藥物殘留檢測技術(shù)激素類藥物的殘留分析-樣品處理方法Residueanalysisofhormonedrugs-Methodofsamplehandling動物藥學(xué)院學(xué)院:賈紀(jì)萍主講教師：樣品種類尿液、血清、膽汁、奶等。液體樣品半固體樣品固體樣品肌肉、腎臟、肝臟組織等。毛發(fā)等。一般對于禁止使用的化合物只需要進(jìn)行確認(rèn)，但對于內(nèi)源性的睪酮、孕酮等化合物以及法庭用樣品就需要準(zhǔn)確的定量，這就導(dǎo)致不同用途樣品的前處理和分析要求的不同。由于生物樣品中的激素殘留水平低、內(nèi)源性干擾物質(zhì)多，因此樣品前處理和分析是一項艱巨且具有挑戰(zhàn)性的工作。樣品預(yù)處理尿液、血清、膽汁、奶等液體樣品預(yù)先進(jìn)行稀釋、調(diào)節(jié)pH值、離心等處理后，通常在37°C在有β-葡糖苷酸酶-葡糖-硫酸酶存在下進(jìn)行酶解2h，有時也可以用枯草桿菌蛋白酶進(jìn)行酶解。肌肉、肝臟、腎臟組織等半固體樣品，首先與水或適當(dāng)?shù)木彌_溶液勻質(zhì)，脂肪組織必要時需要于提取前在40-60°C加熱至脂肪熔化成液體。毛發(fā)等固體樣品需磨碎后加氫氧化鈉溶液水解，以離解共軛的激素類物質(zhì)。常見凈化方法常見的凈化方法有液液萃取、固相萃取、分子印跡、超臨界提取等一種或多種凈化技術(shù)的組合。液液萃取01液液萃取是利用化合物在兩種互不相溶（或微溶）的溶劑中溶解度或分配系數(shù)的不同，使化合物從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另外一種溶劑后再提取的過程。液液萃取應(yīng)用廣泛、操作簡單、成本低。但該方法往往需要使用較大量的有機溶劑，導(dǎo)致樣品被稀釋，測定前還需對樣品進(jìn)行濃集，造成溶劑浪費和環(huán)境污染；此外萃取中還可能發(fā)生乳化現(xiàn)象，萃取率低，且難以實現(xiàn)自動化。固相萃取02固相萃取是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附，使其與樣品的基質(zhì)和干擾化合物分離，然后用洗脫液洗脫或加熱解吸附，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。固相萃取具有回收率高、分離速度快、不產(chǎn)生乳化、溶劑用量減少、自動化程度高、與分析儀器的兼容性好等優(yōu)點。因此，固相萃取已得到廣泛應(yīng)用。當(dāng)然，固相萃取柱也有其局限性，如截面積小、流量低；易產(chǎn)生縫隙，降低提取效率；裝置較貴、操作復(fù)雜等。分子印跡技術(shù)03分子印跡技術(shù)是近年發(fā)展起來的能夠制備出對目標(biāo)分子具有特定的識別能力的聚合物材料的技術(shù)，又被稱為模擬受體。這種聚合物制備比較簡單，性質(zhì)比較穩(wěn)定，可重復(fù)多次使用，是一種很有發(fā)展前途的新型仿生材料。分子印跡技術(shù)是將待分離的目標(biāo)分子與功能單體通過共價或非共價作用進(jìn)行預(yù)組裝，與交聯(lián)劑共聚制備得到聚合物；分子印跡技術(shù)具有強大的分子識別功能，有高效的選擇特異性，對生物樣品中的目標(biāo)分子具有較高程度的富集能力。聚合物大多只能在有機相中進(jìn)行聚合和應(yīng)用，其在水溶液或極性溶劑中進(jìn)行應(yīng)用仍有難度；目前能用于聚合的印跡分子大多是小分子，對于生物大分子的印跡技術(shù)仍需改進(jìn)。超臨界流體萃取04超臨界流體萃取是利用超臨界流體在高于臨界溫度、壓力的條件下，從樣品中萃取目標(biāo)成分，當(dāng)恢復(fù)到常壓和常溫時，溶解在超臨界流體中的目標(biāo)成分立即與氣態(tài)的超臨界流體分開，從而達(dá)到樣品提取和分離的目的。常用的超臨界流體為CO2，具有無毒、無臭、化學(xué)惰性、不污染樣品、易于提純、超臨界條件溫和等特點，并且可通過控制其密度而具有很多傳統(tǒng)的有機溶劑的萃取能力。具有萃取率高、無溶劑殘留、不發(fā)生氧化變質(zhì)等優(yōu)點，但很難萃取強極性化合物，且設(shè)備壓力高、投資大、操作技術(shù)要求高，很難實現(xiàn)較高程度地純化目標(biāo)成分。感謝觀看激素類藥物的殘留分析-樣品處理方法Resid