第41講動(dòng)物細(xì)胞工程

1.簡述動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過程、條件及其應(yīng)用；

2.簡述克隆動(dòng)物的概念含義和基本原理

3.簡述體細(xì)胞核移植技術(shù)和動(dòng)物克隆技術(shù)，以及應(yīng)用前景

4.簡述細(xì)胞融合的方法過程和單克隆抗體的制備過程應(yīng)用

考點(diǎn)要求考題統(tǒng)計(jì)考情分析

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)2023,湖南、遼寧，選擇本專題知識難度較高、基礎(chǔ)性強(qiáng)。

2023,湖南，填空考查學(xué)生對動(dòng)物細(xì)胞工程的整體性

2022,福建、遼寧江蘇、湖北，選擇的認(rèn)識，或結(jié)合一些情景信息或表

格信息設(shè)置題目，考查學(xué)生的應(yīng)變

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與2023,北京，選擇

能力、獲取信息和綜合分析能力。

單克隆抗體2022,福建、浙江，填空

2022,江蘇、山東，填空

動(dòng)物體細(xì)胞核移植技2021,江蘇、浙江，選擇

術(shù)和克隆動(dòng)物2021,湖南，填空

動(dòng)物細(xì)胞

培養(yǎng)條件

動(dòng)物培養(yǎng)由增M

(pH,氣

I普若一獲得新細(xì)眼,不形成個(gè)體體、制清

動(dòng)物體!!這廠里奧一⑩現(xiàn)她?融族的全能性

后話植一1_^_靛而克隆動(dòng)物個(gè)體:....??*.

胚胎移植

邈也與眸原虜耀胞膜的流出展…：

..F7一物理法、?化學(xué)法、生物法:

譬答記小w1注射?優(yōu)血........漿細(xì)胞與

單克a抗抗體

/---1已磁的B淋巴細(xì)胞和■牖細(xì)胞

產(chǎn)生。啦體的雜交螂細(xì)胞

:翰選：

兩次篩選的

目的與方法

考點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

夯基?必備基礎(chǔ)知識梳理

原理和方法細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)

操作水平細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平

按照人的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得

目的

細(xì)胞產(chǎn)品

分類植物_細(xì)胞工程和&物細(xì)胞工程

與基因工程相比，細(xì)胞工程是細(xì)胞或細(xì)胞器水平上的生物技術(shù)，后者是分子水平上的生物技術(shù)

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件

營養(yǎng)條件：播類、箱收取.無機(jī)杜.堆上

—索、保生長因子.激量元素等營養(yǎng)物啦.

此外通常還需等一些天然成分

r遂行滅康

無iwx處理

培一毒的環(huán)境在無前環(huán)境下攆作

養(yǎng)I定期更換培養(yǎng)液,清除代謝物

條

仲溫度.pH和滲透壓：哺乳動(dòng)物的細(xì)胞培

|一養(yǎng)溫度多以36.5/0.5P為宜.多數(shù)動(dòng)物

細(xì)*生存的適宜pH為

[95%的空氣：其中5為細(xì)施

e?氣體環(huán)境，代熱所必需的

15%的CO?:____

血清、血漿可補(bǔ)充細(xì)胞生長和增殖所需的未知營養(yǎng)物質(zhì)取動(dòng)物組縱聯(lián)

無菌、無毒的環(huán)境：即對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌（填I(lǐng)胰蛋白酶或

機(jī)械法[膠原蛋白酶

“滅菌”“消毒”）處理,培養(yǎng)過程加一定量的抗生素殺菌,

但要注意選擇抗生素的種類和劑量；此外還應(yīng)定期更換培養(yǎng)分散成單個(gè)細(xì)胞

液，清除代謝產(chǎn)物，這樣做的目的是防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物的積累加入

培養(yǎng)液

對細(xì)胞自身造成危害。

制成細(xì)胞懸液

通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%的空氣和

5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，

2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程

①在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素，從培養(yǎng)基功能的角度分

類屬于選擇培養(yǎng)基，用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中沒有加入

凝固劑（如瓊脂），從物理性質(zhì)分類屬于液體培養(yǎng)基，從化

學(xué)成分分類屬于合成培養(yǎng)基

②選材：動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官；

原因是細(xì)胞分化程度低，分裂能力強(qiáng)，容易培養(yǎng)。

梏件怕美

③使用胰蛋白酶分散細(xì)胞說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。

用胰蛋白酶處理會（會/不會）把所培養(yǎng)的細(xì)胞消化掉？原因是蛋白質(zhì)是細(xì)胞膜的主要成分之一；故必須控

制好胰蛋白酶的用量和處理時(shí)間。

④培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞的目的是：利于營養(yǎng)物質(zhì)吸收及便于代謝廢物排出，利于細(xì)胞生長

和繁殖。

⑤細(xì)胞貼壁和接觸抑制

A.細(xì)胞貼壁是指體外培養(yǎng)的細(xì)胞貼附在瓶壁生長的現(xiàn)象;接觸抑制是指當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互

接觸時(shí)，細(xì)胞通常會停止分裂增殖的現(xiàn)象。

B.細(xì)胞貼壁生長對培養(yǎng)瓶的要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。

C.打破接觸抑制現(xiàn)象的方法是將貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼

續(xù)增殖。

【點(diǎn)撥】將癌細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)不會（會/不會）出現(xiàn)細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象.

正常細(xì)胞腫瘤細(xì)胞

失去接觸抑制

形成一層細(xì)胞可形成多層細(xì)胞

⑥原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)辨析：

A.含義不同：

?動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。

?當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到貼滿瓶壁時(shí)用胰蛋白酶等處理，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)的過程稱為傳代培養(yǎng)。

B.細(xì)胞增殖特點(diǎn)不同：

?原代培養(yǎng):細(xì)胞分裂旺盛。

?傳代培養(yǎng):正常細(xì)胞的傳代培養(yǎng)的次數(shù)一般是有限的，一般傳至10代后就不易傳下去，一般來說細(xì)胞在

傳至10-50代左右，增殖會逐漸緩慢，甚至停止。但有些細(xì)胞會克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性細(xì)

胞。目前使用的（如用于核移植的供體細(xì)胞）或冷凍保存的正常細(xì)胞通常選用傳代代以內(nèi)的細(xì)胞，

這樣做的目的是持細(xì)胞正常的二倍體核型。

3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的比較

項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)

理論基礎(chǔ)細(xì)胞增殖￡植物細(xì)胞的全能性

無菌；用機(jī)械的方法或胰蛋□

培養(yǎng)前

白酶、膠原蛋白醐等處理，無菌、離體

處理

使組織分散成單個(gè)細(xì)胞

動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡

取材植物幼嫩的部位或花藥等

動(dòng)物的器官或組織

培養(yǎng)基性質(zhì)液體固體

培養(yǎng)基糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維

成分維生素和動(dòng)物血清等生素.植物激素和瓊脂等

項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細(xì)胞，

結(jié)果可產(chǎn)生新個(gè)體

不形成新個(gè)體

快速繁殖、作物脫毒、細(xì)

人造皮膚的構(gòu)建、動(dòng)物分泌

應(yīng)用胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)和單

蛋白的規(guī)?；a(chǎn)

倍體育種等

①都需人工條件下的無菌操作；②都需要適宜的溫度、

pH等條件；③都進(jìn)行有絲分裂，都不涉及減數(shù)分裂

4.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用

醫(yī)亙H甲期胚冊

具有分化成成年動(dòng)物體內(nèi)的任

1市」何一種類型的金眼，并進(jìn)一步

〔s時(shí)：形成機(jī)體的所有組織和器官法

;至個(gè)體的播能

成體蛆織或用官內(nèi)的干細(xì)施.

;包括H中的造血干細(xì)胞、神

:穌系統(tǒng)中的神經(jīng)F蝴第和?丸

中的精原干細(xì)施等

一艘認(rèn)為，成體干蒯*具有由

以特異性，只能分化成特定的

細(xì)庖或組織,不具有發(fā)育成完

整個(gè)體的能力

肝細(xì)腿

f------O------w-----S3-----

H于成體WL具有成體謗號多?a(iPS4UI)

杵鼻住,只黛分化或特定的細(xì)在治療■狀物k黃金、阿爾

■MR,不具有妻聲成完整茨海明、心比甘疾如等弟

標(biāo)的健力I■的研究取得保進(jìn)展

r-------------------------1-用Ml------------------------

因?yàn)榘秾?dǎo)過程無須破壞胚胎，而且iPS組題可以來△于病人

自身的體細(xì)用，將它移植回病人體內(nèi)后，醯上可以避免

賴排斥反應(yīng).所以科學(xué)家普遍認(rèn)為iPS細(xì)K的應(yīng)用前景優(yōu)

〔于附&干細(xì)電

①胚胎干細(xì)胞為什么可以解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題？其應(yīng)用有什么限制因素？

答案通過胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，可以培育出人造組織器官，從而解決供體器官不足問題，另一方面，

由于是自身細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化形成的，所以無免疫排斥反應(yīng)。胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取，這涉及倫理問

題，因而限制了應(yīng)用。

②為什么科學(xué)家認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞？

答案iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)過程無需破壞胚胎，而且iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體

內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。

③科學(xué)家已嘗試采用多種方法來制備iPS細(xì)胞，嘗試說出幾種獲取iPS細(xì)胞的方法。

答案借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中,直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成iPS

細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的，后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)

胞。

【總結(jié)歸納】

關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的4點(diǎn)提醒

第一次用(白

?對動(dòng)物姐織進(jìn)行處理行

的JR養(yǎng)觸原代培養(yǎng)

然界的關(guān)■量者用施

《查白W的對藏和第二次用腺超白1?處理，

使細(xì)胸從瓶箜上睨離下來.

分瓶后的胡胸靖界為傳代

培養(yǎng)

值?山廝加近理前我演芬港i而麻「百；

注■?■培靠過程中沒畬艮分化和再分化過程！

植物徽軟培養(yǎng)可我得新個(gè)體，體現(xiàn)了*愿的全

?性，而Q，tML塔舞只他將到他*,沒有體

AM■的全

加(*?*a露笈而茁通行有*菽斥8

.提升?必考考向歸納

1.重組新冠病毒疫苗是將新冠病毒S蛋白受體結(jié)合區(qū)(RBD)基因通過基因工程技術(shù),重組到中國倉鼠卵巢

(CHO)細(xì)胞內(nèi)，在體外培養(yǎng)并大量表達(dá)出RBD二聚體的方法。下列說法正確的是()

A.CHO細(xì)胞作為新冠病毒的宿主細(xì)胞，提供病毒所需的營養(yǎng)物質(zhì)

B.在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞，需要用液體培養(yǎng)基

C.體外培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時(shí)需添加適量的干擾素防止雜菌污染

D.CHO細(xì)胞能夠表達(dá)出RBD二聚體，說明新冠病毒與倉鼠的遺傳物質(zhì)相同

考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體

?夯基?必備基礎(chǔ)知識梳理

1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)

?拿：便網(wǎng)個(gè)■方個(gè)動(dòng)物結(jié)合影成一

個(gè)第11的技術(shù)

動(dòng)

物

■

靖構(gòu)基.：___________________________

?

*

結(jié)IB；JB成具**來四個(gè)或拿個(gè)41施遺傳

合自息的兼交IBU

技

術(shù)f①安破了有性奈交方法的局限，使

jBH柒交成為可建；②成力研究

知施遺傳、編ai免疫、腫殖和培育

生?新品牌等的重鼻手段,為冊盤

?克?抗體開廊了新途楚

答案：PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等

細(xì)胞膜的流動(dòng)性

植

e動(dòng)

物

物

體

細(xì)

細(xì)

胞

胞

融

雜

合

植

交

過

物

過

程

組

程

織

培

養(yǎng)

植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較

項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)

細(xì)胞膜的流動(dòng)性、

原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性

植物細(xì)胞的全能性

融合前的用纖維素酣和果膠醐用胰蛋白酶或膠原

處理進(jìn)行去壁蛋白酶使細(xì)胞分散

物理：離心，振動(dòng)，電激

誘導(dǎo)融合物理：電激、離心等

化學(xué)：PEG.高Ca2+一化學(xué)：

的方法PEG

高pH融合法生物：滅活的病毒

結(jié)果獲得雜種植株獲得雜交細(xì)胞

植物體細(xì)胞雜交技動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)

項(xiàng)目術(shù)

應(yīng)用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體

突破遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離，擴(kuò)展

意義了雜交的親本組合

動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，

相似點(diǎn)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法

相似

2.單克隆抗體的制備

A.抗體的概念：抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與之發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的蛋白質(zhì)。

B.抗體是由漿細(xì)胞合成和分泌的，每種這種細(xì)胞能產(chǎn)生一種（一種/多種）抗體。

C.動(dòng)物免疫反應(yīng)中產(chǎn)生的抗體有多（一/多）種

D.傳統(tǒng)制備抗體的方法：向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使之產(chǎn)生抗體，然后從動(dòng)物血清中分離所需要的

抗體；其缺點(diǎn)是：產(chǎn)量低，純度低，特異性差。

E.為獲得單一的抗體，不能（能/不能）選用特定的漿細(xì)胞直接去培養(yǎng)；理由是漿細(xì)胞已經(jīng)高度分化，不能

再分裂。

①制備原理

A.B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)：一種B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。

B.骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn)：能在體外大量增殖。

C.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。

②制備過程

A.圖中給小鼠注射特定的抗原蛋白，其目的是什么？

刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答，從而產(chǎn)生特定的B淋巴細(xì)胞。

B.若僅考慮細(xì)胞的兩兩融合，在獲取雜交瘤細(xì)胞的過程中，篩選淘汰的細(xì)胞有幾種類型？為什么？

有未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞（B—B融合細(xì)胞、瘤一瘤融合細(xì)胞）兩種類型。出現(xiàn)不同類型

是因?yàn)榧?xì)胞融合不是100%的，且是隨機(jī)的。

E尾簿T礪自身?合編腦

匕的_京孱百言丁泉說疝;Mitt合的陰時(shí)死亡

1如*上述雜文斕電

?開.|舁克抗體檢陽

答案：B淋巴細(xì)胞選擇雜交瘤細(xì)胞

C.單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的

項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選

由于小鼠在生活中還受到其他

篩選誘導(dǎo)融合后會得到多種雜交細(xì)抗原的刺激，所以經(jīng)選擇培養(yǎng)

原因胞，另外還有未融合的細(xì)胞獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生

其他抗體的細(xì)胞

項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選

用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未

用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔

融合的細(xì)胞和融合的具有同種

只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下

篩選核的細(xì)胞（"B—B"細(xì)胞、

開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，

方法"瘤一瘤”細(xì)胞）都會死亡，只

經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性

有融合的雜交瘤細(xì)胞（

"BTg"抗體的細(xì)胞群

細(xì)胞）才能生長

篩選得到能分泌所需抗體的雜交瘤

得到雜交瘤細(xì)胞

目的細(xì)胞

D.第一次篩選獲得雜交瘤細(xì)胞的方法:

①細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基喋吟阻斷。

②人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但不能分裂增殖。

③鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑，沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。在培養(yǎng)基中加入氨基喋吟，B淋巴

細(xì)胞及同型融合細(xì)胞不能增殖，骨髓瘤細(xì)胞及同型融合細(xì)胞（氨基喋吟阻斷）不能增殖，只有雜交瘤細(xì)胞能

無限增殖。

③單克隆抗體的應(yīng)用

A.作為診斷試劑：在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要的作用。

B.運(yùn)載藥物：抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)

現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成。

?ADC的抗體和藥物各具有什么作用？

ADC的抗體和藥物具有的作用分別是導(dǎo)向和治療。

B.運(yùn)載藥物：

?除了細(xì)胞毒素，還有哪些物質(zhì)理論上可以作為ADC偶聯(lián)的藥物？

放射性同位素和化學(xué)藥物等。

?ADC在臨床應(yīng)用上的作用機(jī)理是什么？

其作用機(jī)理是通過單克隆抗體的靶向作用特異性地識別腫瘤細(xì)胞表面抗原，然后利用細(xì)胞本身具備的內(nèi)吞

作用使化學(xué)藥物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞體內(nèi)發(fā)生藥力，從而達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的。

C.治療疾病。

Y

多功能照質(zhì)體藥物進(jìn)入ie細(xì)胞

【教材拾遺】

（選擇性必修3P50"思考?討論”）抗體一藥物偶聯(lián)物（antibody-drugconjugate,ADC）通過將細(xì)胞毒素與能特

異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物（如

細(xì)胞毒素）三部分組成,它的作用機(jī)制如下圖所示。

提升-必考考向歸納

3.豬繁殖與呼吸綜合征是一種嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的傳染病，由PRRSV病毒引起。我國科學(xué)家制備出

PRRSV病毒GP3蛋白的單克隆抗體可對該病進(jìn)行診斷和治療，過程如下圖所示。下列敘述不正確的是（）

GP3蛋小取骨做

白號瘠細(xì)胞p,第1次.第2次

簿選蜥選

—*18--------

內(nèi)

一細(xì)胞甲-乙

A.用純化的GP3蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),以獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞

B.過程①可以用PEG誘導(dǎo)融合，融合原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性

C.用特定的選擇培養(yǎng)基對細(xì)胞乙進(jìn)行篩選，融合細(xì)胞都能正常生長

D.丙和丁只含雜交瘤細(xì)胞，第2次篩選前需對細(xì)胞丙進(jìn)行克隆培養(yǎng)

考點(diǎn)三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

?夯基?必備基礎(chǔ)知識梳理

世界第一例體細(xì)胞核移植的克隆動(dòng)物

名字：多利(Dolly)

性別：雌

編號：6LL3

出生日期：1996年7月5日

出生地點(diǎn)：英國愛丁堡市羅斯林研究所

締造者：韋爾穆特及其領(lǐng)導(dǎo)的小組

基因父親：無

基因母親：一只芬蘭多塞特白面綿羊

線粒體母親：一只蘇格蘭黑臉羊

生育母親：一只蘇格蘭黑臉羊

重組細(xì)胞

子女：生育6名，存活5名阿

死亡日期：2003年2月14日

早期胚胎

死亡原因：被確診患進(jìn)行性肺病后處以安樂死性植

vl/

，莉

1.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)

①概念分析

A.供體：動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核。

B.受體:去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞。

C.結(jié)果:重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。

D.原理:動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。

②哺乳動(dòng)物核移植類型：胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。

答案：MII去核卵母

①動(dòng)物核移植技術(shù)的理論基礎(chǔ)(原理)是什么？克隆動(dòng)物屬于有性生殖還是無性繁殖？

動(dòng)物細(xì)胞核的全能性?？寺?dòng)物屬于無性繁殖。

②為什么體細(xì)胞核移植較胚胎細(xì)胞核移植更困難？

由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性相對容易；而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難。

因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度就明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。

③受體細(xì)胞為什么選用卵母細(xì)胞？

體積大，易操作；去核時(shí)易于同時(shí)吸走第一極體；含有激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì)。

④為什么不是取供體細(xì)胞核進(jìn)行核移植操作，而是將供體細(xì)胞整個(gè)注入去核卵母細(xì)胞中？

保證供核不被破壞，使克隆動(dòng)物更像供體動(dòng)物，操作也方便。

⑤在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？

為使核移植的胚胎或動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)全部來自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞，在供體細(xì)胞的細(xì)胞

核移至受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)胞的核遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹?/p>

⑥從多莉的產(chǎn)生過程可以看出多莉有三個(gè)親本，探究多莉的性狀表現(xiàn)與三個(gè)親本的關(guān)系并分析原因。

A.大多數(shù)性狀與母羊A（體細(xì)胞核供體）相同，因基因型與母羊A完全一樣。

B.少數(shù)性狀與母羊B（卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體）相同，因細(xì)胞質(zhì)中的基因來自母羊B,受質(zhì)基因控制的性狀

與母羊B相同。

C.性狀與母羊C（代孕母體）無關(guān)，因母羊C沒有為新個(gè)體提供遺傳物質(zhì)。

【教材拾遺】

教材隱性知識：

源于選擇性必修3P54“相關(guān)信息”：目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也

有人采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的

情況下去核或使其中的DNA變性。

通過顯微操作去除卵母細(xì)胞的核，再用微型吸管可一并吸出細(xì)胞核和第一極體。

可用物理或化學(xué)方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活受體細(xì)胞，使其完成細(xì)

胞分裂和發(fā)育的過程

畜牧業(yè)加速家畜遺傳改良8程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育

①作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白;

前醫(yī)藥3專基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織和器官可以用于異種移植

衛(wèi)生③人核移植睡王緞蟀過誘導(dǎo)分化形成相應(yīng)的細(xì)胞、組

景

織、器官，可用于器官移植

保護(hù)瀕

增加瀕危物種的存活數(shù)量

危物種

問①成功率非常低;②絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健虞司題，表現(xiàn)出遺

題傳和生!陷

【總結(jié)歸納】

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抗體體的制備

提升?必考考向歸納

3.在體細(xì)胞克隆猴培育過程中，為調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá),提高胚胎的發(fā)育率和妊娠率，研究人員將組蛋白去甲

基化酶Kdm4d的mRNA注入了重構(gòu)胚，同時(shí)用組蛋白脫乙酰酶抑制劑（TSA）處理,具體培育流程如下圖所示。

下列說法正確的是（）

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