實(shí)驗(yàn)室設(shè)備清潔消毒標(biāo)準(zhǔn)操作流程1引言實(shí)驗(yàn)室設(shè)備是實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的核心工具，其清潔消毒質(zhì)量直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、人員健康安全及實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的生物安全性。未規(guī)范清潔消毒的設(shè)備可能導(dǎo)致交叉污染（如樣品間的微生物轉(zhuǎn)移）、實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差（如殘留試劑干擾檢測(cè)）或病原微生物傳播（如細(xì)菌、病毒感染）。為建立標(biāo)準(zhǔn)化操作體系，保障實(shí)驗(yàn)可靠性與安全性，制定本《實(shí)驗(yàn)室設(shè)備清潔消毒標(biāo)準(zhǔn)操作流程》（以下簡(jiǎn)稱“SOP”）。2適用范圍本SOP適用于實(shí)驗(yàn)室所有需清潔消毒的設(shè)備，包括但不限于：玻璃器皿：燒杯、量筒、試管、培養(yǎng)皿、移液管等；金屬器械：鑷子、剪刀、接種環(huán)、手術(shù)刀片等；塑料耗材：移液器吸頭、離心管、培養(yǎng)瓶、試劑瓶等；精密儀器：生物安全柜、離心機(jī)、培養(yǎng)箱、天平、分光光度計(jì)、PCR儀等；通用設(shè)備：搖床、水浴鍋、磁力攪拌器、超凈工作臺(tái)等。3術(shù)語(yǔ)與定義清潔（Cleaning）：通過(guò)物理或化學(xué)方法去除設(shè)備表面/內(nèi)部的可見(jiàn)污染物（如樣品殘留、培養(yǎng)基、灰塵），是消毒/滅菌的前置步驟（有機(jī)物殘留會(huì)降低消毒效果）。消毒（Disinfection）：殺滅或清除設(shè)備上的病原微生物（不包括細(xì)菌芽孢），使其達(dá)到無(wú)害化要求（如75%乙醇擦拭、含氯消毒劑浸泡）。滅菌（Sterilization）：殺滅或清除設(shè)備上的所有微生物（包括細(xì)菌芽孢），是最高級(jí)別的微生物控制（如高壓滅菌、干熱滅菌）。交叉污染（Cross-contamination）：不同樣品、設(shè)備或環(huán)境之間的污染物轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差或人員感染。4職責(zé)分工實(shí)驗(yàn)人員：負(fù)責(zé)所使用設(shè)備的日常清潔消毒（如玻璃器皿、移液器吸頭），填寫(xiě)《清潔消毒記錄》。設(shè)備管理員：負(fù)責(zé)精密儀器與特殊設(shè)備的定期維護(hù)（如生物安全柜、離心機(jī)），驗(yàn)證清潔消毒效果。實(shí)驗(yàn)室主任：監(jiān)督SOP執(zhí)行情況，審核記錄，處理異常事件（如消毒效果不達(dá)標(biāo)）。保潔人員：配合完成公共區(qū)域設(shè)備的清潔（如桌面、地面的水浴鍋），但不參與消毒操作。5準(zhǔn)備工作5.1人員防護(hù)（PPE）操作前必須佩戴以下防護(hù)裝備，避免接觸污染物或消毒劑：手套：選擇耐化學(xué)腐蝕的丁腈手套（避免乳膠過(guò)敏）；護(hù)目鏡：防止消毒劑飛濺入眼（如過(guò)氧乙酸）；防護(hù)服：一次性或?qū)Ｓ梅雷o(hù)服，避免污染物接觸皮膚；口罩：醫(yī)用外科口罩或N95口罩，防止吸入消毒氣體（如臭氧、乙醇蒸汽）。5.2清潔消毒用品清潔劑：中性洗滌劑（如洗潔精）、酶清潔劑（如蛋白酶，用于去除蛋白質(zhì)殘留，如血液、培養(yǎng)基）；消毒劑：根據(jù)設(shè)備材質(zhì)與污染類型選擇（見(jiàn)表1）；工具：專用毛刷（玻璃器皿）、海綿（塑料/金屬）、一次性擦拭布（精密儀器）、噴壺（消毒劑分裝）、高壓滅菌鍋（滅菌）、紫外燈（表面消毒）；其他：去離子水（沖洗殘留）、烘干箱（干燥）、無(wú)菌儲(chǔ)物容器（存放消毒后設(shè)備）。表1常見(jiàn)消毒劑選擇指南設(shè)備材質(zhì)污染類型推薦消毒劑濃度/用法玻璃/金屬一般污染高壓滅菌121℃、15psi、20分鐘塑料（耐溫）病原微生物75%乙醇擦拭/浸泡30分鐘精密儀器（電子）表面污染75%乙醇擦拭（避免液體進(jìn)入內(nèi)部）生物安全柜內(nèi)部污染75%乙醇+紫外燈擦拭后照射60分鐘5.3設(shè)備預(yù)處理實(shí)驗(yàn)結(jié)束后1小時(shí)內(nèi)處理設(shè)備，避免污染物干涸（如培養(yǎng)基凝固后難以去除）；倒去殘留樣品（如試管中的菌液），用自來(lái)水沖洗表面；關(guān)閉設(shè)備電源（如離心機(jī)、培養(yǎng)箱），待其冷卻至室溫（避免高溫下接觸消毒劑導(dǎo)致變形）；拆卸可分離部件（如離心機(jī)轉(zhuǎn)頭、培養(yǎng)箱隔板），便于徹底清潔。6操作流程6.1通用原則先清潔后消毒：清潔是消毒的前提，未清潔的設(shè)備直接消毒會(huì)導(dǎo)致消毒劑與有機(jī)物結(jié)合，降低效果；分類處理：不同材質(zhì)、用途的設(shè)備采用不同方法（如玻璃耐高溫，可高壓滅菌；塑料不耐熱，用化學(xué)消毒）；避免二次污染：消毒后的設(shè)備應(yīng)立即放入無(wú)菌容器或用無(wú)菌紗布覆蓋，避免接觸未清潔的表面。6.2具體操作步驟6.2.1玻璃器皿清潔流程：1.預(yù)處理：倒去殘留樣品，用自來(lái)水沖洗3次，去除可見(jiàn)污染物；2.浸泡：將器皿放入酶清潔劑溶液（按說(shuō)明書(shū)稀釋，如1:100）中，浸泡30分鐘-1小時(shí)（去除蛋白質(zhì)殘留）；3.刷洗：用專用毛刷（如試管刷、燒杯刷）刷洗內(nèi)外表面，重點(diǎn)清理死角（如培養(yǎng)皿邊緣、移液管尖端）；4.沖洗：用自來(lái)水反復(fù)沖洗5次，去除清潔劑殘留；再用去離子水沖洗2次（避免礦物質(zhì)殘留影響實(shí)驗(yàn)）；5.干燥：將器皿倒置放在烘干箱中，100℃-120℃烘干30分鐘（或自然晾干，需用無(wú)菌紗布覆蓋）。消毒流程：高壓滅菌（首選）：將清潔干燥的器皿放入高壓滅菌鍋，121℃、15psi，滅菌20分鐘（適用于需無(wú)菌的器皿，如培養(yǎng)皿、試管）；干熱滅菌：將器皿放入干熱滅菌箱，160℃-180℃，滅菌2小時(shí)（適用于耐高溫的器皿，如燒杯、量筒）；化學(xué)消毒：如被病原微生物（如乙肝病毒）污染，先用含氯消毒劑（有效氯1000mg/L）浸泡30分鐘，再按清潔流程處理（適用于不耐熱的器皿）。6.2.2金屬器械清潔流程：1.預(yù)處理：用自來(lái)水沖洗表面，去除血液、組織等殘留；2.浸泡：放入中性洗滌劑溶液（1:50）中，浸泡15分鐘-30分鐘；3.刷洗：用毛刷刷洗器械表面與縫隙（如鑷子尖端、剪刀刃），避免刮傷；4.沖洗：用自來(lái)水沖凈清潔劑，再用去離子水沖洗；5.干燥：用無(wú)菌擦拭布擦干，或放入烘干箱低溫烘干（≤60℃，避免生銹）。消毒流程：高壓滅菌（首選）：將清潔干燥的器械放入高壓滅菌鍋，121℃、15psi，滅菌20分鐘（適用于手術(shù)器械、接種環(huán)）；火焰消毒：接種環(huán)、接種針等小型器械，在酒精燈火焰上灼燒至紅熱（1-2秒），冷卻后使用（快速有效）；化學(xué)消毒：如被病原微生物污染，用含氯消毒劑（有效氯1000mg/L）浸泡30分鐘，再按清潔流程處理（適用于不耐熱的器械）。6.2.3塑料耗材清潔流程：1.預(yù)處理：倒去殘留樣品，用自來(lái)水沖洗表面；2.浸泡：放入中性洗滌劑溶液（1:50）中，浸泡15分鐘-30分鐘（避免使用酶清潔劑，以免腐蝕塑料）；3.刷洗：用柔軟海綿或一次性擦拭布刷洗，避免刮傷塑料表面；4.沖洗：用自來(lái)水沖凈清潔劑，再用去離子水沖洗；5.干燥：自然晾干或放入烘干箱低溫烘干（≤60℃，避免塑料變形）。消毒流程：高壓滅菌：部分耐高溫塑料（如聚丙烯離心管）可放入高壓滅菌鍋，121℃、15psi，滅菌20分鐘（需確認(rèn)耗材標(biāo)識(shí)“耐高壓”）；化學(xué)消毒：用75%乙醇擦拭表面（如移液器吸頭、培養(yǎng)瓶），或用含氯消毒劑（有效氯500mg/L）浸泡30分鐘（適用于不耐熱的塑料）；紫外消毒：將塑料耗材放入紫外燈箱中，照射30分鐘-60分鐘（適用于表面消毒，如離心管蓋子）。6.2.4精密儀器注意：精密儀器（如生物安全柜、天平）的清潔消毒需避免液體進(jìn)入內(nèi)部，損壞電路或傳感器。生物安全柜：1.斷電：關(guān)閉風(fēng)機(jī)，拔下電源插頭；2.擦拭：用75%乙醇擦拭內(nèi)壁、工作臺(tái)面、玻璃門(mén)及把手（重點(diǎn)清理樣品殘留處）；3.紫外消毒：打開(kāi)紫外燈，照射60分鐘（定期更換紫外燈，確保強(qiáng)度≥70μW/cm2，否則無(wú)法有效殺菌）；4.通風(fēng)：照射結(jié)束后，打開(kāi)風(fēng)機(jī)通風(fēng)30分鐘，去除殘留臭氧（臭氧對(duì)人體有害）。離心機(jī)：1.拆卸：關(guān)閉電源，拆卸轉(zhuǎn)頭與套管；2.清潔：將轉(zhuǎn)頭放入中性洗滌劑溶液（1:50）中，浸泡15分鐘，用海綿刷洗表面與孔壁（去除殘留樣品）；3.消毒：用75%乙醇擦拭轉(zhuǎn)頭與套管，或用含氯消毒劑（有效氯500mg/L）浸泡30分鐘；4.安裝：晾干后，重新安裝轉(zhuǎn)頭與套管（確保安裝牢固，避免離心時(shí)脫落）。培養(yǎng)箱：1.取出部件：取出內(nèi)部隔板、托盤(pán)與水盤(pán)；2.清潔：用中性洗滌劑溶液擦拭隔板與托盤(pán)，用海綿刷洗水盤(pán)（去除水垢）；3.消毒：用75%乙醇擦拭箱體內(nèi)壁與門(mén)封條（門(mén)封條易積灰，需重點(diǎn)清理）；4.紫外消毒：打開(kāi)紫外燈，照射60分鐘；5.干燥：放入干燥的無(wú)菌紗布，吸收箱內(nèi)水分（避免霉菌生長(zhǎng)，霉菌會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)）。天平/分光光度計(jì)：1.斷電：關(guān)閉電源，拔下插頭；2.擦拭：用干燥的一次性擦拭布擦拭表面灰塵，再用75%乙醇擦拭（避免液體進(jìn)入天平內(nèi)部，損壞傳感器）；3.通風(fēng)：擦拭后，打開(kāi)天平門(mén)，自然晾干（避免用吹風(fēng)機(jī)吹，防止灰塵飛揚(yáng)）。7質(zhì)量控制7.1消毒劑濃度檢測(cè)定期檢測(cè)：用試紙或儀器檢測(cè)消毒劑濃度（如含氯消毒劑的有效氯含量），確保符合要求（如75%乙醇的濃度需在70%-80%之間，過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響消毒效果）；有效期管理：消毒劑開(kāi)啟后，標(biāo)注開(kāi)啟日期與有效期（如75%乙醇開(kāi)啟后有效期為7天，含氯消毒劑開(kāi)啟后有效期為24小時(shí)）。7.2清潔效果驗(yàn)證ATP生物熒光檢測(cè)：采用ATP檢測(cè)儀檢測(cè)設(shè)備表面的有機(jī)物殘留（ATP是所有生物的能量分子，殘留越多，ATP值越高），ATP值≤100RLU為合格（RLU：相對(duì)光單位）；微生物培養(yǎng)驗(yàn)證：對(duì)于無(wú)菌設(shè)備（如培養(yǎng)皿、手術(shù)器械），采用瓊脂平板涂抹法檢測(cè)表面微生物數(shù)量，菌落數(shù)≤1CFU/cm2為合格（CFU：colony-formingunit，菌落形成單位）；目視檢查：清潔后的設(shè)備表面應(yīng)無(wú)可見(jiàn)污染物（如灰塵、樣品殘留），無(wú)異味。7.3記錄審核實(shí)驗(yàn)人員：每次操作后填寫(xiě)《清潔消毒記錄》（見(jiàn)附錄），包括設(shè)備名稱、清潔消毒日期、操作人員、消毒劑名稱及濃度、效果驗(yàn)證結(jié)果等；實(shí)驗(yàn)室主任：每月審核記錄，檢查操作是否符合SOP，記錄是否完整（如缺少消毒劑濃度檢測(cè)記錄，需及時(shí)整改）；異常處理：若清潔消毒效果不達(dá)標(biāo)（如ATP值>100RLU），需重新清潔消毒，并追溯原因（如消毒劑濃度不夠、擦拭不徹底）。8注意事項(xiàng)8.1人員安全消毒劑應(yīng)存放在陰涼、干燥、通風(fēng)的地方，遠(yuǎn)離火源（如乙醇是易燃液體，需遠(yuǎn)離酒精燈）；如不慎接觸消毒劑（如含氯消毒劑濺到皮膚），立即用大量清水沖洗（至少15分鐘），并及時(shí)就醫(yī)；紫外燈照射時(shí)，嚴(yán)禁人員進(jìn)入（紫外光會(huì)損傷眼睛與皮膚）。8.2設(shè)備保護(hù)不同材質(zhì)的設(shè)備選擇合適的清潔劑與消毒劑（如塑料不能用含氯消毒劑，以免腐蝕；玻璃不能用鋼絲球，以免刮傷）；精密儀器避免用水沖洗（如天平、分光光度計(jì)），防止液體進(jìn)入內(nèi)部；高壓滅菌時(shí)，確保設(shè)備內(nèi)有足夠的水分（避免干燒，損壞滅菌鍋）。8.3避免二次污染消毒后的設(shè)備應(yīng)放入無(wú)菌儲(chǔ)物容器（如無(wú)菌培養(yǎng)皿盒）或用無(wú)菌紗布覆蓋，避免接觸未清潔的表面（如桌面）；清潔消毒工具（如毛刷、海綿）應(yīng)專用（如玻璃器皿毛刷與金屬器械毛刷分開(kāi)使用），避免交叉污染；定期清潔儲(chǔ)物容器（如無(wú)菌培養(yǎng)皿盒），確保其本身無(wú)污染物（如用75%乙醇擦拭）。8.4特殊污染處理如設(shè)備被病原微生物（如結(jié)核桿菌、HIV病毒）污染，應(yīng)立即隔離（用紅色塑料袋包裹），并通知實(shí)驗(yàn)室主任；處理特殊污染設(shè)備時(shí)，需佩戴雙層手套（內(nèi)層丁腈手套，外層乳膠手套），避免接觸污染物；處理完畢后，對(duì)周圍環(huán)境進(jìn)行消毒（如用含氯消毒劑擦拭桌面、地面）。9記錄與檔案管理9.1記錄內(nèi)容《清潔消毒記錄》應(yīng)包括以下信息（示例見(jiàn)附錄）：設(shè)備名稱/編號(hào)；清潔消毒日期/時(shí)間；操作人員姓名；清潔劑名稱/濃度；消毒劑名稱/濃度；清潔消毒方法（如高壓滅菌、75%乙醇擦拭）；效果驗(yàn)證結(jié)果（如ATP值、菌落數(shù)）；備注（如設(shè)備損壞、異常情況）。9.2檔案保存記錄應(yīng)及時(shí)填寫(xiě)（操作后1小時(shí)內(nèi)），避免遺漏；檔案應(yīng)存放在干燥、通風(fēng)、防火的地方，便于查閱（如實(shí)驗(yàn)室檔案柜）；記錄保存期限為1年（根據(jù)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證要求，如ISO____，可延長(zhǎng)至3年）；電子記錄應(yīng)定期備份（如存入U(xiǎn)盤(pán)或云盤(pán)），防止數(shù)據(jù)丟失。10修訂與更新本SOP每年修訂一次，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的變化（如新增精密儀器）、最新的規(guī)范要求（如GB____《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》）或異常事件（如消毒效果不達(dá)標(biāo)）進(jìn)行更新；修訂后，需重新培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)人員（如講解新的清潔消毒方法），確保SOP有效執(zhí)行。附錄：實(shí)驗(yàn)室設(shè)備清潔消毒記錄（示例）設(shè)備名稱設(shè)備編號(hào)清潔消毒日期操作人員清潔劑名稱消毒劑名稱及濃度清潔消毒方法ATP值（RLU）菌落數(shù)（CFU/cm2）備注培養(yǎng)皿B-001____張三酶清潔劑高壓滅菌（121℃，20分鐘）高壓滅菌850無(wú)離心機(jī)轉(zhuǎn)頭C-002____李四中性洗滌劑75%乙醇擦拭600無(wú)生物安全柜S-001____王五75%乙醇紫外燈照射（60分鐘）擦拭+紫外消毒900無(wú)移液器吸頭P-001____趙六中性洗滌劑含氯消毒劑（5