動(dòng)物實(shí)驗(yàn)上崗資格培訓(xùn)考核測試習(xí)題及答案一、理論測試題（共60分）（一）單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.以下哪項(xiàng)不屬于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物“3R原則”的核心內(nèi)容？A.替代（Replacement）B.減少（Reduction）C.優(yōu)化（Refinement）D.記錄（Recording）2.清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)小鼠的飼養(yǎng)環(huán)境中，空氣潔凈度應(yīng)達(dá)到的標(biāo)準(zhǔn)是：A.100級(jí)（≥0.5μm粒子數(shù)≤3520個(gè)/m3）B.10000級(jí)（≥0.5μm粒子數(shù)≤352000個(gè)/m3）C.100000級(jí)（≥0.5μm粒子數(shù)≤3520000個(gè)/m3）D.無特殊要求3.大鼠尾靜脈注射時(shí)，正確的操作順序是：①固定大鼠尾部，用75%酒精擦拭尾部②將大鼠放置于固定器中，露出尾部③選擇尾靜脈遠(yuǎn)心端（靠近尾尖）進(jìn)針④回抽見血后緩慢推注藥物A.②→①→③→④B.①→②→③→④C.②→③→①→④D.③→①→②→④4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂死的基本原則不包括：A.快速無痛苦B.確保動(dòng)物意識(shí)喪失后再進(jìn)行后續(xù)操作C.優(yōu)先選擇物理方法（如頸椎脫臼）D.根據(jù)動(dòng)物種類選擇適宜方法（如小鼠可用CO?吸入）5.以下哪種動(dòng)物的妊娠期最短？A.家兔（30-32天）B.大鼠（21-23天）C.小鼠（19-21天）D.豚鼠（68-72天）6.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理審查的核心目的是：A.減少實(shí)驗(yàn)成本B.確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性C.保障動(dòng)物福利，規(guī)范實(shí)驗(yàn)行為D.符合國際論文發(fā)表要求7.進(jìn)行腹腔注射時(shí)，大鼠的進(jìn)針部位應(yīng)選擇：A.腹部正中線B.左下腹（避開肝臟）C.右下腹（避開膀胱）D.臍周2cm范圍內(nèi)8.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)等級(jí)中，SPF級(jí)動(dòng)物指：A.無特定病原體動(dòng)物B.無菌動(dòng)物C.普通級(jí)動(dòng)物D.清潔級(jí)動(dòng)物9.以下哪項(xiàng)不屬于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全防護(hù)的基本要求？A.實(shí)驗(yàn)人員佩戴一次性手套、口罩、白大褂B.感染性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在BSL-2級(jí)以上實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行C.實(shí)驗(yàn)廢棄物與普通垃圾混合處理D.操作結(jié)束后對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面進(jìn)行75%酒精消毒10.小鼠灌胃時(shí)，灌胃針的插入深度約為：A.1-2cm（口腔至賁門）B.3-4cm（口腔至胃底部）C.5-6cm（超過膈?。〥.0.5-1cm（僅進(jìn)入食管）（二）多項(xiàng)選擇題（每題3分，共15分，錯(cuò)選、漏選均不得分）1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇需遵循的原則包括：A.種屬與實(shí)驗(yàn)?zāi)康钠ヅ洌ㄈ缛糜谛难軐?shí)驗(yàn)）B.優(yōu)先選擇低等級(jí)動(dòng)物（普通級(jí)）以降低成本C.年齡、體重符合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要求（如小鼠一般選6-8周齡）D.雌雄比例根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整（如生殖實(shí)驗(yàn)需雌雄配對(duì)）2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境的關(guān)鍵控制指標(biāo)有：A.溫度（小鼠：20-26℃，大鼠：20-25℃）B.相對(duì)濕度（40%-70%）C.光照周期（12小時(shí)光照/12小時(shí)黑暗）D.氨濃度（≤14mg/m3）3.以下哪些操作符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利要求？A.實(shí)驗(yàn)前對(duì)動(dòng)物進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)（至少3天）B.手術(shù)過程中使用麻醉劑（如戊巴比妥鈉）C.術(shù)后提供保溫措施（如加熱墊）D.同一動(dòng)物重復(fù)用于多個(gè)無關(guān)實(shí)驗(yàn)4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常見的給藥途徑包括：A.皮下注射（大鼠頸背部）B.肌肉注射（小鼠后肢股四頭?。〤.靜脈注射（家兔耳緣靜脈）D.灌胃（豚鼠需使用專用彎針）5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全事故的應(yīng)急處理措施包括：A.立即用75%酒精或含氯消毒液覆蓋污染區(qū)域B.被動(dòng)物咬傷后，立即擠壓傷口至出血，用肥皂水沖洗，接種疫苗C.感染性動(dòng)物逃逸時(shí)，使用麻醉槍或網(wǎng)具捕捉D.隱瞞事故以避免責(zé)任追究（三）判斷題（每題1分，共5分，正確填“√”，錯(cuò)誤填“×”）1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體可直接丟棄至普通垃圾桶。（）2.小鼠尾靜脈注射時(shí)，若一次穿刺失敗，可在原位置反復(fù)嘗試。（）3.清潔級(jí)動(dòng)物可用于對(duì)微生物控制要求較高的實(shí)驗(yàn)（如腫瘤學(xué)研究）。（）4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理審查需在實(shí)驗(yàn)開始前完成，實(shí)驗(yàn)過程中無需再次審查。（）5.大鼠灌胃時(shí)，若動(dòng)物出現(xiàn)掙扎、呼吸急促，應(yīng)立即停止操作并檢查灌胃針位置。（）（四）簡答題（每題5分，共20分）1.簡述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物“3R原則”的具體內(nèi)容及實(shí)際應(yīng)用示例。2.列舉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇時(shí)需考慮的5項(xiàng)關(guān)鍵因素，并說明原因。3.描述小鼠頸椎脫臼法安樂死的操作步驟及注意事項(xiàng)。4.說明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境中“屏障系統(tǒng)”的主要功能及管理要求。二、實(shí)操測試題（共40分）（一）操作題（20分）題目：大鼠尾靜脈注射（50μL0.9%氯化鈉溶液）要求：現(xiàn)場操作并口述步驟，考官根據(jù)規(guī)范性評(píng)分。評(píng)分要點(diǎn)：1.動(dòng)物固定：正確使用固定器或徒手固定，避免過度壓迫（3分）。2.血管準(zhǔn)備：用75%酒精擦拭尾部，輕彈尾部促進(jìn)血管擴(kuò)張（3分）。3.進(jìn)針角度與深度：針頭與尾部呈15-30°角，刺入血管后回抽見血（5分）。4.推注藥物：緩慢推注，觀察是否有漏液（藥液外滲時(shí)局部腫脹）（5分）。5.操作后處理：拔針后按壓止血，將大鼠放回原籠（4分）。（二）案例分析題（20分）背景：某實(shí)驗(yàn)室計(jì)劃開展“新型降糖藥物對(duì)2型糖尿病模型大鼠的療效研究”，已通過倫理審查。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：選取8周齡SPF級(jí)SD大鼠40只（雌雄各半），隨機(jī)分為對(duì)照組（生理鹽水）和實(shí)驗(yàn)組（藥物低、中、高劑量組），每組10只。實(shí)驗(yàn)周期為8周，需進(jìn)行血糖監(jiān)測、組織采樣（肝臟、胰腺）及病理分析。問題：1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇SPF級(jí)SD大鼠的依據(jù)是什么？（5分）2.實(shí)驗(yàn)過程中需重點(diǎn)關(guān)注的動(dòng)物福利措施有哪些？（7分）3.若實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)某只大鼠出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉、體重下降20%，應(yīng)如何處理？（8分）---答案及解析一、理論測試題答案（一）單項(xiàng)選擇題1.D（3R原則為替代、減少、優(yōu)化，記錄不屬于核心內(nèi)容）2.B（清潔級(jí)小鼠飼養(yǎng)環(huán)境空氣潔凈度為10000級(jí)）3.A（正確順序：固定→酒精擦拭→選擇遠(yuǎn)心端進(jìn)針→回抽推注）4.C（安樂死應(yīng)優(yōu)先選擇無痛苦方法，物理方法需確?？焖?，并非所有動(dòng)物都適用頸椎脫臼）5.C（小鼠妊娠期最短，約19-21天）6.C（倫理審查核心是保障動(dòng)物福利，規(guī)范實(shí)驗(yàn)行為）7.C（大鼠腹腔注射應(yīng)選右下腹，避開膀胱和肝臟）8.A（SPF級(jí)為無特定病原體動(dòng)物）9.C（實(shí)驗(yàn)廢棄物需分類處理，感染性廢物需高壓滅菌后丟棄）10.A（小鼠灌胃針插入深度約1-2cm，避免損傷食管或胃）（二）多項(xiàng)選擇題1.ACD（B錯(cuò)誤，應(yīng)選擇符合實(shí)驗(yàn)要求的等級(jí)，普通級(jí)可能攜帶病原體影響結(jié)果）2.ABCD（均為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境的關(guān)鍵指標(biāo)）3.ABC（D錯(cuò)誤，重復(fù)實(shí)驗(yàn)需評(píng)估動(dòng)物承受能力，避免過度使用）4.ACD（B錯(cuò)誤，小鼠肌肉注射因肌肉量少，一般不推薦）5.ABC（D錯(cuò)誤，隱瞞事故會(huì)擴(kuò)大風(fēng)險(xiǎn)，需及時(shí)上報(bào)）（三）判斷題1.×（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體需專用容器收集，高壓滅菌或焚燒處理）2.×（反復(fù)穿刺會(huì)導(dǎo)致血管損傷，應(yīng)更換位置或由經(jīng)驗(yàn)者操作）3.×（SPF級(jí)用于高要求實(shí)驗(yàn)，清潔級(jí)適用于一般實(shí)驗(yàn)）4.×（實(shí)驗(yàn)過程中若方案調(diào)整，需重新申請(qǐng)倫理審查）5.√（掙扎、呼吸急促可能提示灌胃針誤入氣管，需立即停止）（四）簡答題1.3R原則：-替代（Replacement）：用非活體材料（如細(xì)胞模型）或低等動(dòng)物（如果蠅）替代哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，例如用斑馬魚胚胎替代小鼠進(jìn)行藥物毒性初篩。-減少（Reduction）：通過優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（如隨機(jī)化、重復(fù)測量）減少動(dòng)物使用數(shù)量，例如采用析因設(shè)計(jì)同時(shí)研究多個(gè)變量，降低總樣本量。-優(yōu)化（Refinement）：改進(jìn)操作（如使用鎮(zhèn)痛劑）減輕動(dòng)物痛苦，例如手術(shù)中使用長效麻醉劑，術(shù)后提供鎮(zhèn)痛藥物。2.關(guān)鍵因素：-種屬特性：如犬的心血管系統(tǒng)與人類相似，用于心臟病研究；小鼠繁殖快，用于遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)。-微生物等級(jí)：SPF級(jí)用于免疫實(shí)驗(yàn)（避免病原體干擾），普通級(jí)僅用于教學(xué)示教。-年齡體重：幼年動(dòng)物代謝旺盛（如毒性實(shí)驗(yàn)），成年動(dòng)物生理穩(wěn)定（如藥效實(shí)驗(yàn)）。-性別：性激素影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果（如乳腺癌研究需雌性小鼠）。-健康狀態(tài)：需選擇無異常體征（如被毛光澤、活動(dòng)正常）的動(dòng)物，避免疾病影響數(shù)據(jù)。3.小鼠頸椎脫臼法步驟及注意事項(xiàng)：步驟：①左手固定小鼠頭部（拇指、食指捏住兩耳后頸部皮膚），右手抓住尾根部；②快速用力向后拉尾，同時(shí)左手向下壓頭部，使頸椎與顱骨分離；③確認(rèn)動(dòng)物無自主呼吸、瞳孔散大后，進(jìn)行后續(xù)處理。注意事項(xiàng)：①僅適用于體重≤20g的小鼠（成年大鼠需其他方法）；②操作需迅速，避免動(dòng)物痛苦；③操作后需檢查是否成功（觸摸頸部是否松軟，無心跳）。4.屏障系統(tǒng)功能及管理：功能：通過空氣過濾（高效過濾器）、壓差控制（正壓）、人員/物品消毒（淋浴、傳遞窗），防止外界微生物進(jìn)入，維持SPF級(jí)動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境。管理要求：①人員需穿滅菌隔離服、戴手套口罩；②物品經(jīng)高壓滅菌或消毒液浸泡后通過傳遞窗進(jìn)入；③定期檢測環(huán)境指標(biāo)（溫度、濕度、氨濃度）；④禁止非工作人員進(jìn)入，實(shí)驗(yàn)人員需培訓(xùn)合格。二、實(shí)操測試題答案（一）操作題評(píng)分要點(diǎn)解析-固定不當(dāng)（如壓迫大鼠胸部導(dǎo)致呼吸困難）扣1-2分；-未用酒精擦拭（血管未擴(kuò)張）或進(jìn)針角度過大（>30°易穿破血管）扣2-3分；-未回抽見血直接推注（可能注入皮下）扣3分；-推注過快（藥液外滲）或未按壓止血（出血）扣2-3分；-操作后未將大鼠輕柔放回籠具（粗暴放置）扣1-2分。（二）案例分析題答案1.選擇依據(jù)：-SD大鼠是常用的代謝性疾病模型動(dòng)物（胰島素抵抗特征明顯）；-SPF級(jí)動(dòng)物無特定病原體（如鼠肝炎病毒），避免微生物干擾血糖指標(biāo)；-8周齡大鼠生理狀態(tài)穩(wěn)定（性成熟但未衰老），適合長期實(shí)驗(yàn)。2.動(dòng)物福利措施：-適應(yīng)性飼養(yǎng)：實(shí)驗(yàn)前7天適應(yīng)環(huán)境（溫度22±2℃，濕度50±10%）；-麻醉與鎮(zhèn)痛：血糖監(jiān)測（尾尖采血）前局部使用利多卡因乳膏；-居住環(huán)境：使用帶墊料的籠具（每籠≤5只），提供玩具（如紙筒）減少焦慮；-采樣優(yōu)化：減少采血次數(shù)（如用血糖儀替代頻繁取血）；-終點(diǎn)設(shè)定：體重下降>20%或出現(xiàn)嚴(yán)重