植物脫毒一、脫毒苗培育的意義二、脫毒的方法三、脫毒苗生根培養(yǎng)與馴化移栽四、脫毒苗鑒定五、脫毒苗保存與繁殖一、脫毒苗培育的意義（一）植物病毒的危害（二）病毒傳播的方式（三）脫毒苗培育的意義二、脫毒的方法（一）莖尖培養(yǎng)脫毒（二）熱處理脫毒（三）莖尖脫毒與熱處理相接合（四）微體嫁接脫毒法（五）愈傷組織培養(yǎng)脫毒（六）珠心胚培養(yǎng)脫毒法（七）花藥培養(yǎng)脫毒（八）抗病毒藥劑法（一）莖尖培養(yǎng)脫毒1．微莖尖培養(yǎng)脫毒機(jī)理2．微莖尖培養(yǎng)脫毒的過程感染病毒植株頂芽或腋芽剝離莖尖莖尖培養(yǎng)植株再生病毒檢測(cè)離體快繁防蟲網(wǎng)室內(nèi)繁殖脫毒苗圖11-1微莖尖培養(yǎng)生產(chǎn)脫毒苗的流程圖（陳世昌，2011）馬鈴薯脫毒馬鈴薯脫毒技術(shù)任務(wù)1選取外植體并滅菌任務(wù)3解剖鏡下莖尖剝離與接種任務(wù)2準(zhǔn)備培養(yǎng)基任務(wù)4繼代培養(yǎng)任務(wù)5誘導(dǎo)生根任務(wù)6試管苗馴化移植2025/8/1任務(wù)一外植體選取及消毒選擇：選取生長旺盛、健壯、無病或患病相對(duì)較輕的的植株。切取4-6cm的頂芽或側(cè)芽，除去外部可見的小葉。消毒：先用自來水沖洗30mink，再用75%的酒精漂洗幾秒到十幾秒，然后用0.1%的氯化汞或20倍的次氯酸鈉液消毒10-15min。消毒后的材料用無菌水沖洗3次。任務(wù)二準(zhǔn)備培養(yǎng)基

初代培養(yǎng)：MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LGA3+0.1mg/LNAA+3%蔗糖+5g/L瓊脂，PH5.8繼代增殖：MS+0.1mg/LNAA+3%蔗糖+5g/L瓊脂，PH5.82025/8/1將消毒后的材料在解剖鏡下進(jìn)行剝離，如果是用于快速繁殖的莖尖材料可帶2-4個(gè)葉原基或更多，如果是用于脫毒的切取0.1-0.5mm,帶1-2個(gè)葉原基，并迅速接到培養(yǎng)基上。解剖鏡下剝?nèi)∏o尖任務(wù)三莖尖剝離和接種任務(wù)四繼代培養(yǎng)

（二）熱處理脫毒1．熱處理脫毒的原理2．熱處理脫毒的方法①溫燙處理脫毒法②熱空氣處理脫毒法3．影響熱處理脫毒的因素4．熱處理的優(yōu)缺點(diǎn)（三）莖尖脫毒與熱處理相接合（四）微體嫁接脫毒法（五）愈傷組織培養(yǎng)脫毒（六）珠心胚培養(yǎng)脫毒法（七）花藥培養(yǎng)脫毒（八）抗病毒藥劑法三氮唑核苷、5-二氫尿嘧啶、雙乙酰-二氫-5-氮尿嘧啶、三、脫毒苗生根培養(yǎng)與馴化移栽四、脫毒苗鑒定（一）直接觀察法（二）指示植物鑒定法

1．汁液涂抹鑒定

2．小葉嫁接法待檢草莓葉，葉柄削成楔形指示植物削去中間小葉，從切口縱切1.5cm左右將削好的待檢小葉插入切口封口膜包扎噴少量水，用小孔塑料袋罩上，放入防蟲網(wǎng)室，10d后去袋圖11-2草莓指示植物小葉嫁接檢測(cè)法指示植物待檢植物砧木砧木指示植物待檢植物圖11-3雙重芽接法（王國平，2002）圖11-4雙重切接法（王國平，2002）3．雙重芽接法4．雙重切接法（三）抗血清鑒定法（四）分子生物學(xué)鑒定法

1．雙鏈RNA法（dsRNA）

2．核酸雜交技術(shù)人工合成能與病毒堿基互補(bǔ)的(cDNA）

3．聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR)（五）電鏡檢測(cè)法五、脫毒苗的保存與繁殖（一）脫毒苗的保存1．隔離保存2．離體保存