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尿液化學(xué)成分檢查十三、尿液微量清蛋白定量測(cè)定(UAE)
清蛋白(albumin,Alb)是血漿蛋白的主要成分,帶負(fù)電荷,少量濾過腎小球,主要由近曲腎小管重吸收。早期的腎小球病變,清蛋白排泄率即有所增加,但因未達(dá)到150mg/24h或100mg/L,常規(guī)定性方法尚不能檢出,只有通過更敏感的方法才能檢出,該指標(biāo)的變化能敏感地反映早期腎小球功能的損害。
(一)測(cè)定方法及評(píng)價(jià)(1)化學(xué)定量法(2)放射免疫法和酶聯(lián)免疫法(3)免疫比濁法(二)參考區(qū)間
晨尿6.5±5.1mg/L隨機(jī)尿1.27±0.78mg/mmolCr24h尿5.7±2.6mg/24h(三)臨床意義腎小球發(fā)生病變可使清蛋白濾過增加,腎小管受損影響蛋白質(zhì)重吸收也會(huì)出現(xiàn)清蛋白排泄率升高。(1)早期腎損害的篩檢:如用于糖尿病、高血壓、重金屬及藥物中毒性腎病的早期腎損害的篩檢。(2)過敏性紫癜的腎功能監(jiān)測(cè):有助于防止并發(fā)腎損害。(3)腎小球腎炎的病情觀察:急性期升高,在恢復(fù)期趨于正常,但疾病稍有活動(dòng)立即上升。(4)其它:如尿路感染、某些特發(fā)性水腫等可輕度升高。(三)臨床意義十四、乳糜尿定性檢查
外觀呈不同程度的乳白色渾濁,因淋巴循環(huán)受阻淋巴液或乳糜液進(jìn)入尿液中所致,其主要成分為脂肪微粒及卵磷脂、膽固醇、少許纖維蛋白原和白蛋白等;如含有較多血液時(shí),稱為乳糜血尿。乳糜尿的程度與患者攝入脂肪量、淋巴管破裂程度和運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度有關(guān)。乳糜尿+乙醚或氯仿乳糜微?;蛑拘〉?/p>
用乙醚或氯仿提取,蘇丹III染色鏡下觀察,出現(xiàn)桔紅色較大的脂肪滴為定性陽(yáng)性,本法簡(jiǎn)便易行。過小的脂滴不易在顯微鏡下觀察,可利用尿液加乙醚后是否變清來判斷,若尿液變清也提示乳糜尿定性陽(yáng)性。鏡檢蘇丹III染色萃取
(一)測(cè)定方法及評(píng)價(jià)(二)質(zhì)量控制
2.定性檢查陽(yáng)性,應(yīng)鏡檢找微絲蚴。乳糜尿與過多的鹽類結(jié)晶尿及膿尿在外觀上容易混淆。鑒別方法:鹽類結(jié)晶尿加酸,加堿或加熱溶解;膿尿常成顆粒樣混濁,經(jīng)離心上層液體清晰,底層為膿細(xì)胞;乳糜尿經(jīng)離心后仍混濁不分層,管底沉淀可能有少數(shù)淋巴細(xì)胞,且加乙醚后澄清。
(四)臨床意義
乳糜尿陽(yáng)性常見于淋巴管阻塞,如絲蟲病,其乳糜尿多為間歇性,可間歇數(shù)周,數(shù)月或數(shù)年發(fā)作一次,個(gè)別病例可呈持續(xù)陽(yáng)性,勞累過度,妊娠等常為誘發(fā)因素。少數(shù)由結(jié)核、腫瘤、胸腹部創(chuàng)傷或手術(shù),先天性淋巴管畸形等引起腹腔內(nèi)淋巴管阻塞,淋巴液回流障礙引起。
(三)參考區(qū)間
陰性十五、尿液含鐵血黃素定性檢查
含鐵血黃素是一種顆粒狀、暗黃色、不穩(wěn)定的鐵蛋白聚合物。血管內(nèi)溶血時(shí),大部分游離血紅蛋白隨尿排出,形成血紅蛋白尿,小部分被腎小管上皮細(xì)胞攝取并分解為含鐵血黃素,當(dāng)細(xì)胞脫落時(shí)隨尿液排出。(一)測(cè)定方法Rous試驗(yàn)(普魯士藍(lán)反應(yīng))(二)參考區(qū)間
(三)臨床意義慢性血管內(nèi)溶血疾病,如陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)定性(-)
定義:婦女受精卵移行至子宮內(nèi)著床后形成胚胎,由胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌產(chǎn)生,具有促性腺發(fā)育的一種糖蛋白激素。結(jié)構(gòu):
兩個(gè)肽鏈:α多肽鏈(分子量1.7萬(wàn))β多肽鏈(分子量3.2萬(wàn))HCG特有作用:
⑴促進(jìn)性腺發(fā)育—黃體增大/卵泡成熟`
⑵保護(hù)孕卵免受母體免疫攻擊十六、尿液人絨毛膜促性腺激素(HCG)檢查
質(zhì)控線:羊抗鼠IgG抗體+金標(biāo)記鼠IgG
紫紅色反應(yīng)線:金標(biāo)記鼠抗人β-HCG單抗+人尿液HCG抗原(有/無(wú))+羊抗人HCG多抗原理(一)測(cè)定方法及評(píng)價(jià)
(1)單克隆抗體膠體金標(biāo)記免疫層析定性檢查
單克隆抗體膠體金標(biāo)記免疫層析定性檢查
A:吸水材料,試紙條上端B:吸水材料,試紙條下端C:金標(biāo)抗體(金標(biāo)記鼠IgG、金標(biāo)記鼠抗人β-HCG單抗)T:測(cè)試區(qū)羊抗人HCG多抗R:質(zhì)控區(qū)羊抗鼠IgG抗體(一)測(cè)定方法及評(píng)價(jià)
尿液陽(yáng)性質(zhì)控評(píng)價(jià):本法簡(jiǎn)便快速(1-15min)、特異性強(qiáng)、靈敏度高(10~25IU/L),可半定量,在受精后7~10d即可作出診斷,故臨床應(yīng)用廣泛。
(2)放射免疫法(RIA)①操作復(fù)雜,需要昂貴的設(shè)備②靈敏度可達(dá)2IU/L③放射核素有害(3)膠乳凝集抑制試驗(yàn)(LAT)①操作簡(jiǎn)便、價(jià)格便宜、快速(5min)②靈敏度低、特異性不高而趨淘汰
(4)電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ECLIA)1.早期妊娠診斷血清中HCG略高于尿中,用ELISA和膠體金標(biāo)記法,在妊娠后7~10天即能測(cè)出。2.滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤診斷及預(yù)后判斷:葡萄胎、惡性葡萄胎、絨毛膜上皮癌、男性睪丸畸胎瘤等,尿HCG↑,且較正常妊娠婦女明顯增高。(二)參考區(qū)間
定性(-)
(三)臨床意義3.協(xié)助診斷異位妊娠及流產(chǎn)(1)異位妊娠(宮外孕)
約60%尿HCG陽(yáng)性
宮外孕時(shí)孕酮不增加。
(2)不全流產(chǎn)HCG持續(xù)陽(yáng)性完全流產(chǎn)HCG由陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性(3)保胎HCG不斷下降—無(wú)效;HCG明顯上升—成功4.其它:腦垂體疾病、甲亢、子宮內(nèi)膜增生、宮頸癌、卵巢囊腫等,HCG也可出現(xiàn)陽(yáng)性。十七、尿總蛋白定量測(cè)定2.比濁法:主要有磺基水楊酸-硫酸鈉(SSA)法、三氯乙酸法(TCA)和鎢酸法。(一)測(cè)定方法及評(píng)價(jià)1.雙縮脲法是測(cè)定尿蛋白質(zhì)總量的常規(guī)參考方法,本法顯色穩(wěn)定、重復(fù)性好,對(duì)清蛋白、球蛋白具有相同的敏感性。缺點(diǎn)是靈敏度低。3.免疫比濁法或放射免疫法:是最精密準(zhǔn)確的方法,不但可以進(jìn)行蛋白總量的測(cè)定,還能進(jìn)行成分分析。4.染料結(jié)合法:這類方法靈敏度高、操作簡(jiǎn)便快速呈色穩(wěn)定。考馬斯亮藍(lán)法:線性范圍窄,受水楊酸類藥物和麝香草酚的干擾鄰苯三酚紅鉬酸絡(luò)合法:受表面活性劑的干擾麗春紅S法:干擾因素少(二)參考值
雙縮脲法:40~150mg/24h尿
麗春紅S法:46.5~18.1mg/L
考馬斯亮藍(lán)法:58.6~134mg/24h尿
(三)臨床意義
同尿蛋白定性試驗(yàn),優(yōu)點(diǎn)是大大提高了腎臟疾病的陽(yáng)性檢出率。十八、尿β2微球蛋白(β2-MG)定量測(cè)定β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)是機(jī)體有核細(xì)胞產(chǎn)生的單鏈球蛋白,分子量小(11800D),由100個(gè)氨基酸和一對(duì)二硫鍵組成,不含糖,因電泳時(shí)位于β2區(qū)帶而命名。除成熟紅細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞外,所有有核細(xì)胞產(chǎn)生的單鏈球蛋白,特別淋巴細(xì)胞表面HLA的輕鏈組分。β2-MG廣泛分布于血液、尿液和唾液及乳汁中,可自由通過腎小球,但幾乎完全被腎小管重吸收并分化,故尿中排出極少。主要用放射免疫法和酶聯(lián)免疫法測(cè)定。這兩種方法敏感度和特異性均較高,但受到實(shí)驗(yàn)室條件限制。
免疫比濁法具有同樣的敏感度及特異性,操作簡(jiǎn)便、能直接定量而得以快速普及,在普通分光光度計(jì)、紫外分光光度計(jì)及自動(dòng)生化分析儀上均適用,還可以用特種蛋白儀進(jìn)行檢測(cè)。為了便于臨床分析,應(yīng)同時(shí)測(cè)定尿肌酐,以二者的比值代表β2-MG排泄率。并進(jìn)行血β2-MG測(cè)定。(一)測(cè)定方法及評(píng)價(jià)(二)參考值
尿β2-MG<0.3mg/24h,
β2-MG排泄率為<0.2mg/(g.Cr)
血β2-MG<0.3mg/L(三)質(zhì)量控制
(1)標(biāo)本處理:尿中β2-MG較不穩(wěn)定,酸性尿尤其在pH5.2以下極易分解,因此標(biāo)本采集后應(yīng)立即測(cè)定,或?qū)H調(diào)至6.5~7.0后再冷藏保存。
(2)試劑要妥善保管,每批測(cè)定應(yīng)帶一份合格的質(zhì)控樣品。(四)臨床意義1.腎小管疾病的早期診斷指標(biāo)腎小管炎癥、中毒、壞死及腎間質(zhì)病變,上皮細(xì)胞胞飲功能受損,尿β2-MG排出率增加;使用慶大霉素、多粘菌素等腎毒性藥物后尿β2-MG增加,提示應(yīng)減量或停藥。2.鑒別上、下尿路感染腎盂腎炎時(shí),腎小管受損β2-MG增加;下尿路感染則正常。3.觀察腎移植排斥反應(yīng)腎移植發(fā)生排斥反應(yīng)時(shí)尿β2-MG增加。十九、尿淀粉酶測(cè)定淀粉酶(AMY)主要來源于胰腺(為同工酶P)和唾液腺(為同工酶S),當(dāng)胰腺有炎癥或胰液排出受阻時(shí),胰腺的淀粉酶會(huì)進(jìn)入血液,因淀粉酶分子量較小,易通過腎小球?yàn)V過膜隨尿排出。
1.碘-淀粉比色法(Somoggi法)
測(cè)定酶作用后剩余的淀粉量來推算酶活性,其缺點(diǎn)是底物難以標(biāo)準(zhǔn)化,反應(yīng)不呈零級(jí)反應(yīng)。但因簡(jiǎn)單、快速、靈敏、價(jià)廉仍被國(guó)內(nèi)廣泛使用。2.染色法:最常用的是2-氯-4硝基苯酚-α-麥芽糖三糖法(CNP-G3法),該法簡(jiǎn)單、快速、可測(cè)范圍較寬。(一)測(cè)定方法及評(píng)價(jià)3.對(duì)硝基麥芽七糖法(4NP-7G法):本法線性、穩(wěn)定性較好,特異性強(qiáng),靈敏度高,國(guó)內(nèi)已有試劑盒供應(yīng),特別適用于自動(dòng)分析。4.免疫抑制法和電泳法:用于同工酶測(cè)定(一)測(cè)定方法及評(píng)價(jià)(二)參考區(qū)間方法參考值(U/L)血清尿液Somoggi法(37℃)800-1800100-12004NP-7G法(37℃)100-220120-1200CNP-G3法(37℃)<600<300(1)急性胰腺炎:發(fā)病3~6h,血清AMY活性開始增高,20~30h達(dá)峰值,持續(xù)3~5天恢復(fù)正常;發(fā)病12~24h,尿AMY開始升高,3~10天后恢復(fù)正常。血清AMY同工酶P型升高。血清AMY主要用于急性胰腺炎的早期診斷,尿AMY主要用于病情觀察。(2)慢性胰腺炎:穩(wěn)定期,各項(xiàng)酶指標(biāo)正常,急性發(fā)作時(shí)AMY及其P型同工酶均升高。(三)臨床意義(3)其它:胰腺癌、胰腺囊腫AMY活性重度升高。卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎時(shí)AMY也升高,但以S型為主。AMY在肝合成,嚴(yán)重肝病時(shí)降低。(三)臨床意義1.NAG:是一種位于細(xì)胞溶酶體內(nèi)的酸性磷酸酶,存在于所有組織中,尿中主要來源于腎近曲小管上皮細(xì)胞,故尿NAG可作為腎小管損傷的標(biāo)志物。2.參
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