152022-07-29發(fā)布本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（SAM/TC1I規(guī)模化牛場細(xì)菌性腹瀉防控技術(shù)規(guī)程GB4789.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌GB4789.6食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)致瀉大腸埃希氏菌GB/T27401實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范GB/T27637副結(jié)核分枝桿菌實(shí)時熒光PNY5047無公害食品奶牛飼養(yǎng)獸醫(yī)防疫準(zhǔn)則NY/T5049無公害食品奶牛飼養(yǎng)管理準(zhǔn)則3.1細(xì)菌性腹瀉（bacterialdi樣品處理的生物安全措施符合GB19489的1革蘭染色陰性桿菌，大小為0.4μm～0.75.3副結(jié)核分枝桿菌革蘭染色陽性短桿菌，大小為0.2μm～0.5μm牛初期體溫升高達(dá)41℃~42℃,有的犢牛出生后數(shù)小時開始腹瀉。初期糞便呈粥樣、白色犢牛多發(fā)病突然，病初體溫升高至40℃~41℃,242腫大，質(zhì)地柔軟，被膜下散在針尖大的灰黃或灰白色病白色黏稠的糊狀物。腸黏膜增厚2～30倍，折疊形成腦回樣皺襞。病變部腸管的漿膜淋巴管和相應(yīng)的腸37℃恒溫細(xì)菌培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、PCR儀、PCR管、電取病死牛腸道、肝、脾、淋巴結(jié)、胃、臍帶等，置于無菌密封袋或大腸桿菌在伊紅美藍(lán)瓊脂上形成黑色帶金屬光澤的菌落；麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上形成紅3副結(jié)核分枝桿菌初代分離困難，在病變腸段及腸淋巴結(jié)分離率較高，可先用4%H2挑取SS培養(yǎng)基、HE瓊脂培養(yǎng)基和去氧膽鹽鈉-枸櫞酸鹽培養(yǎng)基上的沙門菌特征性菌落涂片，進(jìn)行革挑取Dubods培養(yǎng)基和HEYM培養(yǎng)基上的副結(jié)核分枝桿菌特征性菌落涂片，進(jìn)行抗酸染色，鏡下可觀根據(jù)伯杰細(xì)菌手冊對細(xì)菌性病原進(jìn)行生化特鹽試驗(yàn)、V-P試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、三糖鐵試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、糖類分解試驗(yàn)（葡萄糖、乳糖、甘露糖、蔗糖）等。甲基紅試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、葡萄糖和甘露糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果呈陽性，枸櫞酸鹽試驗(yàn)、V-P試驗(yàn)、相符。也可用全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行等。甲基紅試驗(yàn)、枸櫞酸鹽試驗(yàn)、衛(wèi)矛醇和山梨醇發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果呈陽性，吲哚試驗(yàn)、V-P試驗(yàn)、乳糖、按照GB4789.4對沙門菌進(jìn)行血清學(xué)4將采集的樣品進(jìn)行處理，按DNA提取試劑根據(jù)沙門菌毒力基因invA設(shè)計引物。參考李文豪論文“呼和浩特牛腹瀉部分細(xì)菌性病原檢測及三重PCR檢測方法的建立”中的引物序列：F：CACGCTCTTTCGTCTGGCATTA；R：TAGACAGGGCGGAGGA25μL反應(yīng)體系配制：模板2μL，上下游引物各按照GB/T27637對副結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行PCR檢測6.3綜合診斷7.3保暖在保證舍內(nèi)溫度的前提下，自然通風(fēng)，保證牛舍干燥、舒適、溫暖。7,4避免應(yīng)激，消除可能降低機(jī)體抵抗力的各種應(yīng)激因素。h后視情況可再飼喂2L。7.7哺乳犢牛給予開食料，補(bǔ)充微量元素，飼7.9病死或死因不明牛按照《病死及病害動物無害化處理技術(shù)規(guī)范》及《病死畜禽和病害畜禽產(chǎn)品無5根據(jù)細(xì)菌學(xué)診斷及藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇敏感抗生素進(jìn)行8.2微生態(tài)制劑治療根據(jù)脫水狀況，調(diào)節(jié)補(bǔ)液速度，糾正休克和機(jī)體6