2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(5套單選100題合輯)2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇1)【題干1】超薄切片的厚度范圍應(yīng)控制在多少微米以下？【選項】A.0.5B.1.0C.2.0D.3.0【參考答案】A【詳細解析】超薄切片的厚度需在0.5-1.0微米之間以確保電子束穿透性，過厚會導(dǎo)致圖像模糊或樣品無法成像。選項B（1.0微米）為臨界上限，但最佳范圍為0.5微米以下。【題干2】電子顯微鏡的染色劑“醋酸雙氧鈾”主要用于增強哪種結(jié)構(gòu)的對比度？【選項】A.細胞核B.纖維蛋白C.蛋白質(zhì)D.脂類【參考答案】C【詳細解析】醋酸雙氧鈾（UranylAcetate）作為重金屬染色劑，通過結(jié)合蛋白質(zhì)分子中的巰基和氨基形成復(fù)合物，顯著提高蛋白質(zhì)的電子密度，增強其對比度。選項C正確，其他選項為非主要染色對象?！绢}干3】超薄切片制作過程中，切片刀的傾角通常設(shè)置為多少度？【選項】A.30°B.45°C.60°D.90°【參考答案】B【詳細解析】切片刀傾角45°時，切片邊緣不易卷曲且成像均勻，是標準操作規(guī)范。選項A（30°）會導(dǎo)致切片邊緣易斷裂，選項C（60°）和D（90°）會顯著降低切片完整性。【題干4】電子顯微鏡的加速電壓范圍一般為多少千伏？【選項】A.20-50kVB.50-100kVC.100-200kVD.200-300kV【參考答案】C【詳細解析】常規(guī)電子顯微鏡的加速電壓為100-200kV，在此范圍內(nèi)可平衡分辨率與穿透力。選項B（50-100kV）適用于樣品較厚的情況，但分辨率較低；選項D（200-300kV）需特殊設(shè)備且易損傷樣品?！绢}干5】超薄切片染色后需在暗室中避光保存多長時間？【選項】A.30分鐘B.1小時C.2小時D.24小時【參考答案】B【詳細解析】重金屬染色劑遇光易分解，標準操作為避光染色1小時后再進行觀察。選項A（30分鐘）時間不足，選項C（2小時）可能導(dǎo)致染色過深，選項D（24小時）不符合常規(guī)流程。【題干6】電子顯微鏡的樣品臺溫度控制通常設(shè)置為多少℃？【選項】A.-20℃B.0℃C.25℃D.40℃【參考答案】A【詳細解析】低溫（-20℃）可減少樣品熱運動導(dǎo)致的圖像模糊，同時抑制微生物活動。選項B（0℃）對生物樣品效果較差，選項C（25℃）和D（40℃）會顯著影響成像質(zhì)量?！绢}干7】超薄切片的固定劑常用哪種有機溶劑？【選項】A.甲醛B.戊二醛C.福爾馬林D.丙酮【參考答案】B【詳細解析】戊二醛（Glutaraldehyde）作為交聯(lián)固定劑，能穩(wěn)定細胞超微結(jié)構(gòu)，避免甲醛導(dǎo)致的蛋白質(zhì)過度交聯(lián)。選項A（甲醛）和C（福爾馬林）為堿性固定劑，選項D（丙酮）主要用于脫水而非固定?！绢}干8】電子顯微鏡的物鏡光闌直徑調(diào)節(jié)過大會導(dǎo)致什么問題？【選項】A.分辨率降低B.樣品損傷C.圖像模糊D.亮度增加【參考答案】A【詳細解析】物鏡光闌直徑增大時，進入物鏡的電子束束流增加，但樣品區(qū)域被電子束覆蓋面積減少，導(dǎo)致有效分辨率降低。選項B（樣品損傷）與光闌直徑無直接關(guān)聯(lián)，選項D（亮度增加）為表面現(xiàn)象?！绢}干9】超薄切片的染色劑“檸檬酸鉛”與哪種生物分子結(jié)合形成復(fù)合物？【選項】A.脂類B.纖維蛋白C.膜蛋白D.膠原纖維【參考答案】C【詳細解析】檸檬酸鉛（LeadCitrate）通過結(jié)合膜蛋白表面的帶負電荷基團（如磷酸基團）形成沉淀，增強膜結(jié)構(gòu)的對比度。選項A（脂類）和D（膠原纖維）為非主要結(jié)合對象，選項B（纖維蛋白）需用其他染色劑?！绢}干10】電子顯微鏡的樣品制備過程中，漂洗液的選擇原則是什么？【選項】A.高鹽濃度B.低離子強度C.高pH值D.含蛋白酶【參考答案】B【詳細解析】漂洗液需低離子強度（如0.01M磷酸緩沖液）以減少非特異性吸附，避免樣品結(jié)構(gòu)破壞。選項A（高鹽濃度）會加重背景噪聲，選項C（高pH值）可能影響蛋白質(zhì)穩(wěn)定性，選項D（含蛋白酶）會破壞目標結(jié)構(gòu)?！绢}干11】超薄切片的切片刀材料通常為哪種合金？【選項】A.碳鋼B.鉻鉬合金C.不銹鋼D.硅carbide【參考答案】B【詳細解析】鉻鉬合金（Cr-Mo）具有高硬度和耐腐蝕性，適合制作超薄切片刀。選項A（碳鋼）易磨損，選項C（不銹鋼）硬度不足，選項D（碳化硅）脆性過高?！绢}干12】電子顯微鏡的樣品臺載物臺面需預(yù)先鍍層以防止什么現(xiàn)象？【選項】A.電子束折射B.樣品吸附C.電磁干擾D.光學(xué)畸變【參考答案】B【詳細解析】鍍層（如碳膜）可減少樣品與載物臺的非特異性吸附，防止樣品移動或污染。選項A（電子束折射）由物鏡光闌調(diào)節(jié)，選項C（電磁干擾）需通過屏蔽措施解決，選項D（光學(xué)畸變）與鍍層無關(guān)?！绢}干13】超薄切片染色后需使用哪種緩沖液終止染色反應(yīng)？【選項】A.甲醇B.丙酮C.蒸餾水D.甘氨酸緩沖液【參考答案】D【詳細解析】甘氨酸緩沖液（0.1MpH7.4）可中和染色劑過量電荷，終止反應(yīng)并穩(wěn)定切片。選項A（甲醇）和C（蒸餾水）會破壞染色復(fù)合物，選項B（丙酮）主要用于脫水而非終止反應(yīng)?！绢}干14】電子顯微鏡的樣品制備過程中，切片厚度過厚會導(dǎo)致什么后果？【選項】A.圖像模糊B.樣品變形C.亮度降低D.分辨率提高【參考答案】A【詳細解析】切片過厚（>1.0微米）會導(dǎo)致電子束在樣品內(nèi)散射增強，成像模糊且對比度下降。選項B（樣品變形）是固定前的操作問題，選項C（亮度降低）與光闌設(shè)置相關(guān)，選項D（分辨率提高）違背物理規(guī)律?！绢}干15】超薄切片的染色劑“醋酸鈾”與哪種生物大分子結(jié)合效果最佳？【選項】A.核糖體B.線粒體C.細胞膜D.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)【參考答案】A【詳細解析】醋酸鈾（UranylAcetate）優(yōu)先與核糖體亞基的rRNA結(jié)合，顯著提高其電子密度，便于觀察。選項B（線粒體）需用其他染色劑，選項C（細胞膜）和D（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）為膜結(jié)構(gòu)，染色效果較弱。【題干16】電子顯微鏡的樣品制備中，切片刀的切割速度通常為多少毫米/分鐘？【選項】A.10B.20C.30D.50【參考答案】B【詳細解析】標準切割速度為20毫米/分鐘，過慢（10mm/min）會導(dǎo)致切片不均勻，過快（30或50mm/min）會降低切片完整性。【題干17】超薄切片的染色時間通常為多少分鐘？【選項】A.5B.10C.20D.30【參考答案】B【詳細解析】染色時間10分鐘可充分結(jié)合染色劑與目標分子，時間過短（5分鐘）導(dǎo)致結(jié)合不完全，過長（20或30分鐘）會過度染色?！绢}干18】電子顯微鏡的樣品臺傾斜角度調(diào)節(jié)范圍一般為多少度？【選項】A.0-15°B.15-30°C.30-45°D.45-60°【參考答案】C【詳細解析】傾斜角度30-45°時，樣品臺與物鏡光軸形成最佳夾角，便于多角度觀察。選項A（0-15°）適合觀察平面結(jié)構(gòu)，選項B（15-30°）和D（45-60°）會限制視野范圍?！绢}干19】超薄切片的切片刀溫度控制通常為多少℃？【選項】A.-20℃B.0℃C.25℃D.100℃【參考答案】B【詳細解析】切片刀需保持0℃以減少熱膨脹導(dǎo)致的切片不均勻，溫度過高（25或100℃）會顯著降低切割精度。選項A（-20℃）雖更冷，但可能增加操作難度?！绢}干20】電子顯微鏡的樣品制備中，固定劑與緩沖液的體積比一般為多少？【選項】A.1:1B.1:2C.1:4D.1:10【參考答案】B【詳細解析】固定劑（如戊二醛）與緩沖液體積比為1:2時，可充分滲透細胞結(jié)構(gòu)而不破壞局部形態(tài)。選項A（1:1）固定時間過長，選項C（1:4）和D（1:10）固定效果不足。2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇2)【題干1】電子顯微鏡樣品制備中，固定液的主要作用是？【選項】A.提高組織透水性B.增強標本反光性C.穩(wěn)定細胞結(jié)構(gòu)D.防止切片粘連【參考答案】C【詳細解析】電子顯微鏡固定液（如戊二醛和甲醛）的主要作用是通過交聯(lián)蛋白質(zhì)和酶，穩(wěn)定細胞超微結(jié)構(gòu)，防止制片過程中結(jié)構(gòu)崩解。選項A錯誤因透水性是脫水步驟需求；B與電鏡成像無關(guān)；D屬于包埋劑功能?！绢}干2】超薄切片的厚度通常控制在多少微米？【選項】A.0.5-1.0μmB.1.0-2.0μmC.2.0-3.0μmD.3.0-4.0μm【參考答案】A【詳細解析】電鏡超薄切片需0.5-1.0μm厚度以滿足分辨率要求。選項B適用于光學(xué)顯微鏡，C和D會導(dǎo)致切片過厚影響成像?！绢}干3】樣品經(jīng)固定后，哪種處理步驟可去除多余固定液？【選項】A.蒸餾水漂洗B.丙酮脫水C.碘液染色D.包埋劑處理【參考答案】B【詳細解析】丙酮脫水可溶解脂類并置換固定液，為后續(xù)包埋做準備。選項A漂洗會引入水分影響脫水；C為染色步驟；D是最終包埋流程。【題干4】電子顯微鏡常用的染色劑是？【選項】A.hematoxylin-eosinB.GiemsaC.鈷鹽染色D.硫黃素O【參考答案】D【詳細解析】電鏡超薄切片需用重金屬染色（如硫黃素O標記糖原）。選項A為HE染色；B為Giemsa用于細胞遺傳學(xué)；C為細菌染色?！绢}干5】切片機切片時，切片角度應(yīng)控制在多少度？【選項】A.30°-45°B.45°-60°C.60°-90°D.90°-120°【參考答案】A【詳細解析】切片角度30°-45°可減少切片破碎并提高成像清晰度。選項B易產(chǎn)生卷曲；C-D角度過大影響操作。【題干6】電鏡樣品包埋常用哪種材料？【選項】A.環(huán)氧樹脂B.聚甲基丙烯酸甲酯C.福爾馬林D.丙酮【參考答案】B【詳細解析】PMMA（聚甲基丙烯酸甲酯）是電鏡包埋劑的首選，其硬度適合超薄切片。選項A用于光學(xué)顯微鏡；C為固定液；D為脫水劑。【題干7】樣品染色后，哪種處理可增強染色效果？【選項】A.水合處理B.離心脫水C.真空干燥D.重金屬噴鍍【參考答案】D【詳細解析】電鏡染色需噴鍍重金屬（如醋酸鈾）以提高標本與電子束的相互作用。選項A為切片復(fù)水步驟；B-C屬于脫水干燥流程?！绢}干8】超薄切片制作失敗常見原因不包括？【選項】A.切片厚度超標B.固定液濃度不足C.染色劑pH值異常D.切片機刀片鈍化【參考答案】B【詳細解析】固定液濃度不足會導(dǎo)致結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，但非直接導(dǎo)致切片失敗的主因。選項A（厚度）、C（染色pH）、D（刀片狀態(tài)）均為直接關(guān)聯(lián)因素。【題干9】電子顯微鏡成像的分辨率主要取決于？【選項】A.樣品制備質(zhì)量B.電子束波長C.照相機底片類型D.光源亮度【參考答案】B【詳細解析】分辨率公式為0.61λ/NA，其中λ為電子波長（0.005nm）。選項A影響成像質(zhì)量但非分辨率決定性因素；C-D屬于設(shè)備參數(shù)?！绢}干10】超薄切片的染色順序通常為？【選項】A.固定→包埋→染色→噴鍍B.固定→染色→包埋→噴鍍C.固定→脫水→包埋→染色D.包埋→切片→染色→噴鍍【參考答案】D【詳細解析】電鏡流程為固定→脫水→包埋→切片→染色→噴鍍。選項D符合實際操作順序，其他選項存在步驟邏輯錯誤。【題干11】樣品脫水時，丙酮與乙醇的混合比例通常為？【選項】A.1:1B.1:2C.2:1D.3:1【參考答案】B【詳細解析】丙酮與乙醇按體積比1:2混合可逐步置換水分，避免樣品脆化。選項C-D比例會加速脫水導(dǎo)致結(jié)構(gòu)損傷?！绢}干12】電鏡切片的染色劑滲透時間一般為？【選項】A.5-10分鐘B.30-60分鐘C.1-2小時D.12-24小時【參考答案】B【詳細解析】重金屬染色需30-60分鐘滲透，時間過短（A）無法充分結(jié)合；過長（C-D）導(dǎo)致背景染色過深。【題干13】樣品包埋后，切片機進樣前的預(yù)處理是？【選項】A.真空干燥B.福爾馬林處理C.碘液染色D.超聲清洗【參考答案】A【詳細解析】包埋塊需真空干燥至恒重，避免切片時水分影響成像。選項B為固定步驟；C為染色；D用于微生物脫脂。【題干14】電子顯微鏡的成像顏色由什么決定？【選項】A.染色劑種類B.電子束能量C.樣品導(dǎo)電性D.照相底片類型【參考答案】A【詳細解析】重金屬染色（如醋酸鈾）與電子束作用產(chǎn)生不同顏色（灰、藍、棕）。選項B影響對比度；C-D與成像顏色無關(guān)?！绢}干15】超薄切片的刀片角度通常為？【選項】A.15°B.30°C.45°D.60°【參考答案】C【詳細解析】45°角度平衡切片效率和完整性，角度過小（A）易卷曲；過大（D）導(dǎo)致斷裂?！绢}干16】樣品固定液濃度過高會導(dǎo)致？【選項】A.結(jié)構(gòu)過度收縮B.細胞膜破裂C.酶活性恢復(fù)D.染色結(jié)合力下降【參考答案】A【詳細解析】固定液濃度過高（>2.5%戊二醛）會導(dǎo)致蛋白質(zhì)過度交聯(lián)，造成細胞收縮變形。選項B為濃度過低后果；C-D與固定無關(guān)?！绢}干17】電子顯微鏡切片的染色劑噴鍍厚度一般為？【選項】A.5-10nmB.20-30nmC.50-100nmD.200-300nm【參考答案】B【詳細解析】噴鍍20-30nm可增強成像對比度，過厚（C-D）導(dǎo)致背景噪聲增加，過?。ˋ）無法有效標記。【題干18】超薄切片制作中，包埋劑過軟會導(dǎo)致？【選項】A.切片粘連B.結(jié)構(gòu)模糊C.刀片磨損D.染色困難【參考答案】A【詳細解析】包埋劑（PMMA）硬度不足會導(dǎo)致切片時邊緣粘連，影響成像清晰度。選項B為切片過厚結(jié)果；C-D與包埋無關(guān)?！绢}干19】電子顯微鏡成像時，樣品導(dǎo)電性不足會導(dǎo)致？【選項】A.反射光增強B.陰影過深C.灰度不均D.信號干擾【參考答案】B【詳細解析】非導(dǎo)電樣品需染色劑導(dǎo)電性輔助電子束穿透，導(dǎo)電性差（如未染色）會導(dǎo)致局部陰影過深。選項A為金屬樣品特征；C-D與導(dǎo)電性無直接關(guān)聯(lián)?！绢}干20】樣品切片后，未及時染色可能引發(fā)？【選項】A.水分蒸發(fā)B.結(jié)構(gòu)崩解C.染色劑失效D.刀片鈍化【參考答案】B【詳細解析】超薄切片暴露于空氣中易脫水導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，需及時染色固定。選項A為脫水表現(xiàn)；C-D與染色時機無關(guān)。2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇3)【題干1】超薄切片的厚度范圍通?？刂圃诙嗌傥⒚?？【選項】A.0.1-1.0μmB.1.0-5.0μmC.5.0-10.0μmD.10.0-20.0μm【參考答案】A【詳細解析】超薄切片的厚度需在0.1-1.0μm范圍內(nèi)以確保電子束穿透性，過厚會導(dǎo)致圖像模糊或無法成像。其他選項的厚度范圍適用于常規(guī)光學(xué)切片或組織切片，不符合電子顯微鏡成像要求?！绢}干2】電子顯微鏡樣品制備中，鉛染色主要用于哪種組織的超薄切片染色？【選項】A.腫瘤組織B.神經(jīng)組織C.肝臟組織D.肌肉組織【參考答案】B【詳細解析】鉛染色（如Lipofuscin染色）常用于神經(jīng)組織切片，因其能特異性結(jié)合脂褐素等顆粒物質(zhì)，增強神經(jīng)細胞器的對比度。其他選項中，腫瘤組織多采用蘇木精-伊紅（H&E）染色，肝臟和肌肉組織常用甲苯胺藍或甲苯胺紫染色。【題干3】電子顯微鏡的加速電壓范圍一般為多少千伏？【選項】A.50-100kVB.100-200kVC.200-300kVD.300-400kV【參考答案】B【詳細解析】常規(guī)透射電子顯微鏡（TEM）的加速電壓多在100-200kV范圍內(nèi)，此范圍可平衡穿透力和分辨率。50-100kV適用于樣品較厚或分辨率要求不高的場景（如掃描電鏡預(yù)備），而300kV以上多用于特殊研究（如原子級成像）?！绢}干4】超薄切片刀片的材料通常為哪種金屬？【選項】A.鉻B.鈦C.鉛D.鋁【參考答案】B【詳細解析】超薄切片刀片多采用高硬度的鈦合金（如Ripps刀片），鈦的熔點高且化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不易與樣品發(fā)生反應(yīng)。鉻合金雖硬但易脆裂，鉛和鋁的硬度不足，均不適用于切片刀?！绢}干5】電子顯微鏡下觀察到的細胞器膜結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)為黑色線條，這是由于哪種技術(shù)缺陷？【選項】A.樣品未固定B.切片過厚C.染色劑未脫色D.加速電壓不足【參考答案】B【詳細解析】切片過厚會導(dǎo)致電子束在樣品中散射，使膜結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)黑色高對比度的線條（稱為“膜線”）。若切片過?。?lt;0.1μm），則膜結(jié)構(gòu)會因電子穿透而呈現(xiàn)連續(xù)灰度。其他選項中，未固定樣品會導(dǎo)致結(jié)構(gòu)崩解，未脫色染色劑會覆蓋視野?！绢}干6】冷凍超薄切片技術(shù)適用于哪種類型的生物樣品？【選項】A.固定后的石蠟包埋組織B.新鮮冷凍的細胞培養(yǎng)物C.固定后的福爾馬林組織D.脫鈣的骨組織【參考答案】B【詳細解析】冷凍超薄切片技術(shù)需在-80℃以下快速冷凍樣品，適用于新鮮或短期保存的細胞培養(yǎng)物（如貼壁細胞），避免固定劑（如甲醛）破壞細胞膜流動性。其他選項中，石蠟包埋和福爾馬林固定的組織已不適合冷凍切片?！绢}干7】電子顯微鏡樣品染色時，哪種染色劑需在染色后進行脫色處理？【選項】A.鉛鹽染色B.酞酚藍染色C.錫蘭藍染色D.錫紅染色【參考答案】C【詳細解析】錫蘭藍染色（如Masson三色染色）需在染色后用酒精脫色以去除多余染料，避免掩蓋細胞背景。鉛鹽、酞酚藍和錫紅染色多為重金屬染色，通常無需脫色，但需注意鉛鹽的毒性殘留問題?！绢}干8】超薄切片的切片方向與細胞排列方向應(yīng)如何選擇以獲得最佳成像效果？【選項】A.平行于細胞長軸B.垂直于細胞長軸C.隨機方向D.沿細胞分界線【參考答案】A【詳細解析】切片方向應(yīng)平行于細胞長軸或主要結(jié)構(gòu)（如細胞核、肌纖維），以完整保留細胞形態(tài)和空間關(guān)系。垂直切片可能截斷結(jié)構(gòu)，隨機方向易導(dǎo)致成像碎片化，沿分界線切片僅適用于特定研究?！绢}干9】電子顯微鏡樣品制備中，哪種試劑用于防止樣品在切片過程中干燥收縮？【選項】A.戊二醛B.多聚甲醛C.甘露醇D.蔗糖【參考答案】C【詳細解析】甘露醇作為滲透穩(wěn)定劑，可維持樣品體積恒定，防止切片時因干燥導(dǎo)致的形態(tài)改變。戊二醛和多聚甲醛為固定劑，主要作用是維持細胞結(jié)構(gòu)；蔗糖雖能滲透穩(wěn)定，但多用于組織塊固定而非切片防皺?！绢}干10】電子顯微鏡的分辨率與以下哪種參數(shù)成反比關(guān)系？【選項】A.放大倍數(shù)B.加速電壓C.電子束質(zhì)量D.樣品厚度【參考答案】B【詳細解析】分辨率（d）=0.61λ/NA，其中λ為電子波長，與加速電壓（V）的關(guān)系為λ=12.3/√V（nm）。因此，加速電壓升高會導(dǎo)致電子波長縮短，分辨率提高。放大倍數(shù)與分辨率無直接反比關(guān)系，高倍鏡下視野更小但分辨率由物鏡決定?！绢}干11】超薄切片的染色時間通常為多少分鐘？【選項】A.1-5分鐘B.5-10分鐘C.10-15分鐘D.15-20分鐘【參考答案】B【詳細解析】超薄切片染色時間一般為5-10分鐘，過長會導(dǎo)致染色劑堆積（尤其在鉛染色中），過短則染色不充分。具體時間需根據(jù)染色劑類型和樣品透光性調(diào)整，如錫蘭藍染色需10-15分鐘以充分著色?！绢}干12】電子顯微鏡樣品制備中，哪種操作步驟可能導(dǎo)致樣品污染？【選項】A.使用一次性鑷子夾取樣品B.在超凈臺內(nèi)操作C.使用含乙醇的洗液浸泡樣品D.紫外燈滅菌超薄切片【參考答案】C【詳細解析】含乙醇的洗液可能殘留在樣品表面，與電子顯微鏡的真空環(huán)境產(chǎn)生靜電吸附，導(dǎo)致樣品污染。其他選項中，一次性鑷子可避免交叉污染，超凈臺減少空氣中微粒，紫外燈滅菌不影響真空條件?！绢}干13】電子顯微鏡的樣品制備中，哪種步驟需在低溫環(huán)境下完成？【選項】A.固定B.脫鈣C.超薄切片D.染色【參考答案】C【詳細解析】超薄切片需在-20℃以下低溫進行，以防止樣品因溫度升高而變形或氧化。固定、脫鈣（如用乙二胺四乙酸）和染色（如鉛染色）通常在常溫或4℃下完成，但需避光防止光敏感試劑降解?！绢}干14】電子顯微鏡的像差校正技術(shù)主要解決哪種成像問題？【選項】A.樣品污染B.切片厚度不均C.電子束散射D.電壓波動【參考答案】B【詳細解析】像差校正技術(shù)（如球差校正器）可補償樣品厚度不均導(dǎo)致的圖像模糊，尤其在高倍率下顯著改善。其他選項中，樣品污染需通過操作規(guī)范避免，切片厚度不均可通過切片刀調(diào)整解決，電壓波動需由電源穩(wěn)定性保證?！绢}干15】超薄切片的染色劑若未完全脫色，會導(dǎo)致哪種觀察結(jié)果？【選項】A.細胞膜輪廓模糊B.膜結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)黑色線條C.細胞質(zhì)呈均勻灰色D.細胞核無法識別【參考答案】C【詳細解析】未脫色的染色劑會覆蓋細胞質(zhì)背景，使圖像呈現(xiàn)均勻灰色（如錫蘭藍未脫色時），而膜結(jié)構(gòu)（如核膜）因鉛染色或錫紅染色仍保留高對比度。選項A為切片過厚導(dǎo)致的膜線現(xiàn)象，選項D為切片過薄或固定不佳的結(jié)果?！绢}干16】電子顯微鏡的樣品制備中，哪種試劑用于防止樣品在切片過程中被酶解？【選項】A.戊二醛B.脲C.福爾馬林D.乙二胺四乙酸【參考答案】B【詳細解析】脲（如20%脲溶液）作為蛋白酶抑制劑，可防止樣品在切片時被內(nèi)源性或外源性酶解。戊二醛和多聚甲醛為固定劑，主要抑制酶活性；乙二胺四乙酸（EDTA）用于脫鈣而非防酶解。【題干17】電子顯微鏡的樣品支持膜（grids）的孔徑通常為多少微米？【選項】A.0.02μmB.0.05μmC.0.1μmD.0.2μm【參考答案】C【詳細解析】標準支持膜的孔徑為0.1μm（100目），既能允許電子束穿透，又可防止樣品顆粒（如細胞器）脫落。0.02μm（2000目）多用于原子級成像，孔徑過大會導(dǎo)致樣品移位；0.05μm（300目）和0.2μm（50目）均不符合常規(guī)需求?！绢}干18】超薄切片的切片方向與細胞分裂面的關(guān)系如何影響成像？【選項】A.平行于分裂面B.垂直于分裂面C.任意方向D.沿染色體走向【參考答案】B【詳細解析】切片方向垂直于細胞分裂面（如M期中期染色體排列）可完整顯示染色體形態(tài)（如V型中期染色體）。平行于分裂面可能導(dǎo)致染色體分散或切片僅截取部分結(jié)構(gòu)，任意方向或沿染色體走向（如染色體分離時）可能破壞細胞器排列?！绢}干19】電子顯微鏡的樣品制備中，哪種操作步驟需在超凈臺內(nèi)完成？【選項】A.固定B.脫鈣C.切片D.染色【參考答案】C【詳細解析】超薄切片需在超凈臺內(nèi)進行，以避免空氣中微粒污染樣品（如切片邊緣出現(xiàn)顆粒狀陰影）。固定、脫鈣和染色可在常溫臺面操作，但需注意避光和防塵?！绢}干20】電子顯微鏡的樣品制備中，哪種步驟需使用含鈣的試劑？【選項】A.固定B.脫鈣C.超薄切片D.染色【參考答案】B【詳細解析】脫鈣步驟需使用含鈣的試劑（如乙二胺四乙酸或鹽酸）溶解鈣鹽沉積的硬組織（如骨組織），使樣品變軟便于切片。固定、切片和染色均不涉及鈣試劑，染色劑中的鈣（如鉛鹽）需在染色后徹底清洗。2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇4)【題干1】超薄切片的厚度范圍通常為多少微米？【選項】A.5-10μmB.0.5-1μmC.2-3μmD.0.1-0.5μm【參考答案】B【詳細解析】超薄切片的厚度需控制在0.5-1μm范圍內(nèi)，以確保電子束穿透性并減少散射。選項A的厚度過大會導(dǎo)致切片不透明，選項C和D的厚度過小易造成切片斷裂或成像模糊?！绢}干2】電子顯微鏡樣品固定常用哪種方法？【選項】A.戊二醛固定B.福爾馬林固定C.戊二醛-多聚甲醛混合固定D.甲醇固定【參考答案】C【詳細解析】電子顯微鏡樣品需使用戊二醛-多聚甲醛混合固定劑，既能保持細胞結(jié)構(gòu)又避免過度收縮。選項A僅用戊二醛可能固定不徹底，選項B福爾馬林含水量高易導(dǎo)致樣品腫脹，選項D甲醇會破壞大分子結(jié)構(gòu)?！绢}干3】超薄切片修磨刀片的主要作用是？【選項】A.增加切片透明度B.提高切片完整性C.減少切片厚度D.改善切片邊緣銳度【參考答案】D【詳細解析】修磨刀片通過拋光作用消除切片邊緣毛糙，使成像更清晰。選項A和C與修磨無直接關(guān)聯(lián)，選項B的完整性需通過切片厚度控制實現(xiàn)。【題干4】電子顯微鏡標本染色常用哪種染色劑？【選項】A.煌綠B.龍膽紫C.鐵蘇木精D.草酸銨【參考答案】C【詳細解析】鐵蘇木精是電子顯微鏡常用染色劑，與重金屬結(jié)合形成深色顆粒增強對比度。選項A和B為光學(xué)顯微鏡染色劑，選項D草酸銨主要用于固定而非染色?！绢}干5】超薄切片制作過程中，切片機切片速度一般為？【選項】A.10-20μm/sB.50-100μm/sC.100-200μm/sD.200-300μm/s【參考答案】B【詳細解析】切片機速度需平衡切片完整性和效率，50-100μm/s可減少熱損傷并保持切片連續(xù)性。選項A過慢易導(dǎo)致切片斷裂，選項C和D速度過快易產(chǎn)生毛邊。【題干6】電子顯微鏡鏡筒長度通常為？【選項】A.50cmB.80cmC.120cmD.150cm【參考答案】B【詳細解析】透射電子顯微鏡標準鏡筒長度為80cm，確保電子束聚焦精度和成像分辨率。選項A過短影響景深，選項C和D超出常規(guī)設(shè)計范圍?！绢}干7】超薄切片染色時間一般為？【選項】A.1-3分鐘B.5-10分鐘C.15-20分鐘D.30-60分鐘【參考答案】B【詳細解析】染色時間需足夠使染色劑滲透但避免切片卷曲，5-10分鐘可平衡染色效果與結(jié)構(gòu)保留。選項A時間過短染色不充分，選項C和D易導(dǎo)致切片變形?！绢}干8】電子顯微鏡樣品制備中，修磨工具的正確順序是？【選項】A.砂紙→金剛石磨刀→拋光布B.金剛石磨刀→砂紙→拋光布C.拋光布→砂紙→金剛石磨刀D.砂紙→拋光布→金剛石磨刀【參考答案】A【詳細解析】修磨順序應(yīng)從粗到細：砂紙去除大顆?！饎偸サ都毣鷴伖獠紝崿F(xiàn)鏡面效果。選項B順序顛倒導(dǎo)致殘留粗糙面，選項C和D順序錯誤影響最終質(zhì)量?！绢}干9】超薄切片厚度過大會導(dǎo)致哪種問題？【選項】A.切片易斷裂B.成像模糊C.樣品固定不牢D.染色劑滲透困難【參考答案】B【詳細解析】過厚切片（>1μm）會阻礙電子束穿透，產(chǎn)生散射導(dǎo)致圖像模糊。選項A切片斷裂多因刀片過鈍或壓力過大，選項C與切片厚度無關(guān)，選項D滲透困難多因切片過薄?！绢}干10】電子顯微鏡的加速電壓范圍一般為？【選項】A.50-100kVB.100-200kVC.200-300kVD.300-500kV【參考答案】B【詳細解析】常規(guī)透射電子顯微鏡加速電壓為100-200kV，平衡穿透力和分辨率。選項A電壓過低導(dǎo)致樣品過暗，選項C和D電壓過高易造成樣品損傷?！绢}干11】超薄切片染色劑比例一般為？【選項】A.1:1:1（蘇木精-伊紅-緩沖液）B.1:2:1（蘇木精-伊紅-緩沖液）C.2:1:2（蘇木精-伊紅-緩沖液）D.1:1:2（蘇木精-伊紅-緩沖液）【參考答案】B【詳細解析】標準染色比例為蘇木精：伊紅：緩沖液=1:2:1，確保染色對比度與背景平衡。選項A比例不足導(dǎo)致染色不深，選項C和D比例失衡影響染色效果。【題干12】電子顯微鏡樣品制備中，包埋劑的作用是？【選項】A.固定細胞結(jié)構(gòu)B.提高切片透明度C.增強染色效果D.減少切片厚度【參考答案】A【詳細解析】包埋劑（如環(huán)氧樹脂）通過滲透固定細胞并支撐超薄切片，選項B透明度需通過切片厚度控制，選項C染色效果依賴染色劑類型，選項D與包埋無關(guān)。【題干13】超薄切片制作中，切片機切片角度一般為？【選項】A.30°B.45°C.60°D.90°【參考答案】B【詳細解析】切片機角度45°可減少切片邊緣毛糙并保持連續(xù)性，選項A角度過小易產(chǎn)生斷裂，選項C和D角度過大影響切片完整性?！绢}干14】電子顯微鏡的物鏡光闌直徑一般為？【選項】A.2μmB.5μmC.10μmD.20μm【參考答案】B【詳細解析】物鏡光闌標準直徑為5μm，平衡分辨率與景深。選項A過小導(dǎo)致圖像過暗，選項C和D過大影響對比度?！绢}干15】超薄切片染色后需進行哪種處理？【選項】A.蒸餾水洗B.乙醇脫水C.包埋D.烤干【參考答案】A【詳細解析】染色后需用緩沖液終止反應(yīng)并去除多余染色劑，蒸餾水洗可恢復(fù)pH平衡。選項B乙醇脫水適用于光學(xué)顯微鏡，選項C和D操作順序錯誤。【題干16】電子顯微鏡樣品制備中，修磨時間一般為？【選項】A.5-10分鐘B.10-15分鐘C.15-20分鐘D.20-30分鐘【參考答案】C【詳細解析】修磨時間需足夠消除切片表面粗糙，15-20分鐘可平衡效率與質(zhì)量。選項A時間過短殘留毛糙面，選項B和D時間不足或過長影響成像。【題干17】超薄切片厚度過小會導(dǎo)致哪種問題？【選項】A.切片易斷裂B.成像模糊C.染色劑滲透困難D.樣品固定不牢【參考答案】B【詳細解析】過薄切片（<0.5μm）會因電子束散射導(dǎo)致圖像模糊。選項A斷裂多因刀片過鈍，選項C滲透困難與切片厚度無關(guān)，選項D與固定無關(guān)?！绢}干18】電子顯微鏡的樣品臺溫度控制范圍一般為？【選項】A.0-10℃B.10-25℃C.25-40℃D.40-60℃【參考答案】B【詳細解析】樣品臺溫度需穩(wěn)定在10-25℃以避免熱對流干擾成像，選項A溫度過低導(dǎo)致樣品脆化，選項C和D溫度過高影響分辨率?！绢}干19】超薄切片染色劑鐵蘇木精的濃度一般為？【選項】A.1%B.2%C.3%D.4%【參考答案】B【詳細解析】鐵蘇木精標準濃度為2%，過高易導(dǎo)致切片過染，過低則對比度不足。選項A濃度過低，選項C和D濃度過高?！绢}干20】電子顯微鏡的電子束波長與加速電壓的關(guān)系為？【選項】A.隨電壓升高而縮短B.隨電壓升高而延長C.無關(guān)D.先縮短后延長【參考答案】A【詳細解析】根據(jù)公式λ=12.26/√V（V為電壓，單位kV），加速電壓升高會導(dǎo)致電子束波長縮短，成像分辨率提高。選項B與公式相反，選項C和D不符合物理規(guī)律。2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇5)【題干1】電子顯微鏡樣品固定時，哪種試劑常用于生物大分子結(jié)構(gòu)的保存？【選項】A.戊二醛B.甲醛C.冰凍固定D.乙醇固定【參考答案】A【詳細解析】戊二醛能與生物大分子交聯(lián)，保持三維結(jié)構(gòu)，適用于保存蛋白質(zhì)和核酸。甲醛會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，冰凍固定適用于含水量高的組織，乙醇固定多用于脫水保存?！绢}干2】超薄切片的厚度范圍通常為多少納米？【選項】A.100-200nmB.200-500nmC.60-80nmD.500-1000nm【參考答案】C【詳細解析】超薄切片需控制在60-80nm以適應(yīng)電子顯微鏡的穿透力，過厚會導(dǎo)致圖像模糊，過薄則樣品易碎裂?！绢}干3】哪種染色技術(shù)能增強電子顯微鏡圖像的對比度？【選項】A.硫黃素染色B.醋酸鈾染色C.鐵蘇木精染色D.熒光染色【參考答案】B【詳細解析】醋酸鈾染色通過形成重金屬復(fù)合物結(jié)合生物分子，產(chǎn)生明暗對比；硫黃素染色多用于熒光顯微鏡，鐵蘇木精用于光學(xué)顯微鏡，熒光染色需特殊激發(fā)光源。【題干4】電子顯微鏡成像時，哪種電子束參數(shù)影響圖像分辨率？【選項】A.加速電壓20kVB.加速電壓80kVC.電子束斑直徑2nmD.電子束斑直徑5nm【參考答案】C【詳細解析】電子束斑直徑越?。ㄈ?nm），分辨率越高，但需配合更高加速電壓（80kV）以平衡穿透深度。20kV電壓下需更大束斑，5nm束斑會導(dǎo)致衍射效應(yīng)顯著?！绢}干5】超薄切片制作完成后，應(yīng)如何保存？【選項】A.室溫避光保存B.4℃短期保存C.-20℃長期保存D.真空干燥保存【參考答案】B【詳細解析】4℃保存可抑制微生物活動和酶解，避免切片褶皺或污染。長期保存需-20℃冷凍，真空干燥會導(dǎo)致切片脫水變形?！绢}干6】哪種固定液對細胞膜結(jié)構(gòu)破壞最??？【選項】A.戊二醛-甲醛混合液B.戊二醛單獨固定C.甲醇固定D.丙酮固定【參考答案】B【詳細解析】戊二醛單獨固定通過交聯(lián)作用保持膜流動性，甲醛易使膜脂質(zhì)過氧化。甲醇和丙酮為有機溶劑，會溶解膜脂質(zhì)?！绢}干7】超薄切片中常用哪種染色劑結(jié)合重金屬？【選項】A.鉀鹽染色B.錫鹽染色C.鉛鹽染色D.銻鹽染色【參考答案】C【詳細解析】鉛鹽（如醋酸鉛）與生物大分子結(jié)合后產(chǎn)生特征性暗視野圖像，鉀鹽多用于光學(xué)顯微鏡，錫鹽用于特殊組織染色?！绢}干8】電子顯微鏡樣品制備時，哪一步驟需在低溫環(huán)境下進行？【選項】A.固定B.脫水C.軟化D.包埋【參考答案】B【詳細解析】脫水需在低溫（-20℃）下進行以避免蛋白質(zhì)變性，常采用丙酮或乙醇梯度脫水。固定和包埋可在室溫完成?！绢}干9】哪種切片機適用于硬質(zhì)組織超薄切片？【選項】A.