第3章

基因工程第2節(jié)

基因工程的基本操作程序

將目的基因與載體結(jié)合，構(gòu)建好基因表達(dá)載體后，下面該進(jìn)行什么操作？導(dǎo)入新課自主學(xué)習(xí)深度學(xué)習(xí)遷移應(yīng)用

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用1.什么叫轉(zhuǎn)化？閱讀教材P81和P82第五自然段，回答下列問題：2.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法有哪些？

請(qǐng)舉例說明。一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。實(shí)質(zhì)：將目的基因整合到受體細(xì)胞基因組中。導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法花粉管通道法顯微注射法Ca2+轉(zhuǎn)化法（我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)）（常用）轉(zhuǎn)化:深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三方法由于受體細(xì)胞有植物、動(dòng)物、微生物之分，基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法不是千篇一律的，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法也不是完全相同的。方法Ⅰ：用微量注射器將含目的基因的DNA溶液直接注入子房中。含目的基因的DNA溶液（我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)）適用生物：開花植物1.導(dǎo)入植物細(xì)胞深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三（1）花粉管通道法：方法Ⅱ：在植物受粉后的一定時(shí)間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入胚囊。受體細(xì)胞：受精卵（我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)）1.導(dǎo)入植物細(xì)胞深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三（1）花粉管通道法：適用生物：開花植物深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三Ⅰ.能在自然條件下侵染____________和__________，而對(duì)大多數(shù)___________沒有侵染能力；雙子葉植物裸子植物單子葉植物Ⅱ.農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有________，當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后，能將________上的_______（____________）轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其___________________________。Ti質(zhì)粒Ti質(zhì)粒T-DNA可轉(zhuǎn)移的DNA整合到該細(xì)胞的染色體DNA上一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三1.導(dǎo)入植物細(xì)胞深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：①農(nóng)桿菌的特點(diǎn)：大型環(huán)狀DNA（可轉(zhuǎn)移的DNA）（常用）②操作方法：一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三1.導(dǎo)入植物細(xì)胞深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：表現(xiàn)出新性狀的植株植物組織培養(yǎng)第一次導(dǎo)入第二次導(dǎo)入第一次拼接第二次拼接將目的基因拼接到Ti質(zhì)粒的T-DNA上。(非人工操作)是指含目的基因的T-DNA被拼接到受體細(xì)胞的染色體DNA上。(非人工操作)含目的基因的T-DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞。將含目的基因的Ti質(zhì)粒重新導(dǎo)入農(nóng)桿菌。Ti質(zhì)粒T-DNA目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞②操作方法：一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三1.導(dǎo)入植物細(xì)胞深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：Ⅰ.將新鮮的從葉片上取下的圓形小葉與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，然后篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞，并再生成植株。該方法受體細(xì)胞為

。體細(xì)胞②操作方法：一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三1.導(dǎo)入植物細(xì)胞深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：Ⅰ.將新鮮的從葉片上取下的圓形小葉與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，然后篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞，并再生成植株。該方法受體細(xì)胞為

。體細(xì)胞Ⅱ.將花序直接浸沒在含農(nóng)桿菌的溶液中一段時(shí)間，然后培養(yǎng)植株并獲得種子，再進(jìn)行篩選、鑒定。該方法受體細(xì)胞為

。受精卵①個(gè)體大，易操作。②受精卵全能性高，易培養(yǎng)成完整個(gè)體。顯微注射法（1）常用方法：（2）受體細(xì)胞：一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三2.導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用受精卵（3）過程：構(gòu)建基因表達(dá)載體并提純利用顯微注射將基因表達(dá)載體注入動(dòng)物的受精卵中早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植獲得具有新性狀的動(dòng)物受精卵注射器固定吸管顯微注射儀Ca2＋處理一

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三3.導(dǎo)入微生物細(xì)胞深度學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)導(dǎo)入新課遷移應(yīng)用（1）操作方法：原核細(xì)胞（