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第2節(jié)同生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

第1課時(shí)生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

課標(biāo)內(nèi)容要求核心素養(yǎng)對(duì)接

1.闡明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得

純凈的微生物培養(yǎng)物的前提。1.根據(jù)微生物的代謝類(lèi)型分析培

2.闡明無(wú)菌技術(shù)是在操作過(guò)程養(yǎng)基的紐成；比較消毒和滅菌方

中，保持無(wú)菌物品與無(wú)菌區(qū)域不法的不同。

被微生物污染的技術(shù)。2.討論并掌握無(wú)菌技術(shù)的實(shí)驗(yàn)操

3.概述平板劃線法和稀釋涂布平作方法；討論并掌握微生物的純

板法是實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物分離和培養(yǎng)的方法。

純化的常用方法。

必備知識(shí)-自主預(yù)習(xí)儲(chǔ)備

一、培養(yǎng)基的配制

1.培養(yǎng)基

人們按照微生物對(duì)食養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生代繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)一培

養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。

2.培養(yǎng)基的種類(lèi)

（液體培養(yǎng)基：不含凝固劑、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基

按物理性質(zhì)分類(lèi)11（加入凝固劑，如瓊脂）

固體培養(yǎng)基：呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基

微思考

培養(yǎng)基可以培養(yǎng)病毒嗎？

提示：病毒為非細(xì)胞生物，只能在活細(xì)胞中營(yíng)寄生生活，不能利用人工培養(yǎng)基來(lái)

培養(yǎng)。

3.培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組成

⑴主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無(wú)

機(jī)鹽。

⑵常見(jiàn)的細(xì)菌培養(yǎng)基——牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成

組分含量提供的主要營(yíng)養(yǎng)

牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸鹽和維生素等

蛋白陳10g碳源、氮源和維生素等

NaCl5g無(wú)機(jī)鹽

H2O定容至1000mL水

⑶培養(yǎng)基還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如：

在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培

養(yǎng)基調(diào)至酸性;在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性;在培養(yǎng)厭

氧微生物時(shí)，需要提供無(wú)氧的條件。

二、無(wú)菌技術(shù)

1,獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵

防止雜菌污染。

2.消毒與滅菌

⑴概念

①消毒：使用較為退泡的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微

生物。

②滅菌：使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽胞和他子。

⑵類(lèi)型與方法

連一連：將無(wú)菌技術(shù)類(lèi)型、常用方法和適用對(duì)象用線連起來(lái)。

畫(huà)園畫(huà)

a.灼燒滅菌I.接種針（環(huán)）

b.干熱滅菌II.操作空間（接種室）

①消毒

c巴氏消毒III.培養(yǎng)皿

d.紫外線消毒W(wǎng).牛奶等不耐高溫液體

⑨滅菌

&化學(xué)藥物（酒精）V.操作者雙手

匕高壓蒸汽滅菌VI.培養(yǎng)基

vn.試管口

提示:

[^\|方法|pti]

a.灼燒滅--------I.接種針(環(huán))

①消毒《/b.干熱滅菌'/II.操作空間(接種室)

族c.巴氏消毒工^x川.培養(yǎng)皿

②滅菌紫外線消毒木M牛奶等不耐高溫液體

。.化學(xué)藥物(酒精2V操作者雙手

'f.高壓蒸汽滅菌一V.培界基

試管口

3.具體操作

⑴對(duì)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和渣囊。

⑵將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。

(3)為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，許多實(shí)驗(yàn)操作都應(yīng)在超凈工作臺(tái)上并在迫

精燈火焰附近進(jìn)行。

(4)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免己經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲方佑|。

微思考

無(wú)菌技術(shù)除用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么作用？

提示：無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。

三、微生物的純培養(yǎng)

1.純培養(yǎng)

在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi),在合適條件下形成的含特定種類(lèi)微生物的群

體稱(chēng)為培養(yǎng)物。由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱(chēng)為純培養(yǎng)物,獲得純培養(yǎng)

物的過(guò)程就是純培養(yǎng)。

2.微生物純培養(yǎng)的步驟

微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、父離和培養(yǎng)等步驟。

3.菌落及獲得方法

(1)菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見(jiàn)

的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。

⑵獲得單菌落的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

4.酵母菌的純培養(yǎng)

馬鈴普去皮切塊加水煮沸一過(guò)漉一向源液中

I培賓闔力II入20g前萄糖、15~20g瓊脂一用蒸溜水

定容至1000mL

制

備占「培養(yǎng)基滅菌：高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌15?30min

培耍

養(yǎng)畢兒培養(yǎng)皿滅菌：干熱滅菌箱內(nèi),在160~17(PC的熱

基

空氣中滅菌2K

磁回_%穗落犍里工左右時(shí),在酒精燈

接種和分一菌種豁稀釋分散黑3單菌落

周醉母菌

培養(yǎng)

倒置平板?左右的恒溫培遜中培養(yǎng)傘

醉母菌28℃248h

5.倒平板的具體操作

①拔出銖②將瓶口③用拇指和食指格培④等待培養(yǎng)

形瓶的迅速通過(guò)養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于基冷卻凝固

棉塞?；鹧?一瓶口的縫隙,將用養(yǎng)后.將培養(yǎng)

基(1()?20mL)倒入培皿倒過(guò)來(lái)放

養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋,置一

6.平板劃線的具體操作

①將接種環(huán)放②在火焰旁冷卻③將試管口④在火焰附

在火焰上灼燒.接種環(huán)。同時(shí)，通過(guò)火焰。近用接種環(huán)

宜到接種壞的拔出裝有醉母菌一趣取一環(huán)菌

金屬絲燒紅。培養(yǎng)液的試管的

⑤將武管口⑥在火焰附近將⑦灼燒接種環(huán),待其冷卻

通過(guò)火焰，培養(yǎng)皿打開(kāi)一條后，從第一次劃線的末端

并塞上棉塞?？p隙,用接種環(huán)開(kāi)始作第二次劃線。幣:復(fù)

襦養(yǎng)基表而迅以上操作［作第三、四、

速劃三至五條壬五次劃線，注意不要將呈

行線,蓋上IHL馥后-?次的劃線與第一次閑

劃線和連。

硼微思考

劃線操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線末端

開(kāi)始劃線。這樣做的目的是什么？

提示：將聚集的菌種逐步稀釋以便得到單個(gè)細(xì)胞繁殖形成的菌落。

判一判>（正確的打“，錯(cuò)誤的打"X”）

1.液體培養(yǎng)基含有水，而固體培養(yǎng)基不含水。（X）

提示：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基都含有水，它們的區(qū)別為是否含有凝固劑。

2.獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。（V）

3.用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基都要進(jìn)行消毒。（X）

提示：用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基都要進(jìn)行滅菌。

4.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌。（X）

提示：培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿之前要進(jìn)行滅菌。

5.平板冷凝后應(yīng)將平板倒置，防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。（J）

6.接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過(guò)灼燒來(lái)滅菌。（V）

關(guān)鍵能力.重難探究達(dá)成丁——

魔隹建七培養(yǎng)基的配制

［合作修完］

資料r配制培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基

稱(chēng)取去皮的馬鈴薯200g,切成小塊，加水1000mL,加熱煮沸至馬鈴薯軟爛，

用紗布過(guò)濾。向?yàn)V液中加入20g葡萄糖（也可用咸糖代替）、15?20g瓊脂，用蒸

僮水定容至1000mLo

資料2100g馬鈴薯中含有80g水、2g蛋白質(zhì)、16g碳水化合物，還有維

生素、無(wú)機(jī)鹽等。

結(jié)合上述資料和教材第10頁(yè)中的“表1?11000mL牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的營(yíng)

養(yǎng)構(gòu)成“，分析并回答下列問(wèn)題。

1.按物理性質(zhì)劃分，上述兩種培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基分別是什么種類(lèi)？

提示：由于瓊脂是凝固劑，所以培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，而牛肉膏蛋

白膝培養(yǎng)基未加凝固劑，是液體培養(yǎng)基。

2.為什么各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源？

提示：微生物的化學(xué)組成大體相同，主要由C、H、O、N、P、S等大量元素和

Fe、Mn>Cu、Zn>B、Mo等微量元素組成，這些元素最終來(lái)自外界環(huán)境中的

各種有機(jī)物和無(wú)機(jī)物。

3.培養(yǎng)所有微生物的培養(yǎng)基中都需要加入碳源、氮源嗎？

提示：不是。自養(yǎng)型微生物能利用無(wú)機(jī)碳源（比如空氣中的CO2）,培養(yǎng)基中不用

添加碳源；固氮微生物可利用N2作為氟源，培養(yǎng)基中不用加入氟源。

［深化歸納］

1.培養(yǎng)基的成分及功能

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作用功能主要來(lái)源

無(wú)機(jī)碳源：CO2、

構(gòu)成生物體的細(xì)胞

NaHCCh等；有機(jī)

碳能為微生物代謝提物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)

碳源：糖類(lèi)、脂

源供碳元素物，有些是異養(yǎng)生

質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)

物的能源物質(zhì)

酸等

無(wú)機(jī)化合物：N2、

合成蛋白質(zhì)、核酸NH3、錢(qián)鹽、硝酸

氮能為微生物代謝提

以及含氮的代謝產(chǎn)鹽等；有機(jī)氮源：

源供氮元素

物尿素、牛肉膏、蛋

白陳等

微生物生長(zhǎng)不可缺酶和核酸的組成成維生素、氨基

生長(zhǎng)因子

少的微量有機(jī)物分酸、堿基等

不僅是優(yōu)良的溶

是生命活動(dòng)所必需劑，而且可維持生

水外界攝入

的物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)

定

為微生物提供除

碳、氮以外的各種維持細(xì)胞的酸堿平

無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)化合物

重要元素，包括大衡等

量元素和微量元素

2.幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)和能量來(lái)源

微生物碳源氮源能源

藍(lán)細(xì)菌NH；、NO］等光能

co2

硝化細(xì)菌CO2N%NH3的氧化

糖類(lèi)、蛋白

大腸桿菌蛋白質(zhì)等有機(jī)物

質(zhì)等有機(jī)物

［對(duì)點(diǎn)練習(xí)］

1.下列關(guān)于微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的描述，正確的是（）

A.所有碳源都能為微生物生長(zhǎng)提供能源

B.蛋白陳能為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供碳源、氮源和維生素

C.硝酸鉀只能為微生物生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)鹽

D.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)越多，微生物生長(zhǎng)繁殖越快

B［有機(jī)碳源能為異養(yǎng)微生物提供碳源和能源，無(wú)機(jī)碳源只能為自養(yǎng)微生物提

供碳源，不能提供能源,A項(xiàng)錯(cuò)誤;硝酸鉀能為微生物生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)鹽和氮源等，

C項(xiàng)錯(cuò)誤；培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需要控制一定的含量和比例，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量太多

會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基滲透壓過(guò)高，從而抑制微生物的生長(zhǎng)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

2.下列有關(guān)培養(yǎng)基配制原則的表述，正確的是（）

A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水

B.碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素

C.微生物的生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)因素影響外，還受溫度、pH、氧氣、滲透壓等的影響

D.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好

C［培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，但不是必須全部含

有，如自養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基中可以不含碳源，A項(xiàng)錯(cuò)誤；碳源和氮源必須具有一

定比例，但碳元素的含量不一定最多，B項(xiàng)錯(cuò)誤；微生物的生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)因素影

響外，還受溫度、pH、氧氣、滲透壓等的影響，C項(xiàng)正確；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)高

可能會(huì)造成微生物滲透失水而死亡，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

避空?qǐng)De無(wú)菌技術(shù)

［合作探究］

“無(wú)菌技術(shù)”與人們的生活息息相關(guān)。在日常生活、生產(chǎn)實(shí)踐以及自身健康

的防護(hù)中，經(jīng)常用到“無(wú)菌操作”的方法。

1.無(wú)菌技術(shù)包括消毒和滅菌，消毒和滅菌的作用原理是什么？?jī)烧叩膮^(qū)別是什

么？

提示：消毒和滅菌都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，借此殺死微生物。滅菌可殺死處

理材料中的全部微生物（包括芽孑包和瓶子），而消毒僅殺死部分微生物（一般不包

括芽施和瓶子）。

2.常用酒精擦拭雙手是預(yù)防新冠病毒感染的日常防護(hù)措施之一，這是消毒還是

滅菌？體積分?jǐn)?shù)為70%和95%的酒精，哪種效果更好？為什么？

提示：酒精擦拭屬于消毒。酒精消毒時(shí)，70%的酒精殺菌效果最好。濃度過(guò)高，

使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜，酒精分子不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌

能力減弱。

3.對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)者的雙手、空氣和牛奶常采用的滅菌或消

毒方法分別是什么？

提示：分別為高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)藥物消毒、紫外線消毒、

巴氏消毒。

「深化歸納］

1.消毒和滅菌的比較

、___?、____/

YY

較為溫和的物理、*下段強(qiáng)度?較為強(qiáng)烈的理化方法

化學(xué)或生物等方法

僅殺死物體表面或殺死物體內(nèi)外所行的微

*作用效果，

內(nèi)部一部分微生物生物.包括芽胞和胞子

操作空間、活體生__

操作工具、玻璃器I皿、

物材料、操作者的*適用對(duì)象?培養(yǎng)基等

衣著和雙手I

煮沸消毒法、巴氏,灼燒滅菌法、干熱滅菌

消毒法、化學(xué)藥物*常用方法?法、濕熱滅菌法（如高

消毒法、紫外線消--------壓蒸汽滅菌法）

毒法

2.不同消毒方法的特點(diǎn)

。）

污雜A射回可兩”

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菌止D照請(qǐng)不這_能鉀

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毒物死消染品灼線菌，_。

蛋目物菌蛋精力照熱熱和驗(yàn)毒_氯

消生物等圍毒_其果“

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內(nèi)營(yíng)精表菌外進(jìn)紫周消_效

毒巴膜■微的行圍燒消時(shí)_毒填

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消護(hù).使E菌周上合灼過(guò)的__

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到%,保低能酚菌具照。_消_

體相的0通在雜中與焰配行通。__

達(dá)7高層過(guò)功;煤滅確質(zhì)溫_射_

菌法的是火時(shí)用線化

而為過(guò)一度的的或免箱具進(jìn)常菌高_(dá)_

使毒目要果汽料正_照_

從數(shù)度成濃酸目酸避用燈同要外經(jīng)材_強(qiáng)_

以.消毒主效菌蒸滅或_線_

分濃固；核的炭毒酚材紫D可

可活沸消線術(shù)滅料精都，熱_

積精凝中外壞毒石消壓的，屬法_外過(guò)

溫失煮到材酒苯用_,

體酒而其紫破消灑強(qiáng)技熱環(huán)中干毒__

高性與高理果紫_經(jīng)

達(dá)菌干的在灑種采踐金行__

原理優(yōu)點(diǎn)是處常效消_用_是

0無(wú)入理要噴接實(shí)和進(jìn)__

if外消氏采常

處都室法菌，氣毒__

紫紋毒用放研中巳_可_通

菌環(huán)驗(yàn)方滅后空消璃__

利應(yīng)科箱用_氣水

滅種實(shí)的已前的的_灑

?；筒＞蒧空來(lái)

已接對(duì)菌免種內(nèi)間_噴

時(shí)養(yǎng)活，滅常自

免的后滅避接間空是的量

養(yǎng)培生中熱的

避后束基應(yīng)次空閉：毒點(diǎn)內(nèi)適

培的、室干應(yīng)

中前結(jié)養(yǎng)中每閉密題消優(yōu)間，

一物好產(chǎn)驗(yàn)入供

習(xí)驗(yàn)種驗(yàn)培驗(yàn)，密對(duì)問(wèn)的的空前

生制生實(shí)放廠

練實(shí)接實(shí)對(duì)［實(shí)染，高列）奶法閉射

點(diǎn)微配...在在”水

..，污構(gòu)提.下）牛方密照）

對(duì)「3ABCDA染菌結(jié)可4答1（以⑵種⑶在4（

消毒的。

⑸某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到

相應(yīng)溫度，最可能的原因是______________________________________________

［解析］（1）在實(shí)驗(yàn)室中，能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬

材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。（2）巴氏消毒法或高溫

瞬時(shí)消毒法與煮沸消毒法相比，其優(yōu)點(diǎn)表現(xiàn)為在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

損失較少。（3）紫外線照射能消毒的原因是其能夠破壞微生物細(xì)胞中的DNA結(jié)

構(gòu)。在利用紫外線照射前，適量噴灑苯酚或煤酚皂溶液等消毒液，可強(qiáng)化消毒效

果。（4）自來(lái)水通常是采用氯氣進(jìn)行消毒的。（5）采用高壓蒸汽滅菌時(shí)，若壓力達(dá)

到設(shè)定要求，而溫度未達(dá)到相應(yīng)要求，最可能的原因是沒(méi)有排盡高壓蒸汽滅菌鍋

內(nèi)的冷空氣。

［答案］（1）可以（2）在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少（3）破壞DNA

結(jié)構(gòu)消毒液（苯酚或煤酚皂溶液）（4）氯氣（5）未將鍋內(nèi)冷空氣排盡

幽苫融酵母菌的純培養(yǎng)

［合作探究］

1.圖一中a步操作的目的是什么？b步操作的原因是什么？

提示：圖一中a步操作是讓錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰，目的是防止瓶口的微生物污

染培養(yǎng)基。b步操作是培養(yǎng)基冷卻凝固后將平板倒置，原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的

水珠落入培養(yǎng)基，且可以避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快地?fù)]發(fā)。

2.用字母和箭頭表示圖二平板劃線操作的正確步驟。

提示；ILffafe-*cfhfg。

3.圖二的操作中，為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？

在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？

提示：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培

養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種,

使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次

數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。劃線結(jié)束后

需要灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免菌種污染環(huán)境和感染操

作者。

4.接種結(jié)束后，為什么要將一個(gè)未接種的培養(yǎng)基和一個(gè)已接種的培養(yǎng)基放在一

起培養(yǎng)，未接種的培養(yǎng)基表面如果有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明了什么？

??

①②

將接種后的平板①和一個(gè)未接

種的平板②倒置，放入28左

右的恒溫埒養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h

提示：培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是作對(duì)照，未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫24?

48h后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的。若有菌落形成，說(shuō)明培養(yǎng)基滅

菌不徹底，或培養(yǎng)基被污染了，需要重新制備。

「深化歸納］

1.平板劃線操作的注意事項(xiàng)

(1)蘸取菌液前及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)，劃線操作結(jié)束后仍需灼燒接

種環(huán)，三種灼燒的目的不同。

目的項(xiàng)目

蘸取菌液前灼燒避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染菌種

殺死上一次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一

每次劃線前灼燒次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上一次劃線的末

端

及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免菌種污染環(huán)境和

劃線操作結(jié)束后灼燒

感染操作者

⑵在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以免溫度過(guò)高殺死菌種。

⑶除第一次劃線外，每次劃線都從上一次劃線的末端開(kāi)始，這樣能使細(xì)菌的數(shù)

目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。

(4)劃線時(shí)用力大小要適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。

2.平板劃線法的結(jié)果與評(píng)價(jià)

⑴平板劃線法結(jié)果

平板劃線示意圖(A)及培養(yǎng)后菌落分布示意圖(B)如下圖所示。

A

⑵在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨(dú)立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大

小上相似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。

⑶若在培養(yǎng)基中觀察到不同形態(tài)的菌落，原因可能是菌液不純，混入其他雜菌，

或在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中被雜菌污染。

［對(duì)點(diǎn)練習(xí)］

5.如圖是倒平板的操作，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

甲乙丙丁

A.正確的操作順序應(yīng)該是丙一乙一甲一丁

B.甲在酒精燈火焰附近進(jìn)行可以避免雜菌污染

C.丁操作必須要等平板冷卻凝固后才能進(jìn)行

D.培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)倒平板是由于該溫度下不易受雜菌污染

D［結(jié)合倒平板的操作步驟可知，正確的操作順序?yàn)楸灰乙患滓欢?，A項(xiàng)正

確；甲在酒精燈火焰附近進(jìn)行可以避免雜菌污染，B項(xiàng)正確；丁為將培養(yǎng)皿倒過(guò)

來(lái)放置，必須要等平板冷卻凝固后才能進(jìn)行，C項(xiàng)正確；培養(yǎng)基冷卻到50'C左

右時(shí)倒平板是為了防止?fàn)C傷，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

6.在分離、純化細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，劃線接種（甲）、培養(yǎng)結(jié)果（乙）如下圖，a、b、c、

d是劃線的四個(gè)區(qū)域。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.配制培養(yǎng)基時(shí)需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B.甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置

C.連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落

D.圖示接種過(guò)程中接種環(huán)灼燒了5次

B［為了能徹底滅菌，配制的培養(yǎng)基需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A正確；起始劃線的

區(qū)域長(zhǎng)出的菌落多且密，甲中d區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位竟，a區(qū)域?yàn)閯澗€的結(jié)束位

置，B錯(cuò)誤；連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落，C正確；由于每次使

用接種環(huán)前后都要灼燒滅菌，圖示甲中共有4次劃線接種，接種過(guò)程中接種環(huán)灼

燒了5次，D正確。］

應(yīng)用創(chuàng)新.問(wèn)題情境探究，學(xué)—開(kāi)?有應(yīng)—

令情境材料

下表是某種微生物培養(yǎng)基的成分。

編號(hào)①②③④⑤

成分KHPOFeSOCaCh

(NH4)2SO4244H2O

含量0.4g4.0g0.5g0.5g100mL

素養(yǎng)遭授

產(chǎn)一

通過(guò)對(duì)某種微生物培養(yǎng)基成分的分析，培養(yǎng)學(xué)生的物質(zhì)與能量觀、適應(yīng)觀等

生命觀念，認(rèn)識(shí)生物的多樣性、獨(dú)特性。

問(wèn)題探究

⑴該培養(yǎng)基含有微生物生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)成分有哪幾類(lèi)？

（2）該培養(yǎng)基可培養(yǎng)什么樣的微生物？說(shuō)明理由。

⑶若除去成分①，加入(CH2O),該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)什么樣的微生物？

提示：(1)該培養(yǎng)基含有的營(yíng)養(yǎng)成分有三類(lèi)：水、無(wú)機(jī)鹽和氮源。

⑵該培養(yǎng)基培養(yǎng)的是自養(yǎng)型微生物，因?yàn)樵撆囵B(yǎng)基中不含有含碳有機(jī)物。

(3)若除去成分①，加入含碳有機(jī)物可用于培養(yǎng)固氮菌。

.網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

-

_培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類(lèi)

微的配制

培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成

生

物

的

基

本

培

養(yǎng)

技

術(shù)

一

強(qiáng)生出記

1.核心概念

⑴消毒：指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部

分微生物。

⑵滅菌：指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽府和匏子。

⑶菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見(jiàn)

的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。

2.結(jié)論語(yǔ)句

(1)各種培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

(2)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。

(3)由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱(chēng)為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過(guò)程就

是純培養(yǎng)。

學(xué)習(xí)效果,隨堂評(píng)估自測(cè)F課堂即時(shí)鞏固?既強(qiáng)化又?jǐn)U展

i.不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含()

A.碳源、磷酸鹽和維生素

B.氮源和維生素

C.水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽

D.碳元素、氧元素、氫元素、氮元素

C［不