離心機操作實訓指導手冊一、前言本手冊旨在規(guī)范離心機（包括臺式低速/高速離心機、落地式離心機、冷凍離心機等）的操作流程，確保操作人員安全及實驗結(jié)果的準確性與重復性。手冊內(nèi)容基于GB/T____《離心機安全要求》及設備制造商技術規(guī)范，適用于實驗室、醫(yī)療及工業(yè)場景的離心機操作實訓。二、適用范圍本手冊適用于以下類型離心機的操作指導：1.臺式低速離心機（轉(zhuǎn)速≤5000rpm）；2.臺式高速離心機（轉(zhuǎn)速____rpm）；3.落地式大容量離心機（轉(zhuǎn)速≤____rpm，容量≥4L）；4.冷凍離心機（具備溫度控制功能，溫度范圍-20℃~4℃）。三、安全操作規(guī)范（一）操作人員資質(zhì)與防護1.資質(zhì)要求：操作人員需經(jīng)設備廠家或?qū)嶒炇遗嘤?，掌握設備原理、安全規(guī)則及應急處理流程，考核合格后方可獨立操作。2.個人防護：穿實驗服，戴防化手套（處理腐蝕性樣品時需戴耐酸堿手套）；長發(fā)需束起，禁止佩戴項鏈、手鏈等飾品；操作冷凍離心機時，需戴隔熱手套避免凍傷。（二）環(huán)境與設備前置檢查1.環(huán)境要求：離心機需放置在水平、穩(wěn)固的臺面或地面（落地式），周圍預留≥30cm空間以利散熱；環(huán)境溫度需符合設備要求（通常10℃~30℃），避免陽光直射或靠近熱源（如烤箱、暖氣）；通風良好，禁止在易燃、易爆環(huán)境（如汽油、乙醇蒸汽）中使用。2.設備檢查：開機前檢查電源線是否破損、插頭是否松動，接地是否良好；檢查離心機腔體是否清潔，有無異物（如殘留樣品、碎玻璃）；確認轉(zhuǎn)子無裂紋、變形或腐蝕（重點檢查轉(zhuǎn)子邊緣及孔位），轉(zhuǎn)子標識（型號、最大轉(zhuǎn)速）清晰；冷凍離心機需檢查制冷系統(tǒng)是否正常（開機后觀察溫度顯示是否下降）。（三）運行中的安全要求1.離心機啟動后，禁止離開操作現(xiàn)場，需全程監(jiān)控設備運行狀態(tài)（如轉(zhuǎn)速、溫度、震動、噪音）；2.運行過程中，若發(fā)現(xiàn)異常（如劇烈震動、異響、溫度驟升），需立即按下緊急停止按鈕，待轉(zhuǎn)子完全停穩(wěn)后再進行檢查；3.禁止在離心機運行時打開機蓋，禁止用手或工具觸碰旋轉(zhuǎn)中的轉(zhuǎn)子；4.冷凍離心機運行時，需確保機蓋密封良好，避免冷空氣泄漏影響制冷效果。（四）緊急情況處理1.異常震動：立即停機，檢查樣品是否平衡、轉(zhuǎn)子是否安裝到位、離心管是否破裂；2.溫度異常（冷凍離心機）：若溫度無法降至設定值，需關閉設備，檢查制冷系統(tǒng)（如冷凝器是否堵塞、制冷劑是否泄漏），聯(lián)系廠家維修；3.電源中斷：若運行中突然斷電，需等待5~10分鐘后再嘗試重啟（避免電機過載），若無法啟動，聯(lián)系電工檢查電源；4.樣品泄漏：若離心管破裂導致樣品泄漏，需立即停機，待轉(zhuǎn)子停穩(wěn)后，佩戴手套清理腔體及轉(zhuǎn)子（用75%乙醇擦拭消毒），更換污染的離心管。四、標準操作流程（一）實驗前準備1.根據(jù)實驗需求選擇合適的離心機（如細胞沉淀用低速離心機，蛋白質(zhì)分離用高速離心機）；2.準備離心管（需符合轉(zhuǎn)子要求，如材質(zhì)、規(guī)格、耐轉(zhuǎn)速），檢查離心管是否有裂紋、變形；3.確認樣品體積與重量，計算所需離心力（參考公式：\(RCF=1.118\times10^{-5}\timesr\timesn^2\)，其中\(zhòng)(r\)為轉(zhuǎn)子半徑（cm），\(n\)為轉(zhuǎn)速（rpm））。（二）轉(zhuǎn)子選擇與安裝1.轉(zhuǎn)子選擇：根據(jù)樣品容量、轉(zhuǎn)速要求選擇轉(zhuǎn)子（如15mL離心管選12孔轉(zhuǎn)子，50mL離心管選6孔轉(zhuǎn)子），確保轉(zhuǎn)子最大轉(zhuǎn)速≥實驗所需轉(zhuǎn)速；2.轉(zhuǎn)子安裝：打開機蓋，將轉(zhuǎn)子對準主軸上的卡槽（通常有定位銷）；用手輕輕旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)子，確認安裝牢固（避免使用工具擰緊，防止損壞轉(zhuǎn)子）；關閉機蓋，確認機蓋鎖扣到位（部分設備有機蓋未關報警功能）。（三）樣品加載與平衡1.樣品準備：將樣品倒入離心管（避免超過離心管容量的2/3，防止離心時樣品溢出）；2.平衡操作：取兩支重量相等的離心管（誤差≤0.1g），分別裝入等量樣品；將平衡好的離心管對稱放入轉(zhuǎn)子孔中（如1號與7號、2號與8號）；若樣品數(shù)量為奇數(shù)，需用等量的平衡液（如PBS、蒸餾水）代替樣品，確保轉(zhuǎn)子平衡；禁止在轉(zhuǎn)子孔中放置單個離心管或重量不平衡的樣品，避免運行時劇烈震動。（四）參數(shù)設置1.轉(zhuǎn)速設置：根據(jù)實驗需求設置轉(zhuǎn)速（需≤轉(zhuǎn)子最大轉(zhuǎn)速），建議以離心力（RCF）為單位設置（更準確反映離心效果）；2.時間設置：根據(jù)樣品類型設置離心時間（如細胞沉淀通常5~10分鐘，蛋白質(zhì)分離通常20~30分鐘）；3.溫度設置（冷凍離心機）：根據(jù)樣品穩(wěn)定性設置溫度（如酶類樣品需設置4℃，避免失活）；4.加速/減速設置：低速離心機通常選擇“中速”加速/減速；高速離心機或易碎樣品（如紅細胞）選擇“低速”加速/減速，避免樣品破壞；粘性樣品（如血清）可選擇“高速”加速/減速，提高分離效率。（五）啟動與運行監(jiān)控1.啟動設備：按下“電源”按鈕，待設備自檢完成后，按下“啟動”按鈕；2.運行監(jiān)控：觀察離心機運行狀態(tài)，若發(fā)現(xiàn)劇烈震動、異響或溫度異常，立即停機；記錄運行參數(shù)（如轉(zhuǎn)速、時間、溫度），確保符合實驗要求；禁止在運行過程中調(diào)整參數(shù)或打開機蓋。（六）停機與樣品取出1.停機操作：離心結(jié)束后，設備會自動停機（或按下“停止”按鈕），待轉(zhuǎn)子完全停穩(wěn)（通常需1~3分鐘）后再打開機蓋；2.樣品取出：戴手套取出離心管，避免直接接觸樣品（尤其是腐蝕性或生物危險樣品）；檢查離心管是否破裂，若有泄漏需立即處理（用消毒劑擦拭腔體）；將樣品轉(zhuǎn)移至新容器中，做好標記（如樣品名稱、離心條件、日期）。（七）Post-運行清理1.轉(zhuǎn)子清理：取出轉(zhuǎn)子，用75%乙醇擦拭轉(zhuǎn)子表面及孔位（去除殘留樣品），晾干后放回設備；2.腔體清理：用干凈的紗布或紙巾擦拭腔體（避免使用尖銳物品刮擦），若有樣品泄漏，用消毒劑（如含氯消毒液）擦拭；3.設備關閉：關閉電源，拔下插頭（長期不使用時）；4.記錄填寫：填寫《離心機使用記錄》（包括使用日期、操作人員、樣品類型、離心條件、設備狀態(tài)）。五、維護與保養(yǎng)（一）日常維護1.每次使用后清理轉(zhuǎn)子及腔體（避免樣品殘留腐蝕設備）；2.檢查轉(zhuǎn)子是否有裂紋、變形（若有，立即更換）；3.保持設備周圍清潔（避免灰塵進入電機）；4.冷凍離心機使用后，需將溫度設置為室溫（避免制冷系統(tǒng)長期工作）。（二）定期維護1.每月維護：檢查電源線及插頭（是否破損）；潤滑轉(zhuǎn)子主軸（使用專用潤滑劑，如硅油）；校準轉(zhuǎn)速（用轉(zhuǎn)速計測量，誤差≤±5%）。2.每季度維護：檢查電機皮帶（若有松弛或裂紋，更換皮帶）；清理冷凝器（冷凍離心機，用壓縮空氣吹去灰塵）；校準溫度（用溫度計測量腔體溫度，誤差≤±1℃）。3.每年維護：由廠家專業(yè)人員進行全面檢修（如電機、制冷系統(tǒng)、控制系統(tǒng)）；更換磨損部件（如軸承、密封件）。六、常見故障與處理故障現(xiàn)象可能原因處理方法無法啟動電源未接、機蓋未關、參數(shù)錯誤檢查電源、關閉機蓋、重新設置參數(shù)劇烈震動樣品不平衡、轉(zhuǎn)子未安裝到位重新平衡樣品、重新安裝轉(zhuǎn)子溫度無法下降（冷凍機）制冷劑泄漏、冷凝器堵塞聯(lián)系廠家添加制冷劑、清理冷凝器噪音過大軸承磨損、轉(zhuǎn)子變形更換軸承、更換轉(zhuǎn)子離心后樣品渾濁轉(zhuǎn)速不夠、時間太短提高轉(zhuǎn)速、延長離心時間七、附錄（一）常見轉(zhuǎn)子參數(shù)表轉(zhuǎn)子型號最大轉(zhuǎn)速（rpm）最大容量（mL）適用離心管類型R12-15____15×1215mL圓錐管R20-50____50×650mL圓底管R____50001000×41000mL廣口瓶（二）離心力計算表（部分）轉(zhuǎn)速（rpm）轉(zhuǎn)子半徑（cm）離心力（RCF）5000102795____10________10________10____（三）常見樣品離心條件參考樣品類型推薦轉(zhuǎn)速（rpm）推薦時間（min）推薦溫度（℃）細胞沉淀____5-104蛋白質(zhì)分離