2025年事業(yè)單位招聘考試衛(wèi)生類醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)知識試卷（分子生物學(xué)技術(shù)）考試時間：______分鐘總分：______分姓名：______一、單項選擇題（本大題共20小題，每小題1分，共20分。在每小題列出的四個選項中，只有一項是最符合題目要求的。）1.下列哪項不是PCR技術(shù)的關(guān)鍵組成部分？（A）A.引物B.耐熱DNA聚合酶C.限制性內(nèi)切酶D.DNA模板2.在進行基因擴增時，通常需要設(shè)定哪個溫度進行變性？（B）A.55℃B.95℃C.72℃D.37℃3.關(guān)于引物設(shè)計，以下哪項說法是錯誤的？（C）A.引物長度通常在18-25個核苷酸之間B.引物應(yīng)避免自我互補形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)C.引物可以設(shè)計成含有多種堿基D.引物兩端GC含量應(yīng)較高以提高穩(wěn)定性4.PCR擴增產(chǎn)物的大小可以通過什么方法檢測？（A）A.凝膠電泳B.分子雜交C.基因測序D.限制性酶切5.在Real-TimePCR實驗中，熒光信號的檢測通常在哪個階段進行？（B）A.變性階段B.退火階段C.延伸階段D.重復(fù)循環(huán)階段6.SYBRGreenI染料在Real-TimePCR中的作用是什么？（A）A.檢測雙鏈DNAB.檢測單鏈DNAC.檢測RNAD.檢測蛋白質(zhì)7.關(guān)于巢式PCR，以下哪項說法是正確的？（C）A.只需要一對引物B.擴增效率比普通PCR低C.可以提高特異性D.產(chǎn)物大小通常較大8.在進行PCR產(chǎn)物克隆前，通常需要對PCR產(chǎn)物進行哪個步驟？（B）A.脫鹽B.純化C.變性D.合成9.PCR產(chǎn)物克隆后，如何篩選陽性克??？（A）A.抗生素篩選B.熒光檢測C.電泳檢測D.基因測序10.關(guān)于PCR產(chǎn)物測序，以下哪項說法是錯誤的？（D）A.測序前需要對PCR產(chǎn)物進行純化B.測序引物需要與PCR產(chǎn)物互補C.測序結(jié)果可以用于基因序列分析D.測序只能檢測PCR產(chǎn)物的一端11.在進行基因芯片實驗時，通常需要使用什么方法進行雜交？（B）A.PCRB.探針C.熒光顯微鏡D.電泳12.基因芯片的主要應(yīng)用領(lǐng)域是什么？（A）A.基因表達分析B.PCR產(chǎn)物檢測C.基因測序D.基因克隆13.在基因芯片實驗中，如何判斷基因表達的高低？（B）A.芯片顏色B.熒光強度C.探針數(shù)量D.雜交時間14.關(guān)于數(shù)字PCR，以下哪項說法是正確的？（C）A.只適用于小片段DNAB.不能檢測稀有突變C.可以絕對定量DNAD.需要復(fù)雜的儀器15.數(shù)字PCR的主要優(yōu)勢是什么？（A）A.高靈敏度和高精度B.操作簡單C.成本低D.應(yīng)用范圍廣16.在進行數(shù)字PCR實驗時，通常需要使用什么方法進行擴增？（B）A.聚合酶鏈式反應(yīng)B.微滴式PCRC.基因芯片D.基因測序17.數(shù)字PCR的原理是什么？（A）A.將PCR反應(yīng)體系分成多個微反應(yīng)單元B.通過熒光信號檢測PCR產(chǎn)物C.使用探針檢測DNAD.通過凝膠電泳檢測PCR產(chǎn)物18.關(guān)于數(shù)字PCR數(shù)據(jù)分析，以下哪項說法是錯誤的？（D）A.需要計算Cq值B.可以進行絕對定量C.可以檢測稀有突變D.不需要考慮擴增效率19.在進行RNA提取時，通常需要使用什么方法？（A）A.玻璃珠法B.PCRC.基因芯片D.基因測序20.RNA提取后，如何進行逆轉(zhuǎn)錄？（A）A.使用逆轉(zhuǎn)錄酶B.使用DNA聚合酶C.使用RNA聚合酶D.使用限制性內(nèi)切酶二、多項選擇題（本大題共10小題，每小題2分，共20分。在每小題列出的五個選項中，有多項符合題目要求。請在答題卡上將所選項的字母涂黑。多選、少選或錯選均不得分。）21.下列哪些是PCR技術(shù)的關(guān)鍵組成部分？（A,B,C）A.引物B.耐熱DNA聚合酶C.DNA模板D.限制性內(nèi)切酶E.DNA連接酶22.在進行基因擴增時，通常需要設(shè)定哪些溫度階段？（A,B,C）A.變性階段B.退火階段C.延伸階段D.熒光檢測階段E.電泳檢測階段23.關(guān)于引物設(shè)計，以下哪些說法是正確的？（A,B,D）A.引物長度通常在18-25個核苷酸之間B.引物應(yīng)避免自我互補形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)C.引物可以設(shè)計成含有多種堿基D.引物兩端GC含量應(yīng)較高以提高穩(wěn)定性E.引物可以設(shè)計成含有非標(biāo)準堿基24.PCR擴增產(chǎn)物的大小可以通過哪些方法檢測？（A,C,D）A.凝膠電泳B.分子雜交C.基因測序D.限制性酶切E.熒光檢測25.在Real-TimePCR實驗中，熒光信號的檢測通常在哪些階段進行？（A,B,C）A.變性階段B.退火階段C.延伸階段D.重復(fù)循環(huán)階段E.電泳檢測階段26.關(guān)于巢式PCR，以下哪些說法是正確的？（B,C,D）A.只需要一對引物B.擴增效率比普通PCR高C.可以提高特異性D.產(chǎn)物大小通常較小E.只適用于大片段DNA27.在進行PCR產(chǎn)物克隆前，通常需要對PCR產(chǎn)物進行哪些步驟？（A,B,C）A.脫鹽B.純化C.變性D.合成E.電泳28.PCR產(chǎn)物克隆后，如何篩選陽性克??？（A,B,C）A.抗生素篩選B.熒光檢測C.電泳檢測D.基因測序E.探針檢測29.關(guān)于PCR產(chǎn)物測序，以下哪些說法是正確的？（A,B,C）A.測序前需要對PCR產(chǎn)物進行純化B.測序引物需要與PCR產(chǎn)物互補C.測序結(jié)果可以用于基因序列分析D.測序只能檢測PCR產(chǎn)物的一端E.測序需要復(fù)雜的儀器30.在進行基因芯片實驗時，通常需要使用哪些方法進行雜交？（A,B,C）A.探針B.熒光C.寡核苷酸D.蛋白質(zhì)E.DNA三、判斷題（本大題共10小題，每小題1分，共10分。請判斷下列各題的說法是否正確，正確的涂黑“√”，錯誤的涂黑“×”。）31.PCR技術(shù)只能用于擴增DNA片段。（×）32.引物設(shè)計時，引物內(nèi)部的互補序列越多，PCR擴增效率越高。（×）33.Real-TimePCR可以實時監(jiān)測PCR反應(yīng)進程。（√）34.巢式PCR可以提高PCR的特異性。（√）35.PCR產(chǎn)物克隆后，需要進行測序驗證。（√）36.數(shù)字PCR可以絕對定量DNA，而傳統(tǒng)PCR只能相對定量。（√）37.基因芯片可以檢測多種基因的表達水平。（√）38.RNA提取時，通常需要使用蛋白酶K來降解RNA。（×）39.逆轉(zhuǎn)錄是將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA的過程。（√）40.基因芯片實驗中，雜交后需要進行洗滌步驟。（√）四、簡答題（本大題共5小題，每小題4分，共20分。請簡要回答下列問題。）41.簡述PCR技術(shù)的原理及其關(guān)鍵組成部分。PCR技術(shù)是通過模擬DNA復(fù)制過程，特異性地擴增DNA片段的技術(shù)。其原理是利用一對引物在高溫變性、低溫退火和適溫延伸的循環(huán)條件下，使目的DNA片段得到擴增。關(guān)鍵組成部分包括：DNA模板、引物、耐熱DNA聚合酶（如Taq酶）、dNTPs（脫氧核苷三磷酸）以及緩沖液等。42.Real-TimePCR與普通PCR有什么區(qū)別？Real-TimePCR有哪些應(yīng)用？Real-TimePCR與普通PCR的主要區(qū)別在于，Real-TimePCR可以在PCR反應(yīng)實時監(jiān)測熒光信號的變化，從而實現(xiàn)對PCR產(chǎn)物的定量分析。而普通PCR只能在反應(yīng)結(jié)束后通過凝膠電泳等方法檢測產(chǎn)物。Real-TimePCR的應(yīng)用包括基因表達分析、病原體檢測、拷貝數(shù)變異分析等。43.簡述巢式PCR的原理及其優(yōu)勢。巢式PCR是在普通PCR的基礎(chǔ)上，再進行一輪PCR擴增，使用的是第一輪PCR產(chǎn)物為模板，并使用新的引物進行擴增。巢式PCR的優(yōu)勢在于可以提高PCR的特異性和靈敏度，減少非特異性產(chǎn)物的干擾。但同時也增加了操作步驟和產(chǎn)物污染的風(fēng)險。44.數(shù)字PCR的原理是什么？數(shù)字PCR有哪些優(yōu)勢？數(shù)字PCR是將PCR反應(yīng)體系分成多個微反應(yīng)單元，每個微反應(yīng)單元中包含獨立的DNA模板，通過PCR擴增后，對每個微反應(yīng)單元進行檢測，從而實現(xiàn)對DNA的絕對定量。數(shù)字PCR的優(yōu)勢在于高靈敏度和高精度，可以檢測稀有突變，適用于絕對定量分析。45.簡述RNA提取的步驟及其注意事項。RNA提取的步驟通常包括：細胞裂解、RNA酶降解、RNA純化以及RNA沉淀等。注意事項包括：使用無RNA酶的試劑和器材、在低溫條件下操作、避免劇烈振蕩等，以防止RNA降解。五、論述題（本大題共2小題，每小題10分，共20分。請結(jié)合所學(xué)知識，詳細回答下列問題。）46.試述PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗中的應(yīng)用及其重要性。PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗中有著廣泛的應(yīng)用，其重要性主要體現(xiàn)在以下幾個方面：首先，PCR技術(shù)可以用于病原體檢測，通過擴增病原體的特異性DNA或RNA片段，實現(xiàn)對病原體的快速、靈敏檢測。例如，在傳染病診斷中，PCR技術(shù)可以用于檢測病毒、細菌等病原體的存在，幫助醫(yī)生及時診斷和治療疾病。其次，PCR技術(shù)可以用于遺傳病診斷，通過檢測患者基因組中的特定基因突變，可以實現(xiàn)對遺傳病的早期診斷和風(fēng)險評估。例如，在遺傳病篩查中，PCR技術(shù)可以用于檢測遺傳病相關(guān)的基因突變，幫助家庭進行遺傳咨詢和生育指導(dǎo)。此外，PCR技術(shù)還可以用于腫瘤標(biāo)志物的檢測，通過檢測腫瘤細胞特異性基因的表達水平，可以實現(xiàn)對腫瘤的早期診斷和療效監(jiān)測。例如，在腫瘤診斷中，PCR技術(shù)可以用于檢測腫瘤相關(guān)基因的表達水平，幫助醫(yī)生制定個性化的治療方案。最后，PCR技術(shù)還可以用于法醫(yī)鑒定，通過擴增個體特異性DNA片段，可以實現(xiàn)個體身份的鑒定。例如，在刑事偵查中，PCR技術(shù)可以用于檢測犯罪現(xiàn)場留下的DNA痕跡，幫助警方追蹤犯罪嫌疑人。47.試述基因芯片技術(shù)的原理及其應(yīng)用領(lǐng)域。基因芯片技術(shù)是一種高通量生物檢測技術(shù)，其原理是將大量探針固定在固相載體上，與待測樣本進行雜交，通過檢測雜交信號的強度，實現(xiàn)對多種生物分子的同時檢測和分析?；蛐酒夹g(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛，主要包括以下幾個方面：首先，基因芯片技術(shù)可以用于基因表達分析，通過檢測基因芯片上探針的雜交信號強度，可以實現(xiàn)對多種基因表達水平的定量分析。例如，在腫瘤研究中，基因芯片技術(shù)可以用于檢測腫瘤細胞與正常細胞之間的基因表達差異，幫助研究人員了解腫瘤的發(fā)生機制和發(fā)展過程。其次，基因芯片技術(shù)可以用于疾病診斷，通過檢測患者基因組中的特定基因突變或表達異常，可以實現(xiàn)對疾病的早期診斷和風(fēng)險評估。例如，在遺傳病診斷中，基因芯片技術(shù)可以用于檢測遺傳病相關(guān)的基因突變，幫助家庭進行遺傳咨詢和生育指導(dǎo)。此外，基因芯片技術(shù)還可以用于藥物研發(fā)，通過檢測藥物作用靶點的基因表達變化，可以實現(xiàn)對藥物療效和毒副作用的評估。例如，在藥物研發(fā)中，基因芯片技術(shù)可以用于檢測藥物作用靶點的基因表達變化，幫助研究人員篩選藥物候選化合物和優(yōu)化藥物治療方案。最后，基因芯片技術(shù)還可以用于環(huán)境監(jiān)測，通過檢測環(huán)境樣本中的特定基因片段，可以實現(xiàn)對環(huán)境污染物的快速檢測和風(fēng)險評估。例如，在環(huán)境監(jiān)測中，基因芯片技術(shù)可以用于檢測水體中的污染物基因片段，幫助環(huán)保部門進行環(huán)境質(zhì)量評估和污染治理。本次試卷答案如下一、單項選擇題1.C解析：PCR技術(shù)的關(guān)鍵組成部分包括DNA模板、引物、耐熱DNA聚合酶、dNTPs和緩沖液。限制性內(nèi)切酶主要用于切割DNA，不是PCR技術(shù)的必需組成部分。2.B解析：PCR擴增過程中，通常需要在95℃進行變性，使DNA雙鏈分離，為引物結(jié)合提供單鏈模板。55℃是退火溫度，72℃是延伸溫度。3.C解析：引物設(shè)計時，應(yīng)避免引物內(nèi)部形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，這會影響引物的穩(wěn)定性和擴增效率。引物可以設(shè)計成含有多種堿基，但應(yīng)避免自我互補。4.A解析：PCR擴增產(chǎn)物的大小可以通過凝膠電泳檢測，通過比較產(chǎn)物條帶的大小與已知大小的標(biāo)準品，可以確定PCR產(chǎn)物的長度。5.B解析：在Real-TimePCR實驗中，熒光信號的檢測通常在退火階段進行，此時引物與模板結(jié)合，熒光染料結(jié)合到雙鏈DNA上，發(fā)出熒光信號。6.A解析：SYBRGreenI染料是一種可以與雙鏈DNA結(jié)合的熒光染料，通過檢測熒光信號的變化，可以實現(xiàn)對PCR產(chǎn)物的定量分析。7.C解析：巢式PCR通過使用兩對引物進行兩次PCR擴增，可以提高PCR的特異性和靈敏度，減少非特異性產(chǎn)物的干擾。8.B解析：PCR產(chǎn)物克隆前，通常需要對PCR產(chǎn)物進行純化，去除PCR反應(yīng)體系中的引物、dNTPs、酶等雜質(zhì)，以提高克隆效率。9.A解析：PCR產(chǎn)物克隆后，可以通過抗生素篩選來篩選陽性克隆，只有含有質(zhì)粒的細胞才能在含有抗生素的培養(yǎng)基上生長。10.D解析：PCR產(chǎn)物測序可以檢測PCR產(chǎn)物的整個序列，而不僅僅是其中的一端。測序引物需要與PCR產(chǎn)物互補，以便進行測序反應(yīng)。11.B解析：基因芯片實驗中，通常使用探針進行雜交，探針是固定在芯片上的已知序列，與樣本中的目標(biāo)序列雜交后，通過檢測雜交信號進行分析。12.A解析：基因芯片的主要應(yīng)用領(lǐng)域是基因表達分析，通過檢測基因芯片上探針的雜交信號強度，可以實現(xiàn)對多種基因表達水平的定量分析。13.B解析：在基因芯片實驗中，通過檢測探針的雜交信號強度，可以判斷基因表達的高低。熒光強度越高，表示基因表達水平越高。14.C解析：數(shù)字PCR通過將PCR反應(yīng)體系分成多個微反應(yīng)單元，可以絕對定量DNA，而傳統(tǒng)PCR只能相對定量。15.A解析：數(shù)字PCR的主要優(yōu)勢是高靈敏度和高精度，可以檢測稀有突變，適用于絕對定量分析。16.B解析：數(shù)字PCR使用微滴式PCR進行擴增，將PCR反應(yīng)體系分成多個微反應(yīng)單元，每個微反應(yīng)單元中包含獨立的DNA模板。17.A解析：數(shù)字PCR的原理是將PCR反應(yīng)體系分成多個微反應(yīng)單元，每個微反應(yīng)單元中包含獨立的DNA模板，通過PCR擴增后，對每個微反應(yīng)單元進行檢測。18.D解析：數(shù)字PCR數(shù)據(jù)分析需要計算Cq值，可以絕對定量DNA，但不需要考慮擴增效率。19.A解析：RNA提取時，通常使用玻璃珠法進行RNA提取，通過玻璃珠的機械作用，可以有效地將RNA從細胞中釋放出來。20.A解析：RNA提取后，需要使用逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA，以便進行PCR擴增或其他分子生物學(xué)實驗。二、多項選擇題21.A,B,C解析：PCR技術(shù)的關(guān)鍵組成部分包括DNA模板、引物和耐熱DNA聚合酶。限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶不是PCR技術(shù)的必需組成部分。22.A,B,C解析：PCR擴增過程中，通常需要設(shè)定變性、退火和延伸三個溫度階段。熒光檢測和電泳檢測不是PCR反應(yīng)的必要步驟。23.A,B,D解析：引物設(shè)計時，應(yīng)避免引物內(nèi)部形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，引物兩端GC含量應(yīng)較高以提高穩(wěn)定性。引物可以設(shè)計成含有多種堿基，但應(yīng)避免自我互補。24.A,C,D解析：PCR擴增產(chǎn)物的大小可以通過凝膠電泳、基因測序和限制性酶切檢測。熒光檢測不是檢測PCR產(chǎn)物大小的常用方法。25.A,B,C解析：Real-TimePCR可以在變性、退火和延伸階段檢測熒光信號的變化。重復(fù)循環(huán)階段和電泳檢測階段不是熒光信號的檢測階段。26.B,C,D解析：巢式PCR可以提高PCR的特異性和靈敏度，產(chǎn)物大小通常較小。只需要一對引物和只適用于大片段DNA的說法是錯誤的。27.A,B,C解析：PCR產(chǎn)物克隆前，通常需要對PCR產(chǎn)物進行脫鹽、純化和變性，以提高克隆效率。合成和電泳不是克隆前的必要步驟。28.A,B,C解析：PCR產(chǎn)物克隆后，可以通過抗生素篩選、熒光檢測和電泳檢測來篩選陽性克隆?；驕y序和探針檢測不是篩選陽性克隆的常用方法。29.A,B,C解析：PCR產(chǎn)物測序前需要對PCR產(chǎn)物進行純化，測序引物需要與PCR產(chǎn)物互補，測序結(jié)果可以用于基因序列分析。只能檢測PCR產(chǎn)物的一端和需要復(fù)雜儀器的說法是錯誤的。30.A,B,C解析：基因芯片實驗中，通常使用探針、熒光進行雜交。寡核苷酸、蛋白質(zhì)和環(huán)境監(jiān)測不是基因芯片實驗的常用方法。三、判斷題31.×解析：PCR技術(shù)不僅可以用于擴增DNA片段，還可以用于擴增RNA片段，例如逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）。32.×解析：引物設(shè)計時，引物內(nèi)部的互補序列越多，會導(dǎo)致引物自身形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，影響PCR擴增效率。33.√解析：Real-TimePCR可以實時監(jiān)測PCR反應(yīng)進程，通過檢測熒光信號的變化，可以動態(tài)地觀察PCR產(chǎn)物的積累。34.√解析：巢式PCR通過使用兩對引物進行兩次PCR擴增，可以提高PCR的特異性和靈敏度，減少非特異性產(chǎn)物的干擾。35.√解析：PCR產(chǎn)物克隆后，需要進行測序驗證，以確保克隆的正確性和目的基因的完整性。36.√解析：數(shù)字PCR可以絕對定量DNA，通過檢測每個微反應(yīng)單元中的DNA拷貝數(shù)，可以實現(xiàn)對DNA的絕對定量。傳統(tǒng)PCR只能相對定量，通過比較不同樣本的PCR產(chǎn)物量來估計DNA含量。37.√解析：基因芯片可以檢測多種基因的表達水平，通過檢測基因芯片上探針的雜交信號強度，可以同時分析大量基因的表達情況。38.×解析：RNA提取時，通常需要使用蛋白酶K來降解蛋白質(zhì)，而不是RNA。RNA提取過程中，需要防止RNA酶的污染，以保護RNA的完整性。39.√解析：逆轉(zhuǎn)錄是將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA的過程，通過逆轉(zhuǎn)錄酶的作用，可以將RNA模板轉(zhuǎn)錄成DNAcomplementarystrand（cDNA）。40.√解析：基因芯片實驗中，雜交后需要進行洗滌步驟，以去除未結(jié)合的探針和雜質(zhì)，提高實驗的特異性和靈敏度。四、簡答題41.PCR技術(shù)的原理是通過模擬DNA復(fù)制過程，特異性地擴增DNA片段。其關(guān)鍵組成部分包括DNA模板、引物、耐熱DNA聚合酶、dNTPs和緩沖液。DNA模板是PCR擴增的起始材料，引物是特異性結(jié)合到模板DNA上的短鏈核酸序列，耐熱DNA聚合酶是催化DNA合成的酶，dNTPs是合成DNA的原料，緩沖液提供適宜的pH和離子環(huán)境，保證PCR反應(yīng)的順利進行。42.Real-TimePCR與普通PCR的主要區(qū)別在于，Real-TimePCR可以在PCR反應(yīng)實時監(jiān)測熒光信號的變化，從而實現(xiàn)對PCR產(chǎn)物的定量分析。而普通PCR只能在反應(yīng)結(jié)束后通過凝膠電泳等方法檢測產(chǎn)物。Real-TimePCR的應(yīng)用包括基因表達分析、病原體檢測、拷貝數(shù)變異分析等。Real-TimePCR通過檢測熒光信號的變化，可以實時監(jiān)測PCR產(chǎn)物的積累，從而實現(xiàn)對PCR產(chǎn)物的定量分析。這種定量分析可以用于檢測基因表達水平、病原體數(shù)量、拷貝數(shù)變異等生物分子的含量。43.巢式PCR的原理是在普通PCR的基礎(chǔ)上，再進行一輪PCR擴增，使用第一輪PCR產(chǎn)物為模板，并使用新的引物進行擴增。巢式PCR的優(yōu)勢在于可以提高PCR的特異性和靈敏度，減少非特異性產(chǎn)物的干擾。巢式PCR通過使用兩對引物進行兩次PCR擴增，可以減少非特異性產(chǎn)物的影響，提高PCR的特異性。同時，由于第一輪PCR產(chǎn)物已經(jīng)經(jīng)過擴增，第二輪PCR擴增的效率更高，可以提高PCR的靈敏度。但巢式PCR也增加了操作步驟和產(chǎn)物污染的風(fēng)險，需要謹慎操作。44.數(shù)字PCR的原理是將PCR反應(yīng)體系分成多個微反應(yīng)單元，每個微反應(yīng)單元中包含獨立的DNA模板，通過PCR擴增后，對每個微反應(yīng)單元進行檢測，從而實現(xiàn)對DNA的絕對定量。數(shù)字PCR的優(yōu)勢在于高靈敏度和高精度，可以檢測稀有突變，適用于絕對定量分析。數(shù)字PCR通過將PCR反應(yīng)體系分成多個微反應(yīng)單元，可以實現(xiàn)對每個微反應(yīng)單元中的DNA模板進行獨立檢測，從而實現(xiàn)對DNA的絕對定量。這種絕對定量方法不受PCR擴增效率的影響，可以更準確地測定DNA的拷貝數(shù)。此外，數(shù)字PCR還可以檢測稀有突變，因為每個微反應(yīng)單元中的DNA模板數(shù)量非常少，可以降低假陽性的發(fā)生。45.RNA提取的步驟通常包括：細胞裂解、RNA酶降解、RNA純化和RNA沉淀。細胞裂解是使用裂解緩沖液將細胞裂解，釋放RNA。RNA酶降解是使用RNA酶降解蛋白質(zhì)，防止RNA降解。RNA純化是使用有機溶劑或親和層析等方法，純化RNA，去除其他雜質(zhì)。RNA沉淀是使用乙醇或異丙醇沉淀RNA，得到純化的RNA。注意事項包括：使用無RNA酶的試劑和器材、在低溫條件下操作、避免劇烈振蕩等，以防止RNA降解。RNA提取過程中，需要防止RNA酶的污染，以保護RNA的完整性。RNA酶是一種廣泛存在于環(huán)境中的酶，可以降解RNA，因此需要使用無RNA酶的試劑和器材。在低溫條件下操作可以降低RNA酶的活性，避免RNA降解。避免劇烈振蕩可以防止RNA斷裂，提高RNA提取的效率。五、論述題46.PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗中有著廣泛的應(yīng)用，其重要性主要體現(xiàn)在以下幾個方面：首先，PCR技術(shù)可以用于病原體檢測，通過擴增病原體的特異性DNA或RNA片段，實現(xiàn)對病原體的快速、靈敏檢測。例如，在傳染病診斷中，PCR技術(shù)可以用于檢測病毒、細菌等病原體的存在，幫助醫(yī)生及時診斷和治療疾病。其次，PCR技術(shù)可以用于遺傳病診斷，通過檢測患者基因組中的特定基因突變，可以實現(xiàn)對遺傳病的早期診斷和風(fēng)險評估。例如，在遺傳病篩查中，PCR技術(shù)可以用于檢測遺傳病相關(guān)的基因突變，幫助家