云南省南澗縣民族中學(xué)2025-2026學(xué)年高三生物第一學(xué)期期末學(xué)業(yè)水平測試試題注意事項(xiàng):1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時(shí)請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列關(guān)于胚胎工程的敘述，正確的是（）A．在胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需將干細(xì)胞接種在飼養(yǎng)層上B．分割的胚胎需經(jīng)胚胎體外培養(yǎng)才能進(jìn)行胚胎移植C．需要選擇性狀優(yōu)良的母畜作為胚胎移植的受體D．胚胎移植前需使用免疫抑制劑處理受體2．人體細(xì)胞中的染色體DNA會(huì)隨著復(fù)制次數(shù)增加而逐漸縮短。在生殖細(xì)胞和癌細(xì)胞中存在端粒酶（由RNA和蛋白質(zhì)形成的復(fù)合體），能夠?qū)⒆兌痰腄NA末端重新加長。端粒酶作用機(jī)理如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．端粒酶中的RNA能夠催化染色體DNA的合成B．促進(jìn)端粒酶的作用可抑制癌細(xì)胞增殖C．細(xì)胞凋亡與染色體DNA隨復(fù)制次數(shù)增加而縮短有關(guān)D．人體生殖細(xì)胞以外的其他細(xì)胞也含端粒酶基因3．如圖為ATP的分子結(jié)構(gòu)構(gòu)圖，A、B、C表示相應(yīng)的結(jié)構(gòu)，①、②表示化學(xué)鍵。下列敘述正確的是A．A表示腺嘌呤，B表示腺苷B．化學(xué)鍵①與化學(xué)鍵②的穩(wěn)定性相同C．化學(xué)鍵②的形成所需的能量都來自化學(xué)能D．化學(xué)鍵②中能量的釋放往往與吸能反應(yīng)相關(guān)聯(lián)4．果蠅的紅眼對白眼顯性，有關(guān)基因位于X染色體上。人為地將相同數(shù)量的純合紅眼雌果蠅和白眼雄果蠅（親本）培養(yǎng)在同一環(huán)境中，若交配只發(fā)生在同一世代的雌雄個(gè)體之間且是隨機(jī)的，同時(shí)不考慮突變因素，那么，下列有關(guān)敘述中正確的是A．親本中紅眼基因頻率和白眼基因頻率相同B．F2的雌果蠅基因型相同，表現(xiàn)型不同C．白眼雌果蠅最先出現(xiàn)在F3，這是基因重組的結(jié)果D．F2和F3的雄果蠅都能產(chǎn)生3種基因型的配子5．以下高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，操作不正確的是（）A．在制作果酒的實(shí)驗(yàn)中，將葡萄汁液裝滿整個(gè)發(fā)酵裝置B．鑒定DNA時(shí)，將粗提產(chǎn)物與二苯胺混合后進(jìn)行沸水浴C．用蘇丹Ⅲ染液染色，觀察花生子葉細(xì)胞中的脂肪滴（顆粒）D．用龍膽紫染液染色，觀察洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞中的染色體6．大麥種子富含淀粉，利用酵母菌釀造啤酒時(shí)，發(fā)現(xiàn)必須用發(fā)芽的大麥種子才能發(fā)酵成功，而不能用未發(fā)芽的大麥種子來代替。下列推斷合理的是（）A．酵母菌是在有氧條件下產(chǎn)生酒精B．大麥發(fā)芽過程中淀粉含量會(huì)增加C．未發(fā)芽的大麥種子淀粉酶活性高D．酵母菌不能直接利用淀粉來發(fā)酵二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）蕁麻草雌雄異株，且經(jīng)常出現(xiàn)雌雄敗育（無花蕊）現(xiàn)象，雜交實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)1總是無花蕊︰雄株︰雌株=2︰1︰1，再將F1雄株和雌株雜交，F(xiàn)2也出現(xiàn)無花蕊︰雄株︰雌株=2︰1︰1。有同學(xué)對上述現(xiàn)象做如下圖解，請進(jìn)一步分析回答：（1）以上圖解，屬于假說一演繹法的_____________環(huán)節(jié)，其核心內(nèi)容至少包括：①_________________________；②_______________________；③不同對的基因可以自由組合（獨(dú)立遺傳）。另有同學(xué)對核心內(nèi)容中的③提出質(zhì)疑，你認(rèn)為對此質(zhì)疑有道理嗎?為什么?________________________________________。（2）研究者采用_________育種方法很容易得到了純合的雄株，準(zhǔn)備將此雄株與天然雌株雜交，預(yù)測子代的性狀及比例是________________。8．（10分）干擾素是一種抗病毒、抗腫瘤的藥物，天然干擾素的含量低、活性低、穩(wěn)定性低。科學(xué)家將人的干擾素中第17位的半胱氨酸變成絲氨酸，再利用大腸桿菌生產(chǎn)干擾素，從而極大地改變了天然干擾素的缺點(diǎn)?；卮鹣铝袉栴}：（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，依據(jù)的原理是______________，擴(kuò)增的前提是_______________________。（2）將人的干擾素中第17位的半胱氨酸變成絲氨酸，要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，最終是通過改造_______________來實(shí)現(xiàn)的。用蛋白質(zhì)工程找到所需基因的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)（干擾素）功能出發(fā)→__________→____________→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（干擾素基因）。（3）在導(dǎo)人大腸桿菌之前，首先要構(gòu)建其____________中，啟動(dòng)子的作用是_______________________。（4）在檢測干擾素基因在大腸桿菌體內(nèi)是否翻譯時(shí)，采用的方法是_______________________________。9．（10分）突尼斯軟籽石榴是一種熱門水果，深受大家喜愛，但其抗寒能力差，這成為限制該種石榴栽培的重要因素?？茖W(xué)家們利用基因工程對其進(jìn)行定向改造，以得到抗寒性強(qiáng)的優(yōu)良品種。下圖表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的方法，圖中標(biāo)注的是限制酶的酶切位點(diǎn)，請回答下列問題：（1）在切割目的基因時(shí)選擇的兩種限制酶最好為____________________，選擇兩種限制酶的優(yōu)勢是可避免________________。（2）可通過________技術(shù)對獲得的抗寒基因進(jìn)行體外擴(kuò)增，該過程使DNA解旋的方法與細(xì)胞內(nèi)復(fù)制時(shí)的差異是________________，體外擴(kuò)增時(shí)使用的酶具有的顯著特點(diǎn)是__________________。（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入經(jīng)________（過程）培養(yǎng)成的軟籽石榴的愈傷組織中常用________法。10．（10分）胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)在基礎(chǔ)生物學(xué)、畜牧學(xué)和醫(yī)學(xué)上具有十分重要的應(yīng)用價(jià)值，科研人員對綿羊胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)開展研究，回答下列問題：（1）胚胎的獲?。簭耐涝讏鼍d羊卵巢采集卵母細(xì)胞，在培養(yǎng)液中培養(yǎng)至____________________期后，轉(zhuǎn)移到受精液中進(jìn)行受精。培養(yǎng)24h后，若用顯微鏡觀察到__________________，說明該卵子已經(jīng)完成受精作用。為了提高受精效率，可以用_____________________處理卵子，分離外層的卵丘細(xì)胞。（2）胚胎的分離和培養(yǎng)：挑選正常發(fā)育的胚胎置于培養(yǎng)液中，培養(yǎng)液的成分除了含無機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需添加_________________________________________（答出2點(diǎn)即可）等營養(yǎng)成分。為了使胚胎干細(xì)胞維持不分化狀態(tài)，可以把胚胎與____________________細(xì)胞共同培養(yǎng)。（3）干細(xì)胞的鑒定：基因A是干細(xì)胞多能性的標(biāo)志基因，在全能干細(xì)胞中高效表達(dá)?？蒲腥藛T從某一代綿羊干細(xì)胞提取總RNA，單位時(shí)間內(nèi)經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄-PCR的方法獲得大量的相關(guān)___________________，檢測標(biāo)志基因的轉(zhuǎn)錄水平鑒定干細(xì)胞的分化狀態(tài)。逆轉(zhuǎn)錄-PCR應(yīng)用的原理是_____________。11．（15分）某研究小組從牛的瘤胃中采集樣本，進(jìn)行分解尿素的微生物的分離與計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：（1）分解尿素的微生物含有_____，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)以尿素作為唯一氮源，尿素會(huì)被分解成________使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。（2）配制培養(yǎng)基時(shí)，需添加瓊脂，瓊脂起_____作用；培養(yǎng)基中添加_____作為指示劑，可使目標(biāo)菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶。（3）該小組在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是__________；然后將1mL瘤胃樣液稀釋1111倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入1．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為49、47和45。據(jù)此可得出每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為_____，理論上，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往_______________（低、等、高）于接種的實(shí)際活菌數(shù)目。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、A【解析】

胚胎移植的基本程序：對供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理，超數(shù)排卵處理）、配種或進(jìn)行人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進(jìn)行胚胎移植．其中對受體的選擇，不需選擇遺傳性狀優(yōu)良的品種，但需要具有正常繁殖能力的健康個(gè)體，對供體的選擇，需要選擇遺傳性狀優(yōu)良的品種?！驹斀狻緼、培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)基中，必須加入胰島素、葡萄糖、動(dòng)物血清等成分，并且要將干細(xì)胞接種在飼養(yǎng)層上，A正確；B、胚胎分割后便可進(jìn)行胚胎移植，B錯(cuò)誤；C、受體母畜不需選擇遺傳性狀優(yōu)良的品種，但需要具有正常繁殖能力的健康個(gè)體，C錯(cuò)誤；D、受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，D錯(cuò)誤。故選A。2、D【解析】

根據(jù)題干分析，端粒是染色體末端的DNA序列，在正常人體細(xì)胞中，端粒可隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加而逐漸縮短，從而導(dǎo)致細(xì)胞衰老和凋亡，而端粒酶中RNA能逆轉(zhuǎn)錄形成DNA，進(jìn)而能延長縮短的端粒。【詳解】A、端粒酶（由RNA和蛋白質(zhì)形成的復(fù)合體），能夠?qū)⒆兌痰腄NA末端重新加長，即能催化染色體DNA的合成，A錯(cuò)誤；B、在生殖系細(xì)胞和癌細(xì)胞中存在端粒酶（由RNA和蛋白質(zhì)形成的復(fù)合體），能夠?qū)⒆兌痰腄NA末端重新加長，使得癌細(xì)胞能無限增殖，則抑制端粒酶的作用可使得癌細(xì)胞衰老，進(jìn)而抑制癌細(xì)胞增殖，B錯(cuò)誤；

C、端粒學(xué)說認(rèn)為人體細(xì)胞衰老的原因是染色體DNA會(huì)隨著復(fù)制次數(shù)增加而逐漸縮短，C錯(cuò)誤；

D、根據(jù)題干分析，人體生殖系細(xì)胞和其他細(xì)胞含端粒酶基因，但因?yàn)榛蜻x擇性表達(dá)，在生殖系細(xì)胞中表達(dá)，D正確。

故選D。本題考查了端粒及端粒酶的概念及意義，意在考查學(xué)生提取題干信息和識圖的能力，難度不大。3、D【解析】

據(jù)圖分析，圖中A表示腺苷，由腺嘌呤和核糖組成；B表示一磷酸腺苷，又叫腺嘌呤核糖核苷酸，是組成RNA的基本單位；C表示三磷酸腺苷（ATP），是生命活動(dòng)的直接能源物質(zhì)；①②表示高能磷酸鍵，其中②很容易斷裂與重新合成?！驹斀狻緼、根據(jù)以上分析已知，圖中A表示腺苷，B表示一磷酸腺苷，A錯(cuò)誤；B、根據(jù)以上分析已知，化學(xué)鍵①比化學(xué)鍵②的穩(wěn)定性高，B錯(cuò)誤；C、化學(xué)鍵②的形成所需的能量都來自化學(xué)能或光能，C錯(cuò)誤；D、化學(xué)鍵②中能量的釋放后用于各項(xiàng)需要能量的生命活動(dòng)，因此往往與吸能反應(yīng)相關(guān)聯(lián)，D正確。故選D。解答本題的關(guān)鍵是掌握ATP的分子結(jié)構(gòu)，判斷圖中各個(gè)字母的含義，明確兩個(gè)高能磷酸鍵中只有遠(yuǎn)離腺苷的高能磷酸鍵容易斷裂和重新合成。4、D【解析】

分析題意：假設(shè)果蠅的紅眼和白眼由一對等位基因A/a控制，親本純合紅眼雌果蠅的基因型為XAXA，白眼雄果蠅基因型為XaY，F(xiàn)1中雌果蠅基因型為XAXa，雄果蠅基因型為XAY?！驹斀狻緼、親本中純合紅眼雌果蠅和白眼雄果蠅相同數(shù)量，Y染色體上無白眼基因，故紅眼基因頻率大于白眼基因頻率，A錯(cuò)誤；B、F1雌雄隨機(jī)交配，F(xiàn)2的雌果蠅基因型為XAXA、XAXa，表現(xiàn)型均為紅眼，B錯(cuò)誤；C、白眼雌果蠅最先出現(xiàn)在F3，這是基因分離以及雌雄受精的結(jié)果，C錯(cuò)誤；D、F2和F3的雄果蠅基因型均為XAY、XaY，能產(chǎn)生XA、Xa、Y3種基因型的配子，D正確。故選D。5、A【解析】【分析】該題考查高中幾個(gè)主要實(shí)驗(yàn)的材料選擇、試劑選擇、操作步驟等【詳解】在制作果酒的實(shí)驗(yàn)中，葡萄汁液不能裝滿發(fā)酵裝置，要留出1/3的空間，A錯(cuò)誤；在DNA鑒定實(shí)驗(yàn)中，DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)染成藍(lán)色，B正確；用蘇丹Ⅲ染液可以把花生子葉細(xì)胞中的脂肪顆粒染成橘黃色，C正確；用龍膽紫染液能將細(xì)胞中的染色體染成深紫色，在洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞中能清晰地觀察到，D正確，所以選A?！军c(diǎn)睛】注意題目中的“果酒”、“裝滿”6、D【解析】

1、大麥種子在萌發(fā)過程中需要將淀粉分解成葡萄糖，再進(jìn)行氧化供能。2、酵母菌在有氧的條件下進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水，在無氧的條件下生成酒精和二氧化碳?！驹斀狻緼、酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，A錯(cuò)誤；B、大麥發(fā)芽過程中淀粉含量會(huì)細(xì)胞呼吸而減少，B錯(cuò)誤；C、未發(fā)芽的大麥種子淀粉酶活性較低，C錯(cuò)誤；D、酵母菌不能直接利用淀粉來發(fā)酵，是將淀粉分解成葡萄糖進(jìn)行發(fā)酵，D正確。故選D。本題考查了種子萌發(fā)過程中物質(zhì)的變化過程，結(jié)合酵母菌的呼吸作用進(jìn)行解答。二、綜合題：本大題共4小題7、提出假說當(dāng)基因A和基因B同時(shí)存在時(shí)（A_B_）和aabb一樣不育（無花蕊）只含有A基因（不含B基因）時(shí)表現(xiàn)為雄株，只含有B基因（不含A基因）時(shí)表現(xiàn)為雌株有道理，因?yàn)楫?dāng)不同對的基因位于同對同源染色體上時(shí)，雜交的結(jié)果和以上解釋相同，所以不能確定不同對基因可以自由組合（獨(dú)立遺傳）單倍體無花蕊:雄株=1:1【解析】

根據(jù)題意分析：圖解過程很好的解釋了題干結(jié)果“蕁麻草雌雄雜交，F(xiàn)1總是無花蕊：雄株：雌株=2：1：1，再將F1雄株和雌株雜交，F(xiàn)2也出現(xiàn)無花蕊：雄株：雌株=2：1：1”，據(jù)此判斷：天然蕁麻草若同時(shí)存在A和B和同時(shí)都不存在時(shí)，是無花蕊植株而敗育，因此雌株基因型為aaBb，雄株基因型為Aabb，雌雄植株雜交遵循基因的分離或基因的自由組合定律?！驹斀狻浚?）以上圖解，屬于假說一演繹法的提出假說環(huán)節(jié)，其核心內(nèi)容至少包括：①當(dāng)基因A和基因B同時(shí)存在時(shí)（A_B_）和aabb一樣不育（無花蕊）；②基因型為A_bb的個(gè)體為雄株，基因型為aaB_的個(gè)體為雌株。

③兩對等位基因位于非同源染色體上時(shí)和位于一對同源染色體上時(shí)，這兩種情況下Aabb產(chǎn)生的配子均為Ab和ab，aaBb產(chǎn)生的配子均為aB、ab，雜交的結(jié)果也和以上解釋相同，因此不能確定不同對基因可以自由組合（獨(dú)立遺傳）。（2）由于單倍體育種獲得的個(gè)體為純合子，所以用單倍體育種能很容易得到純合的雄株。純合的雄株的基因型為AAbb，將此雄株與天然雌株雜交，AAbb×aaBb→子代基因型為AaBb、Aabb且比例是1：1，其中AaBb表現(xiàn)為無花蕊，Aabb表現(xiàn)為雄株，即無花蕊：雄株=1：1。本題旨在考查學(xué)生分析題干獲取信息的能力，理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn)結(jié)合題干信息，通過分析、綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理、判斷得出正確結(jié)論的能力。8、DNA雙鏈復(fù)制要有一段已知目的基因（干擾素基因）的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物基因設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)（干擾素）結(jié)構(gòu)推測應(yīng)有的氨基酸序列基因表達(dá)載體RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA把提取的蛋白質(zhì)用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交（或抗原-抗體雜交技術(shù)）【解析】

1、蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的原理是DNA雙鏈復(fù)制；擴(kuò)增的前提是要有一段已知目的基因（干擾素基因）的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。（2）蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)最終是由基因決定的，因此，對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，必須通過基因來完成；用蛋白質(zhì)工程找到所需基因的基本途徑即蛋白質(zhì)工程的基本途徑，從預(yù)期的蛋白質(zhì)（干擾素）功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)（干擾素）結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（干擾素基因）。（3）目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前，首先要構(gòu)建基因表達(dá)載體；其中啟動(dòng)子位于目的基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。（4）翻譯的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，在檢測是否翻譯時(shí)，可以利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，把提取的蛋白質(zhì)用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交進(jìn)行鑒定。本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程，考查理解能力、獲取信息的能力及綜合運(yùn)用能力，考查生命觀念和科學(xué)思維核心素養(yǎng)。9、SmaI和PstI質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接PCR體外擴(kuò)增目的基因利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋，細(xì)胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）脫分化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化【解析】

分析題圖可知：HindIII的切割位點(diǎn)會(huì)破壞質(zhì)粒的標(biāo)記基因，AluI會(huì)破壞目的基因，故不能用上述兩種酶切割?！驹斀狻浚?）根據(jù)圖中各種限制酶的切割位點(diǎn)，既可以獲得目的基因又不能破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因，故選用SmaI和PstI；選擇兩種酶的優(yōu)勢是可避免含有目的基因的外源DNA自身環(huán)化，可以防止質(zhì)粒自身環(huán)化，也可避免質(zhì)粒與目的基因的反向連接。（2）對獲得的抗寒基因進(jìn)行體外擴(kuò)增，可用PCR技術(shù)；在細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制需要解旋酶將雙鏈解開，而PCR技術(shù)利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋；該技術(shù)使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特性。（3）軟籽石榴的愈傷組織經(jīng)過植物組織培養(yǎng)得過程中的脫分化環(huán)節(jié)得到；將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。明確基因工程的基本操作程序是解答本題的關(guān)鍵，且能明確限制酶的選擇依據(jù)，結(jié)合題圖分析作答。10、減數(shù)第二次分裂中在卵細(xì)胞膜和透明帶之間存在兩個(gè)極體頂體酶維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清飼養(yǎng)層cDNA堿基互補(bǔ)配對【解析】

1、胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。2、胚胎干細(xì)胞的特征：具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物任何一種組織細(xì)胞。另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行某些遺傳改造。3、胚胎干細(xì)胞的主要用途是：①可用于研究哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；②是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想材料。ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段；③可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合癥、糖尿病、老年癡呆癥、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；④培育各種組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題?！驹斀狻浚?）卵母細(xì)胞，在培養(yǎng)液中培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期后，轉(zhuǎn)移到受精液中進(jìn)行受精；受精后在卵細(xì)胞膜和透明帶存在兩個(gè)極體時(shí)，說明該卵子已經(jīng)完成受精作用；為了提高受精效率，