PCR實驗室廢棄物的管理登記制度PCR實驗室廢棄物的管理登記制度「篇一」PCR實驗室廢棄物的管理登記制度1、目的:保證實驗室、實驗人員和外部環(huán)境的安全。2、范圍:PCR實驗室3、職責(zé):PCR實驗室的工作人員負(fù)責(zé)醫(yī)療廢棄物的處理及登記4、程序:4、1部門職責(zé)應(yīng)對本實驗室工作人員講明本程序在預(yù)防交叉、實驗室污染及切斷傳播途徑中的重要性，并要求嚴(yán)格執(zhí)行。4、2實驗室所有垃圾，裝入專用污物袋內(nèi)，各區(qū)備有:生物污染垃圾袋(黃色)。使用過的一次性消耗品(如試管、吸頭、擴增管、等)，先放入利器盒內(nèi)后，用0、55%含氯消毒液消毒后再放入黃色垃圾袋內(nèi)，使用過的手套、鞋套等直接放入黃色垃圾袋內(nèi)。4、3實驗所用到的患者采樣管在實驗結(jié)束后，應(yīng)先消毒后放入黃色垃圾袋內(nèi)。4、4本實驗室工作人員在工作完成后需對當(dāng)天產(chǎn)生的醫(yī)療廢棄物進行包裝處理，并明確登記醫(yī)療廢棄物的產(chǎn)生量、時間、處理人等。通過廢棄物專用通道運往高壓滅菌室。4、5每天應(yīng)有專業(yè)人員對當(dāng)日產(chǎn)生的醫(yī)療廢棄物進行高壓滅菌，并伴有化學(xué)指示卡，滅菌結(jié)束后需要進行明確的登記。4、6每日有院內(nèi)專門負(fù)責(zé)醫(yī)療廢棄物轉(zhuǎn)運的人員進行交接，交接時應(yīng)明確等登記（時間、轉(zhuǎn)運人等）PCR實驗室廢棄物的管理登記制度「篇二」簡介Pcr實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction)的簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA的片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達納米級別，精確檢測乙肝病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否復(fù)制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據(jù)條件1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的PCR熒光實驗室;實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國AppliedBiosystems公司推出由于該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前已得到廣泛應(yīng)用。本文試就其定量原理、方法及參照問題作一介紹2、檢測設(shè)備必須符合標(biāo)準(zhǔn)PCR熒光實驗室設(shè)置要求;熒光定量PCR儀+實時熒光定量試劑+通用電腦+自動分析軟件，構(gòu)成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統(tǒng)。3、必須通過國家臨床檢驗中心的驗收和認(rèn)證;4、檢測人員必須通過國家臨檢中心業(yè)務(wù)培訓(xùn)并取得合格證書;PCR實驗室內(nèi)工作人員必須參加由國家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗中心舉辦的臨床基因擴增培訓(xùn)班，并持證上崗。PCR實驗室通過驗收，實驗室至少必須應(yīng)有兩個以上持有“臨床基因檢測上崗證”。PCR實驗室必須建立嚴(yán)格的實驗室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（SOP）、建立系列質(zhì)量管理文件等，確保實驗室日常運行符合國家衛(wèi)生部的要求，確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確、確保實驗室衛(wèi)生安全，確保實驗室長期穩(wěn)定運行5、必須在無菌無塵環(huán)境下進行操作功能能夠?qū)颊卟∏檫M行科學(xué)、準(zhǔn)確、實時的掌控，并結(jié)合抗HBV與T細(xì)胞免疫來打破免疫耐受，阻斷肝病病毒復(fù)制的療法、有效的分解肝炎病毒，解決了乙肝病毒易變異、耐藥，病毒復(fù)制模板難以治療，人體免疫耐受狀態(tài)不易打破等醫(yī)學(xué)難題，能迅速消除臨床癥狀，而且有效抑制乙肝病毒復(fù)制，明顯加快e抗原、抗體的血清轉(zhuǎn)換速度，殺滅血液及肝細(xì)胞內(nèi)的病毒，為防止再感染提供了長期保護，有效阻斷和逆轉(zhuǎn)肝纖維化、肝硬化進程。建立方法1、建立樣品準(zhǔn)備區(qū)這個區(qū)域?qū)ｉT用作樣品的準(zhǔn)備，在制備和操作用于核酸提取的試劑時應(yīng)該采取預(yù)防措施：⑴PCR產(chǎn)物和帶有要擴增序列的DNA克隆不能在這個房間操作。⑵組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣品都帶進樣品準(zhǔn)備間處理，以根據(jù)應(yīng)用的需要提取DNA或RNA。⑶用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。⑷DNA樣品應(yīng)該用有專門的防護或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時有氣溶膠遺留。⑸大體積樣品應(yīng)該用單獨包裝的無菌一次性移液管吸取。⑹管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生，而且管子不能用力崩開，這樣會產(chǎn)生氣溶膠。⑺任何時候都應(yīng)該穿實驗服和帶手套，手套要經(jīng)常更換，尤其在抽提過程中每一步之間都要更換。實驗服要專門用于樣品準(zhǔn)備間，經(jīng)常清洗。2、樣品準(zhǔn)備和RNA-PCRRNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作，這樣增加了樣品之間污染的機會。為了避免這一問題，反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準(zhǔn)備區(qū)進行。在RNA-PCR中應(yīng)用UNG以防止污染的方法也有報道。3、建立前PCR區(qū)。該去專門用于準(zhǔn)備各種反應(yīng)，這個區(qū)域必須保持干凈，而且沒有來自克隆和樣品準(zhǔn)備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備，特別是專門用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。4、PCR實驗室試劑的操作。⑴所用的所有溶液都應(yīng)該沒有核酸和（或）核酸酶（DNase和RNase）污染。⑵所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過濾的，并且是高壓滅菌。⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑，在擴增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴增反應(yīng)。⑷所用試劑都應(yīng)該以大體積配制，實驗一下看試劑是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量進行貯存。⑸所有試劑和樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。⑹新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗。⑺樣品準(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時都應(yīng)該小心保存。5、在前PCR區(qū)建立PCR混合物。⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃，在實驗室只涉及到擴增一種或少數(shù)幾種特異序列時這樣做很有用。⑵如果你的實驗室使用多套引物，以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟，可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。⑶作為一個規(guī)則，應(yīng)該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且，你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴增抑制物。⑷陰性樣品要與每組樣品同時做，以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產(chǎn)物的污染，陰性對照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。⑸當(dāng)做陽性對照時，有兩個理由決定了應(yīng)該使用最少數(shù)量的核酸。⑹由于必須有對照反應(yīng)，對照模板的特點應(yīng)該予以考慮。6、控制污染的方法。已設(shè)計出很有力的酶學(xué)方法用來消除一種形式的污染―使用UNG，這一技術(shù)能有效地消除由PCR產(chǎn)物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線，這種方法不能完全消除污染問題，但可以將污染降低幾個數(shù)量級。7、后PCR區(qū)PCR完成以后，需要分析樣品并解釋數(shù)據(jù)，應(yīng)該留出一個專門用于反應(yīng)后處理樣品的地方。后PCR活動中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用于這一目的，決不能把實驗室這一區(qū)域的試劑或儀器用于任何前PCR活動PCR實驗室廢棄物的管理登記制度「篇三」PCR實驗室管理制度1、本實驗室進行臨床基因擴增檢測及相關(guān)檢驗工作，不得進行其他實驗操作。2、本實驗室采用實時熒光定量PCR技術(shù)作為臨床基因診斷的主要手段，實驗室分為四個區(qū)：試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)（第一區(qū)）、標(biāo)本處理區(qū)（第二區(qū)）、擴增區(qū)（第三區(qū)）、擴增產(chǎn)物分析區(qū)(第四區(qū))。每一工作區(qū)配備專用的設(shè)備、儀器、輔助設(shè)施、耗材、清潔用品、辦公用品、專用工作服，并有明顯的區(qū)分標(biāo)識，專用工作服。標(biāo)本的接收則在標(biāo)本接收處進行。3、各工作區(qū)專用的儀器設(shè)備、辦公用品、工作服、實驗耗材和清潔用具等，不可混用。4、嚴(yán)格遵守從“試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本處理區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)”的單一流向制度，不得逆向進入前一工作區(qū)。5、非本實驗室工作人員，未經(jīng)許可不得入內(nèi)；進修、實習(xí)或其他部門人員因科研活動需要。進入實驗區(qū)域（試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本處理區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)）需首先熟悉本程序的各項規(guī)定并嚴(yán)格遵守執(zhí)行，在本實驗室人員監(jiān)督指導(dǎo)下進行。6、在各區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套、口罩、和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程。7、試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)只能進行試劑的貯存及配置等相關(guān)操作。8、標(biāo)本處理區(qū)只能進行臨床標(biāo)本的保存，核酸提取、保存及其加入至擴增反應(yīng)管以及測定RNA時c