高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1河南省天一聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中考生注意：1.答題前，考生務(wù)必將自己的姓名、考生號填寫在試卷和答題卡上，并將考生號條形碼粘貼在答題卡上的指定位置。2.回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑。如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上。寫在本試卷上無效。3.考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：本題共16小題，每小題3分，共48分。在每小題給出的四個選項中，只有一項是符合題目要求的。1.“何以解憂，唯有杜康?！倍趴稻埔詢?yōu)質(zhì)小麥、糯高粱為釀酒原料，采取“高溫制曲、香泥封窖、低溫人池、長期發(fā)酵、混蒸續(xù)槽、量質(zhì)摘酒、分級貯存、陳釀酯化、精心調(diào)配”等先進工藝制成。下列敘述正確的是（）A.小麥和糯高粱中的淀粉和纖維素都是酵母菌的能源物質(zhì)B.高溫制曲的目的是通過高溫殺死酒曲中的所有微生物C.“香泥封窖”是為了給酵母菌發(fā)酵提供一個無氧的環(huán)境D.“長期發(fā)酵”的溫度應(yīng)保持在35℃以上，有利于酒精生產(chǎn)【答案】C〖祥解〗發(fā)酵技術(shù)是指利用微生物的發(fā)酵作用，運用一些技術(shù)手段控制發(fā)酵過程，大規(guī)模的生產(chǎn)發(fā)酵產(chǎn)品的技術(shù)。【詳析】A、酵母菌不能分解纖維素，纖維素不能作為酵母菌的能源物質(zhì)，A錯誤；B、高溫制曲過程中，適度高溫有利于抑制雜菌的生長，但該高溫下酵母菌可以生存，B錯誤；C、“香泥封窖”是為了給酵母菌發(fā)酵提供一個無氧環(huán)境，促進酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，C正確；D、酵母菌發(fā)酵需要將溫度控制在18～30℃，D錯誤。故選C。2.界中米醋以優(yōu)質(zhì)的小米為原料，輔以麩皮、麥曲，并使用當(dāng)?shù)鬲毺氐木劧?。界中米醋呈深褐色，酸中帶香，久存不腐。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.缺少糖源時，醋酸菌可將乙醇直接轉(zhuǎn)化為乙酸B.米醋制作全過程需要在嚴(yán)格密封的條件下完成C.在米醋發(fā)酵過程中，發(fā)酵液的pH會下降，溫度會上升D.界中米醋久存不腐是因為其制作和保存均在無菌環(huán)境下【答案】C〖祥解〗制作醋使用的微生物主要是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌?！驹斘觥緼、缺少糖源時，醋酸菌可直接將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)橐宜?，A錯誤；B、制作米醋使用的微生物主要是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌，在氧氣充足的條件下才能進行乙酸發(fā)酵，因此全過程需要在有氧的條件下完成，B錯誤；C、發(fā)酵過程中，乙酸發(fā)酵產(chǎn)生乙酸，會使發(fā)酵液pH下降，醋酸菌代謝過程中會釋放熱能，使溫度上升，C正確；D、界中米醋久存不腐的原因可能是乙酸的pH較低，不利于雜菌繁殖，D錯誤。故選C。3.淅川酸菜是河南特色傳統(tǒng)美食，制作時將蔬菜經(jīng)過擇凈、淘洗、滾水燙漂等工序處理后，趁熱裝入陶缸中，加點老漿水作引子，壓實蓋缸，讓其自然發(fā)酵。在整個腌制過程中，不加食鹽和其他添加劑，完全依靠乳酸菌和蔬菜自身的糖分進行發(fā)酵。下列說法正確的是（）A.蔬菜經(jīng)滾水燙漂后需冷卻至一定溫度再加入發(fā)酵容器中B.加入老漿水可增加酸菜中乳酸菌的數(shù)量，縮短發(fā)酵時間C.發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽的含量逐漸下降至維持相對穩(wěn)定D.酸菜制作前期需通入無菌空氣，后期應(yīng)嚴(yán)格保持無氧條件【答案】B〖祥解〗泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗帷Ｅ莶说闹谱髁鞒淌牵哼x擇原料、配制鹽水、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵?！驹斘觥緼、結(jié)合題干信息，蔬菜經(jīng)滾水燙漂處理后，是趁熱裝入陶缸中的，A錯誤；B、加入老漿水可以增加酸菜中乳酸菌的數(shù)量，有利于縮短發(fā)酵時間，B正確；C、發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽的含量先增加后下降至相對穩(wěn)定，C錯誤；D、參與酸菜制作的乳酸菌是厭氧菌，因此酸菜制作的全過程都要保持無氧條件，D錯誤。故選B。4.歧桿菌是一類可分解乳糖產(chǎn)生半乳糖的細菌，半乳糖是構(gòu)成腦神經(jīng)系統(tǒng)中腦苷脂的成分，與嬰兒出生后腦的迅速生長有密切關(guān)系。為篩選能高效分解乳糖產(chǎn)生半乳糖的菌株，某學(xué)校同學(xué)進行了流程如圖所示的實驗。下列敘述正確的是（）A.培養(yǎng)雙歧桿菌的培養(yǎng)基應(yīng)調(diào)整pH為酸性B.Ⅰ號培養(yǎng)基以乳糖為唯一碳源，配制時需加入瓊脂C.圖中③過程和④過程所采用的接種方法可能相同D.Ⅰ號培養(yǎng)基上的菌落形狀、大小、顏色等都相同【答案】B〖祥解〗一、培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。不同的培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無機鹽、碳源和氮源。二、微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。操作方法各不相同，但是核心都是要防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。微生物常見的接種的方法：(1)平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。(2)稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。【詳析】A、雙歧桿菌屬于細菌，培養(yǎng)細菌時，一般需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)整為中性或弱堿性，A錯誤；B、為篩選出能高效分解乳糖的菌株，應(yīng)使用以乳糖為唯一碳源的固體培養(yǎng)基，B正確；C、圖中①②過程應(yīng)為梯度稀釋，③過程采用的接種方法為稀釋涂布平板法，④過程采用的接種方法為平板劃線法，C錯誤；D、雙歧桿菌是一類細菌，Ⅰ號培養(yǎng)基中的菌種可能不止一種，故Ⅰ號培養(yǎng)基上的菌落形狀、大小、顏色等不一定都相同，D錯誤。故選B。5.細菌素是某些細菌在代謝過程中產(chǎn)生的一類具有抑菌活性的多肽或前體多肽。某同學(xué)想篩選獲得能高產(chǎn)細菌素的細菌，流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A.細菌素是細菌的初生代謝物，可抑制其他微生物生長B.在進行分離培養(yǎng)時，第一次劃線和最后一次劃線不能連接C.Ⅳ過程后培養(yǎng)基上不同細菌的菌落直徑越小說明細菌素的抑菌效果越好D.若利用發(fā)酵工程生產(chǎn)細菌素，則發(fā)酵結(jié)束后需通過分離、純化等措施來獲得產(chǎn)品【答案】A〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、初生代謝物是生物生長和生存所必需的產(chǎn)物，細菌素是某些細菌代謝過程中產(chǎn)生的具有抑菌活性的多肽或前體多肽，可用于抑制其他細菌生長，應(yīng)屬于細菌的次生代謝物，A錯誤；B、利用平板劃線法進行分離培養(yǎng)時，第一次劃線和最后一次劃線要分開，B正確；C、細菌菌落的直徑越小，說明細菌素對細菌的抑制作用越強，效果越好，C正確；D、如果產(chǎn)品是代謝物，可以根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)奶崛?、分離和純化措施來獲得產(chǎn)品，因此若利用發(fā)酵工程生產(chǎn)細菌素，則發(fā)酵結(jié)束后需通過分離、純化等措施來獲得產(chǎn)品，D正確。故選A。6.我國科學(xué)家利用CRISPR-Cas12i新型基因編輯系統(tǒng)，對馬鈴薯的愈傷組織進行定向誘變，成功篩選出耐低溫突變體。實驗流程如下：①誘導(dǎo)馬鈴薯葉片形成愈傷組織；②通過基因槍遞送CRISPR系統(tǒng)；③在4℃低溫條件下連續(xù)培養(yǎng)3個月；④通過流式細胞儀檢測細胞活性，分離存活細胞團；⑤誘導(dǎo)再分化形成新的植株。下列敘述正確的是（）A.步驟①需在光照條件下進行，以保證細胞脫分化B.步驟③的目的是低溫誘導(dǎo)細胞染色體數(shù)目加倍C.步驟④過程沒有體現(xiàn)植物細胞具有全能性D.步驟⑤再分化時培養(yǎng)基中無須添加有機物【答案】C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株?！驹斘觥緼、誘導(dǎo)形成愈傷組織期間一般不需要光照，A錯誤；B、低溫條件下連續(xù)培養(yǎng)3個月是為了篩選耐低溫突變體，而非誘導(dǎo)細胞染色體數(shù)目加倍，B錯誤；C、步驟③④的目的是篩選符合要求的愈傷組織，沒有涉及完整個體，沒有體現(xiàn)植物細胞具有全能性，C正確；D、在葉片分化之前，植物細胞不能進行光合作用，所以植物組織培養(yǎng)再分化過程中需要在培養(yǎng)基中加入有機營養(yǎng)物質(zhì)，D錯誤。故選C。7.2025年國際空間站公布實驗成果：在微重力環(huán)境下，番茄與枸杞的原生質(zhì)體融合效率較地球環(huán)境提高80%。實驗采用聚乙二醇—激光融合法，融合細胞經(jīng)特殊培養(yǎng)基培養(yǎng)形成“番茄—枸杞”嵌合體植株。檢測發(fā)現(xiàn)，該植株葉片的類胡蘿卜素含量顯著增高，但果實發(fā)育異常。下列分析錯誤的是（）A.還可以用滅活病毒誘導(dǎo)法、電融合法等誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合B.兩種植株的原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是再生出細胞壁C.“番茄—枸杞”嵌合體植株不一定能結(jié)出枸杞味的番茄D.題述技術(shù)可以打破生殖隔離，實現(xiàn)雜交育種【答案】A〖祥解〗誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)試劑是聚乙二醇；原生質(zhì)體融合的理論基礎(chǔ)是細胞膜的流動性；植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化，其原理是植物細胞具有全能性，涉及的細胞分裂方式是有絲分裂；植物體細胞雜交的優(yōu)點是克服遠緣雜交不親和的障礙。【詳析】A、植物體細胞雜交可用電融合法、離心法、PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法等誘導(dǎo)融合，不可采用滅活病毒誘導(dǎo)法，A錯誤；B、兩種植株的原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是再生出細胞壁，B正確；C、細胞中的基因表達受到多種因素影響，不一定完全按照人們的意愿進行，且據(jù)題可知，該植株果實發(fā)育異常，故“番茄—枸杞”嵌合體植株不一定能結(jié)出枸杞味的番茄，C正確；D、植物體細胞雜交技術(shù)可以打破生殖隔離，實現(xiàn)雜交育種，D正確。故選A。8.科學(xué)家通過將數(shù)百個人類誘導(dǎo)多能干細胞（iPS細胞）衍生的肝芽合并，成功構(gòu)建了較大的肝臟類器官（hiPSC-LO）。當(dāng)這些器官被移植到免疫缺陷的小鼠肝臟中時，它們能夠發(fā)展成膽管和其他肝組織，并能夠與宿主小鼠的肝臟血管系統(tǒng)形成連接。研究還發(fā)現(xiàn)，這些移植的器官能通過改變巨噬細胞的極化狀態(tài)，部分逆轉(zhuǎn)由化學(xué)物質(zhì)引起的肝纖維化。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.iPS細胞類似于胚胎干細胞，但獲取時無須破壞胚胎B.培養(yǎng)iPS細胞時要保證無菌無毒環(huán)境，并定期更換培養(yǎng)液C.hiPSC-LO移植到肝衰竭小鼠體內(nèi)，不會發(fā)生免疫排斥D.hiPSC-LO移植可能成為治療肝纖維化的一種新方法【答案】C〖祥解〗胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，是由早期胚胎或原始性腺分離出來一類細胞，iPS與ES細胞一樣，可通過定向誘導(dǎo)分化修補某些功能異常的細胞來治療疾病?！驹斘觥緼、iPS細胞的功能類似于胚胎干細胞，但其不來自胚胎，故獲取時無須破壞胚胎，A正確；B、培養(yǎng)動物細胞時要保證無菌無毒環(huán)境，并定期更換培養(yǎng)液，B正確；C、據(jù)題可知，hiPSC-LO來源于人類誘導(dǎo)多能干細胞，其移植到免疫缺陷的小鼠肝臟中，未發(fā)生免疫排斥，但肝衰竭小鼠不是免疫缺陷小鼠，移植后可能發(fā)生免疫排斥，C錯誤；D、據(jù)題可知，這些移植的器官能通過改變巨噬細胞的極化狀態(tài)，部分逆轉(zhuǎn)由化學(xué)物質(zhì)引起的肝纖維化，故hiPSC-LO移植可能成為治療肝纖維化的一種新方法，D正確。故選C。9.胚胎工程的迅猛發(fā)展實現(xiàn)了家畜繁殖模式的改變，如圖所示為某科研小組培育幼豬的兩種模式。下列說法正確的是（）A.哺乳動物的受精過程和早期胚胎的發(fā)育均在子宮中完成B.被阻止釋放的極體會成為胚胎的組成部分，發(fā)揮重要作用C.分析圖示可知，兩種繁殖模式得到的幼豬所含核基因相同D.圖示流程涉及了體細胞核移植、胚胎移植、重組DNA等技術(shù)【答案】B〖祥解〗胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)，實際是在體外條件下，對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進行的模擬操作?！驹斘觥緼、在自然條件下，哺乳動物的受精過程在輸卵管中完成，受精卵形成后在輸卵管內(nèi)進行有絲分裂，發(fā)育到一定階段后進入子宮繼續(xù)進行胚胎發(fā)育，A錯誤；B、由圖可知，孤雌生殖技術(shù)通過阻止次級卵母細胞釋放極體，激活孤雌生殖從而獲得早期胚胎，B正確；C、孤雌生殖得到的幼豬的核基因來自良種母豬，細胞核移植得到的幼豬的核基因來自良種公豬，故兩種幼豬的核基因不同，C錯誤；D、圖示流程涉及了體細胞核移植、胚胎移植等技術(shù)，未涉及重組DNA技術(shù)，D錯誤。故選B。10.昆明理工大學(xué)科研團隊首次成功利用猴誘導(dǎo)多能干細胞和體細胞核移植胚胎干細胞高效構(gòu)建了類囊胚。在此之前，類囊胚主要源自全能胚胎干細胞。類囊胚與自然囊胚結(jié)構(gòu)極其相似，能夠模擬早期胚胎發(fā)育過程，為研究胚胎發(fā)育和再生醫(yī)學(xué)提供了重要的模型。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.胚胎干細胞在進行傳代培養(yǎng)時，可用胰蛋白酶處理細胞B.可將供體細胞注入MⅡ期去核卵母細胞以實現(xiàn)體細胞核移植C.鑒定類囊胚的性染色體組成時，常取滋養(yǎng)層細胞進行鑒定D.類囊胚源自全能胚胎干細胞，類囊胚中的細胞都具有全能性【答案】D〖祥解〗動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。在體外將采集到的卵母細胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，可以通過顯微操作技術(shù)去除卵母細胞的核，核移植時，對提供細胞核和細胞質(zhì)的奶牛不需要進行同期發(fā)情處理，使用電刺激等方法可以激活重構(gòu)胚使其完成細胞分裂和發(fā)育。【詳析】A、進行傳代培養(yǎng)需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理貼壁細胞，以便細胞繼續(xù)分裂增殖，A正確；B、細胞核移植的過程中，通常是將供體細胞注入處于MⅡ期的去核卵母細胞中，因為MⅡ期的卵母細胞細胞質(zhì)中含有能促進細胞核全能性表達的物質(zhì)，B正確；C、類囊胚與自然囊胚結(jié)構(gòu)極其相似，鑒定類囊胚的性染色體組成，常取滋養(yǎng)層細胞進行鑒定，C正確；D、類囊胚的內(nèi)細胞團可發(fā)育成胎兒的各種組織，具有全能性，滋養(yǎng)層細胞會發(fā)育成胎膜和胎盤，不具有全能性，D錯誤。故選D。11.某同學(xué)實驗時選取了長度為14kb（kb表示千堿基對）的某DNA分子，并用限制酶A、限制酶B進行充分酶切，結(jié)果如表，下列敘述錯誤的是（）實驗用酶限制酶A限制酶B限制酶A和限制酶B得到的片段長度14kb6kb、8kb3kb、5kb、6kbA.該DNA分子上不含限制酶A的酶切位點B.酶A和酶B切割可能產(chǎn)生相同的黏性末端C.DNA連接酶和限制酶都作用于磷酸二酯鍵D.限制酶需要在適宜溫度下才能更好地發(fā)揮作用【答案】A〖祥解〗轉(zhuǎn)錄、復(fù)制都是從模板鏈的3'端開始，因此新合成鏈的方向均為5'→3'。質(zhì)粒作為基因的載體，與目的基因形成重組質(zhì)粒時，需要形成相同的黏性末端，才能重新組合。【詳析】A、該DNA分子的大小為14kb，用限制酶A、B充分酶切后，分別得到1、2個片段，用二者共同酶切后得到3個片段，說明該DNA分子是環(huán)狀DNA，含有1個限制酶A的酶切位點，A錯誤；B、不同的限制酶可能切割出相同的黏性末端，B正確；C、限制酶能使DNA鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，DNA連接酶能恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，兩者均作用于磷酸二酯鍵，C正確；D、溫度能夠影響酶的活性，所以在適宜溫度下限制酶才能更好地發(fā)揮作用，D正確。故選A。12.如圖是目的基因和酵母菌的質(zhì)粒，表中為相關(guān)限制酶的識別序列。URA3為酵母菌篩選標(biāo)記基因，缺失該基因的酵母菌（記為M）無法合成尿嘧啶；AmpR為氨芐青霉素抗性基因。下列相關(guān)敘述正確的是（）限制酶識別序列BglⅡ5'-A↓GATCT-3'EcoRⅠ5'-G↓AAATTC-3'BamHⅠ5'-G↓GATCC-3'HindⅢ5'-A↓AGCTT-3'A.BglⅡ和BamHⅠ切割后產(chǎn)生的平末端相同B.可選用BamHⅠ和EcoRⅠ切割質(zhì)粒和目的基因C.不能選用E.coliDNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒D.可將重組質(zhì)粒導(dǎo)入M中，用不含尿嘧啶的培養(yǎng)基來篩選【答案】D〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定?！驹斘觥緼、據(jù)表分析可知，BglⅡ和BamHⅠ切割后產(chǎn)生了相同的黏性末端，而不是平末端，A錯誤；B、目的基因的兩端只有BglⅡ和EcoRⅠ的識別序列，故目的基因應(yīng)該用這兩種酶切割；為使目的基因crtZ能在受體細胞中表達，應(yīng)將目的基因crtZ插入啟動子和終止子之間，它們之間有BglⅡ、EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的識別位點，但BglⅡ有一個識別位點在啟動子左邊，如果使用此酶切割質(zhì)粒，會將啟動子切除，而BglⅡ和BamHⅠ切割后產(chǎn)生的黏性末端相同，為保證目的基因和質(zhì)粒能連接在一起，應(yīng)該用EcoRⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒，B錯誤；C、根據(jù)B項分析可知用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因，用EcoRⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒，BglⅡ、EcoRⅠ和BamHⅠ切割后產(chǎn)生的都是黏性末端，故可以用E.coliDNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒，C錯誤；D、氨芐青霉素是抗生素，對酵母菌的生長繁殖沒有抑制作用，故篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的酵母菌時，應(yīng)利用基因URA3，可將重組質(zhì)粒先導(dǎo)入M（缺失基因URA3的酵母菌）中，M不能合成尿嘧啶，而導(dǎo)入重組質(zhì)粒后可以合成尿嘧啶，故可用不含尿嘧啶的培養(yǎng)基來篩選，D正確。故選D。13.基因工程中的載體包括克隆載體和表達載體等。克隆載體主要用于基因克隆，可復(fù)制、擴增和保存插入其中的外源基因。表達載體是一種經(jīng)過特殊設(shè)計的DNA分子，可使攜帶的外源基因在特定的宿主細胞中穩(wěn)定表達。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.克隆載體通常具有較強的復(fù)制能力和豐富的酶切位點B.表達載體中攜帶了調(diào)控外源基因表達的元件，但無須具備復(fù)制能力C.表達載體中可能含誘導(dǎo)型啟動子，以使目的基因在特定細胞中表達D.克隆載體和表達載體中都含有標(biāo)記基因，以便于重組DNA分子的篩選【答案】B〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。【詳析】A、據(jù)題可知，克隆載體主要用于基因克隆，故需要有較強的復(fù)制能力，需要插入外源基因，故要有豐富的酶切位點，A正確；B、表達載體能夠使外源基因在特定的宿主細胞中穩(wěn)定表達，故需要含有調(diào)控外源基因表達的元件，如啟動子、終止子等，且要具備復(fù)制能力，B錯誤；C、表達載體中可能含誘導(dǎo)型啟動子，以使目的基因在特定細胞中表達，C正確；D、克隆載體和表達載體中都含有標(biāo)記基因，以便于重組DNA分子的篩選，D正確。故選B。14.某學(xué)校生物學(xué)習(xí)小組進行了與DNA相關(guān)的實驗，下列關(guān)于實驗操作及結(jié)果的敘述，正確的是（）A.用豬血代替雞血作為實驗材料能提取到更多的DNAB.向DNA溶液中加入二苯胺試劑，沸水浴加熱后可顯示藍色C.若設(shè)計的引物較長，則可適當(dāng)降低復(fù)性溫度以提高PCR準(zhǔn)確度D.瓊脂糖凝膠電泳的緩沖液中含指示劑，其可在紫外燈下被檢測出來【答案】B〖祥解〗DNA粗提取和鑒定的實驗原理：（1）DNA的溶解性：①DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用這一特點，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達到分離目的；②DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離。（2）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。（3）DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。【詳析】A、豬（哺乳動物）成熟的紅細胞無細胞核和眾多的細胞器，細胞內(nèi)基本不含DNA，A錯誤；B、向溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑，沸水浴加熱數(shù)分鐘，溶液呈現(xiàn)藍色，B正確；C、如果設(shè)計的引物較長，那么引物與模板之間的結(jié)合會較為穩(wěn)定，因此需要適當(dāng)提高復(fù)性溫度，以確保引物與模板之間的特異性結(jié)合，C錯誤；D、瓊脂糖凝膠電泳的緩沖液中含指示劑，指示劑可指示PCR的進程，可被紫外燈檢測出來的是被染色的DNA，D錯誤。故選B。15.某科研團隊開發(fā)了一款人工智能工具，用其對蛋白質(zhì)進行設(shè)計和優(yōu)化。結(jié)果顯示，經(jīng)過該工具優(yōu)化的兩種單克隆抗體對目標(biāo)的黏附力增強了30倍。下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的敘述，正確的是（）A.天然蛋白質(zhì)合成的過程與蛋白質(zhì)工程基本思路相同B.蛋白質(zhì)工程設(shè)計蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)要依據(jù)已知的基因序列C.該工具可以幫助人類設(shè)計和修改蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)D.可利用DNA分子雜交技術(shù)檢測是否有目標(biāo)蛋白合成【答案】C〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求?！驹斘觥緼、天然蛋白質(zhì)合成的過程是按照中心法則進行的，蛋白質(zhì)工程的基本思路與中心法則相反，A錯誤；B、蛋白質(zhì)工程在設(shè)計蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)時的依據(jù)是人類的需求，B錯誤；C、該工具可以幫助人類設(shè)計和修改蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，C正確；D、DNA分子雜交技術(shù)不能用于檢測蛋白質(zhì)是否合成，可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測，D錯誤。故選C。16.2020年12月26日，《中華人民共和國刑法修正案（十一）》正式通過。刑法第三百三十六條明確規(guī)定，嚴(yán)禁將基因編輯、克隆的人類胚胎植入人體或者動物體內(nèi)，或者將基因編輯、克隆的動物胚胎植人人體內(nèi)。下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性與倫理問題的敘述，正確的是（）A.“設(shè)計試管嬰兒”需用到體外受精、胚胎培養(yǎng)、胚胎分割等技術(shù)B.治療性克隆雖然不產(chǎn)生個體，但也需要進行監(jiān)控和審查C.食用轉(zhuǎn)基因食品時，食品中的基因會整合到人的基因組中D.若轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來自自然界，則不會存在安全性問題【答案】B〖祥解〗一、治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細胞和組織(皮膚、神經(jīng)或肌肉等)用于治療性移植。生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的，即用于產(chǎn)生人類個體。二、轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全(滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變)、生物安全(對生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)?！驹斘觥緼、“設(shè)計試管嬰兒”需用到體外受精、胚胎培養(yǎng)技術(shù)，未用到胚胎分割技術(shù)，A錯誤；B、我國政府同樣重視治療性克隆所涉及的倫理問題，主張對治療性克隆進行有效監(jiān)控和嚴(yán)格審查，B正確；C、基因進入人體后會被酶分解成小分子，不可能通過食物將外來遺傳信息整合到人的基因組中，C錯誤；D、轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問題需要經(jīng)過驗證才能得到證實，即使轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來自自然界，也可能存在安全性問題，D錯誤。故選B。二、非選擇題：本題共5小題，共52分。17.薄膜過濾計數(shù)法是一種常用的微生物檢測方法，其原理是用具有微孔的過濾膜過濾待測液體，使液體中的微生物被滯留在過濾膜表面，從而實現(xiàn)微生物的分離和檢測。某研究小組為探究某地下水水源的質(zhì)量，欲通過薄膜過濾法檢測其中大腸桿菌的數(shù)量，實驗過程和結(jié)果如圖所示。EMB培養(yǎng)基可用于檢測大腸桿菌，PDA培養(yǎng)基可用于檢測酵母菌。回答下列問題：（1）對實驗中的培養(yǎng)皿、濾杯、濾瓶等器具常見的滅菌方法有_______（答出2種）；要在酒精燈火焰旁倒平板的目的是_______。（2）根據(jù)地下水質(zhì)量國家標(biāo)準(zhǔn)，每100毫升地下水水源中大腸桿菌的菌落數(shù)小于3個屬于Ⅲ（及以上）類水源，小于100個屬于Ⅳ類水源，大于100個則屬于Ⅴ類水源。上圖是過濾了1升水樣得到的結(jié)果，該地下水水源屬于_______類水源。抽樣檢測活菌數(shù)量時，采用稀釋涂布平板法比顯微鏡直接計數(shù)法更準(zhǔn)確的原因是_______。（3）根據(jù)圖示，簡述圖中的接種操作過程：______。若要利用圖示裝置檢測水樣中酵母菌的數(shù)量，則實驗裝置需要做的改動有_______（答出2點）?！敬鸢浮浚?）①.濕熱滅菌、干熱滅菌（答出2種）②.防止雜菌污染培養(yǎng)基（2）①.Ⅲ（及以上）②.用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個菌落都來自一個活細胞，而顯微鏡直接計數(shù)法會將死亡的細菌也計算在內(nèi)（3）①.用無菌鑷子將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上②.選用微孔直徑適當(dāng)增大的濾膜；將EMB培養(yǎng)基換成PDA培養(yǎng)基（答出2點）〖祥解〗濾膜法是檢測水樣中大腸細菌群的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經(jīng)過抽濾，細菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后計數(shù)和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落，依據(jù)過濾水樣計算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數(shù)，操作簡單、快速，主要適用于雜質(zhì)較少的水樣?！拘?詳析】對玻璃器皿常見的滅菌方法有濕熱滅菌法和干熱滅菌法。倒平板時要在酒精燈火焰旁進行的目的是防止雜菌污染培養(yǎng)基?！拘?詳析】據(jù)圖分析，過濾了1升水樣后，培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落數(shù)為17個，可知平均每100毫升水體中大腸桿菌的菌落數(shù)為1.7個。根據(jù)地下水質(zhì)量國家標(biāo)準(zhǔn)，該地下水水源屬于Ⅲ（及以上）類水源。用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個菌落都來自一個活細胞，而顯微鏡直接計數(shù)法會將死亡的細菌也計算在內(nèi)，所以計數(shù)活菌時稀釋涂布平板法更準(zhǔn)確?！拘?詳析】分析圖示，圖中的接種操作過程是用無菌鑷子將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上。若要利用圖示裝置檢測水樣中酵母菌的數(shù)量，則要選用微孔直徑適當(dāng)增大的濾膜，因為酵母菌是真菌，其細胞直徑比大腸桿菌（細菌）大；另外EMB培養(yǎng)基可用于檢測大腸桿菌，PDA培養(yǎng)基可用于檢測酵母菌，因此需要將EMB培養(yǎng)基換成PDA培養(yǎng)基。18.科研人員發(fā)現(xiàn)植物A（2n=14）具有耐干旱的特性，植物B（2n=16）具有含糖量高的特性，計劃培育出耐干旱且含糖量高的植株，為此進行了如圖1所示的實驗。回答下列問題：（1）“處理1”的目的是________，獲得原生質(zhì)體；制備原生質(zhì)體前需將兩親本的外植體用________依次進行消毒；進行細胞融合時，需將原生質(zhì)體置于________（填“低滲”“等滲”或“高滲”）溶液中。（2）若細胞甲是由兩種細胞兩兩融合而成的，則細胞甲的染色體數(shù)為______條。在甲→試管苗的過程中需要更換培養(yǎng)基，原因是________。（3）實驗時發(fā)現(xiàn)，若使用聚乙二醇（PEG）使細胞融合，則不同濃度的PEG條件下，異源細胞融合率不同，實驗結(jié)果如圖2所示（PEG濃度較高時對細胞有毒害作用）；根據(jù)現(xiàn)有實驗結(jié)果，PEG的最佳濃度為________。實驗所得的試管苗還需要進行個體水平的篩選，需要進行的操作是________?！敬鸢浮浚?）①.去除A、B兩細胞的細胞壁②.體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液③.等滲（2）①.30②.不同發(fā)育階段所需的生長素和細胞分裂素的濃度、比例不同（3）①.35%②.在干旱的條件下種植試管苗，并檢測含糖量，挑選出耐干旱且含糖量高的植株〖祥解〗植物體細胞雜交過程中需要先進行去壁處理，植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，可利用酶解法，即利用纖維素酶和果膠酶分解細胞壁得到植物原生質(zhì)體?！拘?詳析】兩種細胞通過處理1得到了原生質(zhì)體，所以處理1的目的是去除A、B兩細胞的細胞壁。制備原生質(zhì)體前需將兩親本的外植體用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液依次進行消毒。原生質(zhì)體放入高滲溶液會失水，原生質(zhì)體沒有細胞壁的支持和保護，為防止其吸水漲破，在細胞融合時需將原生質(zhì)體置于等滲溶液中?！拘?詳析】細胞甲是由兩種細胞兩兩融合而成的，則細胞甲包含兩種細胞的染色體，所以染色體數(shù)為16+14=30。由于不同發(fā)育階段所需的生長素和細胞分裂素的濃度、比例不同，所以“甲→乙”過程和“乙→試管苗”過程需要更換培養(yǎng)基?！拘?詳析】PEG濃度為35%和40%時異源融合率相同，且均高于其他濃度下的異源融合率，但較低濃度的PEG對細胞的毒害作用較小，故應(yīng)選擇濃度為35%的PEG。目的植株應(yīng)該兼具耐干旱特性和含糖量高的優(yōu)勢，所以試管苗的培養(yǎng)過程應(yīng)該在干旱環(huán)境下進行，其目的是淘汰不耐旱的植株，同時檢測含糖量，以篩選出符合要求的雜交植株。19.與單抗（單克隆抗體）藥物相比，雙抗（雙特異性抗體）藥物能同時結(jié)合兩種不同的抗原表位，發(fā)揮兩種靶點的識別協(xié)同作用，突破了單一療法易產(chǎn)生耐藥性等局限。圖1為制備某種雙抗的過程，圖2為該雙抗的部分作用機制?；卮鹣铝袉栴}：（1）培養(yǎng)骨髓瘤細胞時，培養(yǎng)液中除了營養(yǎng)物質(zhì)外還要添加一定量的________等天然成分。過程①使用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選的目的是________。（2）本試驗的目的是獲得雙特異性抗體，所以過程③注射的抗原A是________，過程⑤需要進行的操作是________。與從動物血清中分離的抗體相比，如圖所示的雙特異性抗體的優(yōu)點是_______（答出3點）。（3）動物細胞會自發(fā)融合，但效率很低，滅活病毒在動物細胞融合中的應(yīng)用較為廣泛。滅活病毒誘導(dǎo)動物細胞融合的原理是_______。（4）單克隆抗體還可應(yīng)用于篩選特定性別的胚胎。H-Y抗原由Y染色體上的基因編碼，存在于雄性個體細胞的表面?？稍谠缙谂咛ヅ囵B(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體以及含熒光標(biāo)記的第二抗體（可與H-Y單克隆抗體結(jié)合），篩選處于_______期的________（填“發(fā)熒光”或“不發(fā)熒光”）的胚胎進行移植，以多獲得母牛。胚胎移植的實質(zhì)是_______。【答案】（1）①.血清②.篩選出雜交瘤細胞（2）①.CD28②.克隆化培養(yǎng)和雙特異性抗體檢測③.可準(zhǔn)確地識別抗原的細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合；能同時識別癌細胞和T細胞，對癌癥的療效更好；可以大量制備；不易產(chǎn)生耐藥性（答出3點且合理即可）（3）病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合（4）①.桑葚胚或囊胚②.不發(fā)熒光③.早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【小問1詳析】由于人們對細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚，因此動物細胞培養(yǎng)液中除營養(yǎng)物質(zhì)外，還要添加一定量的血清等天然成分。過程①是制備單克隆抗體過程中的第一次篩選，需要使用特定的選擇培養(yǎng)基，篩選出雜交瘤細胞?！拘?詳析】本試驗的目的是獲得雙特異性抗體PSMA-CD28，結(jié)合題圖可知③注射的抗原A應(yīng)是CD28。過程⑤是對經(jīng)選擇培養(yǎng)得到的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和雙特異性抗體檢測，以獲得足夠數(shù)量的能分泌所需雙特異性抗體的雜交瘤細胞。與從動物血清中分離的抗體相比，雙特異性抗體的優(yōu)點是可準(zhǔn)確地識別抗原的細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合；能同時識別癌細胞和T細胞，對癌癥的療效更好；可以大量制備；不易產(chǎn)生耐藥性?！拘?詳析】滅活病毒誘導(dǎo)動物細胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合?！拘?詳析】要多獲得母牛，需篩選雌性胚胎；而H-Y抗原存在于雄性個體細胞的表面，故H-Y單克隆抗體會與雄性胚胎細胞表面的H-Y抗原結(jié)合，而含熒光標(biāo)記的第二抗體可與H-Y單克隆抗體結(jié)合，故應(yīng)篩選處于桑葚胚或囊胚期的不發(fā)熒光的胚胎進行移植。胚胎移植的實質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。20.利用基因工程將外源基因轉(zhuǎn)化到受體中進行高效表達，可獲得具有重要應(yīng)用價值的生命系統(tǒng)，如轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻、轉(zhuǎn)基因奶山羊、轉(zhuǎn)基因大腸桿菌等?；卮鹣铝袉栴}：（1）基因表達載體構(gòu)建完成后，可利用________法或農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將表達載體導(dǎo)入水稻細胞；“農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法”的“轉(zhuǎn)化”與肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實驗中的“轉(zhuǎn)化”含義______（填“相同”或“不同”），理由是_______。（2）若要獲得轉(zhuǎn)基因動物，則可采用________法將目的基因?qū)胧芫?；若要獲得同卵雙胎或多胎，則可對囊胚階段的胚胎進行________，操作過程中要注意_______。（3）將基因表達載體導(dǎo)入大腸桿菌時，需要用Ca2+對大腸桿菌進行處理，目的是_______。（4）設(shè)計一個實驗方案，用于評估轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻在實際田間條件下的抗蟲效果。實驗思路為_______。【答案】（1）①.花粉管通道②.相同③.都表示目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程（2）①.顯微注射②.（胚胎）分割③.將內(nèi)細胞團均等分割（3）使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)（4）在實際田間條件下，選擇若干條件相同的地塊，分別種植轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻和正常水稻，定期記錄水稻損傷情況〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！拘?詳析】基因表達載體構(gòu)建完成后，可利用花粉管通道法或農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將表達載體導(dǎo)入水稻細胞。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實驗中的“轉(zhuǎn)化”含義相同，都表示目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程?！拘?詳析】若要獲得轉(zhuǎn)基因動物，則可采用顯微注射法將目的基因?qū)胧芫眩蝗粢@得同卵雙胎或多胎，則可對囊胚階段的胚胎進行胚胎分割，操作過程中要注意將內(nèi)細胞團均等分割?！拘?詳析】將基因表達載體導(dǎo)入大腸桿菌時，需要用Ca2+對大腸桿菌進行處理，目的是使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)?！拘?詳析】若要評估轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻在實際田間條件下的抗蟲效果，則必須讓正常水稻和轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻在實際田間進行對照種植，并定期記錄水稻損傷情況，因此實驗設(shè)計思路為：在實際田間條件下，選擇若干條件相同的地塊，分別種植轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻和正常水稻，定期記錄水稻損傷情況。21.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種用于擴增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點是能使微量的DNA大幅增加?；卮鹣铝袉栴}：（1）利用PCR擴增DNA時，子鏈DNA的延伸方向是_______；若一個基因在PCR中經(jīng)過n輪循環(huán)，則需要________種引物，理論上共需要消耗_______個引物。（2）反向PCR是通過已知序列設(shè)計引物對未知序列進行擴增的技術(shù)，其過程如圖1所示。據(jù)圖1中的過程①②可知，堿基序列L左側(cè)和R右側(cè)的部分堿基序列應(yīng)_______；其中已知序列如圖2所示，請寫出需要的引物序列：________（寫出6個堿基即可）。（3）利用電泳鑒定PCR產(chǎn)物時，在凝膠中DNA分子的遷移速率與_______（答出1點）等有關(guān)。電泳鑒定的結(jié)果如圖3所示，請分析產(chǎn)生這個結(jié)果的可能原因：_______（答出2點）?！敬鸢浮浚?）①.5'→3'②.2③.2n+1-2（2）①.相同②.5'-GCCTCT-3'，5'-ATAGTT-3'（順序可顛倒）（3）①.凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象（答出1點即可）②.引物設(shè)計不合理，它們與非目的序列有同源性或容易聚合形成二聚體；復(fù)性溫度過低；TaqDNA聚合酶的質(zhì)量不好（答出2點且合理即可）〖祥解〗PCR技術(shù)：1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。5,過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。小問1詳析】PCR擴增時，應(yīng)分別以DNA的兩條鏈為模板合成新的子鏈DNA，DNA復(fù)制時子鏈的延伸方向為5'→3'。DNA有2條單鏈，所以需要2種引物，一個基因在PCR中經(jīng)過n輪循環(huán)，一共得到2n個DNA，總共有2n+1條單鏈，除去2條模板鏈，每條新的單鏈都需要1個引物，故理論上共需要消耗（2n+1-2）個引物。【小問2詳析】根據(jù)圖1可知，要將DNA片段L和R相連接，這兩個片段被限制酶切割后需要有相同的黏性末端，所以L左側(cè)和R右側(cè)需要有相同的堿基序列。由于是反向PCR，所以引物的方向是已知基因序列由中間向兩側(cè)的5'→3'方向，模板為已知基因序列由中間向兩側(cè)的3'→5'方向片段，再根據(jù)堿基互補配對原則可寫出引物，即5'-GCCTCT-3'，5'-ATAGTT-3'?！拘?詳析】利用電泳鑒定PCR產(chǎn)物時，在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)；根據(jù)電泳出的條帶數(shù)量和長度可判斷PCR的準(zhǔn)確性，圖3顯示待測樣品擴增結(jié)果不止一個條帶，可能的原因有：引物設(shè)計不合理，它們與非目的序列有同源性或容易聚合形成二聚體；復(fù)性溫度過低；TaqDNA聚合酶的質(zhì)量不好等。河南省天一聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中考生注意：1.答題前，考生務(wù)必將自己的姓名、考生號填寫在試卷和答題卡上，并將考生號條形碼粘貼在答題卡上的指定位置。2.回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑。如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上。寫在本試卷上無效。3.考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：本題共16小題，每小題3分，共48分。在每小題給出的四個選項中，只有一項是符合題目要求的。1.“何以解憂，唯有杜康。”杜康酒以優(yōu)質(zhì)小麥、糯高粱為釀酒原料，采取“高溫制曲、香泥封窖、低溫人池、長期發(fā)酵、混蒸續(xù)槽、量質(zhì)摘酒、分級貯存、陳釀酯化、精心調(diào)配”等先進工藝制成。下列敘述正確的是（）A.小麥和糯高粱中的淀粉和纖維素都是酵母菌的能源物質(zhì)B.高溫制曲的目的是通過高溫殺死酒曲中的所有微生物C.“香泥封窖”是為了給酵母菌發(fā)酵提供一個無氧的環(huán)境D.“長期發(fā)酵”的溫度應(yīng)保持在35℃以上，有利于酒精生產(chǎn)【答案】C〖祥解〗發(fā)酵技術(shù)是指利用微生物的發(fā)酵作用，運用一些技術(shù)手段控制發(fā)酵過程，大規(guī)模的生產(chǎn)發(fā)酵產(chǎn)品的技術(shù)。【詳析】A、酵母菌不能分解纖維素，纖維素不能作為酵母菌的能源物質(zhì)，A錯誤；B、高溫制曲過程中，適度高溫有利于抑制雜菌的生長，但該高溫下酵母菌可以生存，B錯誤；C、“香泥封窖”是為了給酵母菌發(fā)酵提供一個無氧環(huán)境，促進酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，C正確；D、酵母菌發(fā)酵需要將溫度控制在18～30℃，D錯誤。故選C。2.界中米醋以優(yōu)質(zhì)的小米為原料，輔以麩皮、麥曲，并使用當(dāng)?shù)鬲毺氐木劧?。界中米醋呈深褐色，酸中帶香，久存不腐。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.缺少糖源時，醋酸菌可將乙醇直接轉(zhuǎn)化為乙酸B.米醋制作全過程需要在嚴(yán)格密封的條件下完成C.在米醋發(fā)酵過程中，發(fā)酵液的pH會下降，溫度會上升D.界中米醋久存不腐是因為其制作和保存均在無菌環(huán)境下【答案】C〖祥解〗制作醋使用的微生物主要是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌?！驹斘觥緼、缺少糖源時，醋酸菌可直接將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)橐宜?，A錯誤；B、制作米醋使用的微生物主要是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌，在氧氣充足的條件下才能進行乙酸發(fā)酵，因此全過程需要在有氧的條件下完成，B錯誤；C、發(fā)酵過程中，乙酸發(fā)酵產(chǎn)生乙酸，會使發(fā)酵液pH下降，醋酸菌代謝過程中會釋放熱能，使溫度上升，C正確；D、界中米醋久存不腐的原因可能是乙酸的pH較低，不利于雜菌繁殖，D錯誤。故選C。3.淅川酸菜是河南特色傳統(tǒng)美食，制作時將蔬菜經(jīng)過擇凈、淘洗、滾水燙漂等工序處理后，趁熱裝入陶缸中，加點老漿水作引子，壓實蓋缸，讓其自然發(fā)酵。在整個腌制過程中，不加食鹽和其他添加劑，完全依靠乳酸菌和蔬菜自身的糖分進行發(fā)酵。下列說法正確的是（）A.蔬菜經(jīng)滾水燙漂后需冷卻至一定溫度再加入發(fā)酵容器中B.加入老漿水可增加酸菜中乳酸菌的數(shù)量，縮短發(fā)酵時間C.發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽的含量逐漸下降至維持相對穩(wěn)定D.酸菜制作前期需通入無菌空氣，后期應(yīng)嚴(yán)格保持無氧條件【答案】B〖祥解〗泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗帷Ｅ莶说闹谱髁鞒淌牵哼x擇原料、配制鹽水、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵?！驹斘觥緼、結(jié)合題干信息，蔬菜經(jīng)滾水燙漂處理后，是趁熱裝入陶缸中的，A錯誤；B、加入老漿水可以增加酸菜中乳酸菌的數(shù)量，有利于縮短發(fā)酵時間，B正確；C、發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽的含量先增加后下降至相對穩(wěn)定，C錯誤；D、參與酸菜制作的乳酸菌是厭氧菌，因此酸菜制作的全過程都要保持無氧條件，D錯誤。故選B。4.歧桿菌是一類可分解乳糖產(chǎn)生半乳糖的細菌，半乳糖是構(gòu)成腦神經(jīng)系統(tǒng)中腦苷脂的成分，與嬰兒出生后腦的迅速生長有密切關(guān)系。為篩選能高效分解乳糖產(chǎn)生半乳糖的菌株，某學(xué)校同學(xué)進行了流程如圖所示的實驗。下列敘述正確的是（）A.培養(yǎng)雙歧桿菌的培養(yǎng)基應(yīng)調(diào)整pH為酸性B.Ⅰ號培養(yǎng)基以乳糖為唯一碳源，配制時需加入瓊脂C.圖中③過程和④過程所采用的接種方法可能相同D.Ⅰ號培養(yǎng)基上的菌落形狀、大小、顏色等都相同【答案】B〖祥解〗一、培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。不同的培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無機鹽、碳源和氮源。二、微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。操作方法各不相同，但是核心都是要防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。微生物常見的接種的方法：(1)平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。(2)稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、雙歧桿菌屬于細菌，培養(yǎng)細菌時，一般需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)整為中性或弱堿性，A錯誤；B、為篩選出能高效分解乳糖的菌株，應(yīng)使用以乳糖為唯一碳源的固體培養(yǎng)基，B正確；C、圖中①②過程應(yīng)為梯度稀釋，③過程采用的接種方法為稀釋涂布平板法，④過程采用的接種方法為平板劃線法，C錯誤；D、雙歧桿菌是一類細菌，Ⅰ號培養(yǎng)基中的菌種可能不止一種，故Ⅰ號培養(yǎng)基上的菌落形狀、大小、顏色等不一定都相同，D錯誤。故選B。5.細菌素是某些細菌在代謝過程中產(chǎn)生的一類具有抑菌活性的多肽或前體多肽。某同學(xué)想篩選獲得能高產(chǎn)細菌素的細菌，流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A.細菌素是細菌的初生代謝物，可抑制其他微生物生長B.在進行分離培養(yǎng)時，第一次劃線和最后一次劃線不能連接C.Ⅳ過程后培養(yǎng)基上不同細菌的菌落直徑越小說明細菌素的抑菌效果越好D.若利用發(fā)酵工程生產(chǎn)細菌素，則發(fā)酵結(jié)束后需通過分離、純化等措施來獲得產(chǎn)品【答案】A〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、初生代謝物是生物生長和生存所必需的產(chǎn)物，細菌素是某些細菌代謝過程中產(chǎn)生的具有抑菌活性的多肽或前體多肽，可用于抑制其他細菌生長，應(yīng)屬于細菌的次生代謝物，A錯誤；B、利用平板劃線法進行分離培養(yǎng)時，第一次劃線和最后一次劃線要分開，B正確；C、細菌菌落的直徑越小，說明細菌素對細菌的抑制作用越強，效果越好，C正確；D、如果產(chǎn)品是代謝物，可以根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)奶崛?、分離和純化措施來獲得產(chǎn)品，因此若利用發(fā)酵工程生產(chǎn)細菌素，則發(fā)酵結(jié)束后需通過分離、純化等措施來獲得產(chǎn)品，D正確。故選A。6.我國科學(xué)家利用CRISPR-Cas12i新型基因編輯系統(tǒng)，對馬鈴薯的愈傷組織進行定向誘變，成功篩選出耐低溫突變體。實驗流程如下：①誘導(dǎo)馬鈴薯葉片形成愈傷組織；②通過基因槍遞送CRISPR系統(tǒng)；③在4℃低溫條件下連續(xù)培養(yǎng)3個月；④通過流式細胞儀檢測細胞活性，分離存活細胞團；⑤誘導(dǎo)再分化形成新的植株。下列敘述正確的是（）A.步驟①需在光照條件下進行，以保證細胞脫分化B.步驟③的目的是低溫誘導(dǎo)細胞染色體數(shù)目加倍C.步驟④過程沒有體現(xiàn)植物細胞具有全能性D.步驟⑤再分化時培養(yǎng)基中無須添加有機物【答案】C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株?！驹斘觥緼、誘導(dǎo)形成愈傷組織期間一般不需要光照，A錯誤；B、低溫條件下連續(xù)培養(yǎng)3個月是為了篩選耐低溫突變體，而非誘導(dǎo)細胞染色體數(shù)目加倍，B錯誤；C、步驟③④的目的是篩選符合要求的愈傷組織，沒有涉及完整個體，沒有體現(xiàn)植物細胞具有全能性，C正確；D、在葉片分化之前，植物細胞不能進行光合作用，所以植物組織培養(yǎng)再分化過程中需要在培養(yǎng)基中加入有機營養(yǎng)物質(zhì)，D錯誤。故選C。7.2025年國際空間站公布實驗成果：在微重力環(huán)境下，番茄與枸杞的原生質(zhì)體融合效率較地球環(huán)境提高80%。實驗采用聚乙二醇—激光融合法，融合細胞經(jīng)特殊培養(yǎng)基培養(yǎng)形成“番茄—枸杞”嵌合體植株。檢測發(fā)現(xiàn)，該植株葉片的類胡蘿卜素含量顯著增高，但果實發(fā)育異常。下列分析錯誤的是（）A.還可以用滅活病毒誘導(dǎo)法、電融合法等誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合B.兩種植株的原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是再生出細胞壁C.“番茄—枸杞”嵌合體植株不一定能結(jié)出枸杞味的番茄D.題述技術(shù)可以打破生殖隔離，實現(xiàn)雜交育種【答案】A〖祥解〗誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)試劑是聚乙二醇；原生質(zhì)體融合的理論基礎(chǔ)是細胞膜的流動性；植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化，其原理是植物細胞具有全能性，涉及的細胞分裂方式是有絲分裂；植物體細胞雜交的優(yōu)點是克服遠緣雜交不親和的障礙。【詳析】A、植物體細胞雜交可用電融合法、離心法、PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法等誘導(dǎo)融合，不可采用滅活病毒誘導(dǎo)法，A錯誤；B、兩種植株的原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是再生出細胞壁，B正確；C、細胞中的基因表達受到多種因素影響，不一定完全按照人們的意愿進行，且據(jù)題可知，該植株果實發(fā)育異常，故“番茄—枸杞”嵌合體植株不一定能結(jié)出枸杞味的番茄，C正確；D、植物體細胞雜交技術(shù)可以打破生殖隔離，實現(xiàn)雜交育種，D正確。故選A。8.科學(xué)家通過將數(shù)百個人類誘導(dǎo)多能干細胞（iPS細胞）衍生的肝芽合并，成功構(gòu)建了較大的肝臟類器官（hiPSC-LO）。當(dāng)這些器官被移植到免疫缺陷的小鼠肝臟中時，它們能夠發(fā)展成膽管和其他肝組織，并能夠與宿主小鼠的肝臟血管系統(tǒng)形成連接。研究還發(fā)現(xiàn)，這些移植的器官能通過改變巨噬細胞的極化狀態(tài)，部分逆轉(zhuǎn)由化學(xué)物質(zhì)引起的肝纖維化。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.iPS細胞類似于胚胎干細胞，但獲取時無須破壞胚胎B.培養(yǎng)iPS細胞時要保證無菌無毒環(huán)境，并定期更換培養(yǎng)液C.hiPSC-LO移植到肝衰竭小鼠體內(nèi)，不會發(fā)生免疫排斥D.hiPSC-LO移植可能成為治療肝纖維化的一種新方法【答案】C〖祥解〗胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，是由早期胚胎或原始性腺分離出來一類細胞，iPS與ES細胞一樣，可通過定向誘導(dǎo)分化修補某些功能異常的細胞來治療疾病?！驹斘觥緼、iPS細胞的功能類似于胚胎干細胞，但其不來自胚胎，故獲取時無須破壞胚胎，A正確；B、培養(yǎng)動物細胞時要保證無菌無毒環(huán)境，并定期更換培養(yǎng)液，B正確；C、據(jù)題可知，hiPSC-LO來源于人類誘導(dǎo)多能干細胞，其移植到免疫缺陷的小鼠肝臟中，未發(fā)生免疫排斥，但肝衰竭小鼠不是免疫缺陷小鼠，移植后可能發(fā)生免疫排斥，C錯誤；D、據(jù)題可知，這些移植的器官能通過改變巨噬細胞的極化狀態(tài)，部分逆轉(zhuǎn)由化學(xué)物質(zhì)引起的肝纖維化，故hiPSC-LO移植可能成為治療肝纖維化的一種新方法，D正確。故選C。9.胚胎工程的迅猛發(fā)展實現(xiàn)了家畜繁殖模式的改變，如圖所示為某科研小組培育幼豬的兩種模式。下列說法正確的是（）A.哺乳動物的受精過程和早期胚胎的發(fā)育均在子宮中完成B.被阻止釋放的極體會成為胚胎的組成部分，發(fā)揮重要作用C.分析圖示可知，兩種繁殖模式得到的幼豬所含核基因相同D.圖示流程涉及了體細胞核移植、胚胎移植、重組DNA等技術(shù)【答案】B〖祥解〗胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)，實際是在體外條件下，對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進行的模擬操作?！驹斘觥緼、在自然條件下，哺乳動物的受精過程在輸卵管中完成，受精卵形成后在輸卵管內(nèi)進行有絲分裂，發(fā)育到一定階段后進入子宮繼續(xù)進行胚胎發(fā)育，A錯誤；B、由圖可知，孤雌生殖技術(shù)通過阻止次級卵母細胞釋放極體，激活孤雌生殖從而獲得早期胚胎，B正確；C、孤雌生殖得到的幼豬的核基因來自良種母豬，細胞核移植得到的幼豬的核基因來自良種公豬，故兩種幼豬的核基因不同，C錯誤；D、圖示流程涉及了體細胞核移植、胚胎移植等技術(shù)，未涉及重組DNA技術(shù)，D錯誤。故選B。10.昆明理工大學(xué)科研團隊首次成功利用猴誘導(dǎo)多能干細胞和體細胞核移植胚胎干細胞高效構(gòu)建了類囊胚。在此之前，類囊胚主要源自全能胚胎干細胞。類囊胚與自然囊胚結(jié)構(gòu)極其相似，能夠模擬早期胚胎發(fā)育過程，為研究胚胎發(fā)育和再生醫(yī)學(xué)提供了重要的模型。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.胚胎干細胞在進行傳代培養(yǎng)時，可用胰蛋白酶處理細胞B.可將供體細胞注入MⅡ期去核卵母細胞以實現(xiàn)體細胞核移植C.鑒定類囊胚的性染色體組成時，常取滋養(yǎng)層細胞進行鑒定D.類囊胚源自全能胚胎干細胞，類囊胚中的細胞都具有全能性【答案】D〖祥解〗動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。在體外將采集到的卵母細胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，可以通過顯微操作技術(shù)去除卵母細胞的核，核移植時，對提供細胞核和細胞質(zhì)的奶牛不需要進行同期發(fā)情處理，使用電刺激等方法可以激活重構(gòu)胚使其完成細胞分裂和發(fā)育。【詳析】A、進行傳代培養(yǎng)需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理貼壁細胞，以便細胞繼續(xù)分裂增殖，A正確；B、細胞核移植的過程中，通常是將供體細胞注入處于MⅡ期的去核卵母細胞中，因為MⅡ期的卵母細胞細胞質(zhì)中含有能促進細胞核全能性表達的物質(zhì)，B正確；C、類囊胚與自然囊胚結(jié)構(gòu)極其相似，鑒定類囊胚的性染色體組成，常取滋養(yǎng)層細胞進行鑒定，C正確；D、類囊胚的內(nèi)細胞團可發(fā)育成胎兒的各種組織，具有全能性，滋養(yǎng)層細胞會發(fā)育成胎膜和胎盤，不具有全能性，D錯誤。故選D。11.某同學(xué)實驗時選取了長度為14kb（kb表示千堿基對）的某DNA分子，并用限制酶A、限制酶B進行充分酶切，結(jié)果如表，下列敘述錯誤的是（）實驗用酶限制酶A限制酶B限制酶A和限制酶B得到的片段長度14kb6kb、8kb3kb、5kb、6kbA.該DNA分子上不含限制酶A的酶切位點B.酶A和酶B切割可能產(chǎn)生相同的黏性末端C.DNA連接酶和限制酶都作用于磷酸二酯鍵D.限制酶需要在適宜溫度下才能更好地發(fā)揮作用【答案】A〖祥解〗轉(zhuǎn)錄、復(fù)制都是從模板鏈的3'端開始，因此新合成鏈的方向均為5'→3'。質(zhì)粒作為基因的載體，與目的基因形成重組質(zhì)粒時，需要形成相同的黏性末端，才能重新組合?！驹斘觥緼、該DNA分子的大小為14kb，用限制酶A、B充分酶切后，分別得到1、2個片段，用二者共同酶切后得到3個片段，說明該DNA分子是環(huán)狀DNA，含有1個限制酶A的酶切位點，A錯誤；B、不同的限制酶可能切割出相同的黏性末端，B正確；C、限制酶能使DNA鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，DNA連接酶能恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，兩者均作用于磷酸二酯鍵，C正確；D、溫度能夠影響酶的活性，所以在適宜溫度下限制酶才能更好地發(fā)揮作用，D正確。故選A。12.如圖是目的基因和酵母菌的質(zhì)粒，表中為相關(guān)限制酶的識別序列。URA3為酵母菌篩選標(biāo)記基因，缺失該基因的酵母菌（記為M）無法合成尿嘧啶；AmpR為氨芐青霉素抗性基因。下列相關(guān)敘述正確的是（）限制酶識別序列BglⅡ5'-A↓GATCT-3'EcoRⅠ5'-G↓AAATTC-3'BamHⅠ5'-G↓GATCC-3'HindⅢ5'-A↓AGCTT-3'A.BglⅡ和BamHⅠ切割后產(chǎn)生的平末端相同B.可選用BamHⅠ和EcoRⅠ切割質(zhì)粒和目的基因C.不能選用E.coliDNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒D.可將重組質(zhì)粒導(dǎo)入M中，用不含尿嘧啶的培養(yǎng)基來篩選【答案】D〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。【詳析】A、據(jù)表分析可知，BglⅡ和BamHⅠ切割后產(chǎn)生了相同的黏性末端，而不是平末端，A錯誤；B、目的基因的兩端只有BglⅡ和EcoRⅠ的識別序列，故目的基因應(yīng)該用這兩種酶切割；為使目的基因crtZ能在受體細胞中表達，應(yīng)將目的基因crtZ插入啟動子和終止子之間，它們之間有BglⅡ、EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的識別位點，但BglⅡ有一個識別位點在啟動子左邊，如果使用此酶切割質(zhì)粒，會將啟動子切除，而BglⅡ和BamHⅠ切割后產(chǎn)生的黏性末端相同，為保證目的基因和質(zhì)粒能連接在一起，應(yīng)該用EcoRⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒，B錯誤；C、根據(jù)B項分析可知用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因，用EcoRⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒，BglⅡ、EcoRⅠ和BamHⅠ切割后產(chǎn)生的都是黏性末端，故可以用E.coliDNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒，C錯誤；D、氨芐青霉素是抗生素，對酵母菌的生長繁殖沒有抑制作用，故篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的酵母菌時，應(yīng)利用基因URA3，可將重組質(zhì)粒先導(dǎo)入M（缺失基因URA3的酵母菌）中，M不能合成尿嘧啶，而導(dǎo)入重組質(zhì)粒后可以合成尿嘧啶，故可用不含尿嘧啶的培養(yǎng)基來篩選，D正確。故選D。13.基因工程中的載體包括克隆載體和表達載體等?？寺≥d體主要用于基因克隆，可復(fù)制、擴增和保存插入其中的外源基因。表達載體是一種經(jīng)過特殊設(shè)計的DNA分子，可使攜帶的外源基因在特定的宿主細胞中穩(wěn)定表達。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.克隆載體通常具有較強的復(fù)制能力和豐富的酶切位點B.表達載體中攜帶了調(diào)控外源基因表達的元件，但無須具備復(fù)制能力C.表達載體中可能含誘導(dǎo)型啟動子，以使目的基因在特定細胞中表達D.克隆載體和表達載體中都含有標(biāo)記基因，以便于重組DNA分子的篩選【答案】B〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定?！驹斘觥緼、據(jù)題可知，克隆載體主要用于基因克隆，故需要有較強的復(fù)制能力，需要插入外源基因，故要有豐富的酶切位點，A正確；B、表達載體能夠使外源基因在特定的宿主細胞中穩(wěn)定表達，故需要含有調(diào)控外源基因表達的元件，如啟動子、終止子等，且要具備復(fù)制能力，B錯誤；C、表達載體中可能含誘導(dǎo)型啟動子，以使目的基因在特定細胞中表達，C正確；D、克隆載體和表達載體中都含有標(biāo)記基因，以便于重組DNA分子的篩選，D正確。故選B。14.某學(xué)校生物學(xué)習(xí)小組進行了與DNA相關(guān)的實驗，下列關(guān)于實驗操作及結(jié)果的敘述，正確的是（）A.用豬血代替雞血作為實驗材料能提取到更多的DNAB.向DNA溶液中加入二苯胺試劑，沸水浴加熱后可顯示藍色C.若設(shè)計的引物較長，則可適當(dāng)降低復(fù)性溫度以提高PCR準(zhǔn)確度D.瓊脂糖凝膠電泳的緩沖液中含指示劑，其可在紫外燈下被檢測出來【答案】B〖祥解〗DNA粗提取和鑒定的實驗原理：（1）DNA的溶解性：①DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用這一特點，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達到分離目的；②DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離。（2）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。（3）DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斘觥緼、豬（哺乳動物）成熟的紅細胞無細胞核和眾多的細胞器，細胞內(nèi)基本不含DNA，A錯誤；B、向溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑，沸水浴加熱數(shù)分鐘，溶液呈現(xiàn)藍色，B正確；C、如果設(shè)計的引物較長，那么引物與模板之間的結(jié)合會較為穩(wěn)定，因此需要適當(dāng)提高復(fù)性溫度，以確保引物與模板之間的特異性結(jié)合，C錯誤；D、瓊脂糖凝膠電泳的緩沖液中含指示劑，指示劑可指示PCR的進程，可被紫外燈檢測出來的是被染色的DNA，D錯誤。故選B。15.某科研團隊開發(fā)了一款人工智能工具，用其對蛋白質(zhì)進行設(shè)計和優(yōu)化。結(jié)果顯示，經(jīng)過該工具優(yōu)化的兩種單克隆抗體對目標(biāo)的黏附力增強了30倍。下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的敘述，正確的是（）A.天然蛋白質(zhì)合成的過程與蛋白質(zhì)工程基本思路相同B.蛋白質(zhì)工程設(shè)計蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)要依據(jù)已知的基因序列C.該工具可以幫助人類設(shè)計和修改蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)D.可利用DNA分子雜交技術(shù)檢測是否有目標(biāo)蛋白合成【答案】C〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求?！驹斘觥緼、天然蛋白質(zhì)合成的過程是按照中心法則進行的，蛋白質(zhì)工程的基本思路與中心法則相反，A錯誤；B、蛋白質(zhì)工程在設(shè)計蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)時的依據(jù)是人類的需求，B錯誤；C、該工具可以幫助人類設(shè)計和修改蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，C正確；D、DNA分子雜交技術(shù)不能用于檢測蛋白質(zhì)是否合成，可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測，D錯誤。故選C。16.2020年12月26日，《中華人民共和國刑法修正案（十一）》正式通過。刑法第三百三十六條明確規(guī)定，嚴(yán)禁將基因編輯、克隆的人類胚胎植入人體或者動物體內(nèi)，或者將基因編輯、克隆的動物胚胎植人人體內(nèi)。下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性與倫理問題的敘述，正確的是（）A.“設(shè)計試管嬰兒”需用到體外受精、胚胎培養(yǎng)、胚胎分割等技術(shù)B.治療性克隆雖然不產(chǎn)生個體，但也需要進行監(jiān)控和審查C.食用轉(zhuǎn)基因食品時，食品中的基因會整合到人的基因組中D.若轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來自自然界，則不會存在安全性問題【答案】B〖祥解〗一、治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細胞和組織(皮膚、神經(jīng)或肌肉等)用于治療性移植。生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的，即用于產(chǎn)生人類個體。二、轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全(滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變)、生物安全(對生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)?！驹斘觥緼、“設(shè)計試管嬰兒”需用到體外受精、胚胎培養(yǎng)技術(shù)，未用到胚胎分割技術(shù)，A錯誤；B、我國政府同樣重視治療性克隆所涉及的倫理問題，主張對治療性克隆進行有效監(jiān)控和嚴(yán)格審查，B正確；C、基因進入人體后會被酶分解成小分子，不可能通過食物將外來遺傳信息整合到人的基因組中，C錯誤；D、轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問題需要經(jīng)過驗證才能得到證實，即使轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來自自然界，也可能存在安全性問題，D錯誤。故選B。二、非選擇題：本題共5小題，共52分。17.薄膜過濾計數(shù)法是一種常用的微生物檢測方法，其原理是用具有微孔的過濾膜過濾待測液體，使液體中的微生物被滯留在過濾膜表面，從而實現(xiàn)微生物的分離和檢測。某研究小組為探究某地下水水源的質(zhì)量，欲通過薄膜過濾法檢測其中大腸桿菌的數(shù)量，實驗過程和結(jié)果如圖所示。EMB培養(yǎng)基可用于檢測大腸桿菌，PDA培養(yǎng)基可用于檢測酵母菌。回答下列問題：（1）對實驗中的培養(yǎng)皿、濾杯、濾瓶等器具常見的滅菌方法有_______（答出2種）；要在酒精燈火焰旁倒平板的目的是_______。（2）根據(jù)地下水質(zhì)量國家標(biāo)準(zhǔn)，每100毫升地下水水源中大腸桿菌的菌落數(shù)小于3個屬于Ⅲ（及以上）類水源，小于100個屬于Ⅳ類水源，大于100個則屬于Ⅴ類水源。上圖是過濾了1升水樣得到的結(jié)果，該地下水水源屬于_______類水源。抽樣檢測活菌數(shù)量時，采用稀釋涂布平板法比顯微鏡直接計數(shù)法更準(zhǔn)確的原因是_______。（3）根據(jù)圖示，簡述圖中的接種操作過程：______。若要利用圖示裝置檢測水樣中酵母菌的數(shù)量，則實驗裝置需要做的改動有_______（答出2點）?！敬鸢浮浚?）①.濕熱滅菌、干熱滅菌（答出2種）②.防止雜菌污染培養(yǎng)基（2）①.Ⅲ（及以上）②.用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個菌落都來自一個活細胞，而顯微鏡直接計數(shù)法會將死亡的細菌也計算在內(nèi)（3）①.用無菌鑷子將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上②.選用微孔直徑適當(dāng)增大的濾膜；將EMB培養(yǎng)基換成PDA培養(yǎng)基（答出2點）〖祥解〗濾膜法是檢測水樣中大腸細菌群的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經(jīng)過抽濾，細菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后計數(shù)和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落，依據(jù)過濾水樣計算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數(shù)，操作簡單、快速，主要適用于雜質(zhì)較少的水樣。【小問1詳析】對玻璃器皿常見的滅菌方法有濕熱滅菌法和干熱滅菌法。倒平板時要在酒精燈火焰旁進行的目的是防止雜菌污染培養(yǎng)基?！拘?詳析】據(jù)圖分析，過濾了1升水樣后，培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落數(shù)為17個，可知平均每100毫升水體中大腸桿菌的菌落數(shù)為1.7個。根據(jù)地下水質(zhì)量國家標(biāo)準(zhǔn)，該地下水水源屬于Ⅲ（及以上）類水源。用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個菌落都來自一個活細胞，而顯微鏡直接計數(shù)法會將死亡的細菌也計算在內(nèi)，所以計數(shù)活菌時稀釋涂布平板法更準(zhǔn)確?！拘?詳析】分析圖示，圖中的接種操作過程是用無菌鑷子將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上。若要利用圖示裝置檢測水樣中酵母菌的數(shù)量，則要選用微孔直徑適當(dāng)增大的濾膜，因為酵母菌是真菌，其細胞直徑比大腸桿菌（細菌）大；另外EMB培養(yǎng)基可用于檢測大腸桿菌，PDA培養(yǎng)基可用于檢測酵母菌，因此需要將EMB培養(yǎng)基換成PDA培養(yǎng)基。18.科研人員發(fā)現(xiàn)植物A（2n=14）具有耐干旱的特性，植物B（2n=16）具有含糖量高的特性，計劃培育出耐干旱且含糖量高的植株，為此進行了如圖1所示的實驗?；卮鹣铝袉栴}：（1）“處理1”的目的是________，獲得原生質(zhì)體；制備原生質(zhì)體前需將兩親本的外植體用________依次進行消毒；進行細胞融合時，需將原生質(zhì)體置于________（填“低滲”“等滲”或“高滲”）溶液中。（2）若細胞甲是由兩種細胞兩兩融合而成的，則細胞甲的染色體數(shù)為______條。在甲→試管苗的過程中需要更換培養(yǎng)基，原因是________。（3）實驗時發(fā)現(xiàn)，若使用聚乙二醇（PEG）使細胞融合，則不同濃度的PEG條件下，異源細胞融合率不同，實驗結(jié)果如圖2所示（PEG濃度較高時對細胞有毒害作用）；根據(jù)現(xiàn)有實驗結(jié)果，PEG的最佳濃度為________。實驗所得的試