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通往成功的路,總是在施工中。4/7柑橘果實(shí)糖、酸、VC含量的測(cè)定方法熊慶娥(四川農(nóng)業(yè)大學(xué))Eleven手打分測(cè)定程序及計(jì)算公式建議先通讀這些方法幾遍,借好儀器,想好人員分配后,再到實(shí)驗(yàn)室樣品制備樣品果至少10個(gè)。擦凈果皮后,用水果刀在每個(gè)果對(duì)稱位置切取兩塊。去皮后,用紗布包裹好果肉,擠壓果汁于干燥燒杯中,總量不低于100ml。樣品液混合攪拌均勻后,可供測(cè)定可溶性固性物(TSS)、糖、酸、Vc??偹岷康臏y(cè)定用移液管將5ml果汁轉(zhuǎn)入100ml三角瓶,加酚酞1—2滴,用0.1NNaOH(以標(biāo)定濃度為準(zhǔn))滴至溶液出現(xiàn)粉紅色不消失至。記錄滴定所消耗NaOH量。重復(fù)3次??偹岷浚╣/100ml)=V×N×0.064V:NaOH滴定用量N:NaOH濃度(標(biāo)定為準(zhǔn))B:被滴定樣品用量(5ml)0.064:檸檬酸折算系數(shù)Eleven補(bǔ)充分析:N表示mol/L。②0.064的來歷:折算系數(shù)即1ml氫氧化鈉溶液摩爾濃度×0.064=1ml檸檬酸的質(zhì)量。NaOH與檸檬酸的反應(yīng)中,NaOH與檸檬酸的比例是1:3。檸檬酸的分子量為192.14假設(shè)氫氧化鈉濃度為Amol/L,即10-3Amol/ml。1ml氫氧化鈉溶液與檸檬酸反應(yīng),則檸檬酸用量為檸檬酸質(zhì)量為13×10三、Vc含量的測(cè)定1.取果汁5ml,用1%草酸稀釋,定容至50ml。即稀釋10倍。用移液管吸取稀釋液5ml至50ml三角瓶,通過半微量滴定管滴入2,6D至溶液呈粉紅色且30秒不退色。記錄所耗2,6D用量。重復(fù)三次。2.Vc含量(mg/100ml)=V×AV:2,6-D滴定用量A:每毫升2,6-D相當(dāng)?shù)腣c量(mg)B:滴定所用樣品量(5ml)C:樣品稀釋倍數(shù)(10)Eleven分析補(bǔ)充:抗壞血酸在溶液中易氧化,在整個(gè)測(cè)定中,操作應(yīng)迅速。滴定開始時(shí),染料迅速加入,直至紅色不立即消失,而后逐滴加入,并不斷搖動(dòng)錐形瓶直至終點(diǎn),整個(gè)滴定時(shí)間不宜超過2.分鐘。所有試劑配制,都需用重蒸餾。糖含量的測(cè)定還原糖的測(cè)定用移液管吸取果汁10ml,轉(zhuǎn)入100ml容量瓶,加水稀釋定容到刻度,裝入酸式滴定管。用移液管分別吸取斐林液A、B各5ml于200ml三角瓶,搖勻后,加蒸餾水約30ml,置電爐上煮至沸騰。繼續(xù)保持沸騰,并用樣品液滴定至藍(lán)色大部分減退,加次甲基藍(lán)2滴,繼續(xù)滴定至溶液剛好轉(zhuǎn)磚紅色止。記錄樣品滴定值(ml),重復(fù)三次。轉(zhuǎn)化糖的滴定用移液管吸取果汁10ml,轉(zhuǎn)入100ml容量瓶,加6NHCl5ml,置沸騰水浴上水解15分鐘。溶液冷卻后,用NaOH中和酸(先用6NNaOH5ml,后滴加0.5NNaOH),以酚酞2滴指示。加NaOH至溶液顯紅色即是終點(diǎn),此為轉(zhuǎn)化糖測(cè)定液。將轉(zhuǎn)化糖液裝入酸式滴定管,用以滴定菲林液,方法同還原糖。注:無色的還原型亞甲基藍(lán)極易被空氣中的氧所氧化,應(yīng)調(diào)節(jié)電爐溫度使瓶?jī)?nèi)溶液始終保持沸騰狀態(tài),液面覆蓋水蒸氣不與空氣接觸。整個(gè)滴定過程錐形瓶不能離開電爐隨意搖動(dòng).糖含量的計(jì)算公式還原糖含量(g/100ml)=DV轉(zhuǎn)化糖含量(g/100ml)=DV2,6-D稱取52mgNaHCO3,溶于50ml蒸餾水,煮沸。再稱取2,6-D50mg,加入沸騰的NaHCOVc(用于標(biāo)定2,6-D)稱取烘干Vc(抗壞血酸)20mg(精確至0.1mg),溶于1%的草酸,定容至100ml。用移液管吸取5ml轉(zhuǎn)入50ml容量瓶,加草酸定容(稀釋了10倍)?,F(xiàn)配現(xiàn)用。準(zhǔn)確吸取Vc稀釋液5ml轉(zhuǎn)入100ml容量瓶,用2,6-D滴至粉紅色,30秒不消退止。記錄所耗2,6-D量(ml),重復(fù)三次。計(jì)算1ml2,6-D相當(dāng)?shù)腣c毫克數(shù)(A)。A=W×W:Vc重量(mg)V1:滴定D:2,6-D滴定值V2測(cè)定糖用試劑斐林A硫酸銅(CuSO2·5H2斐林B酒石酸鉀鈉173g、NaOH50g溶于蒸餾水,定容至500ml。6NHCl取濃HCl250ml加入250ml蒸餾水中。6NNaOH120gNaOH溶于500ml蒸餾水。Eleven補(bǔ)充:第4項(xiàng)如果配的不是很準(zhǔn)確也不用擔(dān)心,準(zhǔn)確最好不過。1%亞甲基藍(lán)0.5g亞甲基藍(lán)溶于50ml蒸餾水。葡萄糖(標(biāo)定用)在分析天平上準(zhǔn)確稱取葡萄糖1g左右(精確至0.0001g),加水溶解定容于200ml容量瓶,即約5mg/ml葡萄糖。斐林液的標(biāo)定用上述葡萄糖液滴定10ml斐林液,滴定方法同還原糖測(cè)定。記錄葡萄糖滴定值(ml),重復(fù)三次。計(jì)算10ml斐林液相當(dāng)?shù)钠咸烟强藬?shù)(D)。D=W×W:葡萄糖的重量(g)。V1V2第三部分關(guān)于實(shí)驗(yàn)關(guān)于儀器儀器方面不同樣品量用的儀器稍有差別,記得自己先閱讀本方法,然后根據(jù)自己情況借取儀器,電爐最好能拿兩個(gè),六教比較不好借的就是電爐和稱。一般是找湯福義老師借。藥品如果導(dǎo)師沒有可以到瑞進(jìn)特買,他們送貨上門(不加錢),川農(nóng)一般都是在那買(除了在學(xué)校開了賬戶的老師外),蒸餾水用的是新區(qū)開水房特制的蒸餾水,他們也送貨上門,10元左右。送貨上門加2元。關(guān)于配藥量配藥要根據(jù)自己樣品數(shù)量自己調(diào)整,所以去實(shí)驗(yàn)室前有必要將方法牢記于心,配藥前最好再看一遍。注意事項(xiàng)一些玻璃儀器不能混用,要混用時(shí)要記得洗干凈。比如斐林A、B的移液管。三角瓶在電爐上加熱時(shí)要確保瓶底我明顯水跡。變色的標(biāo)準(zhǔn)要統(tǒng)一,切忌隨意改變負(fù)責(zé)該項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)人員。離開實(shí)驗(yàn)室記得將酸、堿式滴定管取下,平放。做完實(shí)驗(yàn)不應(yīng)該立即倒掉藥品及分食水果,待將數(shù)據(jù)整理確保無明顯問題后才可。經(jīng)驗(yàn)提醒我覺得實(shí)驗(yàn)的核心是人員以及實(shí)驗(yàn)器材的分配協(xié)調(diào)。要物盡其用,人盡其才,實(shí)驗(yàn)才能得以順利進(jìn)行。品質(zhì)分析的實(shí)驗(yàn)最重要的不是測(cè)定的過程,而是以后的數(shù)據(jù)分析,做后你自然明白。但是并不是說測(cè)定過程不重要,畢竟巧婦難為無米之炊。關(guān)于該實(shí)驗(yàn)方法該實(shí)驗(yàn)方法是Eleven獲得了熊老師的手稿后進(jìn)行加工與修改的。這個(gè)實(shí)驗(yàn)Eleven做了數(shù)次、包括測(cè)定櫻桃、李子、獼猴桃、柑橘類。也就是說該實(shí)驗(yàn)方法適合于較多水果,但是對(duì)于不同蔬菜、水果,方法可以略作改動(dòng)。改動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)建議登陸。下載國(guó)家

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