ICS65.05.020CCSB39YYTCTechnicalcodeofpracticefortheproductionofganodermalucidumspawninIT/YYTC009—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由吉林省園藝特產(chǎn)協(xié)會(huì)提出并歸口。本文件起草單位：吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院、吉林省園藝特產(chǎn)管理站、吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)、公主嶺市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊(duì)、長(zhǎng)春大學(xué)、北華大學(xué)、吉林省科學(xué)技術(shù)信息研究所、吉林省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣站、吉林市種子管理站、吉林一畝田農(nóng)業(yè)技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司、白山市永盛農(nóng)業(yè)科技開(kāi)發(fā)有限公司、吉林省蒽芝康生物科技有限公司、蛟河市黃松甸鎮(zhèn)康芝園靈芝專(zhuān)業(yè)合作社、吉林芝福生物科技有限公司、惠豐菌業(yè)（吉林?。┯邢薰尽⒓种I(yè)生物科技有限公司。本文件主要起草人：徐濟(jì)責(zé)、柴秋泉、劉曉龍、楊思思、李雷、周思意、張春蘭、陳昊良、周金梅、沈健、張曉旭、張雪超、秦影、張桐、包建琴、曹中麗、周學(xué)峰、金元舉、王子旭、張慶康、鄭目君、于濤、王大權(quán)。T/YYTC009—2024吉林長(zhǎng)白山是我國(guó)四大靈芝主產(chǎn)區(qū)之一，也是我國(guó)重要的段木靈芝產(chǎn)區(qū)。靈芝栽培已成為吉林省東部林區(qū)的支柱產(chǎn)業(yè)，但當(dāng)前靈芝菌種生產(chǎn)方式參差不齊，2018年，吉林省園藝特產(chǎn)協(xié)會(huì)獲批“地理標(biāo)志農(nóng)產(chǎn)品吉林長(zhǎng)白山靈芝”。為充分發(fā)揮地理標(biāo)志農(nóng)產(chǎn)品品牌效應(yīng)，從源頭控制吉林長(zhǎng)白山靈芝產(chǎn)品質(zhì)量，制定本文件，旨在規(guī)范吉林長(zhǎng)白山靈芝菌種的生產(chǎn)環(huán)節(jié)，實(shí)現(xiàn)“品種培優(yōu)、品質(zhì)提升、品牌打造和標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)”，從而實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)優(yōu)價(jià)，更好地促進(jìn)吉林長(zhǎng)白山靈芝產(chǎn)業(yè)提檔升級(jí)、農(nóng)民增收致富。1T/YYTC009—2024吉林長(zhǎng)白山靈芝菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本文件確立了吉林長(zhǎng)白山靈芝菌種生產(chǎn)的程序，規(guī)定了術(shù)語(yǔ)和定義、場(chǎng)地環(huán)境、設(shè)施設(shè)備、制種技術(shù)、檢驗(yàn)規(guī)則、包裝、運(yùn)輸?shù)入A段的操作指示，描述了生產(chǎn)記錄與檔案追溯方法。本文件適用于吉林長(zhǎng)白山靈芝菌種生產(chǎn)要求。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB150.1壓力容器第1部分：通用要求GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB4806.7食品用接觸用塑料材料及制品NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則NY/T1731食用菌菌種良好作業(yè)規(guī)范NY/T1742-2009食用菌菌種通用技術(shù)要求NY/T528-2010食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)和定義GB/T12728界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1地理標(biāo)志吉林長(zhǎng)白山靈芝GanodermalucidumfromChangbaiMountain,JilinProvince在中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部吉林長(zhǎng)白山靈芝（2018年第62號(hào)）公告區(qū)域范圍內(nèi)，按照吉林長(zhǎng)白山靈芝生產(chǎn)技術(shù)生產(chǎn)，質(zhì)量符合本標(biāo)準(zhǔn)要求的赤芝[Ganodermalucidum（Leyss.ExFr.）Karst]子實(shí)體。3.2菌種生長(zhǎng)在適宜基質(zhì)上具有結(jié)實(shí)性的菌絲培養(yǎng)物，包括母種、原種和栽培種。[來(lái)源GB/T12728]4技術(shù)流程4.1菌種生產(chǎn)技術(shù)流程見(jiàn)圖1.2T/YYTC009—2024圖1吉林長(zhǎng)白山靈芝菌種生產(chǎn)技術(shù)流程圖5場(chǎng)地環(huán)境5.1場(chǎng)地選擇5.1.1選擇地勢(shì)高燥、平坦，通風(fēng)良好，排水暢通，交通便利的場(chǎng)所，周邊環(huán)境清潔，無(wú)污染源。5.1.2300m之內(nèi)無(wú)規(guī)模養(yǎng)殖的禽畜舍、垃圾和糞便堆積場(chǎng)，無(wú)污水、廢氣、煙塵和粉塵等污染源，50m內(nèi)無(wú)食用菌栽培場(chǎng)所、集貿(mào)市場(chǎng)。[來(lái)源：NY/T528—2010中4.2，有修改]5.2生產(chǎn)用水生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749的規(guī)定。6設(shè)施設(shè)備6.1基本設(shè)施及布局基礎(chǔ)設(shè)施及布局應(yīng)符合NY/T528中4.3和4.4.2規(guī)定。3T/YYTC009—20246.2基本設(shè)備天平（感量0.1g～0.001g）、高壓滅菌鍋（1.05kg/cm2）、粉碎機(jī)、磅秤、超凈工作臺(tái)或接種箱、空調(diào)、除濕機(jī)、培養(yǎng)架、恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、顯微鏡等。生產(chǎn)量大的菌種廠還應(yīng)配備攪拌機(jī)、裝袋機(jī)。7制種技術(shù)7.1菌種選擇應(yīng)選擇經(jīng)過(guò)省級(jí)及以上行業(yè)主管部門(mén)審（認(rèn)）定或登記（備案）、具有食用菌菌種生產(chǎn)和經(jīng)營(yíng)資質(zhì)的供種單位購(gòu)買(mǎi)，質(zhì)量應(yīng)符合NY/T1742的規(guī)定。7.2一級(jí)種生產(chǎn)7.2.1PDA培養(yǎng)基制作稱(chēng)取200g去皮的馬鈴薯，切成長(zhǎng)和寬0.5cm的條，加1000mL水煮沸20min～30min，8層紗布過(guò)濾，取濾液后定容至1000mL，加入20g葡萄糖和18g～20g瓊脂粉。7.2.2分裝、滅菌將配制好的PDA培養(yǎng)基分裝至18mm×180mm或20mm×200mm玻璃試管的1/4處。試管口應(yīng)保持干凈，分裝后塞入棉塞或硅膠塞，并用牛皮紙包扎。包扎好的直立放在高壓滅菌鍋內(nèi)高壓蒸汽滅菌，121℃保持30min。7.2.3擺斜面滅菌后的試管培養(yǎng)基冷卻至60℃±5℃,將試管傾斜擺放在操作臺(tái)桌面上，試管口比試管底部高1.5cm±0.2cm，擺成斜面培養(yǎng)基，斜面長(zhǎng)度約為試管長(zhǎng)度的3/4。7.2.4無(wú)菌檢驗(yàn)隨機(jī)抽取5%的試管斜面培養(yǎng)基（每批抽樣量不得少于10支），在35℃±1℃培養(yǎng)2d，檢查有無(wú)微生物菌落，無(wú)菌落的為合格。7.2.5接種7.2.5.1超凈工作臺(tái)或接種箱應(yīng)徹底消毒后方可使用，在接種前用紫外滅菌燈照射30min，接種人員應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作要求進(jìn)行手和衣物的消毒。7.2.5.2接種用具使用前在酒精燈火焰上灼燒滅菌、冷卻。接種時(shí)一只手握斜面試管，另一只手迅速拔開(kāi)試管塞，用接種鏟取3mm～5mm大小的菌種塊迅速放在待接斜面培養(yǎng)基中央位置，迅速用棉塞或硅膠塞塞好試管，整個(gè)操作過(guò)程應(yīng)在火焰周?chē)?0cm范圍內(nèi)進(jìn)行。7.2.5.3將接種好的試管貼好菌種名稱(chēng)、接種日期的標(biāo)簽。7.2.6培養(yǎng)接種后的試管置于25℃±2℃的培養(yǎng)箱避光培養(yǎng)。于接種后第2天和第5天分別進(jìn)行逐個(gè)檢查，挑出未活、污染和生長(zhǎng)不良試管。7.2.7菌種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)菌種質(zhì)量應(yīng)滿(mǎn)足表1要求。表1靈芝母種感官要求無(wú)4T/YYTC009—2024無(wú)無(wú)7.2.8母種保藏在4℃~6℃下避光保藏，保藏期不超過(guò)90天。7.3原種、栽培種生產(chǎn)7.3.1培養(yǎng)料木屑、麩皮等要求新鮮、無(wú)蟲(chóng)、無(wú)螨、無(wú)霉、潔凈、干燥。配方可選擇下列其中之一：a)闊葉木屑78%，麩皮20%，石膏1過(guò)磷酸鈣1%；b)棉籽殼50%，闊葉木屑30%，麩皮17%，蔗糖1%，石膏1石灰1%。7.3.2拌料按照配方準(zhǔn)確稱(chēng)取各種原材料，遵循先干拌再濕拌的原則攪拌均勻，或者使用拌料機(jī)拌料，培養(yǎng)料含水量控制在60%±1%。7.3.3裝袋7.3.3.1拌料結(jié)束后立即裝入聚丙烯塑料袋，聚丙烯塑料袋應(yīng)符合GB4806.7的要求。7.3.3.2原種袋采用規(guī)格為長(zhǎng)（12cm～17cm）×寬（22cm～28cm）×厚（0.04cm～0.06cm栽培種袋采用規(guī)格為長(zhǎng)（15cm～17cm）×寬（35cm～38cm）×厚0.05cm。7.3.3.3裝料要求松緊適中，使用無(wú)棉蓋體或周轉(zhuǎn)棒封口，裝好后在4h內(nèi)裝鍋滅菌。7.3.4滅菌采用高壓蒸汽滅菌，滅菌溫度達(dá)到121℃~126℃后保持2.5h～3.0h。7.3.5冷卻滅菌結(jié)束后，滅菌鍋內(nèi)溫度降至50℃~60℃,趁熱將料袋搬運(yùn)到冷卻室，冷卻至28℃±2℃。7.3.6接種7.3.6.1超凈工作臺(tái)或接種箱應(yīng)徹底消毒后方可使用，在接種前用紫外滅菌燈照射30min，接種人員應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作要求進(jìn)行手和衣物的消毒。7.3.6.2接種用具使用前在酒精燈火焰上灼燒滅菌、冷卻。接種時(shí)一只手握斜面試管（或菌種袋/瓶），另一只手迅速拔開(kāi)試管塞（或打開(kāi)菌種封口物），用接種工具取3mm～5mm大小的菌種塊（或2cm3左右的菌種塊或2根枝條菌種）迅速接入料袋中央位置，迅速用封口物封好料袋，整個(gè)操作過(guò)程應(yīng)在火焰周?chē)?0cm范圍內(nèi)進(jìn)行。7.3.6.3將接種好的試管貼好菌種名稱(chēng)、接種日期的標(biāo)簽。7.3.7培養(yǎng)培養(yǎng)室使用前要徹底消毒和殺蟲(chóng)，藥劑的選用和使用應(yīng)符合GB/T8321（所有部分）和NY/T1276的規(guī)定。培養(yǎng)室要求環(huán)境干凈衛(wèi)生，通風(fēng)、避光、保溫條件良好，溫度控制在25℃±2℃。7.3.8培養(yǎng)期檢查5T/YYTC009—2024培養(yǎng)3天后開(kāi)始不定期檢查菌袋，及時(shí)清理污染袋、生長(zhǎng)不良等不合格菌袋。7.3.9菌種質(zhì)量原種和栽培種質(zhì)量均應(yīng)滿(mǎn)足NY/T1742—2009中3.2要求，同時(shí)還應(yīng)滿(mǎn)足表2要求。表2靈芝二級(jí)種和三級(jí)種感官要求無(wú)無(wú)7.3.10原種、栽培種保藏菌種長(zhǎng)好后在4℃~6℃避光保藏，保藏期不超過(guò)45天。8檢驗(yàn)按照NY/T1742中第5章的檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)項(xiàng)目應(yīng)全部符合7.2.7和7.3.9要求，任何一項(xiàng)不符合要求的為不合格菌種。9包裝、運(yùn)輸9.1包裝9.1.1母種使用錫箔紙包好，外包裝采用泡沫箱或有足夠硬度的紙箱，內(nèi)部有緩沖作用的輕質(zhì)材料填充，要保證使用材料的潔凈和空間衛(wèi)生。要有合格證書(shū)和使用說(shuō)明書(shū)。9.1.2原種和栽培種外包裝宜采用有足夠硬度的紙箱或塑料箱，菌種之間有緩沖作用的輕質(zhì)材料填充，要保證使用材料的潔凈和空間的衛(wèi)生。要有合格證書(shū)和使用說(shuō)明書(shū)。9.2運(yùn)輸9.2.1不應(yīng)與有毒物品混裝運(yùn)輸。9.2.2宜采