廣西欽州市第十三中學(xué)2024-2025學(xué)年度高二下學(xué)期期末熱身考試模擬試卷生物試卷（三）考試時(shí)間：75分鐘；滿分：100分注意事項(xiàng)：1.答題前，考生務(wù)必將自已的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2.回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題日的答案標(biāo)號涂黑。如需改動(dòng)。用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將答案寫在答題卡上。寫在本試卷上無效。3.考試然東后，將本試卷和答題卡-一并交回。一、選擇題:(本題共16小題,第1~12題,每小題2分.第13~16題,每小題4分,共40分.在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。)1．科研人員探究了不同溫度（25℃和0.5℃）條件下密閉容器內(nèi)藍(lán)莓果實(shí)的CO2生成速率的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與25℃相比，0.5℃條件下果實(shí)的CO2生成速率較低。為驗(yàn)證上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，某同學(xué)設(shè)計(jì)如下方案：①取兩個(gè)成熟程度相似、大小相同的藍(lán)莓果實(shí)，分別裝入甲、乙兩個(gè)容積相同的瓶內(nèi)，然后密封。②將甲、乙瓶分別置于25℃和0.5℃條件下儲(chǔ)存，每隔一段時(shí)間測定各瓶中的CO2濃度。③記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)并計(jì)算CO2生成速率。根據(jù)上述方案分析，該方案（

）A．設(shè)計(jì)完善，無不足B．缺少對照實(shí)驗(yàn)C．未能控制單一變量 D．樣本數(shù)量過少且未重復(fù)實(shí)驗(yàn)2．下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法的敘述，不正確的是（

）A．光合作用中C的轉(zhuǎn)移途徑和證明DNA半保留復(fù)制實(shí)驗(yàn)的觀察指標(biāo)都是檢測同位素放射性B．DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)和種群“J”型增長的研究都采用模型建構(gòu)的方法C．探究酵母菌呼吸方式和探究酶的最適溫度都采用了對比實(shí)驗(yàn)的探究方法D．人鼠細(xì)胞的融合實(shí)驗(yàn)和基因在染色體上的定位實(shí)驗(yàn)均可采用熒光標(biāo)記的方法3．一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇，一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（）A．注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大B．單抗制備過程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C．利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D．p72部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況4．人體內(nèi)一些正?；虍惓＜?xì)胞脫落破碎后，其DNA會(huì)以游離的形式存在于血液中，稱為cfDNA；胚胎在發(fā)育過程中也會(huì)有細(xì)胞脫落破碎，其DNA進(jìn)入孕婦血液中，稱為cffDNA。近幾年，結(jié)合DNA測序技術(shù)，cfDNA和cffDNA在臨床上得到了廣泛應(yīng)用。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．可通過檢測cfDNA中的相關(guān)基因進(jìn)行癌癥的篩查B．提取cfDNA進(jìn)行基因修改后直接輸回血液可用于治療遺傳病C．孕婦血液中的cffDNA可能來自于脫落后破碎的胎盤細(xì)胞D．孕婦血液中的cffDNA可以用于某些遺傳病的產(chǎn)前診斷5．下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是（

）A．若受體大腸桿菌含有構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)用到的限制性核酸內(nèi)切酶，則一定有利于該重組質(zhì)粒進(jìn)入受體并保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定B．抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某抗鹽植物獲得2個(gè)穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)基因品系，抗性鑒定為抗除草劑抗鹽和抗除草劑不抗鹽。表明一定是抗鹽性的改變與抗除草劑基因的轉(zhuǎn)入無關(guān)C．抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某植物獲得轉(zhuǎn)基因植株，其DNA檢測均含目的基因，抗性鑒定為抗除草劑和不抗除草劑。表明一定是前者表達(dá)了抗性蛋白而后者只表達(dá)抗性基因RNAD．已知不同分子量DNA可分開成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶。表明該質(zhì)粒上一定至少有3個(gè)被該酶切開的位置6．山藥在生長過程中易受病毒侵害導(dǎo)致品質(zhì)和產(chǎn)量下降。采用組織培養(yǎng)技術(shù)得到脫毒苗，可恢復(fù)其原有的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)特性，流程如圖。下列操作不可行的是（

）外植體→愈傷組織→叢生芽→試管苗A．選擇芽尖作為外植體可減少病毒感染B．培養(yǎng)基中加入抗生素可降低雜菌的污染C．將叢生芽切割后進(jìn)行繼代培養(yǎng)可實(shí)現(xiàn)快速繁殖D．提高生長素和細(xì)胞分裂素的比值可促進(jìn)愈傷組織形成叢生芽7．關(guān)于生物技術(shù)的安全與倫理問題在我國相關(guān)法規(guī)明令禁止的是（

）A．試管動(dòng)物的培育B．轉(zhuǎn)基因食品的生產(chǎn)C．治療性克隆的研究 D．生物武器的發(fā)展和生產(chǎn)8．科學(xué)探究是生物學(xué)科核心素養(yǎng)之一。下列有關(guān)教材實(shí)驗(yàn)探究的說法正確的是（）A．“探究pH對酶活性的影響”實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)溫度屬于無關(guān)變量，實(shí)驗(yàn)過程中無需控制B．“探究酵母菌細(xì)胞的呼吸方式”實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置有氧和無氧兩種條件，其中有氧的為實(shí)驗(yàn)組，無氧的為對照組C．設(shè)計(jì)預(yù)實(shí)驗(yàn)是為了避免實(shí)驗(yàn)偶然性，排除其他干擾因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響D．探究抗生素對細(xì)菌的選擇作用的實(shí)驗(yàn)中，重復(fù)幾代培養(yǎng)后，抑菌圈直徑可能會(huì)變小9．下列關(guān)于對照實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．設(shè)置對照組可排除無關(guān)變量的影響，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果是由自變量引起的B．在“探究土壤微生物的分解作用”實(shí)驗(yàn)中，60℃恒溫滅菌的土壤是實(shí)驗(yàn)組C．“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化”實(shí)驗(yàn)中，需要設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)D．探究甲狀腺激素的功能時(shí)，飼喂甲狀腺激素抑制劑和不做處理組均屬對照組10．科學(xué)探究是生物學(xué)科核心素養(yǎng)之一。下列有關(guān)教材實(shí)驗(yàn)探究的說法正確的是（

）A．“探究pH對酶活性的影響”實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)溫度屬于無關(guān)變量，實(shí)驗(yàn)過程中無需控制B．“探究酵母菌細(xì)胞的呼吸方式”實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置有氧和無氧兩種條件，其中有氧的為實(shí)驗(yàn)組，無氧的為對照組C．設(shè)計(jì)預(yù)實(shí)驗(yàn)是為了避免實(shí)驗(yàn)偶然性，排除其他干擾因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響D．“探究土壤微生物的分解作用”實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)后觀察落葉分解情況，對照組現(xiàn)象比實(shí)驗(yàn)組要明顯11．豆?jié){易被腐敗細(xì)菌污染變質(zhì)，乳酸鏈球菌素是乳酸鏈球菌產(chǎn)生的一種34肽，是食品工業(yè)中常用的天然防腐劑，科研人員為探究乳酸鏈球菌素抑制腐敗細(xì)菌的效果進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見下圖，下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．牛肉膏屬于天然成分，營養(yǎng)豐富，含量越多越有利于細(xì)菌生長B．實(shí)驗(yàn)結(jié)果是將不同濃度的乳酸鏈球菌素分別加入變質(zhì)豆?jié){中得出的C．乳酸鏈球菌素抑制S3生長效果最好，最適添加量為300mg·kg-1D．豆?jié){中添加乳酸鏈球菌素，既能防腐又不影響人腸道內(nèi)正常菌群12．我國科學(xué)家利用猴胚胎干細(xì)胞首次創(chuàng)造了人工“猴胚胎”流程如圖所示，其中①~②表示細(xì)胞。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．①可來源于猴的早期胚胎B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需要添加血清C．猴胚胎移植前細(xì)胞需要放在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)D．細(xì)胞②③來源相同，將來均可發(fā)育成猴胎兒的各種組織13．某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞貼壁生長至接觸抑制時(shí)，需分裝培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)操作過程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離 B．②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖C．③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度 D．整個(gè)過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行14．研究人員為進(jìn)行相關(guān)探究，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)裝置，基本使用過程如圖所示。甲基藍(lán)結(jié)晶使溶液呈藍(lán)色，其對濃度的影響忽略不計(jì)。若a管溶液濃度小于b管，則藍(lán)色液滴上??；反之，則藍(lán)色液滴下沉；若相等，則藍(lán)色液滴位置不變。下列說法正確的是（

）A．科研人員的實(shí)驗(yàn)?zāi)康目赡苁潜容^不同植物種類葉圓片的細(xì)胞液濃度大小B．若藍(lán)色液滴上移，則光學(xué)顯微鏡下能觀察到葉圓片細(xì)胞中細(xì)胞液的綠色變深C．若將裝置中的蔗糖溶液換成硝酸鉀溶液，當(dāng)葉圓片細(xì)胞質(zhì)壁分離又復(fù)原時(shí)，藍(lán)色液滴位置不變D．若將a管中液體換成適宜濃度碳酸鈉溶液，通過觀察葉圓片上浮的數(shù)量可以探究光照強(qiáng)度對光合作用強(qiáng)度的影響15．葉綠體運(yùn)動(dòng)在藻類、苔蘚類和高等植物葉片中廣泛存在，下圖表示的是浮萍葉肉細(xì)胞在不同藍(lán)光強(qiáng)度處理后葉綠體的分布情況，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．①②③分別代表的條件是黑暗、弱藍(lán)光、強(qiáng)藍(lán)光B．浮萍用于觀察質(zhì)壁分離時(shí)，和黑藻一樣可通過觀察液泡顏色的深淺來判斷C．在①②條件下，葉綠體定位在細(xì)胞的上表面附近，可以最大程度的吸收光能D．在③條件下，葉綠體的分布是植物適應(yīng)環(huán)境的一種保護(hù)措施16．抗蟲和耐除草劑玉米雙抗12-5是我國自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因品種。為給監(jiān)管轉(zhuǎn)基因生物安全提供依據(jù)，采用PCR方法進(jìn)行目的基因監(jiān)測，反應(yīng)程序如圖所示。下列敘述正確的是（

）A．預(yù)變性過程可促進(jìn)模板DNA邊解旋邊復(fù)制B．后延伸過程可使目的基因的擴(kuò)增更加充分C．延伸過程無需引物參與即可完成半保留復(fù)制D．轉(zhuǎn)基因品種經(jīng)檢測含有目的基因后即可上市第II卷（非選擇題）二、綜合題:（本題共5小題,共60分，請考生按要求答題。）17．重組質(zhì)粒pMM085常用來生產(chǎn)工程疫苗，但因含氯霉素抗性基因cat，有增加環(huán)境中抗藥基因的風(fēng)險(xiǎn)。pKD46是一種熱敏感型工具質(zhì)粒，只能在低于37℃的溫度條件下穩(wěn)定存在，它攜帶的Red基因在阿拉伯糖的誘導(dǎo)下表達(dá)Red重組蛋白，通過體內(nèi)同源重組進(jìn)行靶向基因敲除，原理如圖1所示。asd基因編碼細(xì)菌二氨基庚二酸（DAP）合成途徑的關(guān)鍵酶，DAP是大腸桿菌細(xì)胞壁的主要成分，當(dāng)asd基因缺失時(shí)，將導(dǎo)致菌株生長對DAP的依賴性。研究人員將質(zhì)粒pMM085和pKD46導(dǎo)入asd缺失型大腸桿菌中，通過Red同源重組，將pMM085中的cat基因替換為asd基因，構(gòu)建無抗性菌苗株，如圖2所示。(1)據(jù)圖1分析，與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)相比，Red體內(nèi)同源重組具有的特點(diǎn)是：(2)無抗藥性菌苗的構(gòu)建過程中（圖2），①中應(yīng)先用處理，使asd基因缺陷型大腸桿菌處于感受態(tài)，然后將pMM085和pKD46轉(zhuǎn)入大腸桿菌，經(jīng)誘導(dǎo)后，電擊導(dǎo)入asd基因，獲得重組質(zhì)粒。(3)將②中獲得的菌液采用方法接種到LB培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)得到單菌落。37℃培養(yǎng)的目的是（請答出兩點(diǎn)）(4)挑取步驟③中獲得的10個(gè)單菌落細(xì)胞進(jìn)行PCR鑒定，得到電泳圖譜（圖3），電泳結(jié)果說明?？蒲腥藛T在上述實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上重新提取③中質(zhì)粒再轉(zhuǎn)化宿主菌，經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選后獲得僅含重組質(zhì)粒的單菌落，請簡要寫出篩選的思路。18．根癌農(nóng)桿菌是一種天然高效的轉(zhuǎn)基因運(yùn)載體。研究者利用根癌農(nóng)桿菌，將人工合成的新冠病毒（SARS-CoV-2）基因組序列導(dǎo)入本氏煙草細(xì)胞，一段時(shí)間后可從葉片中提取、純化病毒樣顆粒，用于新冠疫苗的生產(chǎn)。病毒樣顆粒具有新冠病毒的抗原性，但沒有致病性。下圖為根癌農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞的部分過程示意圖。(1)科學(xué)家人工合成的基因組序列應(yīng)包含新冠病毒（填寫編號）。①全部遺傳信息②遺傳物質(zhì)復(fù)制相關(guān)蛋白的基因③衣殼的部分結(jié)構(gòu)蛋白基因(2)結(jié)合圖判斷，目的基因應(yīng)插入在。A．vir基因區(qū)域 B．?dāng)M核DNA上的任意區(qū)域C．T-DNA區(qū)域 D．Ti質(zhì)粒上除vir基因和T-DNA以外的區(qū)域(3)為快速獲得大量帶有病毒樣顆粒的本氏煙草植株，可使用技術(shù)，取有關(guān)的葉組織進(jìn)行離體培養(yǎng)，該技術(shù)可體現(xiàn)植物細(xì)胞具有全能性。(4)疫苗制備前，需測定從葉片中提取的病毒樣顆粒與特定抗體的結(jié)合率；此外，該疫苗在制備時(shí)加入了一種免疫佐劑AS03，AS03可強(qiáng)化抗原對B淋巴細(xì)胞的刺激作用。請結(jié)合已有知識，說明采取上述措施的理由：（寫出2點(diǎn)）(5)將植物作為新冠疫苗生產(chǎn)的載體為進(jìn)一步開發(fā)谷物類、蔬菜類的“口服疫苗”奠定了基礎(chǔ)。下列關(guān)于“口服新冠疫苗”的評價(jià)合理的是。A．植物生長周期短且自然環(huán)境下易培養(yǎng)，可降低生產(chǎn)成本B．該類“口服疫苗”的自然種植，會(huì)導(dǎo)致其它植物感染新冠C．需確保食用的植物疫苗不會(huì)導(dǎo)致過敏等情況出現(xiàn)D．相比注射式疫苗，口服疫苗適用于所有人19．冬春季凍害是我國部分麥區(qū)實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的重要限制因子。鍛煉是指對植物進(jìn)行適當(dāng)強(qiáng)度的脅迫刺激，以誘導(dǎo)植物對后期更嚴(yán)重脅迫的抗性。科研人員以揚(yáng)麥16為研究材料，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：①拔節(jié)期將小麥搬至人工氣候室中進(jìn)行處理，C組作為對照，生長在16℃/10℃（晝/夜）環(huán)境中，P組作為實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行低溫鍛煉處理(6℃/2℃，晝/夜，2天)。②預(yù)處理結(jié)束后將各組植株置于對照溫度中生長8天。③之后將C、P組各均分為兩組，C1組和P1組保持在對照溫度中生長，C2組和P2組進(jìn)行低溫脅迫處理(2℃/0℃，晝/夜，2天)。④低溫脅迫結(jié)束后搬至對照溫度條件下培養(yǎng)8天，測定植株地面部分干重。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖：(1)低溫脅迫一方面降低類囊體膜的流動(dòng)性從而抑制；另一方面通過，從而抑制暗反應(yīng)，以致植物凈光合速率降低，積累有機(jī)物減少。(2)研究人員得出結(jié)論：低溫脅迫會(huì)明顯抑制植物的生長，而低溫鍛煉處理能提高植物對低溫脅迫的抗性，其判斷依據(jù)是。(3)研究發(fā)現(xiàn)噴施外源水楊酸與低溫鍛煉在提高小麥抗寒性上具有類似的生理機(jī)制，科研人員推測內(nèi)源水楊酸在低溫鍛煉提高小麥抗寒性過程中發(fā)揮重要作用。為了驗(yàn)證該推測進(jìn)行了三組實(shí)驗(yàn)，三組均進(jìn)行處理，A組作為對照，B組處理前噴施水楊酸合成抑制劑，C組在B組基礎(chǔ)上噴施外源水楊酸，測定并比較三組在低溫脅迫后植物地上部分的干重。若該推測正確，預(yù)測相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：。(4)在生產(chǎn)實(shí)踐中為提高小麥抗寒性，某科研機(jī)構(gòu)在采取噴施外源水楊酸方法時(shí)，應(yīng)考慮的因素有。(答出兩點(diǎn))20．我省廣泛種植的9108水稻口感好、品質(zhì)優(yōu)、產(chǎn)量大。為探究干旱預(yù)處理后水稻響應(yīng)高溫脅迫的機(jī)制，研究人員以9108水稻為材料，設(shè)置水稻幼苗正常生長組(CK)、單一高溫處理組(H)以及干旱高溫處理組(DH)進(jìn)行水培實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果如下表所示。請分析回答：組別CKHDH實(shí)驗(yàn)處理晝/夜溫度為25℃/20℃，不添加PEG-6000的營養(yǎng)液，培養(yǎng)3d晝/夜溫度為38℃/30℃，不添加PEG-6000的營養(yǎng)液，培養(yǎng)3d晝/夜溫度38℃/30℃，添加PEG-6000的營養(yǎng)液，培養(yǎng)3d葉綠素總量(mg·g-1)2.070.371.98葉綠素a/b比值3073.063.05光合速率(μmol·m-2s-1)5.371.784.75氣孔導(dǎo)度(μmol·m-2s-1)0.340.120.39胞間CO2濃度(μmol·mol-1)395.32362.78425.65注：在營養(yǎng)液中添加PEG-6000模擬干旱脅迫。(1)水稻的葉綠素主要分布在葉肉細(xì)胞的上。實(shí)驗(yàn)中常采用(填試劑)分離葉片中的色素，分離葉綠素常采用紙層析法，與葉綠素b的色素帶相比，判斷葉綠素a色素帶的依據(jù)有。(2)為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性，實(shí)驗(yàn)期間各組的(至少答兩點(diǎn))等主要環(huán)境條件應(yīng)保持一致。據(jù)表分析可知，單一高溫脅迫后，水稻幼苗的光合速率下降，可能原因有(答出兩點(diǎn)即可)。DH組的水稻幼苗各項(xiàng)光合參數(shù)較H組上升，該結(jié)果表明對水稻幼苗進(jìn)行適當(dāng)?shù)?，有利于提高水稻的耐熱性?3)水稻將光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物運(yùn)輸至籽粒中，并以淀粉形式儲(chǔ)存，稱為“籽粒灌漿”。為進(jìn)一步研究9108水稻產(chǎn)量高的原因，研究人員分別檢測野生型(WT)和P基因缺失突變型(pho)水稻籽粒重量和有機(jī)物合成量，結(jié)果如圖1和圖2所示。據(jù)圖1圖2結(jié)果推測，P蛋白的功能可能是，從而導(dǎo)致pho籽粒重量低且增長緩慢。(4)研究表明，P基因在籽粒胚乳高表達(dá)。據(jù)推測，P蛋白可能是一種磷的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，且參與內(nèi)運(yùn)和外排兩個(gè)過程。為進(jìn)一步確認(rèn)P蛋白的作用機(jī)制，科研人員進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn)：①科研人員分別測定WT和pho水稻胚乳細(xì)胞中磷的含量，若pho胚乳細(xì)胞中的磷含量明顯。(填“高于”“低于”或“等于”)WT胚乳細(xì)胞中的磷含量，則可作為P蛋白參與磷的外排過程的證據(jù)之一，且以外排作用為主。②已知ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)催化胚乳細(xì)胞中葡萄糖和磷的利用，最終合成淀粉?？蒲腥藛T檢測WT和pho水稻胚乳細(xì)胞中AGPase的表達(dá)量和AGPase的活性，結(jié)果如圖3和圖4所示。據(jù)圖示結(jié)果分析表明，pho水稻胚乳細(xì)胞中異常含量的磷既(填“抑制”或“促進(jìn)”)AGPase的基因表達(dá)也。圖3中選擇細(xì)胞骨架蛋白的表達(dá)量作為對照的原因是。21．為了高效純化超氧化物歧化酶（SOD），科研人員將ELP50片段插入pET-SOD構(gòu)建重組質(zhì)粒pET-SOD-ELP50，以融合表達(dá)SOD-ELP50蛋白，過程如圖1。其中，ELP50是由人工合成的DNA片段，序列為：限制酶a識別序列-（GTTCCTGGTGTTGGC）50-限制酶b識別序列，50為重復(fù)次數(shù)。請回答下列問題：

(1)步驟①雙酶切時(shí)，需使用的限制酶a和限制酶b分別是。(2)步驟②轉(zhuǎn)化時(shí)，科研人員常用處理大腸桿菌，使細(xì)胞處于感受態(tài)；轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌采用含有的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。用PCR技術(shù)篩選成功導(dǎo)入pET-SOD-ELP50的大腸桿菌，應(yīng)選用的一對引物是。(3)步驟③大腸桿菌中RNA聚合酶與結(jié)合，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄，翻譯SOD-ELP50蛋白。已知蛋白質(zhì)中氨基酸殘基的平均相對分子質(zhì)量約為0.11kDa，將表達(dá)的蛋白先進(jìn)行凝膠電泳，然后用SOD抗體進(jìn)行雜交，顯示的條帶應(yīng)是（從圖2的“A~D”中選填）。

(4)步驟④為探尋高效純化SOD-ELP50蛋白的方法，科研人員研究了溫度、NaCl對SOD-ELP50蛋白純化效果的影響，部分結(jié)果如圖3。

（?。?0℃時(shí)，加入NaCl后實(shí)驗(yàn)結(jié)果是。（ⅱ）100℃時(shí)，導(dǎo)致各組中所有蛋白都沉淀的原因是。（ⅲ）據(jù)圖分析，融合表達(dá)SOD-ELP50蛋白的優(yōu)點(diǎn)有。參考答案題號12345678910答案DADBDDDDCD題號111213141516答案DDBABB17．(1)在活細(xì)胞內(nèi)完成，無需使用限制酶和DNA連接酶，即可實(shí)現(xiàn)靶基因的敲除或替換（可以擺脫限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)限制）(2)Ca2+（或CaCl2）阿拉伯糖(3)稀釋涂布平板法大腸桿菌生長的適宜溫度