從而測(cè)得抗菌藥物的最低抑菌濃度MIC和最低殺菌濃度MBC從而測(cè)得抗菌藥物的最低抑菌濃度MIC和最低殺菌濃度MBC從而測(cè)得抗菌藥物的最低抑菌濃度MIC和最低殺菌濃度MBC教學(xué)目的：

１、懂得體外抗菌試驗(yàn)的應(yīng)用。

２、熟記最小抑菌濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MBC）概念。

３、熟知常用的體外抗菌試驗(yàn)的措施和影響原因。

教學(xué)重點(diǎn)：１、最小抑菌濃度和最小殺菌濃度。２、液體稀釋法和濾紙片法的原理和措施。教學(xué)難點(diǎn)：１、最小抑菌濃度和最小殺菌濃度的概念。２、用液體稀釋法測(cè)定MIC和MBC值的原理和措施。３、濾紙片法的測(cè)定原理和措施。教學(xué)目的：

１、懂得體外抗菌試驗(yàn)的應(yīng)用。

２、熟記最小抑菌濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MBC）概念。

３、熟知常用的體外抗菌試驗(yàn)的措施和影響原因。

教學(xué)重點(diǎn)：１、最小抑菌濃度和最小殺菌濃度。２、液體稀釋法和濾紙片法的原理和措施。教學(xué)難點(diǎn)：１、最小抑菌濃度和最小殺菌濃度的概念。２、用液體稀釋法測(cè)定MIC和MBC值的原理和措施。３、濾紙片法的測(cè)定原理和措施。第七章藥物體外抗菌試驗(yàn)第一節(jié)藥物體外抗菌試驗(yàn)一、稀釋法稀釋法是在培養(yǎng)基中具有按幾何級(jí)數(shù)稀釋的抗菌藥物中,接種待試菌液，經(jīng)培養(yǎng)后，觀測(cè)成果，從而測(cè)得抗菌藥物的最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC)，并可根據(jù)該抗菌藥物在血液內(nèi)的濃度,來(lái)推測(cè)臨床療效。最低抑菌濃度(MIC)是指藥物能克制微生物生長(zhǎng)的最低濃度，一般用μg/ml或U/ml來(lái)表達(dá)；最低殺菌濃度(MBC)是指藥物能殺死微生物的最低濃度，也常用μg/ml或U/ml來(lái)表達(dá)。MIC和MBC都可以用來(lái)評(píng)價(jià)藥物抑菌或殺菌作用的強(qiáng)弱，數(shù)值越小，藥物的作用越強(qiáng)。稀釋法重要有液體培養(yǎng)基稀釋法和固體培養(yǎng)基稀釋法。1．液體培養(yǎng)基稀釋法在一系列試管中，用液體培養(yǎng)基將藥物稀釋，使各管內(nèi)具有的藥物呈一系列遞減的濃度，然后在每支試管內(nèi)加入一定量的試驗(yàn)菌。在35℃下培養(yǎng)24-48小時(shí)后，肉眼觀測(cè)各試管的渾濁狀況，記錄能克制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度即為MIC。深入將未長(zhǎng)菌試管內(nèi)的培養(yǎng)液移種到新鮮的瓊脂培養(yǎng)基上，如重新長(zhǎng)出細(xì)菌闡明該濃度只有抑菌作用，如無(wú)菌生長(zhǎng)則認(rèn)為該濃度具有殺菌作用，記錄為MBC（圖7-1）2．固體培養(yǎng)基稀釋法（1）平板法此法合用于同步測(cè)定一種藥物對(duì)大批試驗(yàn)菌株MIC。（2）試管法此法合用于需長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)而用平板又易于污染的試驗(yàn)菌，如霉菌有孢子易分散污染環(huán)境，結(jié)核桿菌培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)（需一種月），易導(dǎo)致污染，都不適宜用平板法，而使用本法。二、瓊脂擴(kuò)散法運(yùn)用抗菌藥物可以在瓊脂培養(yǎng)基中擴(kuò)散并能在一定濃度范圍內(nèi)克制細(xì)菌生長(zhǎng)的原理進(jìn)行抗菌試驗(yàn)。1．濾紙片法常用于新藥的初步篩選試驗(yàn)，用來(lái)初步判斷新藥與否具有抗菌作用，也用于病原性細(xì)菌的藥物敏感試驗(yàn)，以測(cè)定臨床分離的某種細(xì)菌對(duì)多種藥物的敏感強(qiáng)度，供醫(yī)生選用治療藥物時(shí)參照。抑菌圈大小的解釋和判斷見(jiàn)P113-1142．挖溝法常用于測(cè)試一種藥物對(duì)幾種細(xì)菌的抗菌作用。這種措施是先制備一般瓊脂平板，然后在平板上挖直溝，在溝內(nèi)滴加藥液。在溝兩側(cè)接種細(xì)菌（圖7-2）。經(jīng)培養(yǎng)后觀測(cè)細(xì)菌生長(zhǎng)狀況，由溝和細(xì)菌間的抑菌距離來(lái)判斷該藥物對(duì)這些細(xì)菌的抗菌能力。先制備含菌平板，然后在平板上打若干個(gè)洞，在洞內(nèi)加入藥液。培養(yǎng)后觀測(cè)各洞周圍細(xì)菌的生長(zhǎng)狀況，根據(jù)各洞抑菌圈的大小來(lái)判斷多種藥物對(duì)該菌的抗菌能力（圖7-3）。此法合用于多種藥物對(duì)一種細(xì)菌的抗菌能力的測(cè)定。3．打洞法

檢查兩種抗菌藥物在聯(lián)合應(yīng)用時(shí)的互相作用，兩種藥物產(chǎn)生的作用之間既也許產(chǎn)生互相影響，也也許彼此間沒(méi)有影響（無(wú)關(guān)）。產(chǎn)生影響時(shí)，既也許是互相加強(qiáng)（協(xié)同作用），也也許是互相減弱（拮抗作用）。在已經(jīng)接種過(guò)細(xì)菌的平板上，垂直放置兩條浸有不一樣藥液的濾紙條，經(jīng)培養(yǎng)后根據(jù)兩種藥液形成抑菌區(qū)的圖形來(lái)判斷這兩種藥物對(duì)該細(xì)菌的作用是無(wú)關(guān)、拮抗還是協(xié)同（圖7-4）。三、聯(lián)合抗菌試驗(yàn)法(紙條試驗(yàn))聯(lián)合抗菌試驗(yàn)法(紙條試驗(yàn))成果1．菌種

在抗菌試驗(yàn)中所用的菌種，必須是國(guó)家衛(wèi)生部生物制品檢定所菌種保藏中心提供的原則菌株。在某些特定狀況下需要應(yīng)用臨床分離的菌株時(shí)，則必須用通過(guò)嚴(yán)格鑒定、純化及合理保藏的菌株。四、影響抗菌試驗(yàn)的原因2．培養(yǎng)基培養(yǎng)基要根據(jù)試驗(yàn)菌種的規(guī)定配制，所用的原料、成分必須控制質(zhì)量，制備過(guò)程必須規(guī)范，培養(yǎng)基內(nèi)不能具有藥物的對(duì)抗物或使藥物活性減少的成分。3．抗菌藥物

藥物的物理狀態(tài)、濃度、稀釋措施等可直接影響抗菌試驗(yàn)的效果，規(guī)定精確配制。固體藥物必須制成溶液，難溶于水的藥物要用有機(jī)溶劑或酸堿溶解后再使用。藥物溶液的pH值應(yīng)盡量靠近中性，以保證藥物的穩(wěn)定性和不影響細(xì)菌的生長(zhǎng)。4．對(duì)照試驗(yàn)為保證試驗(yàn)的精確性和科學(xué)性，必須嚴(yán)格設(shè)置多種對(duì)照試驗(yàn)。對(duì)照菌種應(yīng)在無(wú)藥的狀況下，在培養(yǎng)基內(nèi)正常生長(zhǎng)；已知藥物對(duì)照，應(yīng)使已知抗菌藥物對(duì)原則菌株出現(xiàn)抗菌效應(yīng)。小結(jié):

1、何謂ＭＩＣ和ＭＢＣ？

2、藥物體外抗菌試驗(yàn)的措施常用的有什么措施？

3、影響藥物體外抗菌試驗(yàn)的原因有哪幾種？作業(yè)：

Ｐ：１２９（１、２）一、填空題（將對(duì)的答案填入空內(nèi)）１、藥物的體外抗菌試驗(yàn)具有＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿等方面的用途，運(yùn)用抗菌試驗(yàn)還可以區(qū)別藥物是屬于殺菌劑還是克制，它們之間的區(qū)別是在于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。體外抗菌試驗(yàn)常有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿措施。２、聯(lián)合藥敏試驗(yàn)的目的是為了＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的特殊規(guī)定而進(jìn)行的，一般可有＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿四種成果。二、是非題：如錯(cuò)誤，請(qǐng)?jiān)阱e(cuò)處用筆劃出，并改正。１、抑菌劑是指清除了該藥物后