2025年生物制藥知識考試筆試試題(附答案)一、單項選擇題（每題2分，共30分）1.以下哪種生物藥物不屬于治療性蛋白質(zhì)類藥物？A.重組人胰島素B.阿達木單抗（全人源單抗）C.BNT162b2（mRNA疫苗）D.重組促紅細胞生成素（EPO）答案：C2.在單克隆抗體制備過程中，雜交瘤細胞篩選的關鍵依據(jù)是？A.細胞增殖速度B.抗體的抗原結合特異性C.細胞對HAT培養(yǎng)基的耐受性D.抗體的糖基化修飾程度答案：B（雜交瘤篩選需同時滿足能分泌目標抗體且能在HAT培養(yǎng)基中存活，核心是特異性）3.基因治療中，腺相關病毒（AAV）載體的主要優(yōu)勢是？A.感染分裂期和非分裂期細胞B.攜帶大基因片段（>8kb）C.引發(fā)強免疫反應D.整合至宿主基因組的概率高答案：A（AAV可感染靜息細胞，免疫原性低，載體容量約4.7kb，通常為episomal存在）4.以下哪種技術是mRNA疫苗遞送系統(tǒng)的核心組成？A.脂質(zhì)納米顆粒（LNP）包載B.腺病毒載體整合C.病毒樣顆粒（VLP）展示D.陽離子聚合物靜電吸附答案：A（LNP是mRNA疫苗（如BNT162b2）的關鍵遞送技術，保護mRNA并促進細胞內(nèi)吞）5.生物制品生產(chǎn)中，“質(zhì)量源于設計（QbD）”的核心是？A.加強終產(chǎn)品檢測B.對關鍵質(zhì)量屬性（CQA）的全流程控制C.提高生產(chǎn)設備自動化水平D.縮短工藝開發(fā)周期答案：B（QbD強調(diào)通過工藝理解和風險評估，在設計階段控制CQA，而非依賴終檢）6.中國NMPA《生物制品注冊分類及申報資料要求》中，“治療用生物制品1類”指？A.境內(nèi)外均未上市的創(chuàng)新生物制品B.境內(nèi)未上市的境外已上市生物類似藥C.改變給藥途徑的改良型生物制品D.增加新適應癥的已上市生物制品答案：A（1類為創(chuàng)新藥，2類為改良型，3類為境內(nèi)外同步/境外已上市，4類為生物類似藥）7.重組蛋白藥物中宿主細胞蛋白（HCP）殘留的主要風險是？A.影響藥物半衰期B.引發(fā)免疫原性反應C.降低藥物溶解度D.干擾糖基化修飾答案：B（HCP作為外源性蛋白可能誘導抗體產(chǎn)生，影響療效或引發(fā)過敏）8.CAR-T細胞治療中，“腫瘤相關抗原（TAA）”選擇的關鍵要求是？A.僅在腫瘤細胞表面高表達B.在正常組織低表達且非必需C.具有強免疫原性D.分子量小于50kDa答案：B（理想TAA需在腫瘤高表達，正常組織低表達且非關鍵功能，避免脫靶毒性如CD19）9.以下哪種分析技術常用于生物藥的糖型分析？A.高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）B.動態(tài)光散射（DLS）C.差示掃描量熱法（DSC）D.紫外-可見分光光度法（UV-Vis）答案：A（HPLC-MS可分離并鑒定不同糖型，DLS測粒徑，DSC測熱穩(wěn)定性，UV-Vis測濃度）10.疫苗生產(chǎn)中，“滅活工藝”的關鍵質(zhì)量控制指標是？A.病毒滴度（TCID50）B.滅活劑殘留量C.蛋白質(zhì)變性程度D.佐劑吸附率答案：B（滅活需徹底（病毒感染力喪失），同時控制滅活劑（如甲醛）殘留避免毒性）11.基因編輯藥物中，CRISPR-Cas9系統(tǒng)的“脫靶效應”主要指？A.編輯效率低于50%B.在非目標基因位點發(fā)生切割C.Cas9蛋白引發(fā)免疫反應D.gRNA與目標序列結合不緊密答案：B（脫靶指Cas9在非預期基因組位置切割，可能導致非目標基因突變）12.生物類似藥與原研藥的“可比性研究”不包括以下哪項？A.藥學特性（如結構、純度）B.非臨床安全性C.臨床免疫原性D.適應癥外推答案：D（可比性研究聚焦藥學、非臨床及臨床（如PK/PD），適應癥外推需額外數(shù)據(jù)支持）13.單克隆抗體生產(chǎn)中，“灌流培養(yǎng)（Perfusion）”相比“補料分批培養(yǎng)（Fed-batch）”的主要優(yōu)勢是？A.培養(yǎng)基成本更低B.細胞密度更高（>1×108cells/mL）C.工藝開發(fā)周期更短D.抗體糖基化均一性更好答案：B（灌流培養(yǎng)通過連續(xù)換液維持高細胞密度，適用于長周期生產(chǎn)，成本通常更高）14.以下哪種病毒載體常用于溶瘤病毒治療？A.腺病毒（如DNX-2401）B.慢病毒（LV）C.逆轉錄病毒（RV）D.單純皰疹病毒（HSV-1）答案：A（腺病毒因可選擇性復制并裂解腫瘤細胞，是溶瘤病毒主流載體；HSV-1也有應用如T-VEC）15.生物制品穩(wěn)定性研究中，“加速穩(wěn)定性試驗”的條件通常為？A.2-8℃，24個月B.25℃±2℃，60%±5%RH，6個月C.40℃±2℃，75%±5%RH，6個月D.-20℃，12個月答案：C（加速試驗條件為40℃/75%RH，用于預測長期穩(wěn)定性；長期試驗為25℃/60%RH（2-8℃為冷鏈藥物））二、簡答題（每題8分，共40分）1.簡述單克隆抗體人源化的必要性及主要技術路徑。答案：必要性：鼠源單抗在人體內(nèi)會誘導人抗鼠抗體（HAMA）反應，導致中和、清除加速及過敏；人源化可降低免疫原性，延長半衰期，提高療效。技術路徑：①嵌合抗體（鼠可變區(qū)+人恒定區(qū)）；②人源化抗體（CDR移植，保留鼠互補決定區(qū)，替換框架區(qū)為人源）；③全人源抗體（通過轉基因小鼠、噬菌體展示庫或人B細胞篩選）。2.比較大腸桿菌與CHO細胞作為重組蛋白表達系統(tǒng)的優(yōu)缺點。答案：大腸桿菌：優(yōu)點：培養(yǎng)成本低、生長快、操作簡單、表達量高；缺點：缺乏真核細胞的翻譯后修飾（如糖基化）、可能形成包涵體（需復性）、內(nèi)毒素殘留風險。CHO細胞：優(yōu)點：具備人源化糖基化修飾（接近人體）、可表達復雜蛋白（如單抗）、分泌表達減少包涵體；缺點：培養(yǎng)周期長、成本高、工藝開發(fā)復雜、潛在病毒污染風險。3.簡述mRNA疫苗的作用機制及關鍵質(zhì)量屬性（CQA）。答案：作用機制：mRNA編碼抗原蛋白（如新冠刺突蛋白），通過LNP遞送入宿主細胞（主要是抗原提呈細胞），利用細胞核糖體翻譯表達抗原，誘導體液免疫（抗體）和細胞免疫（CD8+T細胞）。CQA：①mRNA完整性（避免降解影響翻譯效率）；②LNP粒徑分布（影響遞送效率和組織分布）；③包封率（未包封的mRNA易被核酸酶降解）；④殘留雜質(zhì)（如未反應的脂質(zhì)、mRNA合成副產(chǎn)物）；⑤熱穩(wěn)定性（影響儲存條件）。4.列舉生物制品生產(chǎn)中“工藝驗證”的三個階段及各階段的核心目標。答案：①工藝設計階段（Stage1）：基于QbD，通過實驗（如DOE）確定工藝參數(shù)范圍，建立關鍵工藝參數(shù)（CPP）與CQA的關聯(lián)；②工藝qualification階段（Stage2）：包括安裝確認（IQ）、運行確認（OQ）、性能確認（PQ），驗證設備/系統(tǒng)能穩(wěn)定運行，通過連續(xù)3批成功生產(chǎn)確認工藝一致性；③持續(xù)工藝驗證（Stage3）：商業(yè)化生產(chǎn)中持續(xù)監(jiān)控工藝參數(shù)和產(chǎn)品質(zhì)量，確保工藝處于受控狀態(tài)，及時發(fā)現(xiàn)變異并改進。5.解釋“抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用（ADCC）”的機制，并說明其在治療性抗體中的應用意義。答案：機制：抗體（如IgG1）的Fc段與靶細胞（如腫瘤細胞）表面抗原結合后，F(xiàn)c段與自然殺傷細胞（NK細胞）、巨噬細胞等效應細胞表面的Fcγ受體（FcγRIIIa）結合，激活效應細胞釋放細胞毒性物質(zhì)（如穿孔素、顆粒酶），導致靶細胞裂解。應用意義：ADCC是治療性抗體（如利妥昔單抗）的重要作用機制之一，可增強對腫瘤細胞的殺傷效果；通過Fc段工程（如糖基化修飾去除巖藻糖）可提高ADCC活性，優(yōu)化療效。三、案例分析題（每題15分，共30分）案例1：某公司開發(fā)一款抗PD-1人源化單克隆抗體（藥物A），在III期臨床中發(fā)現(xiàn)部分患者出現(xiàn)嚴重免疫相關不良反應（irAEs），經(jīng)分析可能與藥物的免疫原性有關。問題：（1）哪些因素可能導致藥物A的免疫原性？（2）提出3項降低免疫原性的優(yōu)化策略。答案：（1）可能因素：①抗體序列中的T細胞表位（如框架區(qū)或CDR區(qū)的非人源序列）；②翻譯后修飾異常（如糖基化不均一、脫酰胺化、氧化）；③聚集體形成（作為多價抗原增強免疫識別）；④制劑中的輔料（如吐溫降解產(chǎn)物引發(fā)炎癥反應）；⑤患者個體差異（HLA基因型影響表位呈遞）。（2）優(yōu)化策略：①序列優(yōu)化：通過人源化程度分析（如使用Prime數(shù)據(jù)庫比對），去除潛在T細胞表位，或采用全人源抗體技術（如噬菌體展示庫）；②工藝改進：優(yōu)化純化工藝減少聚集體（如使用疏水相互作用色譜），控制氧化/脫酰胺化（如降低溫度、添加抗氧化劑）；③制劑優(yōu)化：選擇穩(wěn)定的緩沖體系（如組氨酸緩沖液替代磷酸鹽），控制吐溫濃度及降解（如使用吐溫20替代吐溫80）；④糖基化工程：通過敲除巖藻糖轉移酶（如CHO細胞FUT8-/-）獲得低巖藻糖抗體，減少Fc段異質(zhì)性。案例2：某企業(yè)申報一款重組人凝血因子VIII（rhFVIII）生物類似藥，在藥學可比性研究中發(fā)現(xiàn)：與原研藥相比，主峰比例低2%（原研95%vs受試93%），高分子量物質(zhì)（HMW）高1.5%（原研1.2%vs受試2.7%），且糖型中唾液酸含量低10%。問題：（1）分析上述差異可能對藥物安全性和有效性的影響；（2）提出后續(xù)研究建議。答案：（1）影響分析：①主峰比例低/HMW高：HMW可能為聚集體，可能誘導抗藥物抗體（ADA）產(chǎn)生，降低療效或引發(fā)過敏反應；聚集體還可能影響藥代動力學（如被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除加速）。②唾液酸含量低：唾液酸可保護蛋白免受肝細胞表面去唾液酸糖蛋白受體（ASGPR）識別，含量降低可能導致藥物半衰期縮短，需增加給藥頻率；此外，低唾液酸可能影響蛋白穩(wěn)定性（如更容易被蛋白酶降解）。（2）后續(xù)建議：①深入表征差異根源：通過LC-MS/MS分析主峰/雜峰的結構差異（如是否為脫酰胺化、氧化產(chǎn)物），HMW的組成（二聚體/多聚體、共價/非共價結合）；通過毛細管電泳-唾液酸分析（CE-SA）確認唾液酸連接方式（α2,6vsα2,3）及含量分布。②非臨床研究：開展動物藥代動力學（PK）研究（如比較半衰期、暴露量），免疫原性