微生物實驗室的質量保證第一頁，共41頁。優(yōu)選微生物實驗室的質量保證第二頁，共41頁。

微生物實驗室的質量控制環(huán)境保證培養(yǎng)基保證無菌性檢查適用性檢查有效的方法方法驗證SOP操作有效的結果可靠的結論結果判斷第三頁，共41頁。

培養(yǎng)基的配制及質量控制

第四頁，共41頁。培養(yǎng)基的配制

培養(yǎng)基可按處方制備也可使用按處方生產的符合規(guī)定的商品

化成品培養(yǎng)基，脫水培養(yǎng)基除附有處方和使用說明外還應注明

有

效期、貯存條件、適用性試驗的質控菌株和用途。

配制時應按使用說明上的要求操作，受潮結塊不能使用，確

保培養(yǎng)基的質量符合要求。

第五頁，共41頁。培養(yǎng)基的配制

使用容器

-配制培養(yǎng)基使用的容器應是玻璃器皿或搪瓷器皿。

-使用的器皿應用蒸餾水或純化水完全沖洗。-配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水，特殊情況下需要用去離子水和蒸餾水.

第六頁，共41頁。

培養(yǎng)基的配制

對配制培養(yǎng)基的過程作詳細的記錄

記錄內容

配制日期、培養(yǎng)基名稱、成分、配制數量、

質量監(jiān)控結果等進行全面詳細記錄。第七頁，共41頁。

培養(yǎng)基的制備方法

稱量

按照產品說明書的規(guī)定稱量，各稱量物的重量應記錄。對培養(yǎng)基的組分應準確稱量，并要求有一定的精確度。第八頁，共41頁。

培養(yǎng)基的制備方法

配制將準確稱量的各組分或脫水培養(yǎng)基加入溶劑中，完全

溶解，如需要可適當加熱。

所有的培養(yǎng)基對熱都或多或少的敏感，因此當培養(yǎng)基需要

加熱溶解時，應注意不要加熱過度，否則會使培養(yǎng)基顏色變

深。配制培養(yǎng)基所用的器具應能方便控制加熱和不斷攪拌。

當培養(yǎng)基需要添加其它組分時，添加后也應將其充分混勻。第九頁，共41頁。培養(yǎng)基的制備方法

分裝配制的培養(yǎng)基根據試驗需要分裝試管、傾注平皿、

制備斜面。經滅菌的培養(yǎng)基分裝，應在無菌環(huán)境下操作，避免污染。第十頁，共41頁。

培養(yǎng)基的制備方法

對熱敏感的培養(yǎng)基分裝容器

應預先進行滅菌，以保證培養(yǎng)基的無菌性。第十一頁，共41頁。培養(yǎng)基的制備方法

矯正pH配制培養(yǎng)基必須矯正pH，干燥培養(yǎng)基也必須對pH進行驗證，高壓滅菌前的pH應比最終pH值高0.2左右。

矯正pH后的培養(yǎng)基應加熱、過濾，使培養(yǎng)基澄清。第十二頁，共41頁。

培養(yǎng)基的滅菌

滅菌方法及條件不當可直接影響培養(yǎng)基質應通過無菌

性試驗和促生長試驗進行驗證.驗證方法同《中國藥典2010年版》附錄滅菌法。

第十三頁，共41頁。

培養(yǎng)基的滅菌

培養(yǎng)基的滅菌應按照生產商提供或使用者驗證的

參數進行。商品化的成品培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方

法的資料。第十四頁，共41頁。

培養(yǎng)基的滅菌

不同種類培養(yǎng)基應采用不同的滅菌方法，配制好的培養(yǎng)基滅菌一般多用流通蒸汽滅菌和濾膜過濾除菌。流通蒸汽滅菌

是最常用的最有效的滅菌法，121℃，15min(121℃，30min)或116℃，40min可殺死所有的細菌芽孢。第十五頁，共41頁。

培養(yǎng)基的滅菌

濾膜過濾除菌

如配制的培養(yǎng)基含有不耐熱成分可采用濾膜過濾除菌和血清凝固器除菌。

-濾膜過濾除菌采用孔徑0.22um的濾膜過濾器.-濾膜材質依過濾物品的性質及目的而定。

不得對被濾過成分有吸附作用，不得有物質釋放

和纖維

的脫落，也不得使用含有石棉的濾器。-濾器和濾膜在使用前應進行驗證，并進行滅菌。血清凝固器80～100℃、30min，連續(xù)三天，間歇滅菌。第十六頁，共41頁。

培養(yǎng)基的貯藏

-商品化培養(yǎng)基應根據使用說明書上的要求進行儲存。-培養(yǎng)基標簽上應標有批號，生產日期、有效期及培

養(yǎng)基的有關特性。-所采用的保藏和運輸條件應使培養(yǎng)基最低限度失去

水分并提供機械保護。第十七頁，共41頁。

培養(yǎng)基的貯藏

脫水培養(yǎng)基或單獨配方組分應在適當的條件下貯存，

如低溫、干燥和避光，所有的容器應密閉，尤其是盛

有脫水培養(yǎng)基的容器.第十八頁，共41頁。

培養(yǎng)基的貯藏

配制好的培養(yǎng)基應驗證的條件下貯藏-保存在2～25℃避光的環(huán)境。

-若保存于非密閉容器中，一般在三周內使用，-若保存于密閉容器中，一般在一年內使用。

第十九頁，共41頁。

培養(yǎng)基的貯藏-瓊脂培養(yǎng)基不得在0℃或0℃以下存放，防止冷凍破

壞凝膠特性。

-瓊脂平板最好現配現用，如置冰箱保存，一般不超

過一周，且應密閉包裝，若延長保存，保存期需經

驗證確定。

-培養(yǎng)基滅菌后應立即取出，不得儲藏在高壓滅菌器

中，避免影響培養(yǎng)基的質量。

第二十頁，共41頁。

培養(yǎng)基的貯藏-固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化應在加熱的水浴中或采

用流通蒸汽進行，只允許一次，融化的培養(yǎng)基應放在45～50℃的水浴中，不得超過8小時。

-使用過的培養(yǎng)基（包括失效的培養(yǎng)基）應按照國家

污染廢物處理相關規(guī)定進行。第二十一頁，共41頁。

培養(yǎng)基的質量控制

所有配制好的培養(yǎng)基均應進行驗證，驗證方法參照《中國藥典2010年版》附錄無菌檢查或微生物限度檢

查項下有關規(guī)定進行。第二十二頁，共41頁。

培養(yǎng)基的質量控制

實驗室配制的培養(yǎng)基監(jiān)控項目

外觀、性狀、pH、促生長試驗、定期的穩(wěn)定性檢查

以及培養(yǎng)基有效期的確定。第二十三頁，共41頁。培養(yǎng)基的質量控制

驗證時間

-由同一批脫水培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基時，若采用已驗證的配制和滅菌程序，那么可不進行批批促生長試驗。-如果培養(yǎng)基制備的方法未經驗證，那么，配制的每一批培養(yǎng)基必須進行促生長試驗。試驗方法

-根據培養(yǎng)基的用途參照《中國藥典2010年版》附錄

無菌檢查或微生物限度檢查項下有關規(guī)定進行。

第二十四頁，共41頁。培養(yǎng)基的質量控制

培養(yǎng)基的有效期是指已通過促生長試驗的培養(yǎng)基在整個

有效期內均需符合這些相應的標準。

每批培養(yǎng)基儲存的時間將取決于一定存放條件（包括容器

和密封性）的培養(yǎng)基組成成分的穩(wěn)定性。第二十五頁，共41頁。培養(yǎng)基的質量控制

試驗結果處理

-當批培養(yǎng)基不符合促生長試驗，應尋找造成不合格的原因。

-這個調查包括采取適當的行動以防止問題的重復出現。

-如果未找到原因或還沒有解決有關培養(yǎng)基的促生長問題，

任何不符合要求的批次均不能使用。第二十六頁，共41頁。培養(yǎng)基的質量控制鑒定微生物的診斷試劑

如

革蘭染色、氧化酶試驗試劑等。質量控制試驗與培養(yǎng)基質量控制試驗相似。試劑用于未知樣品鑒定-選擇正確的標準質控菌-按使用說明上的要求進行質控試驗。第二十七頁，共41頁。培養(yǎng)基的質量控制

用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基應特別小心防護。尤其是用

于關鍵區(qū)域監(jiān)控的培養(yǎng)基最好是終端滅菌，如果不能

采用終端滅菌的培養(yǎng)基，那么在使用前應進行100%

的預培養(yǎng)。防止將外來的污染帶到環(huán)境中及避免出現假陽性結果。第二十八頁，共41頁。

培養(yǎng)基的質量控制測定PH值每批培養(yǎng)基滅菌后均應測定PH值；在冷卻至室溫

（25℃）進行測定。

除非經驗證表明培養(yǎng)基的PH允許的變化范圍很寬，

否則，培養(yǎng)基的PH的范圍不得超過規(guī)定的±0.2。第二十九頁，共41頁。

培養(yǎng)基的質量控制

一般性狀

-制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應檢查；容器和蓋

子的破裂，裝量。

-固體培養(yǎng)基因水分流失而造成表面產生裂縫或漣漪。

-其他如溶血，可能冷藏溫度下形成的結晶，大量的汽泡，微生物污染，氧化還原指示劑的狀況，批數

量和有效期的檢查和記錄，培養(yǎng)基的無菌檢查等。第三十頁，共41頁。培養(yǎng)基的質量控制

-液體培養(yǎng)基應觀察培養(yǎng)基的顏色，是否有沉淀，

微生物污染，氧化還原指示劑的狀況，批數量

和有效期的檢查和記錄等。第三十一頁，共41頁。

培養(yǎng)基的質量控制

培養(yǎng)基的促生長和抑制性能試驗

無菌檢查用培養(yǎng)基使用前應進行適用性試驗適用性試驗無菌性試驗

靈敏度檢查第三十二頁，共41頁。

培養(yǎng)基的質量控制

培養(yǎng)基的靈敏度檢查

菌種金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003]

銅綠假單胞菌[CMCC(B)10104]

枯草芽胞桿菌[CMCC(B)63501]

生孢梭菌[CMCC(B)64941]

白色念珠菌[CMCC(F)98001]

黑曲霉[CMCC(F)98003]

第三十三頁，共41頁。靈敏度檢查培養(yǎng)基接種量試驗菌培養(yǎng)溫度培養(yǎng)基培養(yǎng)時間接種管數裝量

(℃)(天)（支）（支）

金黃色葡萄球菌30～35硫乙醇酸鹽流體3212銅綠假單胞菌3212生孢梭菌3212白色念珠菌23～28改良馬丁529黑曲霉39

①每種菌液接種量含菌小于100cfu②同時做1支空白對照培養(yǎng)基的質量控制第三十四頁，共41頁。培養(yǎng)基的質量控制

結果判定空白對照管應無菌生長。

-若加菌的培養(yǎng)基管均生長良好，判該培養(yǎng)基的靈敏度

檢查符合規(guī)定。

-若加菌的培養(yǎng)基管不生長或生長不好，判培養(yǎng)基的靈

敏度檢查不符合規(guī)定，不能用于無菌試驗，并尋找造

成不合格的原因。培養(yǎng)基的適用性檢查可在供試品的無菌檢查前或與供

試品的無菌檢查同時進行。第三十五頁，共41頁。

微生物限度檢查(計數培養(yǎng)基)培養(yǎng)基的適用性檢查

微生物限度檢查(計數培養(yǎng)基)使用前應進行適用性試驗，適用性試驗包括促生長、抑制及指示能力檢查。第三十六頁，共41頁。培養(yǎng)基的適用性檢查菌種大腸埃希菌[CMCC（B）26003]金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26003]枯草芽孢桿菌[CMCC(B)63501]白色念珠球菌[CMCC（B）98001]黑曲霉[CMCC（F）98003]第三十七頁，共41頁。