq\o(→,\s\up15(酶))2CH3COOH(醋酸)＋2H2O＋2CO2＋能量當(dāng)缺少糖原時(shí)直接將乙醇轉(zhuǎn)換為乙醛，再將乙醛變?yōu)橐宜酑2H5OH＋O2eq\o(→,\s\up15(酶))CH3COOH(醋酸)＋H2O＋能量（酒變酸或酒變醋的原因）制作果醋的發(fā)酵條件：發(fā)酵溫度為30-35℃，氧氣供應(yīng)充足。10.P7葡萄為什么要先沖洗后去梗？為什么不能洗得太干凈？避免葡萄破損，減少被雜菌污染的機(jī)會(huì)防止果皮表面的野生菌種數(shù)量減少。11.P8裝瓶時(shí)留有1/3的空間是為什么？a先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，快速繁殖，耗盡O2后，再進(jìn)行酒精發(fā)酵；b.防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液溢出。12.P8在制作果酒的過程中，除了酵母菌，是否還有其他微生物生長？它們會(huì)對(duì)果酒發(fā)酵產(chǎn)生影響嗎？如果有，如何避免這種影響？還有一些乳酸菌和醋酸菌；乳酸菌能將糖分解為甘油、酒石酸等，從而使果酒變質(zhì)，而在有氧的情況下，醋酸菌能把糖分解成醋酸或者把乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛進(jìn)而轉(zhuǎn)化為醋酸。可以通過調(diào)節(jié)發(fā)酵的溫度、pH等來控制乳酸菌含量；可以通過減少O2含量、調(diào)節(jié)發(fā)酵溫度、pH來控制醋酸菌含量。13.P8葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因？在發(fā)酵過程中，紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液中，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。14.P8在制作果醋的過程中，酵母菌是否還會(huì)繼續(xù)發(fā)酵？醋酸菌從何而來？采用什么措施可以加快果醋的制作？隨著醋酸發(fā)酵的進(jìn)行，發(fā)酵液的pH、發(fā)酵溫度等均不利于酵母菌的生長繁殖，因此酵母菌活性很低，不會(huì)繼續(xù)發(fā)酵。打開瓶蓋后，空氣中的醋酸菌會(huì)進(jìn)入在工業(yè)上，后期醋的發(fā)酵需要人工接種醋酸菌；或者買一瓶醋，將其打開暴露于空氣中，一段時(shí)間后在醋的表面會(huì)有一層薄膜（即醋酸菌膜），用這層薄膜進(jìn)行接種15.P8如何防止發(fā)酵液被污染？a.發(fā)酵瓶、榨汁機(jī)等器具用洗潔精清洗干凈，并用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，晾干備用；b.處理葡萄時(shí)應(yīng)先沖洗再去除枝梗；c.排氣時(shí)只需擰松瓶蓋，不要打開瓶蓋。16.P8用簡易裝置制作果酒適時(shí)擰松瓶蓋目的是什么？及時(shí)排出氣體（CO2）17.P8為什么排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身連接？防止空氣中微生物的污染第一章第二節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用P9什么是微生物？研究微生物的前提是什么？難以用肉眼觀察的微小生物統(tǒng)稱微生物包括細(xì)菌、真菌、病毒及一些原生生物等。本章主要指細(xì)菌和真菌。防止雜菌污染獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是研究和應(yīng)用微生物的前提（即發(fā)酵工程的重要基礎(chǔ)）。2.P9什么是培養(yǎng)基？培養(yǎng)基的用途是什么？人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基作用：用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。3．P9培養(yǎng)基按物理狀態(tài)可以如何分類？液體培養(yǎng)基：不含凝固劑（如瓊脂），呈液體狀態(tài)。用途：擴(kuò)大培養(yǎng)獲得大量菌種、常用于工業(yè)生產(chǎn)。目的是增加目的菌的數(shù)量。固體培養(yǎng)基：含凝固劑（如瓊脂），呈固體狀態(tài)。用途：分離、計(jì)數(shù)、鑒定菌種等實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一：瓊脂固體培養(yǎng)基。4.P10培養(yǎng)基中一般包含什么成分？為滿足一些微生物的特殊要求，培養(yǎng)基配制還需要注意什么？各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。此外還需要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。如培養(yǎng)乳酸菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌(真菌)時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無氧的條件。5.P10能否根據(jù)培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)判斷微生物的代謝類型？可以，例如自養(yǎng)型微生物所需的碳源來自無機(jī)碳源如空氣中CO2，異養(yǎng)型微生物所需的碳源來自有機(jī)碳源如葡萄糖。6.P10為什么培養(yǎng)基需要氮源？培養(yǎng)基中的氮元素是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的。7.P10牛肉膏和蛋白胨主要提供哪些營養(yǎng)？牛肉膏和蛋白胨來源于動(dòng)物原料，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營養(yǎng)物質(zhì)，牛肉膏提供的主要營養(yǎng)為碳源、磷酸鹽、維生素。蛋白胨提供的主要營養(yǎng)為氮源、維生素。8.P10獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵？防止雜菌污染9.P10無菌技術(shù)主要包括？消毒和滅菌消毒:是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。包括煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線消毒和使用化學(xué)藥物進(jìn)行消毒。.滅菌:是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。培養(yǎng)基等一般用濕熱滅菌法，其中在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的效果最好；玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)、金屬用具等，可以在干熱滅菌箱內(nèi)用干熱滅菌法；微生物的接種工具、試管口、瓶口通過灼燒滅菌法10.P11什么是純培養(yǎng)物？什么是純培養(yǎng)？純培養(yǎng)一般包括哪些步驟？由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。單菌落一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。微生物純培養(yǎng)的步驟：微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。酵母菌的純培養(yǎng):用馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌。11P12.什么是菌落？菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。一個(gè)單菌落即一個(gè)種群。菌落通?？梢杂脕碜鳛殍b定菌種的重要依據(jù)。獲得單菌落的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。12.P12倒平板時(shí)，為什么要冷卻到50℃左右？如何估計(jì)溫度？瓊脂是一種多糖，在44℃以下凝固，倒平板時(shí)，溫度過高，太燙手，不易操作；若低于50℃不及時(shí)操作，瓊脂會(huì)凝固。13.P12培養(yǎng)基冷凝后，為什么要將培養(yǎng)皿倒過來放置（倒置）？既可防止皿蓋上冷凝的水滴滴人培養(yǎng)基造成污染;又可避免培養(yǎng)基表面的水分過快蒸發(fā)。14.P13如何檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否徹底滅菌（平板是否合格）？將未接種的培養(yǎng)基（做空白對(duì)照）放入37℃的恒溫箱中培養(yǎng)12h～24h，觀察是否有菌落存在以確定是否被污染或滅菌是否徹底(該操作也可確定培養(yǎng)基滅菌是否徹底）。15.P13平板劃線法的原理？（連續(xù)劃線的目的）通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面，經(jīng)過數(shù)次劃線后培養(yǎng)可以分離得到單菌落。平板劃線法過程中，接種環(huán)蘸了1次菌液；若分5個(gè)區(qū)劃線，則接種環(huán)共需灼燒6次；灼燒次數(shù)＝劃線次數(shù)＋1。16.P13在接種酵母菌的培養(yǎng)基上，如果觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是由哪些原因引起的嗎？說明培養(yǎng)基被污染或者實(shí)驗(yàn)組的菌落中可能存在雜菌。17.P16微生物的篩選原理是什么？實(shí)驗(yàn)室篩選微生物原理：人為提供有利于目的菌生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度和pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長。18.P16什么是選擇培養(yǎng)基？選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。19.P16如何設(shè)計(jì)培養(yǎng)基篩選分解尿素的細(xì)菌？以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，只有能合成脲酶的細(xì)菌才能生長發(fā)育繁殖。20.P17怎么證明一個(gè)選擇培養(yǎng)基具有選擇性？應(yīng)該設(shè)置基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）或完全培養(yǎng)基作為對(duì)照，若基礎(chǔ)培養(yǎng)基或完全培養(yǎng)基中生長的菌落數(shù)菌多于該選擇培養(yǎng)基，則該選擇培養(yǎng)基具有選擇性。21.P12微生物分離純化常用方法有哪兩種？哪種適合菌種計(jì)數(shù)？平板劃線法和稀釋涂布平板法。P18稀釋涂布平板法：既能分離純化微生物又能統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。（平板劃線法不能用于活菌計(jì)數(shù)的原因是菌落連成片，無法計(jì)數(shù)）22.P17稀釋涂布平板法？稀釋涂布平板法操作包括：梯度稀釋和涂布平板。稀釋涂布平板法原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少個(gè)活菌。P18樣品稀釋操作成功的標(biāo)志是什么？得到2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)在30-300的平板樣品的稀釋度將直接影響平板上的菌落數(shù)目。為獲得菌落數(shù)在30-300之間適于計(jì)數(shù)的平板，測細(xì)菌時(shí)，一般選用104、105、106倍稀釋的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)。24.P18稀釋涂布平板法的計(jì)數(shù)原則？（1）選擇菌落數(shù)為30-300的平板計(jì)數(shù)；（2）同一稀釋度下，應(yīng)至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出平均值。25.P18稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少？當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。26.P18每g樣品中的細(xì)菌數(shù)計(jì)算？C代表某一稀釋度下平板上生長菌落數(shù)的平均值；V代表涂布平板時(shí)吸取的稀釋液體積數(shù)值(mL)；M代表稀釋倍數(shù)；則每g樣品中的細(xì)菌數(shù)=（C÷V）×M。27.P19土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)（1）實(shí)驗(yàn)原理：絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，利用以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌。（2）實(shí)驗(yàn)步驟：土壤取樣→制備培養(yǎng)基→樣品的稀釋與涂布平板→微生物的培養(yǎng)與觀察。28.P19為什么選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果？為什么可以根據(jù)菌落的不同判斷培養(yǎng)基上有不同菌種？防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。一般來說，在相同的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征，如形狀大小和顏色等。29．P19你統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)與其他同學(xué)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果差異很大，可能是哪些原因引起的?先看是否是同一土樣，若是同一土樣統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)應(yīng)該比較接近。若差異很大就需要從是否規(guī)范無菌操作，培養(yǎng)基的配制是否合理等方面查找原因。30.P20怎樣對(duì)分解尿素細(xì)菌的進(jìn)一步鑒定？1.鑒定原理:分解尿素細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為CO2和NH3，NH3溶于水會(huì)電離出NH4+和OH-，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，因此可以通過檢測培養(yǎng)基pH的變化來判斷是否發(fā)生了該化學(xué)反應(yīng)，進(jìn)而判斷該菌是否為尿素分解細(xì)菌；2.方法:在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，若pH升高指示劑將變紅。液體培養(yǎng)基可以直接看液體的變色情況；固體培養(yǎng)基上可以觀察菌落周圍是否出現(xiàn)紅色環(huán)帶；紅色環(huán)帶直徑與菌落直徑比值越大，說明分解尿素的能力越強(qiáng)。31．P20分解纖維素的微生物用什么方法篩選？如何鑒定？如何判斷微生物分解纖維素的能力大小？纖維素分解菌的篩選方法是剛果紅染色法。剛果紅(簡稱CR)是一種染料，能與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，透明圈的大小可反應(yīng)細(xì)菌降解纖維素的能力。實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。透明圈直徑與菌落直徑比值越大，說明分解纖維素的能力越強(qiáng)。第一章第三節(jié)發(fā)酵工程及其應(yīng)用32.P23發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)是什么？中心環(huán)節(jié)是？發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)：菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，產(chǎn)品分離、提純等方面。發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。33.P23發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵嚴(yán)格控制發(fā)酵條件的原因？a.環(huán)境條件不僅會(huì)影響微生物的生長繁殖，而且影響微生物代謝物的形成；b.嚴(yán)格控制發(fā)酵條件，有利于使發(fā)酵全過程處于最佳狀態(tài)。34.P23發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵要求？在發(fā)酵過程中，要隨時(shí)檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程。還要及時(shí)添加必需的營養(yǎng)組分，要嚴(yán)格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件。35.P23微生物菌種資源豐富，選擇發(fā)酵工程用的菌種時(shí)需要考慮哪些因素？①在低成本的培養(yǎng)基上能迅速生長繁殖②生產(chǎn)所需代謝物的產(chǎn)量高③發(fā)酵條件易控制④菌種不易變異，退化等36.P22菌種選育方法（菌種來源）？自然界中篩選、誘變育種、基因工程育種37.P23怎樣對(duì)發(fā)酵條件進(jìn)行調(diào)控以滿足微生物的生長需要？①反復(fù)試驗(yàn)確定培養(yǎng)基的配方；②對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌；③隨時(shí)檢測培養(yǎng)液中微生物的數(shù)量、產(chǎn)物濃度等；④及時(shí)添加必需的營養(yǎng)組分；⑤嚴(yán)格控制溫度、pH和溶氧量等發(fā)酵條件，使用計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)對(duì)各種條件進(jìn)行監(jiān)測和控制，以及反饋控制38.P23在進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)時(shí),排出的氣體和廢棄培養(yǎng)液等不能直接排放到外界環(huán)境中。為什么？因?yàn)樵谶M(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)時(shí)，微生物及其代謝物中都可能含有危害環(huán)境的物質(zhì)。為了減少或避免污染物的產(chǎn)生和排放，實(shí)現(xiàn)清潔生產(chǎn)，應(yīng)該對(duì)排出的氣體和廢氣培養(yǎng)液進(jìn)行二次清潔或滅菌處理。39.P24發(fā)酵工程的優(yōu)點(diǎn)？生產(chǎn)條件溫和、原料來源豐富且價(jià)格低廉、產(chǎn)物專一、廢棄物對(duì)環(huán)境的污染小和容易處理40.P24啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)流程？（1）啤酒的發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段；（2）主發(fā)酵階段完成：酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成（3）后發(fā)酵的條件：低溫、密閉的環(huán)境下儲(chǔ)存一段時(shí)間（4）焙烤的目的：加熱殺死種子胚但不使淀粉酶失活（5）蒸煮的目的：產(chǎn)生風(fēng)味組分，終止酶的進(jìn)一步作用，并對(duì)糖漿滅菌42.P24發(fā)酵工程在食品工業(yè)的應(yīng)用？①生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品（啤酒、酒、醋、醬油）；②生產(chǎn)各種各樣的食品添加劑（谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵生產(chǎn)味精、黑曲霉發(fā)酵制得檸檬酸）；③生產(chǎn)酶制劑如果膠酶、脂肪酶43.P25發(fā)酵工程在醫(yī)藥工業(yè)的應(yīng)用包括？①采用基因工程的方法，將植物或動(dòng)物的基因轉(zhuǎn)移到微生物中，獲得具有某種藥物生產(chǎn)能力的微生物如用微生物生產(chǎn)生長激素、胰島素。②直接對(duì)菌種進(jìn)行改造，再通過發(fā)酵技術(shù)大量生產(chǎn)所需要的產(chǎn)品如用酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗。44.P26利用基因工程生產(chǎn)疫苗具體操作?將病原體的某個(gè)或某幾個(gè)抗原基因轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)奈⑸锛?xì)胞，獲得的表達(dá)產(chǎn)物就可以作為疫苗使用。45.P27發(fā)酵工程在農(nóng)牧業(yè)的應(yīng)用？(1)生產(chǎn)微生物肥料：常見的有根瘤菌肥、固氮菌肥(2)生產(chǎn)微生物農(nóng)藥。微生物農(nóng)藥的作用：利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的。微生物農(nóng)藥作為生物防治的重要手段，將在農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展方面發(fā)揮越來越重要的作用。(3)生產(chǎn)微生物飼料。生產(chǎn)微生物飼料的原理：微生物含有豐富的蛋白質(zhì)，且繁殖速度快。微生物飼料實(shí)例：①單細(xì)胞蛋白：以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵獲得了大量的微生物菌體就是單細(xì)胞蛋白。用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料，能使家畜、家禽增重快，產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋量顯著提高。②乳酸菌：在青貯飼料中添加乳酸菌，可以提高飼料的品質(zhì)，使飼料保鮮，動(dòng)物食用后還能提高免疫力。第二章第一節(jié)植物細(xì)胞工程46.P35什么是植物組織培養(yǎng)？大致流程是怎樣的？基本原理是什么？植物組織培養(yǎng)概念：將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的過程：主要包括脫分化和再分化兩步外植體脫分化愈傷組織再分化根、芽 試管苗移栽完整植物植物組織培養(yǎng)的原理：植物細(xì)胞的全能性植物組織培養(yǎng)的生殖方式：無性生殖。47.P35什么是外植體？外植體的選擇？外植體的消毒？離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細(xì)胞被稱為外植體。①外植體選材：經(jīng)常選擇根尖（分生區(qū)）、莖的韌皮部（形成層）等。原因：分裂能力強(qiáng)、分化程度低，容易誘導(dǎo)形成愈傷組織。②外植體的消毒：將流水沖洗后的外植體用酒精消毒30s，用無菌水清洗2～3次后，再用次氯酸鈉溶液處理30min，用無菌水清洗2～3次。若想縮短次氯酸鈉溶液處理時(shí)間應(yīng)適當(dāng)提高次氯酸鈉溶液的濃度。③外植體的分割：用無菌濾紙吸去表面的水分，用解剖刀將外植體切成0.5～1cm長的小段。大小應(yīng)適宜，將外植體的1/3～1/2插入誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基中。注意外植體的方向，不要倒插。48.P34細(xì)胞的全能性的概念？細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。49.P35脫分化？脫分化的實(shí)質(zhì)：已經(jīng)分化的細(xì)胞失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只募?xì)胞脫分化的結(jié)果：形成愈傷組織（不定形的薄壁組織團(tuán)塊）50.P35愈傷組織的特點(diǎn)？不定形的薄壁組織團(tuán)塊（無葉綠素和葉綠體）。一般不需要光。此過程中涉及的生命活動(dòng)只有細(xì)胞增殖（有絲分裂），沒有細(xì)胞分化。51.P35再分化？再分化的實(shí)質(zhì)：基因的選擇性表達(dá)再分化的結(jié)果：由愈傷組織再分化成胚狀體，長出芽和根，而發(fā)育成完整的植株需要給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照，誘導(dǎo)葉綠素的合成，使試管苗能夠進(jìn)行光合作用。此過程中涉及的生命活動(dòng)既有細(xì)胞增殖（有絲分裂），又有細(xì)胞分化。52.P35植物組織培養(yǎng)中激素的作用？植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素，它們濃度、比例等都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。53.P35若想探究生長素與細(xì)胞分裂素的使用比例對(duì)植物組織培養(yǎng)的影響，則應(yīng)如何設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)？空白對(duì)照：不加任何激素。實(shí)驗(yàn)組1：生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值為1；實(shí)驗(yàn)組2：生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值大于1；實(shí)驗(yàn)組3：生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值小于1。54.P40作物脫毒一般選用什么部分的細(xì)胞？原因是什么？脫毒苗一般是通過什么方式獲得的？外植體選材部位：植物頂端分生區(qū)附近部位，如莖尖。選分生區(qū)的原因：植物頂端分生區(qū)附近病毒極少，甚至無病毒。作物脫毒操作過程：切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。55.P41紫杉醇等細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)生產(chǎn)技術(shù)手段：植物組織培養(yǎng)技術(shù)（在離體條件下對(duì)單個(gè)植物細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù)）。過程：優(yōu)點(diǎn)：不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制，對(duì)于社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義；生產(chǎn)速度快。56.P38什么是植物體細(xì)胞雜交？基本原理是什么？屬于哪種變異類型？植物體細(xì)胞雜交的概念：將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。①植物體細(xì)胞雜交的原理：細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性。②植物體細(xì)胞雜交的生殖方式：無性生殖。③植物體細(xì)胞雜交的分裂方式：有絲分裂。④植物體細(xì)胞雜交的涉及的可遺傳變異類型：染色體變異。57.P37如何獲得原生質(zhì)體？誘導(dǎo)融合一般采用什么方法？誘導(dǎo)融合成功的標(biāo)志是什么？用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：①物理法：電融合法、離心法等。②化學(xué)法：聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2＋－高pH融合法等。細(xì)胞融合完成的標(biāo)志：再生出新的細(xì)胞壁。植物體細(xì)胞雜交完成的標(biāo)志：培育出雜種植株。58.P38植物體細(xì)胞雜交的意義？打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種等方面展示出獨(dú)特的優(yōu)勢。第二章第二節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程59.P43什么是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)？基本原理是什么？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要哪些條件？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念：指從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理：細(xì)胞增殖（有絲分裂）。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：①營養(yǎng)條件、②無菌、無毒的環(huán)境、③適宜的溫度、pH和滲透壓④、適宜的氣體環(huán)境。營養(yǎng)物質(zhì)主要包括：糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等。60.P44為什么對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)通常要添加血清？提供尚未全部研究清楚的細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)。61.P44保證無菌、無毒環(huán)境的具體措施？（1）對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理。（2）在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。（3）還需要定期更換培養(yǎng)液。62.P44為什么培養(yǎng)液需要定期更換？以便清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。63.P44如何防止培養(yǎng)過程中的微生物污染？在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。64.P44動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)大致過程是什么？動(dòng)物組織塊→機(jī)械方法或胰蛋白酶/膠原蛋白酶處理→分散成單個(gè)細(xì)胞→加培養(yǎng)液→細(xì)胞懸液→放入培養(yǎng)瓶→原代培養(yǎng)→分瓶培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)。64.P44為什么要將動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞？如何分散得到細(xì)胞懸液？成塊的組織中細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起，彼此限制了細(xì)胞生長和增殖。機(jī)械方法或胰蛋白酶/膠原蛋白酶處理65.P44常用胰蛋白酶分散細(xì)胞，這說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？蛋白質(zhì)。不行，胃蛋白酶作用的適宜pH約為1.5，多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4，在此條件下胃蛋白酶就失去活性。66.P44什么是細(xì)胞貼壁？動(dòng)物細(xì)胞貼附在瓶壁上生長增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制。腫瘤細(xì)胞失去接觸抑制，在培養(yǎng)液可以無限增殖下去。67.P44為什么要進(jìn)行分瓶培養(yǎng)？進(jìn)行傳代培養(yǎng)(分瓶培養(yǎng))時(shí)，如何處理？因?yàn)榧?xì)胞密度過大、有害代謝物積累、培養(yǎng)中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏以及接觸抑制，導(dǎo)致細(xì)胞分裂受阻。胰蛋白酶處理后離心法收集，制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)。68.P46什么是干細(xì)胞？干細(xì)胞有哪兩類？應(yīng)用？①干細(xì)胞：一類已分裂分化，仍能分裂和分化的細(xì)胞。分布：早期胚胎、骨髓、臍帶血等。胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）：具有發(fā)育的全能性（分化為任何一種類型的細(xì)胞甚至完整個(gè)體的潛能）。成體干細(xì)胞：成體組織或器官內(nèi)、具有組織特異性、只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。應(yīng)用：發(fā)育、再生和修復(fù)等。如誘導(dǎo)多能干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）：優(yōu)點(diǎn)——無需破壞胚胎；iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。缺點(diǎn)——iPS細(xì)胞存在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，導(dǎo)致iPS細(xì)胞無法在短期內(nèi)進(jìn)入臨床應(yīng)用。69.P46什么是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)？原理是什么？常用誘導(dǎo)融合的方法有哪些？動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)：使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。融合后形成的雜交細(xì)胞就有原來兩個(gè)細(xì)胞的遺傳遺傳信息。融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性融合方法：電融合法等、PEG融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法70.P46為什么要制備單克隆抗體？傳統(tǒng)抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。71.P46如何制備單克隆抗體？用特定抗原注射小鼠→取多種B淋巴細(xì)胞→B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合得到未融合細(xì)胞+多種融合細(xì)胞→用特定的選擇培養(yǎng)基HAT進(jìn)行篩選獲得雜交瘤細(xì)胞→克隆化培養(yǎng)+抗體檢測+多次篩選獲得分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞→體外培養(yǎng)液中培養(yǎng)或注射小鼠腹腔內(nèi)增殖→獲取單克隆抗體。單克隆抗體制備的過程中涉及的原理：細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖。單克隆抗體制備的過程中應(yīng)用到的技術(shù)：動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。72P50.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)？應(yīng)用？單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原制備。單克隆抗體的應(yīng)用：(1)作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。用作診斷試劑的實(shí)例：多種疾病的診斷和病原體鑒定，如利用同位素或熒光標(biāo)記的單克隆抗體在特定組織中成像的技術(shù)可定位診斷腫瘤或心血管畸形。(2)用于治療疾病和運(yùn)載藥物。ADC：單克隆抗體與藥物結(jié)合，制成抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC），殺傷腫瘤細(xì)胞；ADC通常由抗體、接頭和藥物三部分組成。原理：通過將細(xì)胞毒素（藥物）與能特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC優(yōu)點(diǎn)：靶點(diǎn)清楚、毒副作用?。ú粫?huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害）73.P50什么是動(dòng)物核移植？基本原理是什么？有哪兩種類型？哪種更容易？動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)：將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重組細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。原理：動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。分類：胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。胚胎細(xì)胞核移植更容易74.P50為什么體細(xì)胞核移植比胚胎細(xì)胞核移植更困難？分化程度高，表現(xiàn)全能性困難。75.P52動(dòng)物體細(xì)胞核移植的大致過程是怎樣的？采集的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)至MⅡ期（減數(shù)分裂Ⅱ中期）→供體細(xì)胞選擇（一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞）→通過顯微操作去核法對(duì)卵母細(xì)胞去核→供體核移植到去核卵母細(xì)胞→重構(gòu)胚的激活（用物理或化學(xué)方法(如電刺激、Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等)激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程）→胚胎移植→生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)基本相同的犢牛76.P53什么是重構(gòu)胚？人工重新構(gòu)建的胚胎，具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。77.P54體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？不是。因?yàn)椋?）克隆動(dòng)物絕大部分DNA來自供體動(dòng)物的細(xì)胞核，但線粒體中的DNA（細(xì)胞質(zhì)中的DNA）同時(shí)來自供體細(xì)胞和受體卵母細(xì)胞。（2）性狀是基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果，克隆動(dòng)物所處的環(huán)境與核供體細(xì)胞生活的環(huán)境不會(huì)完全相同。（3）克隆動(dòng)物在個(gè)體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變、染色體變異等可遺傳變異。第二章第三節(jié)胚胎工程78.P56什么是受精作用？包括哪兩個(gè)階段？場所是哪里？受精概念：精子與卵子結(jié)合形成合子(即受精卵)的過程。受精場所：在自然條件下，哺乳動(dòng)物的受精在輸卵管內(nèi)完成。受精過程包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段；受精前的準(zhǔn)備階段包括精子獲能和卵子的準(zhǔn)備。79.P56什么是精子獲能？(1)精子獲能的概念：剛剛排出的精子不能立即與卵子受精，必須在相應(yīng)的生理變化發(fā)生雌性動(dòng)物的生殖道后，才能獲得受精能力，這一生理現(xiàn)象稱為“精子獲能”。注意：獲能的能指的是“受精能力”而不是“能量”。(2)使精子獲能的兩種方法:①直接利用雌性動(dòng)物生殖道使精子獲能②將精子培養(yǎng)在人工配制的獲能液中使其獲能。獲能液的成分因動(dòng)物種類不同而有所差異。獲能液常見有效成分有肝素、Ca2+載體等。80.P57為什么要進(jìn)行卵子的準(zhǔn)備？不同動(dòng)物排出的卵子成熟程度不同：少數(shù)是初級(jí)卵母細(xì)胞；多數(shù)是次級(jí)卵母細(xì)胞。排出的卵子都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟。卵子具備與精子受精能力的時(shí)期MⅡ中期。81.P57哺乳動(dòng)物受精過程包括？精子穿越卵細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)發(fā)生透明帶反應(yīng)→精子入卵發(fā)生卵細(xì)胞膜反應(yīng)→觀察到雌雄原核的形成和兩個(gè)極體（受精的標(biāo)志）→雌雄原核融合，受精卵形成（受精完成的標(biāo)志）82.P57防止多精入卵的兩道屏障分別是什么？防止多精入卵的兩道屏障是：透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)。83.P58受精卵的分裂方式是什么？什么是卵裂？其特點(diǎn)是什么？有絲分裂。受精卵的早期分裂叫卵裂卵裂的特點(diǎn)：①細(xì)胞數(shù)量不斷增加，胚胎總體積并不增加，每個(gè)細(xì)胞體積不斷減小；②DNA總數(shù)目不斷增加；每個(gè)細(xì)胞的核DNA數(shù)目不變；有機(jī)物總量減少；有機(jī)物種類增加。84.P58什么是桑椹胚？桑椹胚的細(xì)胞屬于什么細(xì)胞？桑葚胚的概念：當(dāng)卵裂產(chǎn)生的子細(xì)胞逐漸形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑葚時(shí)，這時(shí)的胚胎稱為桑葚胚。桑葚胚和之前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞。85.P58胚胎細(xì)胞在什么時(shí)期開始分化？構(gòu)成囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞分別會(huì)發(fā)育成什么？囊胚期細(xì)胞逐漸分化。囊胚結(jié)構(gòu)組成：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、滋養(yǎng)層、囊胚腔。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織。（內(nèi)細(xì)胞團(tuán)可用于胚胎分割）滋養(yǎng)層將來發(fā)育成胎膜和胎盤。（滋養(yǎng)層常用于DNA分析鑒定胎兒性別、遺傳病篩查）86.P58什么是孵化？囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大，會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從透明帶中伸展出來，這一過程叫做孵化。如果不能正常孵化，胚胎就無法繼續(xù)發(fā)育。87.P58原腸胚有什么特點(diǎn)？細(xì)胞分化在什么時(shí)期達(dá)到最大限度？原腸胚出現(xiàn)外中內(nèi)三個(gè)胚層這三個(gè)胚層將逐漸分化形成各種組織、器官等。細(xì)胞分化在原腸胚期達(dá)到最大限度88.P58體外受精技術(shù)主要包括哪些步驟？體外受精技術(shù)的主要過程：卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取和受精。89.P60試管牛是有性生殖還是無性生殖？是有性生殖試管動(dòng)物：通過人工操作使卵子在體外受精，經(jīng)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再進(jìn)行移植產(chǎn)生的個(gè)體。90.P61什么是胚胎移植？胚胎移植是指將通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。P61胚胎移植的實(shí)質(zhì)是什么？早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。92.P61可供移植的胚胎有哪些來源？適合移植的胚胎？胚胎的保存方法？有性生殖——體外受精或體內(nèi)受精(配種)→早期胚胎；無性生殖——核移植或胚胎分割→早期胚胎。胚胎的檢查、培養(yǎng)或保存：適合移植的階段是桑葚胚或囊胚階段。胚胎冷凍保存(-196℃液氮中）。93.P61胚胎移植是個(gè)什么過程？過程：對(duì)供受體母畜進(jìn)行選擇，并同期發(fā)情處理→對(duì)供體母畜進(jìn)行超數(shù)排卵→配種或人工授精→收集胚胎→對(duì)胚胎檢查、培養(yǎng)或保存→胚胎移植→對(duì)受體母畜進(jìn)行妊娠檢查→產(chǎn)生具有優(yōu)良性狀的后代。P61同期發(fā)情處理的目的是什么？使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致。95.P61注射什么激素來達(dá)到超速排卵的目的？超數(shù)排卵的目的是什么？注射促性腺激素使一頭母畜一次排出比自然情況下多許多的成熟卵子，用于配種或者人工授精，可獲得多枚胚胎，經(jīng)胚胎移植可得到多個(gè)后代。96.P61移入胚胎存活的基礎(chǔ)是什么？受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。97.P62胚胎移植后經(jīng)過受體孕育的后代的遺傳特性與供體保持一致的原因是？供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，其遺傳物質(zhì)不會(huì)發(fā)生改變。98.P62進(jìn)行胚胎移植有何優(yōu)勢？(1)充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力。(2)大大縮短了供體本身的繁殖周期。(3)對(duì)供體施行超數(shù)排卵處理后，增加后代數(shù)量。99.P62什么是胚胎分割？胚胎分割理論依據(jù)？胚胎分割技術(shù)屬于無性繁殖還是有性繁殖？胚胎分割概念：采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。胚胎分割理論基礎(chǔ)：早期胚胎干細(xì)胞具有很強(qiáng)的分裂能力，并保持著細(xì)胞全能性。胚胎分割生殖方式：無性生殖（無性繁殖、克隆）。100.P62什么樣的胚胎適合進(jìn)行胚胎分割？選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚（原因：桑葚胚或囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有發(fā)育的全能性）101．P62囊胚階段的胚胎要進(jìn)行分割要特別注意什么？在分割囊胚階段的胚胎時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割(原因：防止影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育)。102．P63胚胎移植前的性別鑒定，通常選擇什么部位的細(xì)胞？滋養(yǎng)層細(xì)胞：做DNA分析，鑒定性別。103.P62胚胎分割所需的主要儀器設(shè)備？體視顯微鏡+顯微操作儀。分割工具:分割針或分割刀。104．P63胚胎分割的意義？(1)促進(jìn)優(yōu)良動(dòng)物品種的繁殖產(chǎn)生遺傳性狀相同的后代（具有相同的遺傳物質(zhì)）用于遺傳學(xué)研究(2)在胚胎移植前，對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定（取樣部位為滋養(yǎng)層，鑒定方法為做（等，對(duì)于人工控制動(dòng)物性別、動(dòng)物繁育健康后代有重要意義。第三章基因工程105.P67基因工程的概念？基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?；蚬こ淌窃贒NA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，又叫做DNA重組技術(shù)。106.P71分子手術(shù)刀”是指什么？在基因工程中的作用是什么？分子手術(shù)刀”是指限制性核酸內(nèi)切酶，又稱限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定不同的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，產(chǎn)生黏性末端或平末端兩種形式的末端。107.P71限制酶識(shí)別的序列長度是多少？作用部位是哪里？切割的結(jié)果是什么？大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列由6個(gè)核苷酸組成，也有少數(shù)限制酶的識(shí)別序列由4個(gè)、8個(gè)或其他數(shù)量的核苷酸組成限制酶的作用部位：雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵限制酶切割結(jié)果：形成黏性末端或平末端108．P71限制酶為什么不會(huì)切割自身的DNA？原核生物中不存在該酶的識(shí)別序列或識(shí)別序列已被修飾109.P71在選擇限制酶的時(shí)候有什么依據(jù)？在選擇限制酶時(shí)，不能破壞目的基因和標(biāo)記基因（至少保留一個(gè)標(biāo)記基因），切割后的目的基因和載體必須產(chǎn)生相同的黏性末端。切割載體時(shí)酶切位點(diǎn)應(yīng)位于啟動(dòng)子與終止子之間。110.P71為何通常用兩種限制酶同時(shí)切割目的基因和運(yùn)載體？用兩種限制酶（同尾酶）同時(shí)切割目的基因和載體，可以避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接。111.P72“分子縫合針”是指什么？作用是什么？作用部位是哪里？可以分為哪兩類？DNA連接酶的作用結(jié)果？“分子縫合針”是指DNA連接酶DNA連接酶的功能將兩個(gè)DNA片段連接起來，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵DNA連接酶作用部位：磷酸二酯鍵（氫鍵的形成與DNA連接酶）DNA連接酶分為兩類，一類是E·coliDNA連接酶，另一類是T4DNA連接酶。后者既可以縫合雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端，又可以縫合雙鏈DNA片段的平末端，但連接平末端之間的效率比較低。催化具有互補(bǔ)黏性末端或平末端的DNA片段連接起來，形成重組DNA分子112.P72“分子運(yùn)輸車”是指什么？常用的有哪些？什么是質(zhì)粒？天然的質(zhì)粒能直接做運(yùn)載體嗎？“分子運(yùn)輸車”是指載體基因工程中使用的載體，除質(zhì)粒外，還有動(dòng)植物病毒和λ噬菌體的衍生物等。質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于真核細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上經(jīng)過人工改造的。113.P72質(zhì)粒需具備什么條件才能充當(dāng)“分子運(yùn)輸車”？a.能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。b.具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。c.具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和篩選。114.P72標(biāo)記基因的作用是什么？常見的標(biāo)記基因有哪些？作為標(biāo)記基因的一定是抗性基因嗎？標(biāo)記基因的存在便于重組DAN的篩選。常見的標(biāo)記基因有四環(huán)素抗性基因，氨芐青霉素抗性基因。標(biāo)記基因不一定都是抗生素抗性基因，也可以是熒光蛋白基因如綠色熒光蛋白基因等有助于篩選的其他基因。115.P74DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)原理:(1)DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面有差異,選用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)方法對(duì)它們進(jìn)行提取。①DNA不溶于酒精,某些蛋白質(zhì)溶于酒精,分離DNA和蛋白質(zhì)。②DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液。(2)DNA的鑒定：遇二苯胺試劑（沸水?。?huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。116.P74DNA粗提取的基本思路是什么？材料的選取→破碎細(xì)胞→去除雜質(zhì)→DNA析出（95%冷酒精）→DNA鑒定（與二苯胺試劑顯藍(lán)色）117.P76基因工程的基本操作程序主要包括哪四個(gè)步驟？核心步驟是哪一步？基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建118.P76什么是目的基因？常用的目的基因有哪些？在基因工程的設(shè)計(jì)和操作中，用于改變受體細(xì)胞性狀或獲得預(yù)期表達(dá)產(chǎn)物等的基因就是目的基因。目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因常用的有與生物的抗逆性、優(yōu)良品質(zhì)、生產(chǎn)藥物、毒物降解、工業(yè)用酶等有關(guān)的基因。篩選目的基因：從相關(guān)的已知結(jié)構(gòu)和功能清晰的基因中進(jìn)行篩選是較為有效的方法之一。119.P77什么是PCR？進(jìn)行PCR需要什么條件？PCR大致過程是怎樣的？擴(kuò)增的結(jié)果是什么？利用PCR獲取和擴(kuò)增目的基因①PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))：是一項(xiàng)根據(jù)DNA分子半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。②PCR反應(yīng)的條件：一定的緩沖溶液、DNA模板、2種引物、4種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶，以及能自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器。③PCR擴(kuò)增的過程目的基因DNA在90-95℃受熱變性后解為單鏈，冷卻到55-60℃引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合；然后加熱至70-75℃以單鏈DNA為模板在耐高溫的DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸，即將4種脫氧核苷酸加到引物的3’端，如此重復(fù)循環(huán)多次。每次循環(huán)一般可以分為變性、復(fù)性、延伸。擴(kuò)增的結(jié)果是得到大量含目的基因的核苷酸序列120.P77什么是引物？引物的作用是什么？為什么需要引物？引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核酸。用于PCR的引物長度通常為20-30個(gè)核苷酸，PCR中的引物一般為DNA單鏈。（體內(nèi)DNA復(fù)制的引物為RNA單鏈）引物的作用：使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸需要引物的原因：DNA復(fù)制不能從頭開始，DNA聚合酶只能從引物的3'端延伸DNA鏈（DNA聚合酶只能催化單個(gè)核苷酸加到已有核苷酸片段的3’端的羥基上）④兩種引物都結(jié)合在DNA模板鏈的3’端=5\*GB3⑤DNA新鏈延伸的方向?yàn)閺?’端向3’端延伸121.P79PCR產(chǎn)物的鑒定？進(jìn)行電泳鑒定的結(jié)果如果不止一條條帶，可能原因是什么？常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR產(chǎn)物。進(jìn)行電泳鑒定的結(jié)果如果不止一條條帶，可能原因有引物設(shè)計(jì)不合理；它們與非目的序列有同源性或容易形成二聚體;退火溫度過低；DNA聚合酶的質(zhì)量不好122.P79用PCR可以擴(kuò)增mRNA嗎？mRNA不可以直接擴(kuò)增，需要將它逆轉(zhuǎn)錄成cDNA再進(jìn)行擴(kuò)增。123.P80構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是什么？讓目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用124.P80一個(gè)完整的基因表達(dá)載體應(yīng)該包括哪些元件？基因表達(dá)載體必須包括啟動(dòng)子、目的基因、標(biāo)記基因、終止子等（若需要能完成自主復(fù)制，還應(yīng)有復(fù)制原點(diǎn)。在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子應(yīng)位于目的基因的首端，終止子應(yīng)位于目的基因的尾端，這樣目的基因才能表達(dá)。125.P80什么是啟動(dòng)子？什么是終止子？啟動(dòng)子是一段特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，是RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。終止子是一段特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停下來。126.必修二P66什么是密碼子？什么是起始密碼子？什么是終止密碼子？密碼子是指mRNA上每三個(gè)相鄰的堿基能決定一個(gè)氨基酸稱為一個(gè)密碼子。起始密碼是mRNA上翻譯的起點(diǎn)終止密碼是mRNA上翻譯的終點(diǎn)127.標(biāo)記基因的作用？是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。128.P81什么是轉(zhuǎn)化？是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。129．P81轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞常用方法