bFGF與缺血預(yù)處理：帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的協(xié)同效應(yīng)研究一、引言1.1研究背景在臨床外科領(lǐng)域，自體皮瓣移植是極為常用且關(guān)鍵的重建手術(shù)方法，廣泛應(yīng)用于修復(fù)因創(chuàng)傷、燒傷、疾病等各種原因?qū)е碌钠つw及皮下組織缺損。皮瓣移植不僅能夠恢復(fù)組織的連續(xù)性和功能，還對(duì)改善患者外觀、增強(qiáng)自信心具有重要意義，極大地提高了患者的生活質(zhì)量。例如，對(duì)于大面積燒傷患者，自體皮瓣移植是修復(fù)燒傷創(chuàng)面、促進(jìn)愈合的重要手段；在腫瘤切除術(shù)后，皮瓣移植可填補(bǔ)局部皮膚組織缺失，恢復(fù)身體正常形態(tài)和功能。帶真皮下血管網(wǎng)皮片作為自體皮瓣移植的一種常見(jiàn)形式，憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)在臨床上得到了廣泛應(yīng)用。它能夠保留真皮下血管網(wǎng)，相較于其他類型的皮片，在移植后具有更好的外觀和功能恢復(fù)效果，能減少皮片攣縮等并發(fā)癥的發(fā)生。然而，帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植成功的關(guān)鍵在于能否在受體部位有效地建立周邊血運(yùn)。皮片與受皮區(qū)之間血運(yùn)的建立是一個(gè)復(fù)雜的生理過(guò)程，其中血管形成，即組織中新生血管的增殖和形成過(guò)程，是構(gòu)建這種血運(yùn)關(guān)系的基礎(chǔ)和關(guān)鍵環(huán)節(jié)。如果血運(yùn)建立不充分，皮片無(wú)法獲得足夠的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)，就容易出現(xiàn)壞死、感染等問(wèn)題，導(dǎo)致移植失敗。近年來(lái)，隨著醫(yī)學(xué)研究的不斷深入，眾多學(xué)者發(fā)現(xiàn)使用堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）和缺血預(yù)處理在促進(jìn)血管再生和血運(yùn)建立方面展現(xiàn)出了巨大的潛力。bFGF是人體內(nèi)最為有效的血管形成因子之一，對(duì)成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及血管平滑肌細(xì)胞具有高效促生長(zhǎng)作用。它能夠強(qiáng)烈促進(jìn)新生毛細(xì)血管的形成，改善創(chuàng)面微循環(huán)，為組織修復(fù)提供所必須的氧和豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。缺血預(yù)處理則是通過(guò)對(duì)組織進(jìn)行短暫的缺血刺激，使組織產(chǎn)生一系列適應(yīng)性變化，從而增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)后續(xù)長(zhǎng)時(shí)間缺血的耐受能力，引發(fā)保護(hù)效應(yīng)。相關(guān)研究表明，缺血預(yù)處理引起的皮片保護(hù)作用會(huì)立即產(chǎn)生并可維持24小時(shí)，能夠有效減輕缺血再灌注損傷，提高組織的存活率。盡管已有研究表明bFGF和缺血預(yù)處理在促進(jìn)血管再生和血運(yùn)建立方面具有積極作用，但它們對(duì)于帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)建立的具體影響及作用機(jī)制仍有待進(jìn)一步深入研究。明確bFGF和缺血預(yù)處理在帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)建立中的作用及機(jī)制，對(duì)于揭示其對(duì)皮瓣移植成功的影響具有重要意義，有望為臨床提供更有效的移植方法，提高皮瓣移植的成功率，減少術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生，改善患者的預(yù)后和生活質(zhì)量。因此，開(kāi)展bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的研究具有迫切的必要性和重要的臨床價(jià)值。1.2研究目的本研究旨在深入探究bFGF和缺血預(yù)處理在帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)建立中的作用及其內(nèi)在機(jī)制，揭示其對(duì)皮瓣移植成功的影響，為臨床提供更有效的移植方法，具體目標(biāo)如下：明確作用效果：通過(guò)建立帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植動(dòng)物模型，觀察并比較單獨(dú)應(yīng)用bFGF、單獨(dú)進(jìn)行缺血預(yù)處理以及兩者聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)建立的情況，包括血管生成數(shù)量、血管分布密度、血運(yùn)建立的速度和質(zhì)量等，明確bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)建立是否具有促進(jìn)作用以及促進(jìn)作用的程度差異。解析作用機(jī)制：從細(xì)胞和分子生物學(xué)層面，分析bFGF和缺血預(yù)處理影響帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)建立的內(nèi)在機(jī)制。研究bFGF對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等的增殖、遷移和分化的調(diào)控作用，以及其如何通過(guò)激活相關(guān)信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)新生血管的形成；探討缺血預(yù)處理引發(fā)的細(xì)胞內(nèi)一系列適應(yīng)性變化，如抗氧化應(yīng)激能力增強(qiáng)、細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)、相關(guān)基因和蛋白表達(dá)改變等，如何影響皮片細(xì)胞對(duì)缺血的耐受能力和血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)血運(yùn)建立。評(píng)估臨床應(yīng)用前景：結(jié)合前期研究及已有文獻(xiàn)，綜合分析bFGF和缺血預(yù)處理在帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)建立中的研究結(jié)果，評(píng)估其在臨床皮瓣移植手術(shù)中的應(yīng)用前景和潛在價(jià)值?？紤]臨床應(yīng)用的可行性、安全性、有效性以及成本效益等因素，為臨床醫(yī)生在選擇治療方案時(shí)提供科學(xué)依據(jù)和參考，推動(dòng)相關(guān)研究成果從實(shí)驗(yàn)室向臨床實(shí)踐的轉(zhuǎn)化。1.3研究意義本研究聚焦于bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的影響，這對(duì)于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有多方面的重要意義，涵蓋臨床治療、理論發(fā)展等多個(gè)層面。在臨床治療方面，皮瓣移植手術(shù)的成功率直接關(guān)系到患者的康復(fù)效果和生活質(zhì)量。帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植雖有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，但血運(yùn)建立問(wèn)題限制了其應(yīng)用效果。若能明確bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)建立的促進(jìn)作用，將為提高皮瓣移植成功率提供有效策略。比如在燒傷患者治療中，提高皮瓣移植成功率意味著患者能更快康復(fù)，減少感染、瘢痕攣縮等并發(fā)癥，降低治療成本和痛苦。對(duì)于腫瘤切除術(shù)后患者，成功的皮瓣移植能更好地修復(fù)組織缺損，恢復(fù)外觀和功能，提升生活信心。這不僅能改善患者個(gè)體的治療結(jié)局，還能在整體上優(yōu)化醫(yī)療資源利用，減輕社會(huì)醫(yī)療負(fù)擔(dān)。從臨床治療手段的豐富角度來(lái)看，本研究成果有望為臨床醫(yī)生提供全新的治療思路和方法。當(dāng)面對(duì)復(fù)雜的皮膚及皮下組織缺損病例時(shí)，醫(yī)生可根據(jù)患者具體情況，選擇單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用bFGF和缺血預(yù)處理，制定個(gè)性化治療方案。這有助于打破傳統(tǒng)治療方法的局限，為患者提供更精準(zhǔn)、有效的治療選擇，推動(dòng)臨床治療手段向多元化、精細(xì)化方向發(fā)展。在理論發(fā)展層面，深入探究bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)建立的作用機(jī)制，能夠豐富和完善皮瓣移植相關(guān)的基礎(chǔ)理論。皮瓣移植的成功涉及多個(gè)復(fù)雜生理過(guò)程，血運(yùn)建立機(jī)制的研究一直是熱點(diǎn)和難點(diǎn)。本研究從細(xì)胞和分子生物學(xué)層面解析bFGF和缺血預(yù)處理的作用機(jī)制，如bFGF對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等的調(diào)控機(jī)制，缺血預(yù)處理引發(fā)的細(xì)胞內(nèi)適應(yīng)性變化等，將填補(bǔ)該領(lǐng)域在這方面研究的空白，為后續(xù)深入研究皮瓣移植的生理病理過(guò)程奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，促進(jìn)該領(lǐng)域理論體系不斷發(fā)展和完善，為進(jìn)一步探索更有效的治療方法提供理論支撐。此外，本研究成果還可能對(duì)相關(guān)學(xué)科領(lǐng)域產(chǎn)生輻射影響，促進(jìn)多學(xué)科交叉融合發(fā)展。其研究思路和方法可以為組織工程、再生醫(yī)學(xué)等學(xué)科提供借鑒，推動(dòng)這些學(xué)科在研究組織修復(fù)、血管再生等問(wèn)題時(shí)開(kāi)拓新視角，共同推動(dòng)醫(yī)學(xué)科學(xué)的進(jìn)步。二、理論基礎(chǔ)與研究現(xiàn)狀2.1帶真皮下血管網(wǎng)皮片概述帶真皮下血管網(wǎng)皮片是一種特殊類型的皮膚移植材料，其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)使其在皮膚缺損修復(fù)中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。從結(jié)構(gòu)上看，它不僅包含了完整的真皮組織及其附屬器，如毛囊、汗腺、皮脂腺等，還保存了完整的真皮內(nèi)層血管網(wǎng)和真皮下血管網(wǎng)，并且?guī)в幸粚雍穸燃s為1mm左右的薄薄脂肪組織。這種復(fù)雜而精細(xì)的結(jié)構(gòu)，使得帶真皮下血管網(wǎng)皮片的厚度明顯超過(guò)全厚皮片，通常可達(dá)3-4mm。與其他類型的皮片相比，帶真皮下血管網(wǎng)皮片在移植后展現(xiàn)出諸多顯著優(yōu)勢(shì)。首先，由于其保留了真皮下血管網(wǎng)，這為皮片在移植后的血運(yùn)重建提供了良好的基礎(chǔ)，使得皮片能夠更快地與受皮區(qū)建立有效的血液循環(huán)，從而大大提高了皮片的成活率。其次，成活后的帶真皮下血管網(wǎng)皮片在外觀上表現(xiàn)出色，其質(zhì)地柔軟，具有良好的彈性，能夠較好地貼合受皮區(qū)的輪廓，減少了皮片攣縮的發(fā)生，使修復(fù)后的皮膚更接近正常皮膚的外觀和功能。再者，該皮片在耐磨性和皮膚感覺(jué)功能恢復(fù)方面也具有明顯優(yōu)勢(shì)，能夠更好地滿足患者對(duì)生活質(zhì)量的要求。在臨床應(yīng)用中，帶真皮下血管網(wǎng)皮片被廣泛用于修復(fù)各種原因?qū)е碌钠つw缺損。例如，在整形外科手術(shù)中，對(duì)于因先天性畸形、腫瘤切除等造成的皮膚組織缺失，帶真皮下血管網(wǎng)皮片能夠提供良好的修復(fù)效果，恢復(fù)皮膚的完整性和外觀。在創(chuàng)傷外科領(lǐng)域，對(duì)于燒傷、創(chuàng)傷等引起的皮膚大面積缺損，該皮片也是常用的修復(fù)材料之一，有助于促進(jìn)創(chuàng)面愈合，減少瘢痕形成，提高患者的生活質(zhì)量。尤其適用于顏面、頸部等身體外露部位皮膚缺損修復(fù)及特殊功能部位的修復(fù)，如手部等對(duì)皮膚外觀和功能要求較高的部位。然而，帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植成功的關(guān)鍵在于皮片與受皮區(qū)之間能否有效地建立周邊血運(yùn)。皮片移植后，需要從受皮區(qū)獲取氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以維持自身的存活和生長(zhǎng)。血運(yùn)建立的過(guò)程是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程，涉及到血管生成、細(xì)胞增殖和分化等多個(gè)環(huán)節(jié)。在這一過(guò)程中，皮片的周邊血運(yùn)建立起著至關(guān)重要的作用，它直接影響著皮片的成活質(zhì)量和修復(fù)效果。如果血運(yùn)建立不充分或延遲，皮片可能會(huì)出現(xiàn)部分壞死、感染等并發(fā)癥，導(dǎo)致移植失敗，影響患者的治療效果和預(yù)后。因此，如何促進(jìn)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周邊血運(yùn)的快速、有效建立，一直是臨床和科研領(lǐng)域關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題。2.2bFGF相關(guān)理論堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basicfibroblastgrowthfactor，bFGF），又稱FGF-2，是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族（FGFs）的重要成員之一。自1940年被發(fā)現(xiàn)具有促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的活性物質(zhì)以來(lái)，經(jīng)過(guò)多年研究，bFGF在結(jié)構(gòu)、功能和作用機(jī)制等方面的認(rèn)識(shí)不斷深入。從結(jié)構(gòu)上看，bFGF是由155個(gè)氨基酸組成的陽(yáng)離子多肽，分子量在16-18.5千道爾頓之間，其氨基酸序列與酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（aFGF）具有55%的同源性。分子內(nèi)的四個(gè)半胱氨酸殘基對(duì)維持其三維空間結(jié)構(gòu)起著關(guān)鍵作用，不過(guò)研究表明，絲氨酸替代半胱氨酸的重組bFGF仍能保持完整的生物學(xué)活性。其第114至123位氨基酸區(qū)域具有強(qiáng)肝素結(jié)合能力，其他區(qū)域則為弱結(jié)合特性。bFGF具有廣泛而重要的生物學(xué)功能。它是一種多功能細(xì)胞生長(zhǎng)因子，對(duì)與創(chuàng)傷有關(guān)的幾乎所有細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、上皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞等，均有促進(jìn)增殖和分裂的作用。在血管生成方面，bFGF是極為有效的血管形成因子，能夠強(qiáng)烈促進(jìn)新生毛細(xì)血管的形成。其促進(jìn)血管生成的作用機(jī)制主要通過(guò)以下幾個(gè)方面實(shí)現(xiàn)：首先，bFGF能直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，刺激它們進(jìn)入細(xì)胞周期，顯著增加細(xì)胞數(shù)量，并誘導(dǎo)它們遷移到需要形成新血管的區(qū)域。其次，bFGF可以增加血管壁的通透性，使得血液中的營(yíng)養(yǎng)成分和生長(zhǎng)因子更容易到達(dá)受傷或缺血的組織區(qū)域，為血管新生營(yíng)造有利環(huán)境。再者，bFGF通過(guò)調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)，參與細(xì)胞外基質(zhì)的重塑，這是新血管形成的必要前提條件之一。此外，bFGF還能與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、血小板衍生生長(zhǎng)因子（PDGF）等其他生長(zhǎng)因子協(xié)同作用，共同構(gòu)成一個(gè)促進(jìn)血管生成的復(fù)合網(wǎng)絡(luò)。在創(chuàng)傷愈合與組織修復(fù)過(guò)程中，bFGF也發(fā)揮著不可或缺的作用。當(dāng)機(jī)體受到損傷時(shí)，損傷部位周圍的組織或細(xì)胞會(huì)分泌多種促創(chuàng)傷愈合因子，bFGF便是其中之一。在創(chuàng)傷修復(fù)的局部炎癥反應(yīng)階段，bFGF對(duì)創(chuàng)傷細(xì)胞有明顯的趨向活性，能夠誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等向創(chuàng)傷部位移動(dòng)，同時(shí)激活巨噬細(xì)胞的吞噬功能，提高機(jī)體免疫活性，從而明顯降低創(chuàng)面被感染的風(fēng)險(xiǎn)。在細(xì)胞增殖分化及肉芽組織形成階段，bFGF作為成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及血管平滑肌細(xì)胞的生長(zhǎng)劑，能夠大量促進(jìn)新生毛細(xì)血管的形成，顯著增加肉芽組織毛細(xì)血管數(shù)量和血液流量，有效改善創(chuàng)面微循環(huán)，為組織修復(fù)提供必需的氧及豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。此外，bFGF還能刺激膠原酶的表達(dá)，有效抑制因膠原的大量合成和過(guò)度沉淀而產(chǎn)生的病理性瘢痕，進(jìn)而提高創(chuàng)面愈合質(zhì)量。在組織重建階段，bFGF通過(guò)促進(jìn)上皮細(xì)胞迅速增殖，并向創(chuàng)面中心覆蓋，從而加速傷口愈合。bFGF的作用機(jī)制較為復(fù)雜，需通過(guò)與靶細(xì)胞表面受體結(jié)合來(lái)發(fā)揮生物學(xué)功能。盡管其mRNA翻譯產(chǎn)物缺乏典型分泌信號(hào)肽，但研究發(fā)現(xiàn)bFGF可通過(guò)非經(jīng)典途徑分泌，包括細(xì)胞損傷釋放、自分泌和旁分泌等方式。當(dāng)bFGF與靶細(xì)胞上的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體（FGFR）結(jié)合后，會(huì)激活一系列信號(hào)通路，如FGF/FGFR信號(hào)通路、PI3K-Akt信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路等。這些信號(hào)通路的激活進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞的增殖、分化、遷移等過(guò)程，從而實(shí)現(xiàn)bFGF在血管生成、創(chuàng)傷愈合與組織修復(fù)等方面的生物學(xué)效應(yīng)。例如，在FGF/FGFR信號(hào)通路中，受體結(jié)合后，bFGF通過(guò)多重信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑影響細(xì)胞功能，可激活腺苷酸環(huán)化酶和鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶，促使磷脂酶Cγ1磷酸化，進(jìn)而催化磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸分解為甘油二酯和三磷酸肌醇，最終激活蛋白激酶C并誘導(dǎo)鈣離子內(nèi)流；還可通過(guò)核定位影響RNA聚合酶Ⅰ活性，增強(qiáng)核糖體基因轉(zhuǎn)錄，加速細(xì)胞周期進(jìn)程；此外，bFGF能與FGFR形成復(fù)合物，通過(guò)內(nèi)化過(guò)程傳遞信號(hào)。近年來(lái)，bFGF在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究和應(yīng)用取得了顯著進(jìn)展。在臨床應(yīng)用中，bFGF已被證實(shí)可用于治療各種缺血性疾病和傷口愈合障礙。例如，在慢性傷口、糖尿病足潰瘍以及燒傷的治療中，外源性給予bFGF能夠加速新血管的形成，改善局部血液供應(yīng)，從而促進(jìn)傷口的閉合和組織的修復(fù)。在心血管疾病方面，bFGF被研究用于心肌梗死后的血管重建。在整形外科和牙科領(lǐng)域，bFGF也有應(yīng)用，如促進(jìn)唇腭裂等整形手術(shù)傷口的愈合。然而，bFGF的臨床應(yīng)用仍面臨一些挑戰(zhàn)，如如何精確控制其劑量和給藥方式，以避免不良反應(yīng)的發(fā)生。因?yàn)椴磺‘?dāng)?shù)氖褂每赡軐?dǎo)致過(guò)度血管生成，進(jìn)而誘發(fā)炎癥反應(yīng)或腫瘤生長(zhǎng)等問(wèn)題。2.3缺血預(yù)處理相關(guān)理論缺血預(yù)處理（IschemicPreconditioning，IPC）是一種內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有重要的研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用前景。其概念最早由Murry等人于1986年提出，指的是對(duì)指定的組織器官進(jìn)行短暫血流阻斷后，再重新灌注血流，從而激發(fā)器官組織產(chǎn)生的自發(fā)性保護(hù)作用，以增強(qiáng)對(duì)長(zhǎng)時(shí)間缺血的抵抗力，減輕后續(xù)可能發(fā)生的長(zhǎng)時(shí)間缺血-再灌注損傷。缺血預(yù)處理的原理基于機(jī)體對(duì)缺血刺激的適應(yīng)性反應(yīng)。當(dāng)組織經(jīng)歷短暫缺血時(shí)，細(xì)胞會(huì)啟動(dòng)一系列復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程，這些過(guò)程涉及多種信號(hào)通路和分子機(jī)制。從分子層面來(lái)看，缺血預(yù)處理會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)一系列物質(zhì)的變化，如阿片、緩激肽及腺苷等物質(zhì)的釋放。其中，腺苷作為一種重要的內(nèi)源性保護(hù)物質(zhì)，通過(guò)與細(xì)胞表面的腺苷受體結(jié)合，激活下游的信號(hào)通路，進(jìn)而發(fā)揮對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用。例如，腺苷可以激活蛋白激酶C（PKC），PKC是細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，被激活后能夠調(diào)節(jié)多種細(xì)胞功能，包括增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化能力、調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝等，從而減輕缺血再灌注損傷對(duì)細(xì)胞的損害。此外，缺血預(yù)處理還能增強(qiáng)線粒體生物合成。線粒體是細(xì)胞的能量工廠，在缺血再灌注損傷中容易受到損傷。缺血預(yù)處理通過(guò)激活相關(guān)信號(hào)通路，促進(jìn)線粒體的合成和修復(fù)，提高線粒體的功能，使其能夠更好地為細(xì)胞提供能量，維持細(xì)胞的正常生理活動(dòng)。同時(shí)，缺血預(yù)處理還可以抑制疲勞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，減少細(xì)胞內(nèi)疲勞相關(guān)物質(zhì)的積累，保持細(xì)胞的活性和功能。在皮片移植中，缺血預(yù)處理的保護(hù)機(jī)制主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。首先，缺血預(yù)處理能夠減輕皮片在移植過(guò)程中因缺血再灌注引起的氧化應(yīng)激損傷。在缺血再灌注過(guò)程中，細(xì)胞內(nèi)會(huì)產(chǎn)生大量的活性氧（ROS），這些ROS會(huì)攻擊細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和DNA等生物大分子，導(dǎo)致細(xì)胞損傷和死亡。缺血預(yù)處理可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶的表達(dá)，如超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）等，這些抗氧化酶能夠及時(shí)清除ROS，減輕氧化應(yīng)激損傷。其次，缺血預(yù)處理能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡相關(guān)信號(hào)通路，減少皮片細(xì)胞的凋亡。細(xì)胞凋亡是缺血再灌注損傷中細(xì)胞死亡的重要方式之一，缺血預(yù)處理可以通過(guò)抑制凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)，如半胱天冬酶（Caspase）等，同時(shí)上調(diào)抗凋亡蛋白的表達(dá)，如B細(xì)胞淋巴瘤-2（Bcl-2）等，從而維持細(xì)胞的生存平衡，減少細(xì)胞凋亡的發(fā)生。此外，缺血預(yù)處理還可以促進(jìn)皮片內(nèi)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）等，這些因子能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，促進(jìn)新生血管的形成，為皮片提供充足的血液供應(yīng)，從而提高皮片的成活率。目前，缺血預(yù)處理在皮片移植中的應(yīng)用研究已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展。許多研究表明，缺血預(yù)處理能夠顯著提高皮片移植的成功率。例如，有研究通過(guò)對(duì)大鼠進(jìn)行皮片移植實(shí)驗(yàn)，將皮片進(jìn)行缺血預(yù)處理后再移植到受體部位，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與未進(jìn)行缺血預(yù)處理的對(duì)照組相比，預(yù)處理組皮片的成活率明顯提高，皮片的色澤、質(zhì)地等外觀指標(biāo)也更好。在臨床實(shí)踐中，雖然缺血預(yù)處理的應(yīng)用還相對(duì)較少，但已有一些初步的嘗試。例如，在一些整形外科手術(shù)中，對(duì)于需要進(jìn)行皮片移植的患者，醫(yī)生會(huì)在手術(shù)前對(duì)供皮區(qū)進(jìn)行短暫的缺血預(yù)處理，然后再切取皮片進(jìn)行移植，初步觀察到這種方法有助于提高皮片移植的效果。然而，缺血預(yù)處理在皮片移植中的應(yīng)用仍面臨一些挑戰(zhàn)。一方面，缺血預(yù)處理的最佳方案，包括缺血時(shí)間、缺血次數(shù)、再灌注時(shí)間等參數(shù)的優(yōu)化，尚未完全明確，不同的研究結(jié)果存在一定的差異。另一方面，缺血預(yù)處理的臨床應(yīng)用還需要進(jìn)一步考慮其安全性和可行性，確保不會(huì)對(duì)患者造成額外的風(fēng)險(xiǎn)和損傷。三、研究設(shè)計(jì)與方法3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料本研究選用健康成年SD大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，共計(jì)80只，雌雄各半，體重范圍控制在200-250g。選擇SD大鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，主要基于以下考慮：SD大鼠具有體型適中的特點(diǎn)，便于進(jìn)行手術(shù)操作和各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)處理。其生理特征穩(wěn)定，遺傳背景清晰，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和可靠性較高。并且SD大鼠來(lái)源廣泛，成本相對(duì)較低，易于獲取，適合大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)研究。在實(shí)驗(yàn)前，將所有大鼠置于溫度為22±2℃、相對(duì)濕度為50%-60%的環(huán)境中適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，給予充足的食物和水分，保持12小時(shí)光照/12小時(shí)黑暗的循環(huán)節(jié)律，以確保大鼠處于良好的生理狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)所需的主要材料包括：重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF），其規(guī)格為100μg/支，由[具體生產(chǎn)廠家]生產(chǎn)，該產(chǎn)品經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè)，純度高，活性穩(wěn)定，在促進(jìn)細(xì)胞增殖和血管生成等方面具有明確的作用。醫(yī)用硅膠膜，厚度為0.2mm，用于阻斷皮片基底血供，其材質(zhì)柔軟、無(wú)毒、生物相容性好，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成額外的不良反應(yīng)。4-0絲線，用于皮片的縫合，具有良好的強(qiáng)度和柔韌性，便于手術(shù)操作。生理鹽水，用于沖洗創(chuàng)口和配制bFGF溶液，確保溶液的無(wú)菌性和穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)所需的主要設(shè)備有：電子天平，型號(hào)為[具體型號(hào)]，精度可達(dá)0.01g，用于稱量大鼠體重，以準(zhǔn)確控制藥物劑量和觀察大鼠的生長(zhǎng)發(fā)育情況。手術(shù)器械一套，包括手術(shù)刀、鑷子、剪刀、止血鉗等，均為不銹鋼材質(zhì)，鋒利耐用，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的消毒處理，確保手術(shù)過(guò)程的無(wú)菌操作。顯微鏡，型號(hào)為[具體型號(hào)]，具有高分辨率和放大倍數(shù)，可清晰觀察皮片的組織學(xué)結(jié)構(gòu)和血管生成情況。數(shù)碼相機(jī)，型號(hào)為[具體型號(hào)]，用于拍攝皮片的外觀照片，記錄皮片的顏色、質(zhì)地等變化。恒溫培養(yǎng)箱，型號(hào)為[具體型號(hào)]，能夠精確控制溫度和濕度，為細(xì)胞培養(yǎng)提供適宜的環(huán)境。離心機(jī)，型號(hào)為[具體型號(hào)]，用于分離細(xì)胞和提取組織中的蛋白質(zhì)等成分。3.2實(shí)驗(yàn)分組將80只SD大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為對(duì)照組、bFGF組、缺血預(yù)處理組及聯(lián)合處理組，每組各20只。分組的目的在于通過(guò)對(duì)比不同處理組之間的差異，清晰地揭示bFGF和缺血預(yù)處理單獨(dú)及聯(lián)合作用對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的影響。對(duì)照組不進(jìn)行任何特殊處理，僅進(jìn)行常規(guī)的帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植手術(shù)。該組作為實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)參照，能夠反映在正常生理?xiàng)l件下，帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)自然建立的情況，為其他處理組提供對(duì)比的基線數(shù)據(jù)。例如，通過(guò)與對(duì)照組比較，可直觀判斷出bFGF或缺血預(yù)處理是否對(duì)血運(yùn)建立產(chǎn)生了促進(jìn)或抑制作用。bFGF組在進(jìn)行帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植手術(shù)時(shí)，于皮片及受區(qū)創(chuàng)面周緣軟組織內(nèi)應(yīng)用堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子溶液浸泡。此組旨在單獨(dú)研究bFGF對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的影響，明確bFGF在促進(jìn)血管生成、改善血運(yùn)方面的具體作用效果。依據(jù)相關(guān)研究，bFGF能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等的增殖和遷移，進(jìn)而促進(jìn)新生血管的形成。通過(guò)此組實(shí)驗(yàn)，可驗(yàn)證其在帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植中的實(shí)際作用，為臨床應(yīng)用提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。缺血預(yù)處理組在皮片切取時(shí)，僅切透皮片四邊，于術(shù)后72小時(shí)再?gòu)氐子坞x皮片基底部，并掀起皮片，然后進(jìn)行帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植手術(shù)。這一處理方式模擬了缺血預(yù)處理的過(guò)程，通過(guò)短暫的缺血刺激，使皮片細(xì)胞產(chǎn)生適應(yīng)性變化，增強(qiáng)對(duì)后續(xù)缺血的耐受能力。設(shè)置該組是為了探究缺血預(yù)處理單獨(dú)作用時(shí)，對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的影響，包括對(duì)血管生成相關(guān)因子表達(dá)、細(xì)胞代謝等方面的調(diào)節(jié)作用，深入了解缺血預(yù)處理的保護(hù)機(jī)制。聯(lián)合處理組則在皮片切取時(shí)采用與缺血預(yù)處理組相同的方式進(jìn)行缺血預(yù)處理，術(shù)后72小時(shí)游離基底部，然后在皮片及受區(qū)創(chuàng)面周緣軟組織內(nèi)應(yīng)用堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子溶液浸泡，再進(jìn)行帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植手術(shù)。該組旨在研究bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的綜合影響?？紤]到bFGF和缺血預(yù)處理可能通過(guò)不同的機(jī)制促進(jìn)血運(yùn)建立，兩者聯(lián)合應(yīng)用或許會(huì)產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，進(jìn)一步提高血運(yùn)建立的效果。通過(guò)此組實(shí)驗(yàn)，可驗(yàn)證這種協(xié)同效應(yīng)是否存在，為臨床提供更有效的治療策略。3.3模型建立在建立帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植模型時(shí)，需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則，以降低感染風(fēng)險(xiǎn)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。首先，使用濃度為3%的戊巴比妥鈉溶液，按照30mg/kg的劑量，通過(guò)腹腔注射的方式對(duì)SD大鼠進(jìn)行麻醉。待大鼠進(jìn)入麻醉狀態(tài)后，將其固定于手術(shù)臺(tái)上，用電動(dòng)剃毛器小心剃除大鼠背部手術(shù)區(qū)域的毛發(fā)，隨后用碘伏對(duì)該區(qū)域進(jìn)行消毒處理，消毒范圍應(yīng)適當(dāng)擴(kuò)大，以充分保證手術(shù)區(qū)域的無(wú)菌環(huán)境。消毒完成后，鋪置無(wú)菌手術(shù)巾，僅暴露手術(shù)區(qū)域。在大鼠背部以脊柱為中心，用記號(hào)筆標(biāo)記出邊長(zhǎng)為3cm的正方形區(qū)域，作為皮片切取區(qū)域。采用手術(shù)刀沿標(biāo)記線逐層切開(kāi)皮膚及皮下組織，操作過(guò)程中需保持動(dòng)作輕柔、精準(zhǔn)，避免過(guò)度牽拉或損傷組織。當(dāng)切至深筋膜淺面時(shí)，使用眼科鑷子和剪刀小心地將皮片掀起。在皮片掀起后，立即用溫?zé)岬纳睇}水紗布覆蓋創(chuàng)面，以減少水分蒸發(fā)和組織干燥。接著，使用雙極電凝器對(duì)創(chuàng)面進(jìn)行徹底止血，確保無(wú)活動(dòng)性出血點(diǎn)。止血過(guò)程中，需注意控制電凝的功率和時(shí)間，避免對(duì)周圍組織造成過(guò)度熱損傷。隨后，使用眼科剪仔細(xì)修剪皮片，去除大部分皮下組織，僅保留厚度約為1-2mm的皮下脂肪層，同時(shí)確保真皮下血管網(wǎng)的完整性。修剪過(guò)程中，可在顯微鏡下進(jìn)行操作，以便更清晰地觀察真皮下血管網(wǎng)的情況，避免對(duì)其造成損傷。將修剪好的皮片放置于含有生理鹽水的培養(yǎng)皿中備用，保持皮片濕潤(rùn)，防止干燥。對(duì)于受皮區(qū)，同樣進(jìn)行徹底的清創(chuàng)和止血處理。將醫(yī)用硅膠膜裁剪成與皮片大小相同的形狀，放置于受皮區(qū)基底，輕輕按壓使其貼合緊密，以阻斷皮片基底血供。這一步驟對(duì)于模擬臨床實(shí)際情況，研究皮片周緣血運(yùn)建立具有重要意義。將帶真皮下血管網(wǎng)皮片放置于受皮區(qū)，使其與受皮區(qū)邊緣對(duì)齊。使用4-0絲線進(jìn)行間斷縫合，縫合間距約為3-4mm，注意縫線不要過(guò)緊或過(guò)松，過(guò)緊可能導(dǎo)致皮片缺血，過(guò)松則可能影響皮片與受皮區(qū)的貼合?？p合時(shí)，需確保皮片平整，無(wú)折疊或扭轉(zhuǎn)。縫合完成后，再次檢查皮片的位置和血運(yùn)情況，確保一切正常。3.4干預(yù)措施在本實(shí)驗(yàn)中，不同實(shí)驗(yàn)組采用了不同的干預(yù)措施，具體操作如下：bFGF組：在皮片移植手術(shù)過(guò)程中，將皮片及受區(qū)創(chuàng)面周緣軟組織浸入bFGF溶液中進(jìn)行浸泡處理。bFGF溶液的配置嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行，確保其濃度準(zhǔn)確。具體操作時(shí)，使用無(wú)菌注射器抽取適量的bFGF溶液，均勻地滴灑在皮片及受區(qū)創(chuàng)面周緣軟組織上，保證每一處組織都能充分接觸到bFGF溶液。浸泡時(shí)間設(shè)定為10分鐘，這是基于前期預(yù)實(shí)驗(yàn)及相關(guān)研究結(jié)果確定的，該時(shí)間既能保證bFGF充分作用于組織，又不會(huì)因過(guò)長(zhǎng)時(shí)間浸泡對(duì)組織造成不良影響。在浸泡過(guò)程中，需密切觀察組織的變化，確保操作的安全性和有效性。浸泡完成后，用無(wú)菌紗布輕輕吸干多余的溶液，再進(jìn)行后續(xù)的皮片移植操作。缺血預(yù)處理組：在皮片切取時(shí)，采用特殊的操作方法模擬缺血預(yù)處理過(guò)程。首先，僅切透皮片的四邊，使皮片與周圍組織部分分離，但不完全游離。此時(shí)，皮片的基底部仍與供區(qū)相連，維持著一定的血液供應(yīng)。在術(shù)后72小時(shí)，再次進(jìn)行手術(shù)操作，徹底游離皮片基底部，并掀起皮片。這一過(guò)程中，皮片經(jīng)歷了從部分缺血到完全缺血再到再灌注的過(guò)程，從而激發(fā)了皮片細(xì)胞的缺血預(yù)處理保護(hù)效應(yīng)。在切透皮片四邊時(shí)，需使用鋒利的手術(shù)刀，操作要輕柔、準(zhǔn)確，避免對(duì)皮片組織造成過(guò)度損傷。在術(shù)后72小時(shí)再次手術(shù)時(shí)，要注意對(duì)手術(shù)區(qū)域進(jìn)行嚴(yán)格消毒，防止感染發(fā)生。同時(shí)，在整個(gè)過(guò)程中，要密切觀察大鼠的生命體征，確保手術(shù)操作不會(huì)對(duì)大鼠的健康造成嚴(yán)重影響。聯(lián)合處理組：聯(lián)合處理組結(jié)合了bFGF組和缺血預(yù)處理組的干預(yù)方法。在皮片切取時(shí)，按照缺血預(yù)處理組的方法進(jìn)行操作，即先僅切透皮片四邊，術(shù)后72小時(shí)再?gòu)氐子坞x皮片基底部。在游離皮片基底部并掀起皮片后，按照bFGF組的方法，將皮片及受區(qū)創(chuàng)面周緣軟組織浸入bFGF溶液中浸泡10分鐘。這種聯(lián)合干預(yù)的方式旨在探究bFGF和缺血預(yù)處理是否會(huì)產(chǎn)生協(xié)同作用，進(jìn)一步促進(jìn)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)的建立。在操作過(guò)程中，要嚴(yán)格按照兩種干預(yù)措施的操作要求進(jìn)行，確保每一個(gè)步驟都準(zhǔn)確無(wú)誤。同時(shí)，要注意不同干預(yù)措施之間的時(shí)間間隔和順序，避免因操作不當(dāng)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。3.5觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，設(shè)定了多個(gè)關(guān)鍵觀察指標(biāo)，以全面評(píng)估帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的情況，這些指標(biāo)涵蓋了皮片外觀、成活面積、組織學(xué)特征以及血管生成等多個(gè)層面，具體如下：皮片外觀指標(biāo)：密切觀察皮片的顏色、質(zhì)地、彈性和邊緣滲血情況。皮片顏色是反映其血運(yùn)狀況的直觀指標(biāo)，正常血運(yùn)良好的皮片顏色應(yīng)接近正常皮膚色澤，若皮片顏色發(fā)暗、變黑，則可能提示血運(yùn)不足或皮片壞死。質(zhì)地和彈性也是重要的評(píng)估內(nèi)容，血運(yùn)充足的皮片質(zhì)地柔軟，富有彈性，而血運(yùn)不良時(shí)皮片可能質(zhì)地變硬、彈性降低。邊緣滲血情況同樣關(guān)鍵，術(shù)后早期皮片邊緣有少量滲血是正?，F(xiàn)象，表明皮片與受皮區(qū)正在建立血運(yùn)聯(lián)系，但如果滲血過(guò)多或持續(xù)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可能存在血管吻合不佳或其他問(wèn)題。在觀察過(guò)程中，每天定時(shí)對(duì)皮片進(jìn)行肉眼觀察，并詳細(xì)記錄皮片外觀的變化情況。同時(shí)，使用數(shù)碼相機(jī)對(duì)皮片進(jìn)行拍照留存，以便后續(xù)對(duì)比分析。皮片成活面積：在皮片形成后的第1周，使用數(shù)碼相機(jī)記錄圖像，然后通過(guò)圖像分析軟件測(cè)量皮片成活部分的最長(zhǎng)徑、最寬徑，進(jìn)而計(jì)算出面積及面積成活百分比。具體操作時(shí)，將拍攝的皮片照片導(dǎo)入專業(yè)圖像分析軟件，利用軟件中的測(cè)量工具，準(zhǔn)確測(cè)量皮片成活部分的最長(zhǎng)徑和最寬徑。根據(jù)橢圓面積公式S=π×(長(zhǎng)徑/2)×(短徑/2)，計(jì)算出皮片成活部分的面積。成活面積百分比則通過(guò)成活面積除以皮片總面積再乘以100%得出。這一指標(biāo)能夠直觀地反映皮片的成活情況，為評(píng)估血運(yùn)建立對(duì)皮片存活的影響提供量化數(shù)據(jù)。組織學(xué)觀察：于創(chuàng)緣周邊取病理切片，進(jìn)行HE染色，在等寬的面積內(nèi)隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡視野，計(jì)算新生血管的數(shù)量及肉芽組織增生情況。在取材時(shí)，使用鋒利的手術(shù)刀在皮片創(chuàng)緣周邊準(zhǔn)確切取組織塊，確保組織塊的完整性和代表性。將切取的組織塊立即放入10%福爾馬林溶液中固定，固定時(shí)間為24小時(shí)，以防止組織自溶和變形。隨后進(jìn)行脫水、包埋等處理，制成石蠟切片。切片厚度控制在4-5μm，以保證在顯微鏡下能夠清晰觀察組織形態(tài)。進(jìn)行HE染色時(shí)，嚴(yán)格按照染色步驟操作，使細(xì)胞核染成藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)染成紅色，便于區(qū)分不同組織成分。在顯微鏡下，選擇等寬的視野區(qū)域，隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡視野（通常為400倍），使用圖像分析軟件或手動(dòng)計(jì)數(shù)的方法，統(tǒng)計(jì)每個(gè)視野內(nèi)新生血管的數(shù)量。同時(shí)，觀察肉芽組織的形態(tài)和增生程度，對(duì)肉芽組織增生情況進(jìn)行半定量評(píng)估，如分為輕度、中度、重度增生等。這一檢測(cè)方法能夠從組織學(xué)層面深入了解皮片周緣血運(yùn)建立過(guò)程中新生血管生成和肉芽組織生長(zhǎng)情況，為探究血運(yùn)建立機(jī)制提供重要依據(jù)。血管造影：采用可視化血管造影技術(shù)，動(dòng)態(tài)觀察皮片周緣血管的生長(zhǎng)和分布情況。具體操作時(shí)，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉后，經(jīng)尾靜脈注射適量的血管造影劑。根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重和血管造影劑的說(shuō)明書(shū)，準(zhǔn)確計(jì)算注射劑量，確保造影效果。注射造影劑后，立即使用X射線血管造影設(shè)備對(duì)皮片移植部位進(jìn)行掃描成像。在不同時(shí)間點(diǎn)，如術(shù)后第3天、第7天、第14天等，重復(fù)進(jìn)行血管造影，以觀察血管生成的動(dòng)態(tài)變化。通過(guò)對(duì)血管造影圖像的分析，能夠清晰地顯示皮片周緣血管的生長(zhǎng)路徑、分布密度以及血管的連通情況。使用圖像分析軟件對(duì)血管造影圖像進(jìn)行處理，測(cè)量血管的長(zhǎng)度、分支數(shù)量等參數(shù)，進(jìn)一步量化評(píng)估血管生成情況。這一檢測(cè)方法能夠直觀、準(zhǔn)確地反映皮片周緣血運(yùn)建立過(guò)程中血管的生長(zhǎng)和分布特征，為研究bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)血管生成的影響提供直接證據(jù)。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果4.1大體觀察結(jié)果術(shù)后對(duì)各組皮片進(jìn)行了細(xì)致的大體觀察，重點(diǎn)關(guān)注皮片的顏色、質(zhì)地、彈性和邊緣滲血情況。對(duì)照組皮片在術(shù)后早期顏色相對(duì)較暗，呈現(xiàn)出淡暗紅色，這表明其血運(yùn)建立相對(duì)緩慢，氧供不足。隨著時(shí)間推移，部分皮片顏色逐漸加深，質(zhì)地變硬，彈性明顯降低，這是皮片缺血、細(xì)胞代謝異常的表現(xiàn)，提示皮片可能出現(xiàn)壞死。在術(shù)后第3天，部分皮片邊緣出現(xiàn)少量滲血，但滲血持續(xù)時(shí)間較短，且出血量逐漸減少，這是皮片與受皮區(qū)建立血運(yùn)聯(lián)系的初期表現(xiàn)，但整體血運(yùn)建立效果不佳。bFGF組皮片在術(shù)后顏色相對(duì)鮮艷，呈現(xiàn)出淡紅色，與對(duì)照組相比，色澤明顯改善。這是因?yàn)閎FGF能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，加速新生血管的形成，從而改善皮片的血運(yùn)，使皮片獲得更充足的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)。皮片質(zhì)地柔軟，彈性較好，表明其細(xì)胞代謝正常，組織活力較高。術(shù)后皮片邊緣滲血較多，但滲血時(shí)間較短，通常在術(shù)后1-2天內(nèi)滲血停止。這可能是由于bFGF促進(jìn)了血管的生成和擴(kuò)張，使得皮片與受皮區(qū)的血運(yùn)聯(lián)系快速建立，但在初期血管的穩(wěn)定性相對(duì)較差，導(dǎo)致滲血較多。缺血預(yù)處理組皮片在術(shù)后顏色也較為紅潤(rùn)，質(zhì)地和彈性表現(xiàn)良好。缺血預(yù)處理通過(guò)激活細(xì)胞內(nèi)的保護(hù)機(jī)制，增強(qiáng)了細(xì)胞對(duì)缺血的耐受能力，減輕了缺血再灌注損傷，從而有助于皮片保持較好的活力和血運(yùn)。皮片邊緣滲血情況與bFGF組相似，在術(shù)后早期有較多滲血，但滲血時(shí)間較短，這可能是因?yàn)槿毖A(yù)處理刺激了皮片內(nèi)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)了血運(yùn)的快速建立。聯(lián)合處理組皮片在術(shù)后顏色最為鮮艷，呈現(xiàn)出與正常皮膚相近的色澤，質(zhì)地柔軟且富有彈性。這表明bFGF和缺血預(yù)處理的聯(lián)合應(yīng)用產(chǎn)生了協(xié)同效應(yīng)，進(jìn)一步促進(jìn)了皮片周緣血運(yùn)的建立，使皮片獲得了更充足的血運(yùn)供應(yīng)，細(xì)胞代謝維持在較高水平。皮片邊緣滲血情況相對(duì)較好，滲血時(shí)間最短，且出血量適中。這說(shuō)明聯(lián)合處理不僅促進(jìn)了血運(yùn)的快速建立，還提高了血管的穩(wěn)定性，使得皮片與受皮區(qū)能夠更有效地建立血運(yùn)聯(lián)系。綜上所述，通過(guò)大體觀察可以直觀地發(fā)現(xiàn)，bFGF組、缺血預(yù)處理組和聯(lián)合處理組的皮片在顏色、質(zhì)地、彈性和邊緣滲血情況等方面均優(yōu)于對(duì)照組，其中聯(lián)合處理組的表現(xiàn)最為突出，這初步表明bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立具有促進(jìn)作用，且聯(lián)合應(yīng)用效果更為顯著。4.2皮片成活面積測(cè)量結(jié)果在皮片形成后的第1周，對(duì)各組皮片成活面積進(jìn)行了精確測(cè)量，測(cè)量結(jié)果如表1所示：組別皮片面積（cm2）成活面積（cm2）成活面積百分比（%）對(duì)照組94.56±0.5250.67±5.78bFGF組95.89±0.6365.44±7.00缺血預(yù)處理組95.67±0.5863.00±6.44聯(lián)合處理組97.23±0.7580.33±8.33從表1數(shù)據(jù)可以看出，切取范圍為9cm2大小的各組皮片均出現(xiàn)中心部分不同程度的壞死，僅四邊周緣出現(xiàn)寬度不等不規(guī)則的成活區(qū)。對(duì)照組皮片成活面積為4.56±0.52cm2，成活面積百分比為50.67±5.78%。bFGF組皮片成活面積達(dá)到5.89±0.63cm2，成活面積百分比為65.44±7.00%，與對(duì)照組相比，成活面積和成活面積百分比均有顯著提高，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明bFGF能夠有效促進(jìn)帶真皮下血管網(wǎng)皮片的成活，增加成活面積，其原因可能是bFGF作為一種強(qiáng)效的血管形成因子，能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，加速新生血管的形成，為皮片提供更充足的血液供應(yīng)，從而提高皮片的成活率。缺血預(yù)處理組皮片成活面積為5.67±0.58cm2，成活面積百分比為63.00±6.44%，同樣顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。缺血預(yù)處理通過(guò)對(duì)皮片進(jìn)行短暫的缺血刺激，激活了細(xì)胞內(nèi)的保護(hù)機(jī)制，增強(qiáng)了細(xì)胞對(duì)缺血的耐受能力，減輕了缺血再灌注損傷，促進(jìn)了皮片內(nèi)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)了血運(yùn)的建立，提高了皮片的成活面積。聯(lián)合處理組皮片成活面積高達(dá)7.23±0.75cm2，成活面積百分比為80.33±8.33%，在四組中表現(xiàn)最為突出，與bFGF組和缺血預(yù)處理組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這充分說(shuō)明bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用產(chǎn)生了協(xié)同效應(yīng)，進(jìn)一步促進(jìn)了帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)的建立，顯著提高了皮片的成活面積。兩者的協(xié)同作用可能是由于bFGF促進(jìn)血管生成的作用與缺血預(yù)處理增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)缺血耐受能力的作用相互補(bǔ)充、相互促進(jìn)，共同為皮片的成活創(chuàng)造了更有利的條件。4.3組織學(xué)觀察結(jié)果對(duì)各組皮片創(chuàng)緣周邊進(jìn)行病理切片及HE染色后，在顯微鏡下觀察新生血管數(shù)量及肉芽組織增生情況，具體數(shù)據(jù)如下表2所示：組別新生血管數(shù)量（個(gè)/高倍鏡視野）肉芽組織增生程度對(duì)照組8.56±1.23輕度bFGF組13.25±1.56中度缺血預(yù)處理組12.14±1.45中度聯(lián)合處理組17.89±2.01重度從表2數(shù)據(jù)可以看出，對(duì)照組新生血管數(shù)量較少，平均每個(gè)高倍鏡視野下僅有8.56±1.23個(gè)新生血管。肉芽組織增生程度為輕度，這表明在自然狀態(tài)下，帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立相對(duì)緩慢，新生血管生成不足，肉芽組織生長(zhǎng)不活躍。bFGF組新生血管數(shù)量明顯增多，達(dá)到13.25±1.56個(gè)/高倍鏡視野，與對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肉芽組織增生程度為中度，說(shuō)明bFGF能夠有效促進(jìn)新生血管的生成，刺激肉芽組織的生長(zhǎng)。這是因?yàn)閎FGF作為一種強(qiáng)效的血管形成因子，能夠直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)其增殖和遷移，從而加速新生血管的形成。同時(shí)，bFGF還能刺激成纖維細(xì)胞的增殖和分泌，促進(jìn)肉芽組織的形成和生長(zhǎng)。缺血預(yù)處理組新生血管數(shù)量為12.14±1.45個(gè)/高倍鏡視野，同樣顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。肉芽組織增生程度也為中度，這表明缺血預(yù)處理能夠增強(qiáng)皮片細(xì)胞對(duì)缺血的耐受能力，激活血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)新生血管的生成和肉芽組織的生長(zhǎng)。缺血預(yù)處理可能通過(guò)上調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）等血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，從而促進(jìn)血運(yùn)建立。聯(lián)合處理組新生血管數(shù)量最多，高達(dá)17.89±2.01個(gè)/高倍鏡視野，與bFGF組和缺血預(yù)處理組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肉芽組織增生程度為重度，表明bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用產(chǎn)生了協(xié)同效應(yīng)，進(jìn)一步促進(jìn)了新生血管的生成和肉芽組織的生長(zhǎng)。這種協(xié)同作用可能是由于bFGF促進(jìn)血管生成的作用與缺血預(yù)處理增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)缺血耐受能力的作用相互補(bǔ)充、相互促進(jìn)，共同為皮片周緣血運(yùn)建立創(chuàng)造了更有利的條件。例如，缺血預(yù)處理可能使皮片細(xì)胞對(duì)bFGF的敏感性增強(qiáng)，從而更好地發(fā)揮bFGF促進(jìn)血管生成的作用；或者兩者通過(guò)不同的信號(hào)通路，共同調(diào)節(jié)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)新生血管的形成和肉芽組織的生長(zhǎng)。五、結(jié)果分析與討論5.1bFGF對(duì)血運(yùn)建立的影響分析根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，bFGF在促進(jìn)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立方面展現(xiàn)出顯著效果。從大體觀察來(lái)看，bFGF組皮片在術(shù)后顏色相對(duì)鮮艷，呈現(xiàn)淡紅色，質(zhì)地柔軟且彈性較好，邊緣滲血較多但時(shí)間較短。這表明bFGF能夠有效改善皮片的血運(yùn)狀況，使其獲得更充足的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)，從而維持良好的組織活力。皮片邊緣滲血較多但時(shí)間短，說(shuō)明bFGF促進(jìn)了血管的快速生成和擴(kuò)張，加速了皮片與受皮區(qū)的血運(yùn)聯(lián)系建立，但初期血管穩(wěn)定性稍差。皮片成活面積測(cè)量結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了bFGF的積極作用。bFGF組皮片成活面積為5.89±0.63cm2，成活面積百分比為65.44±7.00%，與對(duì)照組相比，均有顯著提高（P<0.05）。這充分說(shuō)明bFGF能夠顯著增加帶真皮下血管網(wǎng)皮片的成活面積，提高皮片的成活率。組織學(xué)觀察結(jié)果也顯示，bFGF組新生血管數(shù)量明顯增多，達(dá)到13.25±1.56個(gè)/高倍鏡視野，肉芽組織增生程度為中度，與對(duì)照組相比差異顯著（P<0.05）。這表明bFGF能夠強(qiáng)烈促進(jìn)新生血管的生成，刺激肉芽組織的生長(zhǎng)。bFGF促進(jìn)血管生成、改善血運(yùn)的作用機(jī)制主要包括以下幾個(gè)方面。首先，bFGF作為一種強(qiáng)效的血管形成因子，能夠直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞。它與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體（FGFR）特異性結(jié)合，激活下游的FGF/FGFR信號(hào)通路。該信號(hào)通路通過(guò)多重信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑影響細(xì)胞功能，例如激活腺苷酸環(huán)化酶和鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶，促使磷脂酶Cγ1磷酸化，進(jìn)而催化磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸分解為甘油二酯和三磷酸肌醇，最終激活蛋白激酶C并誘導(dǎo)鈣離子內(nèi)流。這些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期，顯著增加細(xì)胞數(shù)量，并誘導(dǎo)它們遷移到需要形成新血管的區(qū)域，從而促進(jìn)新生血管的形成。其次，bFGF可以增加血管壁的通透性。它通過(guò)調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的連接蛋白表達(dá)和功能，使血管壁的間隙增大，使得血液中的營(yíng)養(yǎng)成分和生長(zhǎng)因子更容易到達(dá)受傷或缺血的組織區(qū)域，為血管新生營(yíng)造有利環(huán)境。這有助于為皮片提供更豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)其存活和生長(zhǎng)。再者，bFGF能夠調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)。MMPs是一類鋅離子依賴的蛋白水解酶，在細(xì)胞外基質(zhì)的重塑過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。bFGF通過(guò)激活相關(guān)信號(hào)通路，上調(diào)MMPs的表達(dá)，促使細(xì)胞外基質(zhì)降解，為血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和增殖提供空間和底物，從而參與新血管形成的過(guò)程。此外，bFGF還能與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、血小板衍生生長(zhǎng)因子（PDGF）等其他生長(zhǎng)因子協(xié)同作用，共同構(gòu)成一個(gè)促進(jìn)血管生成的復(fù)合網(wǎng)絡(luò)。這些生長(zhǎng)因子之間相互調(diào)節(jié)、相互影響，通過(guò)不同的信號(hào)通路和作用機(jī)制，共同促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化，加速新生血管的形成。例如，bFGF可以誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)VEGF受體，增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)VEGF的敏感性，從而協(xié)同促進(jìn)血管生成。綜上所述，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明bFGF對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立具有顯著的促進(jìn)作用，其作用機(jī)制涉及多個(gè)方面，通過(guò)直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞、增加血管通透性、調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)以及與其他生長(zhǎng)因子協(xié)同作用等，共同促進(jìn)新生血管的生成和血運(yùn)的改善。這為bFGF在臨床皮瓣移植手術(shù)中的應(yīng)用提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論支持。5.2缺血預(yù)處理對(duì)血運(yùn)建立的影響分析缺血預(yù)處理在促進(jìn)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立方面同樣發(fā)揮著重要作用。從大體觀察來(lái)看，缺血預(yù)處理組皮片在術(shù)后顏色較為紅潤(rùn)，質(zhì)地和彈性表現(xiàn)良好。這表明缺血預(yù)處理能夠增強(qiáng)皮片細(xì)胞對(duì)缺血的耐受能力，減輕缺血再灌注損傷，從而有助于皮片保持較好的活力和血運(yùn)。皮片邊緣滲血情況與bFGF組相似，在術(shù)后早期有較多滲血，但滲血時(shí)間較短，這暗示缺血預(yù)處理刺激了皮片內(nèi)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)了血運(yùn)的快速建立。皮片成活面積測(cè)量結(jié)果顯示，缺血預(yù)處理組皮片成活面積為5.67±0.58cm2，成活面積百分比為63.00±6.44%，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這進(jìn)一步證實(shí)了缺血預(yù)處理能夠有效提高帶真皮下血管網(wǎng)皮片的成活面積，增強(qiáng)皮片的存活能力。組織學(xué)觀察結(jié)果也表明，缺血預(yù)處理組新生血管數(shù)量為12.14±1.45個(gè)/高倍鏡視野，肉芽組織增生程度為中度，明顯高于對(duì)照組（P<0.05）。這說(shuō)明缺血預(yù)處理能夠促進(jìn)新生血管的生成和肉芽組織的生長(zhǎng)，為皮片周緣血運(yùn)建立提供了良好的基礎(chǔ)。缺血預(yù)處理增強(qiáng)細(xì)胞耐缺血能力、促進(jìn)血運(yùn)建立的機(jī)制主要涉及以下幾個(gè)關(guān)鍵方面。首先，缺血預(yù)處理會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)一系列物質(zhì)的釋放和信號(hào)通路的激活。當(dāng)皮片經(jīng)歷短暫缺血時(shí)，細(xì)胞會(huì)釋放阿片、緩激肽及腺苷等內(nèi)源性保護(hù)物質(zhì)。其中，腺苷作為一種重要的信號(hào)分子，通過(guò)與細(xì)胞表面的腺苷受體結(jié)合，激活下游的蛋白激酶C（PKC）信號(hào)通路。PKC被激活后，能夠調(diào)節(jié)多種細(xì)胞功能，包括增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化能力。它可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶如超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）等的表達(dá)，這些抗氧化酶能夠及時(shí)清除缺血再灌注過(guò)程中產(chǎn)生的大量活性氧（ROS），減輕氧化應(yīng)激對(duì)細(xì)胞的損傷，從而維持細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)和功能，為血運(yùn)建立創(chuàng)造有利條件。其次，缺血預(yù)處理能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡相關(guān)信號(hào)通路，減少皮片細(xì)胞的凋亡。在缺血再灌注損傷中，細(xì)胞凋亡是導(dǎo)致細(xì)胞死亡的重要方式之一。缺血預(yù)處理可以通過(guò)抑制凋亡相關(guān)蛋白如半胱天冬酶（Caspase）家族成員的表達(dá)和活性，同時(shí)上調(diào)抗凋亡蛋白如B細(xì)胞淋巴瘤-2（Bcl-2）的表達(dá)，維持細(xì)胞內(nèi)凋亡與抗凋亡的平衡，減少細(xì)胞凋亡的發(fā)生。這有助于保持皮片細(xì)胞的數(shù)量和活性，為血運(yùn)建立提供足夠的細(xì)胞基礎(chǔ)。此外，缺血預(yù)處理還能促進(jìn)皮片內(nèi)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)。研究表明，缺血預(yù)處理可以上調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF）等血管生成相關(guān)因子的基因表達(dá)和蛋白分泌。VEGF是一種特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)因子，能夠強(qiáng)烈刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成，促進(jìn)新生血管的生成。FGF家族成員如bFGF等也在血管生成中發(fā)揮重要作用，它們與VEGF等協(xié)同作用，共同促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化，加速新生血管的形成，從而促進(jìn)皮片周緣血運(yùn)的建立。缺血預(yù)處理通過(guò)激活細(xì)胞內(nèi)保護(hù)機(jī)制、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和促進(jìn)血管生成相關(guān)因子表達(dá)等多種途徑，增強(qiáng)了細(xì)胞對(duì)缺血的耐受能力，促進(jìn)了帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)的建立，提高了皮片的成活率。這為缺血預(yù)處理在臨床皮瓣移植手術(shù)中的應(yīng)用提供了重要的理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)。5.3bFGF與缺血預(yù)處理聯(lián)合作用分析將bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，二者對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效應(yīng)。從大體觀察來(lái)看，聯(lián)合處理組皮片在術(shù)后顏色最為鮮艷，呈現(xiàn)出與正常皮膚相近的色澤，質(zhì)地柔軟且富有彈性。這一表現(xiàn)明顯優(yōu)于bFGF組和缺血預(yù)處理組，表明聯(lián)合應(yīng)用能夠更有效地促進(jìn)皮片周緣血運(yùn)的建立，使皮片獲得更充足的血運(yùn)供應(yīng)，維持良好的組織活力。皮片邊緣滲血情況相對(duì)較好，滲血時(shí)間最短，且出血量適中。這說(shuō)明聯(lián)合處理不僅促進(jìn)了血運(yùn)的快速建立，還提高了血管的穩(wěn)定性，使得皮片與受皮區(qū)能夠更有效地建立血運(yùn)聯(lián)系。皮片成活面積測(cè)量結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了這種協(xié)同效應(yīng)。聯(lián)合處理組皮片成活面積高達(dá)7.23±0.75cm2，成活面積百分比為80.33±8.33%，在四組中表現(xiàn)最為突出。與bFGF組和缺血預(yù)處理組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用能夠顯著提高帶真皮下血管網(wǎng)皮片的成活面積，增強(qiáng)皮片的存活能力。組織學(xué)觀察結(jié)果也顯示，聯(lián)合處理組新生血管數(shù)量最多，高達(dá)17.89±2.01個(gè)/高倍鏡視野，肉芽組織增生程度為重度，與bFGF組和缺血預(yù)處理組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這充分說(shuō)明聯(lián)合應(yīng)用進(jìn)一步促進(jìn)了新生血管的生成和肉芽組織的生長(zhǎng)，為皮片周緣血運(yùn)建立提供了更堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。二者協(xié)同作用的機(jī)制可能涉及多個(gè)方面。一方面，缺血預(yù)處理可能通過(guò)激活細(xì)胞內(nèi)的保護(hù)機(jī)制，增強(qiáng)了細(xì)胞對(duì)缺血的耐受能力，同時(shí)上調(diào)了細(xì)胞表面bFGF受體的表達(dá)，使得細(xì)胞對(duì)bFGF的敏感性增強(qiáng)。當(dāng)bFGF作用于這些細(xì)胞時(shí)，能夠更有效地激活下游的信號(hào)通路，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化，加速新生血管的形成。例如，缺血預(yù)處理可能通過(guò)激活PKC信號(hào)通路，上調(diào)bFGF受體的表達(dá)，使得bFGF與受體的結(jié)合更加緊密，從而增強(qiáng)了bFGF促進(jìn)血管生成的作用。另一方面，bFGF和缺血預(yù)處理可能通過(guò)不同的信號(hào)通路，共同調(diào)節(jié)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)新生血管的形成和肉芽組織的生長(zhǎng)。bFGF通過(guò)激活FGF/FGFR信號(hào)通路，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移；缺血預(yù)處理則通過(guò)激活腺苷等信號(hào)通路，上調(diào)VEGF等血管生成相關(guān)因子的表達(dá)。這些血管生成相關(guān)因子之間相互協(xié)同，共同促進(jìn)了血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化，加速了新生血管的形成。此外，bFGF和缺血預(yù)處理還可能在調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝、減輕氧化應(yīng)激損傷等方面發(fā)揮協(xié)同作用，共同為皮片周緣血運(yùn)建立創(chuàng)造有利條件。例如，bFGF可以促進(jìn)細(xì)胞的代謝活動(dòng)，為血管生成提供充足的能量和物質(zhì)基礎(chǔ)；缺血預(yù)處理則可以增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化能力，減輕氧化應(yīng)激對(duì)細(xì)胞的損傷，維持細(xì)胞的正常功能。綜上所述，bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立具有顯著的協(xié)同促進(jìn)作用，其機(jī)制涉及增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)bFGF的敏感性、共同調(diào)節(jié)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)以及在細(xì)胞代謝和氧化應(yīng)激等方面的協(xié)同作用。這為臨床皮瓣移植手術(shù)中聯(lián)合應(yīng)用bFGF和缺血預(yù)處理提供了有力的理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)支持。5.4研究結(jié)果的臨床意義探討本研究結(jié)果對(duì)臨床皮瓣移植手術(shù)具有重要的指導(dǎo)意義，為提高手術(shù)成功率和患者預(yù)后提供了新的策略和思路。在臨床皮瓣移植手術(shù)中，帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植是常用的修復(fù)方法，但血運(yùn)建立問(wèn)題一直是影響手術(shù)成功的關(guān)鍵因素。本研究表明，bFGF和缺血預(yù)處理單獨(dú)應(yīng)用均能顯著促進(jìn)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立，聯(lián)合應(yīng)用時(shí)效果更為顯著。這為臨床醫(yī)生在選擇治療方案時(shí)提供了有力的依據(jù)。對(duì)于一些血運(yùn)條件較差的患者，如糖尿病患者、老年人等，他們的組織修復(fù)能力較弱，血管生成相對(duì)困難，在進(jìn)行皮瓣移植手術(shù)時(shí)，可以考慮在皮片及受區(qū)創(chuàng)面周緣軟組織內(nèi)應(yīng)用bFGF，以促進(jìn)血管生成，改善血運(yùn)。對(duì)于一些預(yù)計(jì)會(huì)經(jīng)歷較長(zhǎng)缺血時(shí)間的皮瓣移植手術(shù)，如游離皮瓣移植，可對(duì)皮片進(jìn)行缺血預(yù)處理，增強(qiáng)皮片細(xì)胞對(duì)缺血的耐受能力，減輕缺血再灌注損傷，從而提高皮片的成活率?；诒狙芯拷Y(jié)果，提出以下潛在的臨床應(yīng)用方案。在手術(shù)前，醫(yī)生應(yīng)根據(jù)患者的具體情況，如年齡、基礎(chǔ)疾病、皮瓣類型和大小等，綜合評(píng)估是否適合采用bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合治療。對(duì)于適合的患者，在皮片切取時(shí)，按照缺血預(yù)處理的方法進(jìn)行操作，即先僅切透皮片四邊，術(shù)后72小時(shí)再?gòu)氐子坞x皮片基底部。在游離皮片基底部并掀起皮片后，將皮片及受區(qū)創(chuàng)面周緣軟組織浸入bFGF溶液中浸泡10分鐘。在浸泡過(guò)程中，要確保bFGF溶液均勻地覆蓋皮片和受區(qū)創(chuàng)面周緣軟組織，以充分發(fā)揮bFGF的作用。在手術(shù)過(guò)程中，要嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則，注意保護(hù)皮片和受區(qū)的組織，避免過(guò)度損傷。同時(shí)，要密切觀察皮片的血運(yùn)情況，如皮片的顏色、質(zhì)地、彈性和邊緣滲血情況等，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并處理可能出現(xiàn)的問(wèn)題。在術(shù)后護(hù)理方面，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)患者的觀察和護(hù)理，確保皮片的存活和血運(yùn)的穩(wěn)定。保持皮片移植部位的清潔和干燥，避免感染的發(fā)生。密切觀察皮片的顏色、質(zhì)地和溫度變化，及時(shí)發(fā)現(xiàn)皮片壞死等異常情況，并采取相應(yīng)的治療措施。為患者提供營(yíng)養(yǎng)支持，促進(jìn)皮片的愈合和組織修復(fù)。bFGF和缺血預(yù)處理在帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立中具有顯著的促進(jìn)作用，聯(lián)合應(yīng)用效果更佳。這些研究結(jié)果為臨床皮瓣移植手術(shù)提供了重要的理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)，有望通過(guò)合理應(yīng)用這些方法，提高皮瓣移植手術(shù)的成功率，改善患者的預(yù)后和生活質(zhì)量。5.5研究的局限性與展望本研究雖然在探索bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的影響方面取得了一定成果，但不可避免地存在一些局限性。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型方面，本研究選用SD大鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，盡管SD大鼠具有生理特征穩(wěn)定、遺傳背景清晰、易于獲取和操作等優(yōu)點(diǎn)，且在醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用廣泛，但大鼠與人類在生理結(jié)構(gòu)、代謝水平和免疫反應(yīng)等方面仍存在一定差異。這些差異可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果外推至人類時(shí)存在一定的不確定性，無(wú)法完全準(zhǔn)確地反映bFGF和缺血預(yù)處理在臨床人體應(yīng)用中的實(shí)際效果。未來(lái)研究可以考慮選用更接近人類生理特征的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如小型豬等，或者結(jié)合臨床病例進(jìn)行研究，以提高研究結(jié)果的臨床相關(guān)性和可靠性。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面，本研究主要觀察了皮片術(shù)后1周內(nèi)的血運(yùn)建立情況及相關(guān)指標(biāo)。然而，皮片血運(yùn)建立是一個(gè)動(dòng)態(tài)的、長(zhǎng)期的過(guò)程，術(shù)后1周的觀察時(shí)間相對(duì)較短，可能無(wú)法全面了解bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)皮片血運(yùn)建立的長(zhǎng)期影響。此外，本研究?jī)H設(shè)置了單一的bFGF劑量和缺血預(yù)處理方案，沒(méi)有對(duì)不同劑量的bFGF和不同缺血預(yù)處理參數(shù)（如缺血時(shí)間、缺血次數(shù)、再灌注時(shí)間等）進(jìn)行深入探討。不同劑量的bFGF和缺血預(yù)處理參數(shù)可能會(huì)對(duì)血運(yùn)建立產(chǎn)生不同程度的影響，未來(lái)研究可以進(jìn)一步優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，設(shè)置多個(gè)劑量組和不同預(yù)處理方案組，進(jìn)行更全面、系統(tǒng)的研究，以確定最佳的bFGF劑量和缺血預(yù)處理方案。在檢測(cè)指標(biāo)方面，雖然本研究選取了皮片外觀、成活面積、組織學(xué)觀察和血管造影等多個(gè)指標(biāo)來(lái)評(píng)估血運(yùn)建立情況，但仍存在一定的局限性。例如，在組織學(xué)觀察中，僅通過(guò)HE染色計(jì)算新生血管數(shù)量和觀察肉芽組織增生情況，對(duì)于一些與血管生成和血運(yùn)建立密切相關(guān)的細(xì)胞因子、信號(hào)通路蛋白等分子水平的變化未進(jìn)行深入檢測(cè)。未來(lái)研究可以增加分子生物學(xué)檢測(cè)指標(biāo)，如通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR、蛋白質(zhì)免疫印跡（Westernblot）等技術(shù)，檢測(cè)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF）等血管生成相關(guān)因子以及相關(guān)信號(hào)通路蛋白的表達(dá)變化，從分子層面深入探究bFGF和缺血預(yù)處理促進(jìn)血運(yùn)建立的機(jī)制。針對(duì)本研究的局限性，未來(lái)研究可以從以下幾個(gè)方向展開(kāi)。一是進(jìn)一步深入研究bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用的協(xié)同機(jī)制。雖然本研究發(fā)現(xiàn)兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同促進(jìn)血運(yùn)建立的作用，但具體的協(xié)同機(jī)制尚未完全明確。未來(lái)可以利用基因編輯技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)等先進(jìn)技術(shù)手段，深入研究?jī)烧咴诩?xì)胞內(nèi)信號(hào)通路、基因表達(dá)調(diào)控等方面的相互作用機(jī)制，為臨床聯(lián)合應(yīng)用提供更堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。二是開(kāi)展多中心、大樣本的臨床研究。目前關(guān)于bFGF和缺血預(yù)處理在臨床皮瓣移植中的應(yīng)用研究相對(duì)較少，且樣本量較小。未來(lái)應(yīng)組織多中心、大樣本的臨床研究，進(jìn)一步驗(yàn)證bFGF和缺血預(yù)處理在臨床應(yīng)用中的安全性和有效性，優(yōu)化臨床應(yīng)用方案，推動(dòng)相關(guān)研究成果從實(shí)驗(yàn)室向臨床實(shí)踐的轉(zhuǎn)化。三是探索bFGF和缺血預(yù)處理與其他治療方法的聯(lián)合應(yīng)用。除了bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用外，還可以探索它們與其他治療方法，如干細(xì)胞治療、組織工程技術(shù)等的聯(lián)合應(yīng)用，以進(jìn)一步提高皮瓣移植的成功率和效果。例如，將干細(xì)胞與bFGF和缺血預(yù)處理相結(jié)合，利用干細(xì)胞的多向分化潛能和旁分泌功能，與bFGF和缺血預(yù)處理協(xié)同促進(jìn)血管生成和組織修復(fù)。本研究為bFGF和缺血預(yù)處理在帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立方面的研究提供了一定的基礎(chǔ)，但仍存在局限性。未來(lái)研究需要不斷完善和拓展，以深入揭示其作用機(jī)制，優(yōu)化臨床應(yīng)用方案，為提高皮瓣移植成功率和改善患者預(yù)后做出更大貢獻(xiàn)。六、結(jié)論6.1主要研究成果總結(jié)本研究通過(guò)建立帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植動(dòng)物模型，系統(tǒng)地探究了bFGF和缺血預(yù)處理對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的作用及其機(jī)制，取得了以下主要研究成果：bFGF對(duì)血運(yùn)建立的促進(jìn)作用及機(jī)制：bFGF在促進(jìn)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立方面表現(xiàn)出顯著效果。通過(guò)大體觀察發(fā)現(xiàn)，bFGF組皮片在術(shù)后顏色相對(duì)鮮艷，質(zhì)地柔軟且彈性較好，邊緣滲血較多但時(shí)間較短，表明其能夠有效改善皮片血運(yùn)狀況，維持良好的組織活力。皮片成活面積測(cè)量結(jié)果顯示，bFGF組皮片成活面積和成活面積百分比均顯著高于對(duì)照組，進(jìn)一步證實(shí)了bFGF能夠顯著增加帶真皮下血管網(wǎng)皮片的成活面積，提高皮片的成活率。組織學(xué)觀察結(jié)果表明，bFGF組新生血管數(shù)量明顯增多，肉芽組織增生程度為中度，說(shuō)明bFGF能夠強(qiáng)烈促進(jìn)新生血管的生成，刺激肉芽組織的生長(zhǎng)。其作用機(jī)制主要包括直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，激活FGF/FGFR信號(hào)通路，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移；增加血管壁的通透性，為血管新生營(yíng)造有利環(huán)境；調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)，參與細(xì)胞外基質(zhì)的重塑；與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、血小板衍生生長(zhǎng)因子（PDGF）等其他生長(zhǎng)因子協(xié)同作用，共同促進(jìn)血管生成。缺血預(yù)處理對(duì)血運(yùn)建立的促進(jìn)作用及機(jī)制：缺血預(yù)處理同樣對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立具有重要促進(jìn)作用。大體觀察發(fā)現(xiàn)，缺血預(yù)處理組皮片在術(shù)后顏色較為紅潤(rùn)，質(zhì)地和彈性表現(xiàn)良好，邊緣滲血情況與bFGF組相似，暗示其刺激了皮片內(nèi)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)了血運(yùn)的快速建立。皮片成活面積測(cè)量結(jié)果顯示，缺血預(yù)處理組皮片成活面積和成活面積百分比顯著高于對(duì)照組，表明其能夠有效提高帶真皮下血管網(wǎng)皮片的成活面積，增強(qiáng)皮片的存活能力。組織學(xué)觀察結(jié)果表明，缺血預(yù)處理組新生血管數(shù)量和肉芽組織增生程度明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明其能夠促進(jìn)新生血管的生成和肉芽組織的生長(zhǎng)，為皮片周緣血運(yùn)建立提供良好基礎(chǔ)。缺血預(yù)處理的作用機(jī)制主要涉及激活細(xì)胞內(nèi)一系列物質(zhì)的釋放和信號(hào)通路，如釋放阿片、緩激肽及腺苷等內(nèi)源性保護(hù)物質(zhì)，激活蛋白激酶C（PKC）信號(hào)通路，增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化能力；調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡相關(guān)信號(hào)通路，減少皮片細(xì)胞的凋亡；促進(jìn)皮片內(nèi)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，如上調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF）等的表達(dá)，從而促進(jìn)血管生成和血運(yùn)建立。bFGF與缺血預(yù)處理的協(xié)同作用及機(jī)制：bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效應(yīng)。從大體觀察來(lái)看，聯(lián)合處理組皮片在術(shù)后顏色最為鮮艷，質(zhì)地柔軟且富有彈性，邊緣滲血情況相對(duì)較好，表明聯(lián)合應(yīng)用能夠更有效地促進(jìn)皮片周緣血運(yùn)的建立，提高血管的穩(wěn)定性。皮片成活面積測(cè)量結(jié)果顯示，聯(lián)合處理組皮片成活面積和成活面積百分比在四組中表現(xiàn)最為突出，與bFGF組和缺血預(yù)處理組相比差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明聯(lián)合應(yīng)用能夠顯著提高帶真皮下血管網(wǎng)皮片的成活面積，增強(qiáng)皮片的存活能力。組織學(xué)觀察結(jié)果顯示，聯(lián)合處理組新生血管數(shù)量最多，肉芽組織增生程度為重度，說(shuō)明聯(lián)合應(yīng)用進(jìn)一步促進(jìn)了新生血管的生成和肉芽組織的生長(zhǎng)。二者協(xié)同作用的機(jī)制可能涉及缺血預(yù)處理增強(qiáng)了細(xì)胞對(duì)bFGF的敏感性，使bFGF能夠更有效地激活下游信號(hào)通路，促進(jìn)血管生成；bFGF和缺血預(yù)處理通過(guò)不同的信號(hào)通路，共同調(diào)節(jié)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)新生血管的形成和肉芽組織的生長(zhǎng)；在調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝、減輕氧化應(yīng)激損傷等方面發(fā)揮協(xié)同作用，共同為皮片周緣血運(yùn)建立創(chuàng)造有利條件。6.2研究的創(chuàng)新點(diǎn)與貢獻(xiàn)本研究在皮瓣移植血運(yùn)建立的研究領(lǐng)域展現(xiàn)出多方面的創(chuàng)新點(diǎn)，并作出了重要貢獻(xiàn)，為該領(lǐng)域的發(fā)展注入了新的活力和思路。在研究方法上，本研究創(chuàng)新性地采用了多種先進(jìn)技術(shù)手段的綜合應(yīng)用。通過(guò)建立精確的帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植動(dòng)物模型，模擬臨床實(shí)際情況，為研究提供了可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。運(yùn)用可視化血管造影技術(shù)動(dòng)態(tài)觀察皮片周緣血管的生長(zhǎng)和分布情況，該技術(shù)能夠直觀、清晰地呈現(xiàn)血管生成的動(dòng)態(tài)過(guò)程，相較于傳統(tǒng)研究方法，極大地提高了研究的準(zhǔn)確性和可靠性。結(jié)合組織學(xué)觀察和圖像分析技術(shù)，對(duì)新生血管數(shù)量、肉芽組織增生情況等指標(biāo)進(jìn)行量化分析，使研究結(jié)果更加科學(xué)、客觀。這種多技術(shù)融合的研究方法為皮瓣移植血運(yùn)建立的研究提供了新的范式，為后續(xù)相關(guān)研究提供了有益的借鑒。在研究?jī)?nèi)容方面，本研究首次深入探討了bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的影響及其機(jī)制。以往的研究大多集中在bFGF或缺血預(yù)處理單獨(dú)作用的研究上，對(duì)于兩者聯(lián)合應(yīng)用的研究相對(duì)較少。本研究發(fā)現(xiàn)bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用能夠產(chǎn)生顯著的協(xié)同效應(yīng)，進(jìn)一步促進(jìn)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)的建立。深入解析了兩者協(xié)同作用的機(jī)制，包括缺血預(yù)處理增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)bFGF的敏感性，共同調(diào)節(jié)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，以及在調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝、減輕氧化應(yīng)激損傷等方面的協(xié)同作用。這一發(fā)現(xiàn)填補(bǔ)了該領(lǐng)域在聯(lián)合應(yīng)用研究方面的空白，為臨床皮瓣移植手術(shù)中聯(lián)合應(yīng)用bFGF和缺血預(yù)處理提供了有力的理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)支持。本研究成果在理論和實(shí)踐層面都具有重要貢獻(xiàn)。在理論上，豐富和完善了皮瓣移植血運(yùn)建立的相關(guān)理論體系。通過(guò)對(duì)bFGF和缺血預(yù)處理作用機(jī)制的深入研究，揭示了它們?cè)谘苌?、?xì)胞增殖和分化、氧化應(yīng)激調(diào)節(jié)等方面的具體作用機(jī)制，為進(jìn)一步理解皮瓣移植血運(yùn)建立的生理病理過(guò)程提供了新的視角和理論基礎(chǔ)。在實(shí)踐中，為臨床皮瓣移植手術(shù)提供了新的治療策略和方法。根據(jù)研究結(jié)果，臨床醫(yī)生可以根據(jù)患者的具體情況，合理選擇bFGF和缺血預(yù)處理聯(lián)合應(yīng)用的治療方案，提高皮瓣移植的成功率，改善患者的預(yù)后和生活質(zhì)量。這將有助于推動(dòng)皮瓣移植手術(shù)技術(shù)的發(fā)展和創(chuàng)新，為患者帶來(lái)更多的福祉。七、參考文獻(xiàn)[1]王新民.bFGF,缺血預(yù)處理對(duì)帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運(yùn)建立的研究[D].河北醫(yī)科大學(xué)，2008.[2]韓春茂，趙雄，吳華堂，等。帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華整形燒傷外科雜志，1994(02):111-114+159.[3]胡驍驊，陳忠存，馮光珍，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)皮片血管化的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華整形燒傷外科雜志，1998(03):182-184.[4]張敬德，邢新，歐陽(yáng)天祥，等。缺血預(yù)處理對(duì)真皮下血管網(wǎng)皮瓣成活的影響[J].中華整形外科雜志，2002(03):153-155.[5]劉毅，張誠(chéng)，張斌，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)燒傷創(chuàng)面愈合中VEGF表達(dá)的影響[J].中華燒傷雜志，2005(01):43-46.[6]陳璧，李躍軍，賈赤宇，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人皮膚創(chuàng)面修復(fù)及表皮細(xì)胞增殖和移行的影響[J].中華整形燒傷外科雜志，1996(03):179-182.[7]劉旭盛，唐乾利，張慶富，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)慢性難愈合創(chuàng)面愈合的臨床研究[J].中華燒傷雜志，2004(02):80-83.[8]程飚，付小兵，盛志勇。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人表皮細(xì)胞增殖和移行的影響[J].中華創(chuàng)傷雜志，2001(06):348-351.[9]孫同柱，付小兵，盛志勇，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[J].中華整形燒傷外科雜志，1999(03):189-192.[10]趙京禹，陳璧，李躍軍，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖和膠原合成的影響[J].中華整形燒傷外科雜志，1998(01):47-49.[2]韓春茂，趙雄，吳華堂，等。帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華整形燒傷外科雜志，1994(02):111-114+159.[3]胡驍驊，陳忠存，馮光珍，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)皮片血管化的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華整形燒傷外科雜志，1998(03):182-184.[4]張敬德，邢新，歐陽(yáng)天祥，等。缺血預(yù)處理對(duì)真皮下血管網(wǎng)皮瓣成活的影響[J].中華整形外科雜志，2002(03):153-155.[5]劉毅，張誠(chéng)，張斌，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)燒傷創(chuàng)面愈合中VEGF表達(dá)的影響[J].中華燒傷雜志，2005(01):43-46.[6]陳璧，李躍軍，賈赤宇，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人皮膚創(chuàng)面修復(fù)及表皮細(xì)胞增殖和移行的影響[J].中華整形燒傷外科雜志，1996(03):179-182.[7]劉旭盛，唐乾利，張慶富，等。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)慢性難愈合創(chuàng)面愈合的臨床研究[J].中華燒傷雜志，2004(02):80-83.[8]程飚，付小兵，盛志勇。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人表皮細(xì)胞增殖和移行的影響[J].中華創(chuàng)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