DB42副豬嗜血桿菌對(duì)替米考星的敏感性檢測(cè)2021-05-12發(fā)布湖北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I 2 2 3 3 4本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專(zhuān)利的責(zé)任。本文件實(shí)施應(yīng)用中的疑問(wèn)，可咨詢(xún)湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳，聯(lián)系電話(huà)郵箱hbsnab@126.com；本文件的有關(guān)修改意見(jiàn)建議請(qǐng)反饋至華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技-動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，聯(lián)系電8115，郵箱：haohaihong@mail.hzau.ed1副豬嗜血桿菌對(duì)替米考星的敏感性檢測(cè)本文件規(guī)定了副豬嗜血桿菌對(duì)替米考星的體外敏感性檢本文件適用于檢測(cè)和判斷獸醫(yī)臨床分離的副豬嗜血桿菌對(duì)替米考星的敏感性，合理應(yīng)用替米考星GB/T34750副豬嗜血桿菌檢測(cè)4儀器和設(shè)備4.7細(xì)菌多位點(diǎn)接種儀。4.8生物安全柜：II級(jí)及以上。5.6麥?zhǔn)媳葷峁埽?.5麥?zhǔn)蠞岫取?.71%輔酶I(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD):準(zhǔn)確稱(chēng)取0.01gNAD，用滅菌去離子水溶解并定容至27.2瓊脂稀釋法將菌液用TSB肉湯稀釋至0.5麥?zhǔn)蠞岫龋簼舛燃s為1×108CFU/mL。用TSB肉湯進(jìn)行10倍稀釋?zhuān)辜?xì)菌和2mL替米考星倍比稀釋液（參見(jiàn)本文件7.2.2），渦旋混勻，傾入培養(yǎng)皿，制備成替TSA平板的濃度范圍可適當(dāng)縮小至0.0養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～32h。37.3微量肉湯稀釋法D-F三排加另一株菌的菌懸液。G排每孔加200μLTSB肉湯，作為陰性對(duì)照；H排每孔加100μL菌液和確定無(wú)菌無(wú)藥孔中無(wú)菌生長(zhǎng)，無(wú)藥含菌對(duì)照孔中菌株生長(zhǎng)。以孔內(nèi)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度為MIC。當(dāng)出現(xiàn)單一跳孔時(shí)，需記錄抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最高藥物濃度；當(dāng)出現(xiàn)考星的最小抑菌濃度（MIC）的質(zhì)控范圍為8μg/mL～32μg/mL。每次藥敏試驗(yàn)需保證質(zhì)控藥對(duì)質(zhì)控菌的9結(jié)果判定副豬嗜血桿菌對(duì)替米考