免疫elisa考試題及答案

一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）

1.ELISA實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)板的包被通常使用哪種緩沖液？

A.PBS

B.Tris-HCl

C.磷酸鹽緩沖液

D.碳酸鹽緩沖液

答案：D

2.在ELISA實(shí)驗(yàn)中，下列哪種物質(zhì)不是抗體？

A.IgG

B.IgM

C.IgA

D.BSA

答案：D

3.雙抗體夾心ELISA中，用于捕獲抗原的抗體是：

A.單克隆抗體

B.多克隆抗體

C.酶標(biāo)抗體

D.以上都可以

答案：A

4.ELISA實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)二抗的作用是：

A.捕獲抗原

B.標(biāo)記信號

C.封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)

D.提供緩沖環(huán)境

答案：B

5.在間接ELISA中，酶標(biāo)抗體的作用是：

A.捕獲抗原

B.標(biāo)記信號

C.封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)

D.提供緩沖環(huán)境

答案：B

6.ELISA實(shí)驗(yàn)中，用于終止酶反應(yīng)的常用試劑是：

A.硫酸

B.鹽酸

C.檸檬酸

D.硼酸

答案：A

7.競爭ELISA中，競爭物與酶標(biāo)物之間的關(guān)系是：

A.相同

B.不同

C.互補(bǔ)

D.無關(guān)

答案：A

8.ELISA實(shí)驗(yàn)中，洗滌的目的是：

A.去除未結(jié)合的酶標(biāo)物

B.增加反應(yīng)時(shí)間

C.減少背景信號

D.提高靈敏度

答案：A

9.在ELISA實(shí)驗(yàn)中，用于封閉酶標(biāo)板非特異性結(jié)合位點(diǎn)的物質(zhì)通常是：

A.牛血清白蛋白（BSA）

B.脫脂奶粉

C.明膠

D.以上都可以

答案：D

10.ELISA實(shí)驗(yàn)中，底物與酶反應(yīng)后產(chǎn)生的顏色變化通常是什么？

A.藍(lán)色

B.黃色

C.紅色

D.無色

答案：C

二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）

1.ELISA實(shí)驗(yàn)中，下列哪些因素會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果？

A.抗體的純度

B.底物的濃度

C.洗滌的次數(shù)

D.酶的活性

答案：ABCD

2.在ELISA實(shí)驗(yàn)中，下列哪些物質(zhì)可以作為封閉液？

A.牛血清白蛋白（BSA）

B.脫脂奶粉

C.明膠

D.甘油

答案：ABC

3.以下哪些是ELISA實(shí)驗(yàn)中常用的底物？

A.OPD

B.TMB

C.ABTS

D.BCIP/NBT

答案：ABCD

4.以下哪些是ELISA實(shí)驗(yàn)中常用的酶？

A.辣根過氧化物酶（HRP）

B.堿性磷酸酶（AP）

C.β-半乳糖苷酶（β-Gal）

D.葡萄糖氧化酶（GOx）

答案：ABC

5.ELISA實(shí)驗(yàn)中，以下哪些操作可以減少非特異性結(jié)合？

A.使用高純度抗體

B.增加洗滌次數(shù)

C.使用封閉液

D.降低抗體濃度

答案：ABC

6.以下哪些是ELISA實(shí)驗(yàn)中常用的終止反應(yīng)方法？

A.加入硫酸

B.加入鹽酸

C.加入檸檬酸

D.加入硼酸

答案：AB

7.以下哪些是ELISA實(shí)驗(yàn)中常用的檢測波長？

A.450nm

B.492nm

C.630nm

D.340nm

答案：ABC

8.以下哪些是ELISA實(shí)驗(yàn)中常用的酶標(biāo)二抗？

A.辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗

B.堿性磷酸酶標(biāo)記的二抗

C.生物素標(biāo)記的二抗

D.熒光素標(biāo)記的二抗

答案：ABC

9.以下哪些是ELISA實(shí)驗(yàn)中可能遇到的問題？

A.高背景

B.非特異性結(jié)合

C.酶活性不足

D.抗原或抗體不足

答案：ABCD

10.以下哪些是ELISA實(shí)驗(yàn)中常用的洗液成分？

A.PBS

B.Tween-20

C.NaN3

D.甘油

答案：ABC

三、判斷題（每題2分，共10題）

1.ELISA實(shí)驗(yàn)中，洗滌可以去除未結(jié)合的酶標(biāo)物。（對）

2.ELISA實(shí)驗(yàn)中，底物的顏色變化越深，表示抗原或抗體的濃度越高。（對）

3.在ELISA實(shí)驗(yàn)中，所有抗體都可以用作酶標(biāo)抗體。（錯(cuò)）

4.ELISA實(shí)驗(yàn)中，封閉液可以防止非特異性結(jié)合。（對）

5.ELISA實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)抗體的濃度越高，信號越強(qiáng)。（錯(cuò)）

6.在ELISA實(shí)驗(yàn)中，洗滌液中通常不含有洗滌劑。（錯(cuò)）

7.ELISA實(shí)驗(yàn)中，底物與酶反應(yīng)后的顏色變化是不可逆的。（對）

8.ELISA實(shí)驗(yàn)中，終止反應(yīng)后，顏色越深，表示樣本中抗原或抗體的濃度越高。（對）

9.ELISA實(shí)驗(yàn)中，使用高純度的抗體可以減少非特異性結(jié)合。（對）

10.ELISA實(shí)驗(yàn)中，所有類型的ELISA都使用相同的底物和酶。（錯(cuò)）

四、簡答題（每題5分，共4題）

1.請簡述ELISA實(shí)驗(yàn)中洗滌的目的是什么？

答案：ELISA實(shí)驗(yàn)中洗滌的目的是去除未結(jié)合的酶標(biāo)物和封閉液，減少非特異性結(jié)合，從而降低背景信號，提高實(shí)驗(yàn)的特異性和靈敏度。

2.請簡述ELISA實(shí)驗(yàn)中底物的選擇依據(jù)是什么？

答案：ELISA實(shí)驗(yàn)中底物的選擇依據(jù)包括底物的顏色變化是否明顯、是否容易終止反應(yīng)、是否對酶有良好的穩(wěn)定性以及是否對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的讀取有干擾等。

3.請簡述ELISA實(shí)驗(yàn)中如何減少非特異性結(jié)合？

答案：減少ELISA實(shí)驗(yàn)中的非特異性結(jié)合可以通過使用高純度的抗體、增加洗滌次數(shù)、使用封閉液以及優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件等方法實(shí)現(xiàn)。

4.請簡述ELISA實(shí)驗(yàn)中終止反應(yīng)的重要性。

答案：ELISA實(shí)驗(yàn)中終止反應(yīng)的重要性在于控制反應(yīng)時(shí)間，防止反應(yīng)過度進(jìn)行，從而避免顏色變化過深導(dǎo)致讀數(shù)誤差，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

五、討論題（每題5分，共4題）

1.討論ELISA實(shí)驗(yàn)中不同類型抗體（單克隆抗體和多克隆抗體）的優(yōu)缺點(diǎn)。

答案：單克隆抗體具有高度的特異性和均一性，適用于定量分析；而多克隆抗體則具有較好的親和力和廣譜性，適用于定性分析。但單克隆抗體可能存在靈敏度不足的問題，多克隆抗體則可能存在非特異性結(jié)合的問題。

2.討論ELISA實(shí)驗(yàn)中底物和酶的選擇對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

答案：底物和酶的選擇直接影響ELISA實(shí)驗(yàn)的靈敏度和特異性。選擇合適的底物和酶可以提高信號與噪聲的比例，減少非特異性結(jié)合，從而提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.討論ELISA實(shí)驗(yàn)中洗滌次數(shù)和洗滌液成分對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

答案：洗滌次數(shù)和洗滌液成分對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有顯著影響。適當(dāng)?shù)南礈齑螖?shù)和成分可以有效地去除未結(jié)合的物質(zhì)