2025年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物考試題庫及答案1.依據(jù)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》（2023年修訂版），實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位和使用單位應(yīng)當(dāng)取得的法定資質(zhì)文件是？其有效期為幾年？答案：應(yīng)當(dāng)取得《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證》或《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證》；有效期均為5年。2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查的核心內(nèi)容包括哪些？請(qǐng)列舉至少5項(xiàng)。答案：包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇是否符合“3R”原則（替代、減少、優(yōu)化）；實(shí)驗(yàn)方案的必要性與科學(xué)性；實(shí)驗(yàn)過程中疼痛與應(yīng)激的控制措施；麻醉、鎮(zhèn)痛及安樂死方法的合理性；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸、飼養(yǎng)環(huán)境是否符合標(biāo)準(zhǔn)；人員資質(zhì)與培訓(xùn)情況；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后動(dòng)物處置方案等。3.SPF級(jí)（無特定病原體級(jí)）小鼠的飼養(yǎng)環(huán)境中，溫度、相對(duì)濕度、晝夜光照周期的具體要求分別是？答案：溫度應(yīng)控制在20-26℃（日波動(dòng)不超過3℃）；相對(duì)濕度40%-70%；光照周期為12小時(shí)光照/12小時(shí)黑暗（或14小時(shí)光照/10小時(shí)黑暗），照度150-300勒克斯（動(dòng)物籠具處）。4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料中，微生物指標(biāo)需滿足的最低要求是什么？（以大鼠生長料為例）答案：大鼠生長料中需控制：細(xì)菌總數(shù)≤1×10?CFU/g，霉菌總數(shù)≤1×10?CFU/g，沙門氏菌不得檢出，大腸桿菌≤1×10?MPN/g（或不得檢出特定致病血清型）。5.判斷題：近交系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基因純合度需達(dá)到99%以上，因此其個(gè)體間差異極小，適合作為標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)材料。（）答案：√（近交系通過連續(xù)20代以上兄妹交配或親子交配培育，基因純合度≥99%，遺傳背景一致，個(gè)體差異小）。6.簡答題：簡述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳質(zhì)量控制中“封閉群”的定義及核心管理要求。答案：封閉群是指以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群，在不從外部引入新個(gè)體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上。核心管理要求包括：保持種群大?。ㄐ⌒蛧X類封閉群基礎(chǔ)群≥25對(duì)）；避免近交（每代近交系數(shù)上升不超過1%）；定期進(jìn)行遺傳檢測(cè)（如生化標(biāo)記法、微衛(wèi)星DNA分析法）；記錄完整繁殖譜系，防止遺傳漂變。7.案例分析題：某實(shí)驗(yàn)室購入一批清潔級(jí)豚鼠，飼養(yǎng)1周后出現(xiàn)群體性腹瀉，部分動(dòng)物死亡。剖檢可見腸黏膜充血、壞死，肝脾腫大。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)發(fā)現(xiàn)糞便中存在大量革蘭氏陰性桿菌，血清學(xué)檢測(cè)顯示該菌對(duì)頭孢類抗生素敏感。請(qǐng)判斷可能的病原體，并提出預(yù)防與控制措施。答案：可能病原體為沙門氏菌（如鼠傷寒沙門氏菌）。預(yù)防措施：嚴(yán)格引種檢疫（購入前檢測(cè)沙門氏菌）；加強(qiáng)飼料與飲水衛(wèi)生（避免被糞便污染）；飼養(yǎng)環(huán)境定期消毒（使用過氧乙酸或次氯酸鈉）；工作人員操作前后洗手，避免交叉污染。控制措施：立即隔離發(fā)病動(dòng)物，對(duì)同群動(dòng)物進(jìn)行抗生素治療（如口服頭孢噻肟）；淘汰重癥動(dòng)物并無害化處理；徹底清洗消毒籠具、墊料及飼養(yǎng)區(qū)域；重新評(píng)估供應(yīng)商資質(zhì)，必要時(shí)更換來源。8.選擇題：以下哪種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的妊娠期最短？（）A.小鼠B.大鼠C.豚鼠D.兔答案：A（小鼠妊娠期19-21天，大鼠21-23天，豚鼠65-70天，兔30-32天）。9.填空題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病毒檢測(cè)中，小鼠必須排除的核心病毒包括小鼠肝炎病毒（MHV）、仙臺(tái)病毒（Sendai）、鼠痘病毒（Ectromelia）、______和______。答案：淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒（LCMV）；呼腸孤病毒Ⅲ型（Reo-3）。10.論述題：結(jié)合“3R原則”，試述在腫瘤實(shí)驗(yàn)中如何優(yōu)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用。答案：在腫瘤實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用“3R原則”需從以下方面優(yōu)化：（1）替代（Replacement）：優(yōu)先使用體外模型（如腫瘤細(xì)胞系培養(yǎng)、類器官技術(shù)）或低等動(dòng)物（如果蠅、斑馬魚）進(jìn)行初步篩選，減少哺乳動(dòng)物使用；（2）減少（Reduction）：通過實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化（如隨機(jī)化分組、增加每組樣本量計(jì)算的準(zhǔn)確性），避免重復(fù)實(shí)驗(yàn)；利用影像學(xué)技術(shù)（如活體熒光成像）實(shí)現(xiàn)同一動(dòng)物多時(shí)間點(diǎn)觀察，減少動(dòng)物數(shù)量；（3）優(yōu)化（Refinement）：選擇疼痛程度低的建模方法（如皮下接種替代原位接種）；使用麻醉（如異氟醚吸入）減輕手術(shù)操作疼痛；術(shù)后提供鎮(zhèn)痛藥物（如布托啡諾）；改善飼養(yǎng)環(huán)境（增加墊料、隱蔽物）降低應(yīng)激；定期評(píng)估動(dòng)物福利（如體重、活動(dòng)度、腫瘤大小），達(dá)到倫理終點(diǎn)時(shí)及時(shí)安樂死。11.判斷題：無菌級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是指體內(nèi)外無任何微生物和寄生蟲的動(dòng)物，因此其飼養(yǎng)環(huán)境需完全隔絕外界空氣。（）答案：×（無菌級(jí)動(dòng)物需在隔離器中飼養(yǎng)，空氣經(jīng)高效過濾器（HEPA）過濾，但并非完全隔絕，而是通過嚴(yán)格的微生物控制維持無菌狀態(tài)）。12.簡答題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施中的“壓差梯度”有何作用？SPF級(jí)動(dòng)物房的壓差應(yīng)如何設(shè)置？答案：壓差梯度的作用是防止外界微生物通過空氣流動(dòng)進(jìn)入清潔區(qū)，或防止污染區(qū)微生物擴(kuò)散至清潔區(qū)。SPF級(jí)動(dòng)物房的壓差設(shè)置應(yīng)為：清潔走廊＞動(dòng)物飼養(yǎng)間＞污染走廊，相鄰區(qū)域壓差≥10Pa；緩沖間與飼養(yǎng)間壓差≥5Pa；外界與清潔區(qū)壓差≥20Pa（具體需符合GB14925-2021《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施》標(biāo)準(zhǔn)）。13.選擇題：以下哪種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)結(jié)核桿菌高度敏感，常用于結(jié)核病研究？（）A.小鼠B.大鼠C.豚鼠D.地鼠答案：C（豚鼠對(duì)結(jié)核桿菌敏感性是小鼠的1000倍，感染后癥狀與人類相似，是結(jié)核病研究的經(jīng)典模型）。14.案例分析題：某實(shí)驗(yàn)室使用C57BL/6小鼠構(gòu)建阿爾茨海默?。ˋD）模型，采用APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因鼠。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)部分小鼠在3月齡時(shí)出現(xiàn)異常攻擊行為，死亡率升高?？赡艿脑蛴心男繎?yīng)如何排查？答案：可能原因：（1）轉(zhuǎn)基因品系遺傳污染（如混入其他品系基因）；（2）飼養(yǎng)環(huán)境應(yīng)激（如密度過高、噪音）；（3）微生物感染（如小鼠腦脊髓炎病毒）；（4）模型構(gòu)建過程中基因插入位置異常導(dǎo)致行為改變；（5）飼料營養(yǎng)不均衡（如缺乏ω-3脂肪酸影響神經(jīng)發(fā)育）。排查方法：（1）進(jìn)行遺傳檢測(cè)（PCR擴(kuò)增轉(zhuǎn)基因靶點(diǎn)）確認(rèn)品系純度；（2）檢查飼養(yǎng)環(huán)境參數(shù)（溫度、濕度、照度、籠具密度）是否符合SPF級(jí)標(biāo)準(zhǔn)；（3）采集病鼠腦組織進(jìn)行病毒檢測(cè)（如免疫熒光法檢測(cè)腦脊髓炎病毒抗原）；（4）通過全基因組測(cè)序分析轉(zhuǎn)基因插入位點(diǎn)；（5）檢測(cè)飼料營養(yǎng)成分（粗蛋白、必需脂肪酸含量）是否符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生長需求。15.填空題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂死的基本原則包括______、______、______，常用的物理方法有______和______。答案：快速無痛苦、避免動(dòng)物恐懼與焦慮、確保動(dòng)物死亡確實(shí)；頸椎脫臼（適用于小鼠、大鼠）、二氧化碳吸入（適用于多數(shù)哺乳動(dòng)物）。16.論述題：對(duì)比普通級(jí)、清潔級(jí)、SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物控制要求，說明SPF級(jí)動(dòng)物在生物醫(yī)學(xué)研究中的優(yōu)勢(shì)。答案：微生物控制要求對(duì)比：-普通級(jí)：僅排除人畜共患病原（如沙門氏菌、弓形蟲），允許存在條件致病菌；-清潔級(jí)：在普通級(jí)基礎(chǔ)上，排除部分動(dòng)物專致病原（如小鼠肺炎病毒、大鼠支氣管敗血波氏桿菌）；-SPF級(jí)：排除所有明確的致病微生物（包括病毒、細(xì)菌、寄生蟲），僅允許存在非致病的共生微生物。SPF級(jí)動(dòng)物的優(yōu)勢(shì)：（1）實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可靠：無潛在病原體干擾，避免感染導(dǎo)致的生理、病理指標(biāo)偏差；（2）重復(fù)性好：微生物背景一致，不同實(shí)驗(yàn)間結(jié)果可比性高；（3）安全性高：減少實(shí)驗(yàn)人員感染風(fēng)險(xiǎn)（如避免漢坦病毒、淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒傳播）；（4）適用于高端研究：如免疫缺陷動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、基因功能研究、藥物安全性評(píng)價(jià)等對(duì)微生物控制要求嚴(yán)格的領(lǐng)域。17.判斷題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物墊料應(yīng)選擇吸濕性強(qiáng)、無刺激性的材料，因此楊木刨花比玉米芯更適合作為小鼠墊料。（）答案：√（楊木刨花吸濕性好、粉塵少，玉米芯易滋生霉菌且粉塵較多，可能誘發(fā)小鼠呼吸道炎癥）。18.簡答題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量檢測(cè)中，“哨兵動(dòng)物”的作用是什么？如何設(shè)置哨兵動(dòng)物？答案：作用：通過接觸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的墊料、籠具等，監(jiān)測(cè)飼養(yǎng)環(huán)境中的微生物污染情況，間接反映實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群的微生物狀態(tài)。設(shè)置方法：（1）選擇與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同品系、無特定病原體的年輕動(dòng)物作為哨兵；（2）每10-20個(gè)飼養(yǎng)籠設(shè)置1只哨兵動(dòng)物（或按屏障系統(tǒng)面積比例設(shè)置）；（3）將哨兵動(dòng)物與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的臟墊料（每2周更換一次）同籠飼養(yǎng)；（4）每3個(gè)月對(duì)哨兵動(dòng)物進(jìn)行全面微生物檢測(cè)（病毒、細(xì)菌、寄生蟲）；（5）檢測(cè)結(jié)果異常時(shí)，提示實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群可能被污染，需進(jìn)一步排查。19.選擇題：以下哪種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別鑒別最易通過觀察肛門與生殖器間距判斷？（）A.小鼠B.兔C.犬D.猴答案：A（小鼠幼崽的肛門與生殖器間距（AGD）在雄性中顯著大于雌性，出生后即可通過此特征鑒別性別）。20.案例分析題：某實(shí)驗(yàn)室計(jì)劃開展人源腫瘤異種移植實(shí)驗(yàn)（PDX模型），需選擇免疫缺陷小鼠。請(qǐng)說明應(yīng)選擇哪種品系（如NOD/SCID、BALB/cnude、C.B-17SCID），并闡述選擇依據(jù)及飼養(yǎng)注意事項(xiàng)。答案：應(yīng)選擇NOD/SCID小鼠（非肥胖糖尿病/嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠）。選擇依據(jù)：NOD背景小鼠存在補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷（C5缺陷）和樹突狀細(xì)胞功能異常，SCID突變導(dǎo)致T、B淋巴細(xì)胞缺失，相比BALB/cnude（僅T細(xì)胞缺陷）和C.B-17SCID（T、B細(xì)胞缺陷但NK細(xì)胞功能正常），NOD/SCID的免疫抑制更徹底，可提高人源腫瘤細(xì)胞的成瘤率和移植成功率。飼養(yǎng)注意事項(xiàng)：（1）必須在SPF級(jí)以上環(huán)境中飼養(yǎng)（因免疫缺陷易感染）；（2）使用無菌飼料、飲水（經(jīng)高壓滅菌或酸化處理）；（3）墊料需高溫高壓消毒；（4）操作時(shí)嚴(yán)格無菌（佩戴手套、口罩，使用超凈臺(tái)）；（5）定期檢測(cè)機(jī)會(huì)性感染（如卡氏肺孢子蟲、隱孢子蟲）；（6）避免與其他品系小鼠混養(yǎng)，防止交叉感染。21.填空題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病理學(xué)檢查中，“大體解剖”需重點(diǎn)觀察的組織器官包括______、______、______（至少3項(xiàng)），常見的病理變化描述術(shù)語有______、______、______（至少3項(xiàng)）。答案：心、肝、脾、肺、腎（任選3項(xiàng)）；充血、出血、水腫、壞死、增生（任選3項(xiàng)）。22.論述題：結(jié)合《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查指南》，試述科研人員在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)階段應(yīng)履行的倫理責(zé)任。答案：科研人員在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)階段需履行以下倫理責(zé)任：（1）必要性論證：證明實(shí)驗(yàn)?zāi)康木哂锌茖W(xué)或社會(huì)價(jià)值，且無法通過替代方法（如計(jì)算機(jī)模擬、體外實(shí)驗(yàn)）完成；（2）減少原則應(yīng)用：通過樣本量計(jì)算（如使用Power分析）確定最小動(dòng)物數(shù)量，避免冗余實(shí)驗(yàn)；采用多指標(biāo)檢測(cè)（如同一動(dòng)物采集血樣、組織樣本）減少重復(fù)使用；（3）優(yōu)化設(shè)計(jì)：選擇疼痛程度最低的實(shí)驗(yàn)方法（如非侵入性檢測(cè)替代手術(shù)）；合理選擇麻醉劑（如根據(jù)動(dòng)物種屬選擇異氟醚或氯胺酮）；設(shè)計(jì)人道終點(diǎn)（如腫瘤體積超過體重10%時(shí)終止實(shí)驗(yàn)）；（4）動(dòng)物選擇：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適種屬（如神經(jīng)科學(xué)研究選大鼠，免疫學(xué)研究選小鼠），避免使用高等靈長類動(dòng)物（如猴）進(jìn)行非必要實(shí)驗(yàn)；（5）倫理審查：在實(shí)驗(yàn)開始前提交完整方案至倫理委員會(huì)，包括動(dòng)物數(shù)量、操作步驟、福利保障措施等，經(jīng)審查通過后方可實(shí)施；（6）培訓(xùn)與資質(zhì)：確保參與實(shí)驗(yàn)人員接受過實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利與操作規(guī)范培訓(xùn)，具備相應(yīng)技術(shù)能力。23.判斷題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸時(shí)，為避免應(yīng)激，應(yīng)將大鼠與小鼠混裝在同一運(yùn)輸箱中。（）答案：×（不同種屬動(dòng)物混裝可能導(dǎo)致攻擊行為或交叉感染，需分箱運(yùn)輸，且每箱密度不超過飼養(yǎng)密度的70%）。24.簡答題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物檢測(cè)中，“必須檢測(cè)項(xiàng)目”與“必要時(shí)檢測(cè)項(xiàng)目”的區(qū)別是什么？請(qǐng)各舉2例（以小鼠為例）。答案：必須檢測(cè)項(xiàng)目是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的、無論是否發(fā)病都需定期檢測(cè)的病原，如小鼠肝炎病毒（MHV）、仙臺(tái)病毒（Sendai）；必要時(shí)檢測(cè)項(xiàng)目是當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)異常癥狀（如腹瀉、消瘦）時(shí)需針對(duì)性檢測(cè)的病原，如鼠輪狀病毒（EDIM）、泰澤氏菌（Clostridiumpiliforme）。25.案例分析題：某實(shí)驗(yàn)室使用SD大鼠進(jìn)行高血壓藥物實(shí)驗(yàn)，灌胃給藥后2小時(shí)，部分大鼠出現(xiàn)呼吸急促、抽搐癥狀。可能的原因有哪些？應(yīng)采取哪些應(yīng)急措施？答案：可能原因：（1）藥物過量（給藥劑量計(jì)算錯(cuò)誤）；（2）藥物過敏反應(yīng)（大鼠對(duì)藥物成分敏感）；（3）灌胃操作失誤（誤入氣管導(dǎo)致窒息）；（4）藥物配伍禁忌（與飼料中的成分發(fā)生反應(yīng)）；（5）大鼠本身存在隱性疾病（如心臟病）。應(yīng)急措施：（1）立即停止給藥，將發(fā)病大鼠移至安靜環(huán)境；（2）對(duì)呼吸急促者給予氧氣吸入（使用面罩或鼻導(dǎo)管）；（3）抽搐者注射地西泮（0.1-0.2mg/kg）鎮(zhèn)靜；（4）檢查灌胃記錄（確認(rèn)劑量、操作是否正確）；（5）采集血液樣本檢測(cè)藥物濃度及生化指標(biāo)（如肝腎功能）；（6）對(duì)死亡大鼠進(jìn)行剖檢，觀察氣管、肺部是否有藥物殘留，記錄病理變化；（7）調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案（如降低給藥劑量、更換溶媒），重新進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。26.選擇題：以下哪種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的紅細(xì)胞無細(xì)胞核？（）A.小鼠B.大鼠C.兔D.雞答案：A（小鼠、大鼠等哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核；鳥類（如雞）紅細(xì)胞有細(xì)胞核）。27.填空題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基因編輯技術(shù)中，CRISPR/Cas9系統(tǒng)的核心組件包括______和______，其作用是______。答案：sgRNA（單鏈引導(dǎo)RNA）、Cas9核酸酶；sgRNA引導(dǎo)Cas9到特定基因位點(diǎn)，Cas9切割DNA雙鏈，誘導(dǎo)基因敲除或插入。28.論述題：對(duì)比近交系與封閉群實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用場景，說明如何根據(jù)研究需求選擇合適的動(dòng)物類型。答案：近交系的應(yīng)用場景：（1）遺傳背景一致的實(shí)驗(yàn)（如基因功能